H—2^b和H—2^d单体型小鼠MHC I类分子结合的HFRSV蛋白抗 …

本文通过对Ｈ－２＾ｂ和和Ｈ－２＾ｄ单体型小鼠主要组织相容性抗原Ｉ类分子结合抗原肽的分析，建立了一个计算机预测模型，并对肾综合征出血热病毒核蛋白（ＮＰ）及囊膜糖蛋白Ｇ１和Ｇ２可与Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２＾ｄ）和Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２＾ｂ）小鼠ＭＨＣ Ｉ类分子相结合的抗原表位进行了分析，预测出可分别与Ｈ－２Ｋ＾ｂ，Ｈ－２Ｄ＾ｄ，Ｈ－２Ｄ＾ｄ和Ｈ－２Ｌ＾ｄ结合的核蛋白表位，依此各有７，１４，４，０和８个     

抗淋球菌PIA单克隆抗体的制备和应用分析

用淋球菌全菌体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，以纯化ＰＩＡ做ＥＬＩＳＡ间接法筛选，获得５株稳定分泌抗ＰＩＡ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。５株ＭｃＡｂ中３株为ＩｇＭ类（２Ｈ１１，４Ｈ８，４Ｅ１０），另２株分别为ＩｇＧ１（１Ｃ２）和ＩｇＧ２ｂ（５Ａ５）亚类。２Ｈ１１和１Ｃ２为高亲和力抗体，１Ｃ２与５Ａ５识别的抗原表位相同。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，５株ＭｃＡｂ均能从复杂的淋球菌菌体崩解物中特异地识别分子量为３５ＫＤａ的ＰＩＡ抗原，与淋球菌ＰＩＢ无交叉反应。     

瘤体内注射IL—2基因后肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞的功能分析

将脂质体包裹的ＩＬ－２基因直接注射至Ｂ１６Ｆ１０黑色素瘤瘤体内，研究肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）的功能变化。１０ｄ后，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定显示瘤体内注射ＩＬ－２基因后肿瘤细胞及ＴＩＬ中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达阳性；经Ｇ４１８筛选后的肿瘤细胞培养上清中可检测出ＩＬ－２；肿瘤细胞表面表达了较高水平的ＭＨＣＩ类抗原（Ｈ２Ｋ＾ｂＤ＾ｂ）；ＴＩＬ表面粘附分子ＬＡＦ－１表达也明显高于对照组，其     

逆转录病毒载体介导的同种MHC基因在小鼠胸腺的 …

通过胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２－Ｂ１９－Ｈ－２Ｋ＾ｂ），表达外源性主要组织相容性抗原复合物（ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏ－ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘ，ＭＨＣ）抗原，为下一步诱导异基因小鼠器官移植耐受作准备。方法：通过ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠有腺内注射射质粒ＰＸＮ（Ｎ２－Ｂ１９－Ｈ－２Ｋ＾ｂ），将外源性的编码Ｃ５７ＢＬ／６小鼠ＭＨＣⅠ类抗原的Ｈ－２Ｋ＾ｂｃＤＮＡ转移到ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠胸腺，用聚合酶链反     

抗人Ig轻链系列单抗的研制：Ⅲ抗人Ig游离λ型轻链共同抗原决定…

用多例提纯的ＢＪ－λ混合免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Ｓｐ２／０融合，获得３株稳定分泌抗人Ｉｇ游离λ链ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株（ＡＨλＤ８、ＡＨλ１Ｃ１和ＡＨλ２Ｃｌ）。它们分泌的ＭｃＡｂ均能与我室所有１７例ＢＪ－λ起强反应，但不与结合的λ型轻链及Ｋ型轻链反应，表明这３株ＭｃＡｂ可能是抗人Ｉｇ游离λ链共同抗原决定簇的。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。添加ＥＬＩＳＡ表明它们识别相同的表位。     

