增城与广州地区乙型肝炎病毒基因分型比较研究

目的增城地区与广州地区的乙型肝炎病毒基因型的差异性比较.方法利用荧光PCR法对HBV携带者进行基因分型.结果增城地区B型占87.0%,C型占11.6%,BC混合型占1.4%,没有发现D型;广州地区B型占48.9%,C型占43.7%,BC混合型占6.5%,D型占0.9%.结论增城与广州HBV DNA基因分型存在一定差异.     

广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者的基因型研究

目的：扩增HBV DNA S基因，建立HBV DNA的分型方法，研究广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者（AsC）的基因型。方法：利用PCR－RFLP基因分型方法，扩增HBV DNA S基因，以限制性内切酶AvaⅡ、MboI酶切分型。结果：60份AsC血清样本，B型37份（62．7％），C型20份（33．3％），B、C混合型2份（3．3％），未分型1份（1．7％），经序列分析证明为C型，C型共35％。结论：PCR－RELP分型方法经济实用，分型率达98．3％，广州地区小儿乙肝病毒的基因型以B型和C型为主，其中携带者中B型占优势。     

乙型肝炎病毒基因分型方法的建立及应用

目的　扩增病毒S基因区,建立基因分型方法。方法　利用基因库软件及PCR和限制性片段长度多态性分析技术RFLP,用慢性无症状携带者的血清,扩增病毒S基因,建立新的分型方法。用此方法对我国部分地区慢性无症状携带者(AsC)及慢性乙型肝炎、肝硬化的HBVDNA进行了调查。对广州、重庆、北京、沈阳等地区慢性无症状携带者的HBVDNA进行分型。结果　广州,B型328%、C型427%、BC混合型230%、其他16%;重庆,B型350%、C型400%、BC混合型250%;北京,B型250%、C型500%、BC混合型250%;沈阳,B型111%、C型889%。结论　新的基因分型方法,简化了传统的基因序列分型法,结果可靠,操作相对简便。我国HBVDNA的基因型以C型和B型为主。广州地区慢性乙型肝炎和肝硬化患者的HBV基因型,肝硬化患者以C和B混合型为主,占500%,HBVDNA毒株的混合感染,有可能加重肝组织的损伤。     

成都地区HBV基因型分布研究

目的 调查成都地区乙型肝炎患者外周血中乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布情况。方法 以长片段高保真聚合酶链反应（LA—PCR）扩增乙肝病毒S基因区，结合双脱氧链末端终止法（Sanger）测序技术对该地区90例乙型肝炎患者感染的HBV进行基因分型；同时与常用的基因型特异引物扩增分型法获得的分型结果进行比较，做重复试验以证实所用方法的可靠性和准确性。结果 S基因直接测序法检测成都地区人群HBV基因分型结果为B基因型57例（63．3％）、C型30例（33．3％），D型3例（3．3％），无其他基因型和混合型；基因型特异引物分型法除检出23例（25．5％）混合基因型外，其他各例结果均与S基因测序法吻合。结论 成都地区HBV优势基因犁以B型为主，C型次之，偶见D型。S基因直接测序法能准确鉴定HBV基因型，并较好地反映HBV基因组变化的准种特征，总体上优于型特异引物分型法，此结论具有统计学意义（P〈0．001）。     

