呼吸道合胞病毒下呼吸道感染对机体细胞免疫的影响

为研究呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）急性下呼吸道感染（ＡＬＲＩ）的细胞免疫变化，对２５例病儿外周血白细胞介素２（ＩＬ－２）和可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平、Ｔ细胞白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达率和Ｔ细胞亚群百分率进行检测。结果显示，急性期病儿外周血ＩＬ－２水平明显低于恢复期和正常对照组，Ｔ细胞ＩＬ－２Ｒ表达率亦明显降低，而ｓＩＬ－２Ｒ水平却显著增高。急性期病儿ＩＬ－２水平与Ｔ细胞ＩＬ－２Ｒ表达率和ＣＤ＋４细胞百分率呈正相关，与ｓＩＬ－２Ｒ水平和ＣＤ＋８细胞百分率呈负相关；ｓＩＬ－２Ｒ水平与Ｔ细胞ＩＬ－２Ｒ表达率呈负相关，与临床严重程度呈正相关。上述各项免疫指标异常均提示ＲＳＶ感染时机体存在细胞免疫功能紊乱。     

IL—2—绿脓杆菌外毒素融合蛋白增强杀伤细胞活性

实验证实了白细胞介素２－绿脓杆菌外毒素融合蛋白ＩＬ２－ＰＥ４０ＲＥＤＬＫ、ＩＬ２－ＰＥ４０ＫＤＥＬ、ＩＬ２－ＰＥ６６4GluＲＥＤＬＫ、ＩＬ２－ＰＥ６６4GluＫＤＥＬ对含高亲和力ＩＬ－２受体靶细胞的杀伤效应是借助于ＩＬ－２与其受体的特异性结合和ＰＥ的杀伤活性介导的，而且同一靶细胞对这些融合蛋白的敏感性有较大的差异，对人外周血ＰＨＡ体外活化的淋巴母细胞的杀伤活性，ＩＬ２－ｐＥ６６4GluＫＤＥＬ要比ＩＬ２－ＰＥ４０ＲＥＤＬＫ强约４０倍，还发现若将ＩＬ２－ＰＥ融合蛋白羧基末端的ＲＥＤＬＫ氨基酸突变为ＫＤＥＬ可增强其杀伤细胞的活性，对ＣｏｎＡ活化的小鼠脾母细胞的杀伤活性，ＩＬ２－ＰＥ４０ＫＤＥＬ要比ＩＬ２－ｐＥ４０ＲＥＤＬＫ强８倍。     

可溶性IL－2R在选择性IgA缺乏症发病机理中的意义

白细胞介素２（ＩＬ－２）及其受体（ＩＬ－２Ｒ）系统在机体免疫调节中发挥着重要作用。本研究首先以间接免疫荧光技术检测了选择性ＩｇＡ缺乏症（ＳＩｇＡＤ）患儿活化淋巴细胞膜表面白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒα）的表达情况及其Ｔ细胞亚类水平，继而采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测了ＳＩｇＡＤ患儿血清可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒα）的含量。结果表明：ＳＩｇＡＤ患儿组的Ｔａｃ阳性细胞百分率（ｍＩＬ－２Ｒα）明显高于正常对照组，其ＣＤ４＋细胞百分率明显低于正常对照组、ＣＤ８＋细胞百分率明显高于正常对照组。而其血清ＳＩＬ－２Ｒα含量亦明显高于正常对照组。研究显示：ＳＩｇＡＤ患儿ｍＩＬ－２Ｒα的表达虽高于正常对照组，但因其Ｔ细胞亚类的显著异常既有体内存在着明显的细胞免疫功能的损害，导致ＩＬ－２的生成不足，使高水平的ＳＩＬ－２Ｒα大量脱落成为ＳＩＬ－２Ｒα，而ＳＩＬ－２Ｒα又可与ＳＩＬ－２Ｒα竞争结合ＩＬ－２，从而使机体细胞免疫功能的损害进一步加剧。     

智能低下患儿外周血T淋巴细胞亚群与sIL－2R水平的变化

本文检测５５例智能低下（ＭＲ）患儿及正常人外周血Ｔ淋巴细胞亚群及血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的水平，结果表明ＭＲ患儿ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞显著低于对照组，ＣＤ８＋细胞明显高于对照组，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值下降。ｓＩＬ－２Ｒ活性明显高于对照组。     