MHC－I类分子在诱导肿瘤浸润淋巴细胞细胞毒活性中的作用

选用Ｈ＿２２（小鼠肝癌）、Ｂ＿１６（小鼠黑色素瘤）和Ｅ＿（１０）（小鼠淋巴瘤）三种动物模型分离肿瘤浸润淋巴细胞（ＴｕｍｏｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ，ＴＩＬｓ），在含ＩＬ－２２００Ｕ／ｍｌ的培养系统中以６０钴灭活自身瘤细胞，周期性刺激进行扩增。实验发现，被选用的三种动物瘤株中。仅从Ｅ＿（１０）淋巴瘤分离的ＴＩＬ显示明显的增殖和对自身瘤细胞的杀伤活性。对三种瘤株体外ＭＨＣ限制性观察结果表明，未测出Ｈ＿（２２）、Ｂ＿（１６）瘤株细胞表达Ｋ￣ｂ、Ｄ￣ｂ、Ｋ￣ｋ、Ｄ￣ｋ、Ｋ￣ｄ、Ｄ￣ｄ位点编码的ＭＨＣ－Ｉ类分子，而Ｅ＿（１０）瘤细胞则表达强阳性的Ｋ￣ｂ、Ｄ￣ｂ位点编码的ＭＨＣ－Ｉ类分子。此外，Ｈ＿（２２）、Ｂ＿（１６）瘤细胞可在多种品系（Ｃ＿（５７）ＢＬ／６、Ｃ＿３Ｈ、Ｂａｌｂ／Ｃ及昆明种）小鼠中生长，而Ｅ＿（１０）瘤株只限制在Ｃ＿（５７）ＢＬ／６品系小鼠中生长。     

移植前淋巴细胞输注诱导产生供者特异性同种移植物长期存活的机制

研究表明,移植前输入同种异体供者的淋巴细胞（ＤＳＴ）,尤其当供受者之间某些组织相容性抗原（ＭＨＣ）相同时,可以诱导出对同种移植物的长期耐受,确切机制不明。文章作者应用２Ｃ转基因小鼠研究了ＤＳＴ诱导同种异体移植物长期存活的机制。２ＣＦ１转基因小鼠（Ｈ－２ｂ／ｄ,Ｌｄ－,抗－ＬｄＴＣＲ＋）作为受者,该小鼠携带有能特异性识别Ｌｄ（ＭＨＣ一类分子）的转基因Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）,该ＴＣＲ可被单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｂ２识别。ＢＹＪ小鼠（Ｈ－２ｂ／ｄＬｄ＋）作为淋巴细胞及皮肤移植物的供者。在皮肤移植的当天或…     

生物免疫制剂对鼠枯否细胞释放过氧化氢的影响

从正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝中分离出大量高纯度的枯否细胞（ＫＣ），体外培养并以干扰素（ＩＦＮａ－２ｂ）、卡介苗（ＢＣＧ）或二者联用处理枯否细胞，用荧光法检测免疫制剂对枯否细胞释放Ｈ２Ｏ２的影响。结果显示，ＩＦＮａ－２ｂ或ＢＣＧ均可增强枯否细胞释放Ｈ２Ｏ２量，分别使释放量提高约１．６倍和１倍；ＩＦＮａ－２ｂ和ＢＣＧ协同作用的效果更强，使枯否细胞释放Ｈ２Ｏ２量提高２倍以上。文章讨论了免疫制剂增强枯否细胞的     

异型反应性CD4^＋T淋巴细胞在MHC—I类分子差异的？…

目的 离体实验中，异型反应性ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞可以通过识别由受体抗原提呈细胞（ＡＰＣ）提呈的异体ＭＨＣ－Ｉ类抗原这一“间接途径”崦活化增殖。在体内是否能导致ＭＨＣ－Ｉ类分子差异的异体移植排斥反应值得研究。方法 ＣＤ８基因被剔除的小鼠（ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｉｃｅ）体内９９％以上的Ｔ淋巴细胞为ＣＤ４＾＋Ｔ细胞。将ＭＨＣ－Ｉ类分子发生基因变异的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠（Ｂ６Ｋ＾ｂｍｌ，Ｈ－２＾ｂｍｌ，Ｋ＾ｂ     