HBV基因型与前C/C启动子变异及抗病毒疗效的关系

目的 了解深圳市乙型肝炎病毒（HBV）基因分型情况，探讨HBV基因型与前C／C启动子变异、乙肝的病程进展及抗病毒疗效的关系。方法 用单克隆抗体ELISA法（mAbs ELISA）对深圳市165例HBV感染者进行HBV基因分型；随机抽取24例慢性乙型肝炎（CUB）患者，用基因芯片技术检测HBV前C／C启动子变异；回顾性分析HBV基因型与干扰素、贺普丁抗HBV疗效的关系。结果 ①165例患者中，以B型106例（64.2％）和C型48例（29．1％）为主。慢性无症状乙肝病毒携带者（ASC）组B型占95．4％，肝硬化（LC）组C型占64．7％（P〈0．05）。②24例CHB患者中，16例（10例B型，6例C型）发生HBV前C／C启动子变异：前C区变异（nt1896、1862）者10例（B型9例，C型1例）。基本C区启动子变异（BCP）变异（nt1762、1764）者6例（B型1例，C型5例）。③用干扰素治疗的27例HBeAg（＋）CHB患者，达到完全应答者B型11例（62．5％）较C型1例（9．1％）多见（P〈0．05）。用贺普丁治疗的29例HBeAg（＋）CHB患者，持续应答者B型15例（78．9％）较C型3例（30．0％）多见（P〈0．05）。结论 ①深圳市HBV基因分型以B型为主，C型次之。②C型较B型易发生BCP变异，发生肝硬化机会较高，且对于扰素及贺普丁疗效较差。     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义。方法应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义。结果2922例HBV感染者中,B、C、B／C、D基因型分别占15．9％、83．5％、0．41％、0．21％,未发现其他基因型。北方地区c基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以c基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主。B基因型较c基因型HBV感染者平均年龄小（P〈0．001）;C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高（P=0．023）;B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较c基因型高（P=0．038）;C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义（P值分别为0．016）。结论中国HBV基因型以B、c基因型为主,仅少量的B／C和D基因型。北方地区以c基因型为主,南方地区c基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主。c基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBVDNA载量低,病情较重。     

反向点杂交法检测湘潭地区乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究

目的了解湘潭地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价。方法用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析。结果HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100％,湘潭地区HBV各种基因型分布比例：B型占74．74％。C型占11．58％,B、C型混合感染占13．68％。无症状携带者组与慢性重型肝炎组,慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBVB型和C型感染率存在显著性差异。其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组。结论HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值。湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点。     

特异性引物聚合酶链反应乙型肝炎病毒基因分型法的建立及应用

目的应用型特异性引物聚合酶链反应法（PCR）进行乙型肝炎病毒基因分型并分析该法的可靠性。方法应用型特异性引物PCR和INNO-LiPA分别对深圳、长春、北京152份HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者的血清标本进行了基因型分型，对该两种分型法不一致的血清标本再进行S区基因测序分型，以确定该两法的可靠性。结果型特异性引物PCR和INNO-LiPA的总符合率为86．8％（132／152），不一致率为13．2％（20／152）。型特异性引物PCR检测到81份（53．3％）B型；58份（38．2％）C型；13份（8．5％）B＋C型混合感染，未检出其他基因型或混合感染的基因型。INNO-LiPA检测到74份（48．7％）B型；61份（40．1％）C型；5份（3．3％）B＋C型混合感染；另检出3份（2．0％）A＋B型混合感染；1份（0．7％）B＋E型混合感染；1份（0．7％）C型与D型，1份（0．7％）D型感染，3份（2．0％）B／C／D型及3份未能分型。20份两法分型不一致的标本中，6份无剩余血清，对其余14份进行了S区基因测序分型，结果型特异性引物PCR与S区基因测序分型法的符合率为71．4％（10／14），而INNO-LiPA与S区测序法的符合率仅为7．1％（1／14），前者明显高于后者（P〈0．05）。结论型特异性引物PCR和INNO-LiPA均可鉴定HBV基因型，但前者较为简便和可靠，且费用较低，可用于临床标本的检测和流行病学调查。     

采用PCR微板核酸杂交-ELISA技术进行HBV DNA基因分型的研究

目的 采用PCR微板核酸杂交－ELISA技术对HBV DNA进行基因分型研究。方法 采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术,首先将HBV DNA进行PCR扩增,并将扩增产物加入预先包被HBV通用探针的微孔板,再加入HBV各基因型显色探针,同时进行微板核酸夹心杂交－ELISA显色,对152例临床诊断为不同程度乙型肝炎患者血清中HBV DNA进行基因分型。结果 152例不同临床表面的肝炎患得血清中的HBV DNA的基因型大多集中在B、C和D这3种基因型,其所占比例分别为：B型28．29％（43／152）,C型（37．50％（57／152）、D硎型18．42％（28／152）;A型、E型、F占比例很少,各占有3．29％（5／152）。还存在一定比例的混合基因型,B、C、D三型不同组合的混合型共占10．53％（16／152）。结论 PCR微板核酸杂交－ELISA方法可以准确、快速、简便进行HBV基因分型,在探讨HBV的流行病学及观察各基因型毒力强弱及致病性大小方面有重要意义。     