急性丙型肝炎患者免疫状况的研究

用间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及ＬＤＨ释法，对１６例急性输血后丙型肝炎（抗－ＨＣＶ、ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性）患者，分别进行外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的Ｔ细胞亚群计数、Ｔ４／Ｔ８比值、Ｔａｃ受体的检测及血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）ＮＫ细胞活性的测定。并与正常人组比较，经ｔ检验发现，急性丙型肝炎患者的Ｔ４亚群所占百分比、Ｔ４／Ｔ８比值及ＰＢＭＣＴａｃ受体表达均明显低于正常人组（Ｐ＜０．０５），而ＮＫ细胞活性、血清ｓＩＬ－２Ｒ明显高于正常人组（Ｐ＜０．０５）。患者的这些免疫状态改变，可能对其发病机理的研究有一定意义。     

食管癌患者五项细胞免疫学指标的测定及其意义

对３５例食管癌（ＥＣ）患者和３０例正常人（ＮＣ）的外周血自然杀伤（ＮＫ）细胞活性、Ｔ细胞亚群、血浆可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）以及外周血诱生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的水平进行了检测。结果显示，ＥＣ患者ＮＫ细胞活性明显降低（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ８＋细胞增多（Ｐ＜０．０６），ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞比值降低（Ｐ＜０．０５）；ｓＩＬ－２Ｒ明显增高（Ｐ＜０．０１）；外周血诱生ＩＦＮ－γ降低（Ｐ＜０．０５）；血浆ＴＮＦ－α升高。表明，上述指标对判断、分析ＥＣ患者细胞免疫功能状况及病变程度有较大的意义。     

白癜风患者外周血T淋巴细胞异常活化

本文以人类白细胞抗原ＤＲ位点（ＨＬＡ－ＤＲ）及白细胞介素２受体亚单位Ｐ５５和Ｐ７５（ＩＬ－２Ｒ，Ｐ５５和ＩＬ－２Ｒ，Ｐ７５）的表达为Ｔ淋巴细胞活化的指标，用双色免疫标记流式细胞法对白癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞（ＶＰＢＴＬ）进行分析。实验发现：ＨＬＡ－ＤＲ在ＶＰＢＴＬ及其亚群Ｔ辅助细胞（Ｔｈ，ＣＤ４＾＋细胞）和Ｔ抑制细胞（Ｔｓ，ＣＤ８＾＋细胞）的表达均明显高于正常人，分别为：４９．６２％比１４．５４％     

智能低下患儿外周血T淋巴细胞亚群与sIL—2R水平的变化

本文检测５５例智能低下（ＭＲ）患儿及正常人外周血Ｔ淋巴细胞亚群及血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的水平，结果表明ＭＲ患儿ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞显著低于对照组，ＣＤ８＾＋细胞明显高于对照组，ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值下降。ｓＩＬ－２Ｒ活性明显高于对照组。     

扩张型心肌病可溶性IL－2R、NK活性和T细胞亚群的检测

应用单克隆与多克隆双抗体夹心法检测２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）及２０例正常人（ＮＣ）的血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ），同时测定了外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性和Ｔ淋巴细胞亚群，结果发现ＤＣＭ患者ｓＩＬ－２Ｒ明显高于ＮＣ组（Ｐ＜０．００１），而ＮＫ活性明显低于ＮＣ组（Ｐ＜０．００１），ＤＣＭ患者Ｔ细胞亚群与ＮＣ组比较，ＣＤ８降低（Ｐ＜０．０１），而ＣＤ４／ＣＤ８比值升高（Ｐ＜０．０５）。提示细胞免疫功能紊乱参与ＤＣＭ的病理过程。     

吸入糖皮质激素对哮喘儿童细胞免疫功能的影响

为了解糖皮质激素对免疫功能的作用，检测了哮喘发作期患儿。对经丙酸倍氯松（ＢＤＰ）吸入治疗的患儿及正常儿童外周血淋巴细胞膜ＩＬ－２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）、超微结构、血浆游离ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、淋巴细胞亚群及ＢＤＰ对体外培养淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ的表达进行比较。结果显示，ＢＤＰ可以明显抑制ＰＨＡ刺激引起的体外培养淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ的表达，引起淋巴细胞的凋亡，而吸入ＢＤＰ（２００μｇ／ｄ）的哮喘患儿（缓解期）除ｓＩＬ－２Ｒ比哮喘发作期显著降低（Ｐ＜０．０５）外，外周血淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ及淋巴细胞亚群并未出现显著变化．结果提示，抑制淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ表达和淋巴细胞活化可能是ＢＤＰ治疗哮喘等变态反应的重要机制之一。吸入ＢＤＰ主要是呼吸道局部作用，对全身细胞免疫指标影响不大     