抗人Ig轻链系列单抗的研制Ⅲ抗人Ig游离λ型轻链共同抗原决定簇单克隆抗体的制备和初步鉴定

用多例提纯的ＢＪ－λ混合免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Ｓｐ２／０融合，获得３株稳定分泌抗人屹游离λ链ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株（ＡＨλＤ８、ＡＨλ１Ｃ１和ＡＨλ２Ｃ１）．它们分泌的ＭｃＡｂ均能与我室所有１７例ＢＪ－λ起强反应，但不与结合的λ型轻链及Ｋ型轻链反应，表明这３株ＭｃＡｂ可能是抗人Ｉｇ游离λ链共同抗原决定簇的．３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。添加ＥＬＩＳＡ表明它们识别相同的表位。用于检测正常人血清和尿中的游离λ链及多发性骨髓瘤患者的ＢＪ－λ均具有很好的特异性和敏感性．本文还讨论了有关的免疫问题．     

分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（Ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（Ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（Ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡ     

H—2K^b基因导入小鼠造血细胞的研究

本研究应用分子克隆技术，用脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）将ＭＨＣ－Ｉ类基因（即小鼠Ｈ－２Ｋ＾ｂ基因）导入包装细胞ＰＡ３１７。用培养的病毒上清进一步感染ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的造血细胞，且形成了抗Ｇ４１８的ＣＦＵ－ＧＭ。通过多聚酶链式反应（ＰＣＲ）和反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），表明病毒上清感染后小鼠造血细胞及其形成的ＣＦＵ－ＧＭ中均整合了ＭＨＣ－Ｉ类基因，且已转录为ｍＲＮＡ，流式细胞仪（ＦＡＣＳ     

抗血型糖蛋白A非凝集型单克隆抗体的制备和鉴定

抗红细胞非凝集型抗体是建立“全血免疫分析系统”的必要条件。为此，我们采用小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０和纯化人红细胞膜血型糖蛋白Ａ（ＧＰＡ）免疫的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠的脾细胞融合，获得了一株分泌抗ＧＰＡ非凝集型单克隆抗体的杂交瘤细胞系－３Ｃ５。３Ｃ５分泌的ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１亚类，ｋａｐｐａ型轻链，能够识别和结合红细胞膜的血型糖蛋白Ａ和血型糖蛋白Ｂ（ＧＰＢ），说明其识别的是ＧＰＡ和ＧＰＢ分子所共有的抗原决定族     

一个新的CD4单克隆抗体的研制

用基因工程重组人ＣＤ４分子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备了一个分泌抗ＣＤ４ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。该ＭｃＡｂ与ＣＤ４分子有强反应，其亲和力常数Ｋａｆｆ＝６．１２５×１０￣９Ｍ￣（－１）。竞争结合实验表明，它与ＡＴＣＣ克隆ＣＲＬ８００２（ＯＫＴ４）分泌的ＭｃＡｂ分别识别ＣＤ４分子中不同的表位，其腹水滴度较ＡＴＣＣ（ＯＫＴ４）ＭｃＡｂ腹水高约１０倍。     

高压氧抗移植排斥反应及其机制的研究

目的：探讨高压氧降低细胞免疫功能、抗移植排斥反应的机理。方法：供鼠ＢＡＬＢＣ（Ｈ－２ｄ）,受鼠Ｃ５７ＢＬ６（Ｈ－２ｂ）,皮肤移植后,分对照组、实验组,实验组小鼠用９９－２％氧气,０－２５ＭＰａ,作用１－５ｈ,每日一次,看高压氧对小鼠移植皮片存活时间的影响,分别于术后３ｄ、７ｄ、１４ｄ、２１ｄ检测小鼠脾Ｔｈｙ－２阳性细胞、Ｌ３Ｔ４阳性细胞、Ｌｙｔ－２阳性细胞百分率的变化及ＩＬ－２产生量、对ＩＬ－２Ｒ反应性,同时做ＴｈＴｓ比值变化的比较。另外,于术后１４ｄ,应用免疫组化法检测移植皮片局部ＣＤ＋…     