广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者的基因型研究

目的扩增HBV DNA S基因,建立HBV DNA的分型方法,研究广州地区小儿无症状乙肝病毒携带者(AsC)的基因型. 方法利用PCR-RFLP基因分型方法,扩增HBV DNA S基因,以限制性内切酶AvaII、MboI酶切分型. 结果 60份AsC血清样本,B型37份(62.7%),C型20份(33.3%),B、C混合型2份(3.3%),未分型1份(1.7%),经序列分析证明为C型,C型共35%. 结论 PCR-RELP分型方法经济实用,分型率达98.3%,广州地区小儿乙肝病毒的基因型以B型和C型为主,其中携带者中B型占优势.     

贵州乙型肝炎病毒基因型分布及意义分析

目的调查贵州乙型肝炎病毒（HBV）基因型分布。方法选择贵阳、遵义、凯里、都匀慢性HBV感染者693例，其中无症状携带者（ASC）292例，慢性肝炎（CH）276例，肝硬化（LC）76例，肝细胞肝癌（HCC）49例。用S基因限制性片段长度多态性确定基因型，比较主要基因型的地区分布及其与临床的关系。结果693例中，B基因449例（64．79％），C型233例（33．62％），A型6例（0．87％）。D型5例（0．72％），未发现E、F基因型。B型的分布：凯里最高（96．40％），遵义、都匀其次（78．79％、76．19％），贵阳最低（53．66％）。C型的分布，贵阳（45．68％）高于都匀（23．80％）、遵义（13．13％）及凯里（3．96％），差异有统计学意义（P≤0．01）。与B型相比，C型感染者平均年龄大；ALT水平高；HBeAg阳性率低（P≤0．01）。除ASC组外，B、C2种基因型在CH、LC和HCC中的分布差异有统计学意义（P均〈0．01）。结论贵州存在A、B、C、D4种HBV基因型，但以B型为主，C型其次，A型、D型仅占很小比例。B、C基因型在贵州不同地区的分布有一定差异。与B型相比，C型感染者肝脏损害的程度较重。     

广西乙型肝炎病毒基因分型及其临床意义的研究

目的 了解广西乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义。方法 用套式PCR扩增检测广西南部和北部[桂南和桂北]的各型乙型肝炎患者和慢性无症状HBV携带者共161份血清HBV DNA，阳性者用限制性片段长度多态性(RFLP)方法、直接测序法或克隆测序法进行基因分型。结果 广西HBV各种基因型分布比例：基因型A占3．7％，基因型B 21．7％，基因型C 72．7％、基因型D 1．2％；未发现基因型E、F、G和H。基因型C在慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌患者组中流行呈增加趋势，基因型B的流行与基因型C比较呈相反趋势(主要在慢性无症状HBV携带者和急性肝炎流行率相对较高)；基因型C组的HBeAg阳性率显著高于基因型B组，而基因型C组抗—HBe阳性率显著低于基因型B组。在基因型C组的肝脏损伤(ALT)比基因型A和B组更为严重；而在慢性无症状HBV携带者组中，基因型C在桂南的流行率显著高于桂北，基因型B的情况则相反。结论 ①广西主要流行的HBV主要为基因型B和C，桂南主要为HBV基因型C，桂北则主要为HBV基因型B，提示广西HBV基因型由于其流行分布的不同与广西肝癌发病率桂南高于桂北有关。②基因型C与较严重的肝脏疾病如肝癌的发生有关。③首次发现广西的急性肝炎、慢性肝炎存在少量的HBV基因型A型、D型和B C的混合型的流行。     

沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分子流行病学研究

目的 研究沈阳地区乙型肝炎病毒基因型分布和特点。方法 应用半巢式聚合酶链反应（PCR）扩增乙型肝炎病毒P基因，将PCR产物应用ABI377自动测序仪直接做核苷酸序列分析，并用DNA STAR软件进行种系发生分析及基因型鉴定。结果 HBV DNA标准株P基因片段可进行基因分型。在沈阳地区慢性HBV感染者中可检出基因型B、C和D，检出率分别为22％、50％和28％，基因型C分布与基因型B、D的差异有统计学意义，在慢性乙型肝炎患者和慢性HBV携带者间各基因型间分布比较中差异无统计学意义。结论 通过测定HBV DNAP基因序列片段可进行HBV DNA基因分型。沈阳地区乙型肝炎病毒基因型有基因型B、C和D型，其中基因型C为优势基因型。     

慢性乙型肝炎病毒基因型与YMDD变异关系

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）基因型与YMDD变异的关系。方法 选用200例HBV DNA、HbeAg阳性，血清ALT异常的．HBV肝炎患者，服拉米夫定（100mg／d）24个月。用PCR（FQ-PCR）检测HBVDNA，分析乙肝病毒野生型YMDD及突变耐药型YIDD／YVDD，HBV基因分型。结果 200例慢性乙肝病人C基因型占39％，B基因型占26％，D基因型占22％，B＋C混合基因型占10％，其他占3％，包括1例出现YIDD耐药株。服拉米夫定12个月后，YMDD变异率为6％；24个月后，YMDD变异率为15％。结论 乙肝病人HBV基因型以C型为主，次为B型及D型；服拉米夫定后大多数病人的DNA水平日月显降低，拉米夫定治疗可加速病毒YMDD变异发生，且与服药时间呈正相关；YMDD突变与乙肝病毒的基因型无关。     

慢性乙型肝炎患者病毒基因型分布及与临床关系

目的了解邯郸市乙肝病毒基因型分布情况，并探讨其与临床的关系。方法采用PCR—RFLP方法对邯郸108份HBV感染者的血清进行基因型分型，并结合转氨酶和HBV—DNA结果，分析乙肝病毒基因型的临床意义。结果邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主，占93．5％，B基因型占6、5％。不同性别感染基因型差异无统计学意义。肝生化指标ALT、AST、TB比较提示c基因型患者的肝脏炎症似乎比B型患者重，但差异无统计学意义。C基因型的患者血清HBeAg阳性率高于B基因型。C基因型的患者血清HBV—DNA略高于B基因型，但无统计学差异。结论邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主。C基因型患者血清HBeAg阳性率高于B基因型，C基因型患者与B基因型相比肝脏炎症较重，HBV—DNA略高，但差异无统计学意义。     

基因芯片法检测HBV多位点变异和基因分型的临床价值

目的运用基因芯片技术检测临床乙肝患者血清中HBV病毒的相关耐药基因突变及基因分型,评价该方法在监测HBV耐药及基因分型中的作用。方法在使用不同核苷类药物的260例乙肝患者血清中,采用寡核苷酸探针芯片检测其携带的HBV相关耐药基因变异情况及基因型。并随机挑取40例第2次扩增产物进行DNA序列分析。结果经基因芯片检测到拉米呋啶耐药31例（19．4％）,阿德福韦酯耐药6例（6％）。260例患者中C基因型180例（69．2％）,B型59例（22．7％）,BC混合型21例（8．1％）。结论基因芯片法可同时检测针对拉米呋啶、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比呋啶的多重耐药基因位点以及基因分型,与基因测序法比较,结果完全一致,是一种可靠的检测方法,可为临床抗病毒药物的科学选择提供参考。     

云南省乙型肝炎病毒基因型和血清型的流行状况分析

目的了解云南省人群中流行的乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）基因型和血清型分布情况。方法从参加健康体检的人群中筛查HBsAg阳性的血清标本,利用巢式PCR扩增HBVS基因片段,并对扩增产物进行序列测定,从GenBank中查获A～I基因型共27株HBV参考序列,构建HBVS基因系统发生树,以此确定其样本的基因型及血清型,并对结果进行统计分析。结果从2216名体检人员血清标本中筛查出39份HBsAg阳性的样本,HBV的s基因序列分型结果表明有4种基因型：c型占76．9％,B型占15．4％;D型占5．1％;I型占2．5％。血清分型结果为：adw2型占71．8％;adrq‘型占17．9％;ayr型占10．3％。所有adw2血清型标本均为c基因型。HBsAg、HBeAg双阳性标本中75％为c基因型／adw2血清亚型。结论云南省HBV感染人群中HBV基因型的分布以C型为主,血清型以adw2型为主。     