pEGFP-N2-BMP2转染诱导P19细胞分化为心肌样细胞

目的 探讨真核表达质粒pEGFP-N2-BMP2转染P19细胞后能否诱导其分化为心肌样细胞.方法 实验分转染组和对照组,转染组以真核表达质粒pEGFP-N2-BMP2转染P19细胞并使骨形态发生蛋白2(BMP2)基因稳定表达,然后结合细胞聚集培养,对照组为培养的P19细胞.两组细胞聚集培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4d、8d、12d、16d,免疫细胞化学和Western blotting方法检测心肌标志物心肌肌钙蛋白T (cTnT)和心肌肌动蛋白α;半定量RT-PCR检测心脏早期转录因子GATA-4和NKx2.5基因的表达.结果 转染组心肌肌钙蛋白T和心肌肌动蛋白α两种蛋白形成聚集体贴壁4d时无表达,8d、12d、16d出现表达,其表达随时间延长逐渐增强.取材各时间点之间有显著差异(P＜0.01).在转染诱导后4d时GATA-4、NKx2.5两个基因即出现弱的表达,随着时间延长,8d、12d、16d两个基因的表达逐渐增强.取材各时间点之间有显著差异(P＜0.01).对照组未发现心肌肌钙蛋白T和心肌肌动蛋白α两种蛋白的表达,亦未发现GATA-4、NKx2.5两个基因的表达.结论稳定表达BMP2基因的P19细胞可以分化为心肌样细胞,BMP2可能通过调控转录因子GATA-4、NKx2.5进而影响心肌肌钙蛋白T和心肌肌动蛋白α的表达.     

参麦注射液对鼠肾小管细胞株NRKSIE氧化性损伤影响的实验研究

通过H2O2致鼠肾小管细胞损伤模型建立，研究参麦注射液(SMI)对H2O2所致的小管细胞氧化性损伤的影响。实验结果表明，SMI对H2O2致的小管细胞氧化性损伤具有明显的保护和治疗作用，其疗效略优于辅酶Q10(CoQ10)，证实SMI能明显提高受损的小管细胞有氧代谢功能，并能保护未受损小管细胞，从而为SMI治疗肾脏疾惠提供了依据。     

预适应对氧化应激中HepG2细胞保护作用的初步探讨

目的：建立HepG2细胞预适应、氧化应激模 型。方法:应用不同浓度H₂O₂作用于HepG2细胞，分别用吖啶橙和溴 化乙锭（AO/EB）双染色法、MTT比色法及PI染色流式细胞术检测细胞活力及凋亡情况。结果:各组细胞经AO/EB双染色之后呈现不同的染色状态：对照组细胞为正常 梭形，呈均匀绿色荧光染色；预适应组可见少量绿色浓染细胞；氧化应激组可见大量绿色或 红色浓染凋亡细胞；预适应后氧化应激组凋亡细胞明显少于氧化应激组。预适应组MTT比色 法测定细胞生存活力比较：对照组>预适应组>预适应后氧化应激组>氧化应激组（P<0.05）。PI染色流式细胞术测细胞凋亡率比较：氧化应激组>预适应后氧化应激组>预适应组> 对照组（P<0.05）。结论:不同浓度H₂O₂作用于HepG2细胞发 生预适应和氧化应激现象，应用小剂量H₂O₂作用于细胞可以保护细胞免受更大浓度H₂ O₂带来的损伤。     

盐酸戊乙奎醚对高黏血症大鼠微循环和血液流变性的影响

目的 观察盐酸戊乙奎醚（Penehyclidine Hydrochloride，PHC）对大鼠肠系膜微循环及血液流变性的影响。方法 健康成年SD大鼠舌静脉给予10％的高分子右旋糖酐（high molecular dextran，HMD）3．5nl／kg制造高血黏症动物模型，镜下活体观察大鼠肠系膜微循环微血流流态变化，造模成功后给予PHC0．023、0．07、0．2mg/kg，山莨菪碱（anisodamine，Ani）2mg／kg，生理盐水2ml／kg，继续观察微血流流态变化。给药后40min取血做血液流变性检测及血栓烷素A3（thromboxan A2，TXA2）与前列环素（prostaglandln I2，PGI2）含量测定。结果 模型组与正常对照组比较，血流明显变缓，血流态为粒摆流或近停滞状态，全血黏度、血浆黏度、红细胞比容、红细胞电泳时间、血沉方程K值、TXA2及TXA3／PGI2均有极显著性差异（P〈0．01）；PHC0．2ms／kg组能明显改善血浆黏度，在PHC0．023、0．07、0．2mg／kg及Ani 2mg／kg组除血浆黏度外均得到明显改善，与模型组比较P〈0．05。结论 PHC可改善HMD引起的急性微循环障碍及血液流变性异常。     