分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素杂交瘤细胞系的建立及初步应用

应用常规方法建立了３株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌Ｃ１型肠毒素（ＳＥＣ１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系Ｂ３、Ｃ４和Ｇ８。其中Ｂ３和Ｃ４均为ＩｇＧ１（ｋ），Ｇ８为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。Ｂ３和Ｇ８与ＳＥＡ，ＳＥＢ及ＳＥＤ均无交叉反应；Ｃ４虽与ＳＥＡ和ＳＥＤ无交叉反应，但与ＳＥＢ有交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水效价为１０＾－５～１０＾－８。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳ     

大马蹄蝠中脑上,下丘的功能形态学研究——氚标记的2—脱氧核糖法

用定量氚标记的２－＾３Ｈ脱氧核糖法（＾３Ｈ－２－Ｄｅｏｘｙｇｌｕｃｏｓｅ，＾３Ｈ－２－ＤＧ）和电生理学技术，研究了大马蹄蝠中脑上，下丘的听反应特征，电生理实验表明：下丘听反应的最佳频率为５９ＫＨｚ，从下丘中央核腹侧部到下丘表面，其频率从６２ＫＨｚ依次递减到３５ＫＨｚ具音频组构特点，＾３Ｈ－ＤＧ法结果表明：（１）上丘对５９ＫＨｚ６５ｄＢ５９ＫＨｚ，２０ｄＢ，２９．５ＫＨｚ，２０ｄＢ三组声刺激的反应处     

抗淋球菌PIA单克隆抗体的制备和应用分析

用淋球菌全菌体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，以纯化ＰＩＡ做ＥＬＩＳＡ间接法筛选，获得５株稳定分泌抗ＰＩＡ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。５株ＭｃＡｂ中３株为ＩｇＭ类（２Ｈ１１，４Ｈ８，４Ｅ１０），另２株分别为ＩｇＧ１（１Ｃ２）和ＩｇＧ２ｂ（５Ａ５）亚类。２Ｈ１１和１Ｃ２为高亲和力抗体，１Ｃ２与５Ａ５识别的抗原表位相同。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，５株ＭｃＡｂ均能     

人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体的研制及鉴定

以人心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）为抗原，采用脾内免疫法，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾淋巴细胞与小鼠Ｓｐ２／０细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选，三次克隆化后获得５株能稳定分泌抗ｃＴｎＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞Ｇ３、Ｇ８、Ｇ１０、Ａ５和Ａ７。免疫球蛋白亚类鉴定其中１株为ＩｇＧ２ａ，４株为ＩｇＭ。染色体数目９２～１１０条。将Ｇ３、Ｇ８、Ｇ１０、Ａ５的单克隆抗体腹水做１：１００稀释与ＬＤＨ、ＣＫ、ＣＫＭＢ和ＧＯＴ等心肌酶均无交叉反应。５株ＭｃＡｂ的腹水效价为３．２×１０－６～１．６×１０－７。ＭｃＡｂ相加试验表明，Ａ５和Ｇ３可识别不同的抗原表位。     

汉坦病毒核蛋白基因片段真核表达载体的构建及鉴定

目的 确定特定小鼠ＭＨＣ Ｉ类分子Ｈ－２ｄ限制性另工提呈的汉坦病毒核蛋白（ＮＰ）抗原表位。方法 在计算机预测的基础上,以编码ＮＰ的Ｓ基因为模板,合成了３个相互重叠的基因片段,构建了以携带ＧＦＰ报告基因的ｐＥＧＦＰ－Ｎ２为持载体的重组质粒,并进行了初步表达及鉴定。结果 目的基因片段已插入质粒载体,并在转染的真核细胞内成功表达。结论 汉坦病毒核蛋白片段能够被细胞加工提呈。