山东地区HBV基因型分布及拉米夫定抗病毒治疗对基因分型的影响

目的 确定乙型肝炎病毒（HBV）基因型在山东地区的分布及拉米夫定抗病毒疗效的影响。方法 采用PCR微板核酸分子杂交酶联显色技术，对临床服用拉米夫定一年的131例乙型肝炎患者血清中的HBV．DNA进行基因分型，与未服用拉米夫定组对照。结果 治疗组C型为87．4％（90／103），D型为12．6％（13／103）。对照组C型为89．3％（25／28），D型为10．7％（3／28），两组间差异无统计学意义。均未发现A、B、E和F基因型。结论 首次从临床慢性乙肝患者中得出山东地区HBV优势基因型为C基因型，同时存在D基因型。服用拉米夫定治疗一年对HBV基因型没有影响。     

贵州侗族、苗族和汉族人群乙型肝炎病毒基因型分布

目的　了解贵州侗、苗、汉族HBV感染者的基因型。方法　比较 12 7株各基因型HBV全序列S基因核苷酸序列 ,用DNA分析软件筛选出 3个限制性内切酶。设计 3条HBVS区引物并进行聚合酶链反应扩增 ,产物经MboⅠ、BstNⅠ或BsmAⅠ酶切 ,分析酶切产物电泳图谱 ,建立区分HBV(A～F)基因型的方法。对贵州 16 6份侗、苗、汉族HBV感染者血清进行基因分型 ,5份PCR产物直接测序验证分型方法的准确、可靠。结果　S基因PCR RFLP分型结果准确 ,5份酶切鉴定结果经测序证实。 16 6份标本中 ,B基因型 138份 (83 13% ) ,C型 2 8份 (16 87% ) ,未发现B、C以外的其他基因型。侗族的 4 8例中 ,4 7例为B型 (97 92 % ) ,1例C型 (2 0 8% ) ,苗族的 5 2例中 ,4 9例为B型(94 2 3% ) ,3例C型 (5 77% ) ;6 6例汉族也以B基因为主 (6 3 6 4 % ,4 2 6 6 ) ,但C型有 2 4例 (36 36 % ) ,与侗、苗族HBV感染者相比 ,差异有显著意义 (χ2 =35 0 5 88,P <0 0 0 5 )。结论　贵州地区HBV基因型由B、C 2型构成 ,且以B基因型为主。汉族患者C型较多 ,而侗、苗族患者中B型是占绝对优势的基因型。     

重型肝炎时乙型肝炎病毒基因型与基本核心启动子及前C区突变关系的研究

目的探讨重型肝炎（重肝）乙型肝炎病毒（HBV）基因型与基本核心启动子（BCP）及前C区突变的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）-限制性片段长度多态性分析技术（PCR-RFLP）对52例重肝和52例慢性乙肝（CHB）进行HBV基因分型。采用PCR产物直接测序技术，随机对15例B型和15例C型重肝患者的BCP区和前C区进行序列测定，分析HBV基因型与BCPT1762／A1764及前C区A1896突变的关系。结果泉州地区重肝的基因型以B型为主（48．08％），其次为C型（30．77％）和B／C混合型（17．31％），无A、E、F型存在。与CHB组比较，重肝组B型检出率明显降低，而C型和BIC混合型检出率明显升高。C型重肝患者BCPT1762／A1764双突变率显著高于B型（P〈0．05），而前C区A1896突变率在B、C型感染者中差异无统计学意义（P〉0．05）。结论C型感染易引起较重肝损伤，而B／C型混合感染可能是导致重肝发生的重要原因之一。C型重肝患者BCP T1762／A1764双突变率显著高于B型。