胃腺癌中PAR-2、β-catenin和COX-2的表达及其意义

目的 探讨人类蛋白酶激活受体-2(protease-activated receptor-2,PAR-2)、β-连环蛋白(β-catenin)与COX-2在胃腺癌中的表达及其与临床病理因素和预后的相关性及意义.方法 应用免疫组化SP法检测63例胃腺癌组织、19例低级别上皮内瘤变、20例正常胃组织中PAR-2、β-catenin与COX-2的表达情况.结果 PAR-2、COX-2在胃腺癌组织中的阳性表达率较在低级别上皮内瘤变组织、正常胃组织中分别升高(P<0.05),β-catenin在胃腺癌组织中的异常表达率较在低级别上皮内瘤变组织、正常胃黏膜组织中升高(P<0.05).PAR-2在胃腺癌组织中的阳性表达与胃腺癌的浸润深度相关(P<0.05);β-catenin在胃腺癌组织中的异常表达与胃腺癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期相关(P<0.05);COX-2在胃腺癌组织中的阳性表达与胃腺癌的浸润深度、淋巴结转移、临床病理分期相关(P<0.05).Kaplan-Meier生存分析显示:PAR-2、COX-2阳性表达与阴性表达组患者的5年生存期的差异有统计学意义(P<0.05),β-catenin异常表达与正常表达组患者的5年生存期的差异有统计学意义(P<0.05).结论 PAR-2参与胃腺癌的进展且可作为判断预后的一项指标;β-catenin的异常表达和COX-2的阳性表达与胃腺癌的发生、发展密切相关,且可作为判断预后的重要指标.     

013 抗原激活的T淋巴细胞凋亡的分子机制

为维持外周淋巴细胞数量的平衡、谱库的多样性、适度应答以及自身耐受,抗原激活后多数增殖的T淋巴细胞要发生凋亡(apoptosis).不同免疫状态下,抗原活化T细胞的凋亡途径是不同的.本文就T细胞经抗原活化后,在局部IL-2、抗原水平较高时由死亡因子受体介导的凋亡和在低IL-2、低抗原时由线粒体途径发生的凋亡作一简要综述.     

BMP-2和FGF-2对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

目的:观察骨形成蛋白(BMP-2)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响.方法:取3～18月雄性C57BL/6J小鼠(共50只)的骨髓细胞, 分离贴壁培养后, 用免疫磁珠法纯化, 并鉴定为MSCs后, 再进行贴壁培养24 h后, 分别在成骨细胞诱导培养液中加入100 μg/L BMP-2和0.5 nmol/L FGF-2持续诱导7、 14、 21 d后, 进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测, Vonkossa染色以及茜素红染色, 并用递转录荧光定量PCR法检测向成骨细胞分化的标志性基因(Runx2/cbfa1、 Alp、 collagen-1、 osteocalcin)的表达情况.结果:BMP-2刺激组的ALP活性以及钙化结节明显高于对照组, Runx2/cbfa1, ALP, collage-1, osteocalcin的mRNA呈高表达; FGF-2刺激组的ALP活性以及钙化结节也高于对照组, Runx2/cbfa1、 Alp、 collagen-1、 osteocalcin的mRNA表达量也高于对照组, 但不如BMP-2明显. 结论:BMP-2和 FGF-2在不同程度上促进体外培养的小鼠MSCs向成骨细胞方向分化.     

社会情绪负性偏向的事件相关电位研究

目的:采用事件相关电位(ERP)方法考察社会悲伤与愉快情绪的加工时程特点,以探明社会情绪能否引起负性偏向。方法:16名在校大学生观看社会悲伤、中性与愉快情绪图片,同时记录EEG,离线分析比较三种图片诱发的P2与N2等ERP成分的峰潜伏期、波幅及其头皮分布。结果:与愉快情绪相比较,社会悲伤性情绪使P2潜伏期缩短(177.9→168.8ms),N2波幅增大(-3.4→-4.2μV);P2、N2波幅均表现为右半球优势(左、右半球P2分别为:4.2与5.2μV;N2:-3.1与-3.7μV)。结论:社会情绪引起负性注意偏向,并存在心理加工的右半球优势。