炎症性肠病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞及其特异标志物Foxp3表达水平的研究

目的：通过检测炎症性肠病（IBD）不同病期患者以及对照组外周血CD4^＋CD25^＋Treg及其特异标志物Foxp3的表达，来分析与IBD疾病活动性关系，探讨CD4^＋CD25^＋Treg和Foxp3在IBD发病机制中的作用。方法：52例IBD患者和35例正常对照组分别应用流式细胞术和逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞亚群的百分率测定和外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达水平。结果：IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于疾病缓解期患者和正常对照组（P〈0．01）；活动期IBD患者中使用激素和／或免疫抑制剂与未使用激素和／或免疫抑制剂结果差异有统计学意义；IBD患者外周血单个核细胞（PBMC）中Foxp3mRNA表达水平低于缓解期和正常人，差异有显著性（P〈0．05）；缓解期Foxp3mRNA水平与正常人差异无显著性（P〉0．05）；IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达率及PBMC中的Foxp3mRNA表达水平与疾病活动指数评分呈负相关性。结论：活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及Foxp3mRNA表达下调，而恢复期其表达回升，且二者呈正相关，并与临床活动评分呈负相关，因此认为CD4^＋CD25^＋Treg细胞和Foxp3可能参与疾病的发生发展，与疾病的活动性密切相关。     

CD4＋CD25＋调节性T细胞在胃癌患者外周血分布的临床意义和作用机制

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在胃癌患者外周血分布的临床意义及其作用机制。方法流式细胞术分析不同TNM分期的胃癌患者和健康者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例。免疫磁珠分离胃癌患者和健康者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞,将CD4＋CD25＋调节性T细胞与淋巴细胞体外共培养, CCK8方法检测CD4＋CD25＋调节性T细胞对淋巴细胞的增殖能力的影响。 RT?PCR检测CD4＋CD25＋调节性T细胞特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果胃癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例明显高于健康者,差异具有统计学意义（P＜0．05）。其中Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者外周血调节性T细胞的比例均明显高于Ⅰ?Ⅱ期胃癌患者,差异具有统计学意义（ P ＜0．05）。与健康者相比,胃癌患者 CD4＋CD25＋调节性T细胞能明显抑制淋巴细胞增殖,其差异具有统计学意义（ P＜0．05）,而且Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者CD4＋CD25＋调节性T细胞抑制淋巴细胞增殖的能力明显强于Ⅰ?Ⅱ期胃癌患者,其差异具有统计学意义（P＜0．05）。进一步分析显示胃癌患者CD4＋CD25＋调节性T细胞Foxp3 mRNA的表达水平均明显高于健康者,差异具有统计学意义（P＜0．05）。其中Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者Foxp3 mRNA的表达水平明显高于Ⅰ?Ⅱ期胃癌患者,其差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论调节性T细胞可能通过增强Foxp3 mRNA表达发挥免疫抑制作用,促进胃癌的发生发展。通过监测外周血调节性T细胞有利于评估胃癌患者免疫功能和病情进展。     

自身免疫性肝炎CD4+CD25+high调节性T细胞的研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋high调节性T细胞（Tr）在自身免疫性肝炎（AIH）发病中的作用。方法用流式细胞仪技术比较分析AIH患者16例、慢性乙型肝炎（CHB）22例及键康正常人20例外周血中的CD4^＋CD25^＋high细胞，同时用免疫组织化学法检测AIH和CHB患者肝组织Foxp3的表达情况。结果AIH组外周血中CD4^＋CD25^＋high／CD4^＋百分比显著低于正常组（P〈0、05）和CHB组（P〈O．01），并且CHB组显著高于正常组（P〈0．05）；同时AIH组外周血中CD4^＋ T细胞也显著高于CHB组（P〈0．01））；肝组织Foxp3^＋细胞主要分布于肝小叶内窦周隙、汇管区，AIH组肝组织Foxp3^＋表达显著低于CHB组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋high Tr细胞下降可能是自身免疫性肝炎发病的原因之一。     

不同结核病患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞表达的变化

目的分析不同结核病患者体内CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Tr）表达的变化,探讨其在结核病免疫中的作用。方法对33例结核病患者以及同期30例健康体检者运用流式细胞术检测其外周血CD4^＋CD25“。“和CIM^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr表达情况。结果结核组CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果分别为（8．84±2．55）％、（6．30±1．38）％,高于对照组（7．09±1．09）％、（5．22±0．64）％,差别有统计学意义（t=3．57,4．01,P〈0．01）;痰涂阳患者CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果分别为（10．52±3．27）％、（7．18±1．77）％,高于痰涂阴患者（8．21±1．94）％、（5．97±1．06）％,两组问差别均具有统计学意义（t=2．51,2．42,P〈0．05）;初治患者和复治患者间CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋检测结果无统计学意义（t=0．03,0．02,P〉0．05）。结论结核病患者体内CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果高于健康人群,提示患者体内存在免疫系统抑制状态。     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞频率分布及功能标记的研究

目的探讨调节性T细胞（treg）细胞及功能标记在慢性乙型肝炎患者发病过程中的变化及其与疾病进展的关系。方法人组20例健康对照组、53例慢性乙型肝炎（CHB）组、24例乙肝肝硬化（LC）组患者,采用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋Fox3＋细胞、CD4＋CD25＋CD127^low细胞、CD39＋Treg细胞、CTLA-4＋Treg细胞频率,同时检测患者临床指标。结果健康对照组、CHB组及LC组的treg细胞频率、CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率、CI）39＋treg细胞频率差异均有统计学意义（P均〈0．01）。CHB中重度组treg细胞频率、CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率、CD39＋treg细胞频率与轻度组间存在差异（P〈0．05,P〈0．05,P〈0．01）。CHB组内CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞频率与ALT呈正相关（r=0．289,P〈0．05）,CD39＋treg细胞频率与ALT、AST均呈正相关（r=0．275,P〈0．05;r=0．302,P〈0．05）,CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞频率与CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率呈显著正相关（r=0．478,P〈0．01）。结论treg细胞频率及其功能标记频率在慢性乙型肝炎疾病进程中存在变化并与肝脏功能变化密切相关。CD39＋treg细胞可能是一群功能性的treg细胞,CD39是反应treg细胞功能较灵敏的标记。CD4＋CD25＋CD127^low细胞频率一定程度上可以代表treg细胞频率。     

血浆sIL-2R对急性期川崎病调节性T 细胞的影响

目的探讨sIL-2R血浓度对急性期川崎病（ KD）患儿调节性T细胞（ Treg）的影响。方法急性期KD患儿33例,正常同龄对照儿童14例。流式细胞术检测外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞的比例和CD4＋CD25＋T细胞磷酸化STAT5（pSTAT5）蛋白平均荧光强度（MFI）;流式微球阵列术（CBA）检测血浆sIL-2R、IL-2、IL-7、IL-15的浓度;荧光定量PCR（real-time PCR）检测CD4＋CD25＋T细胞Foxp3、GITR、CTLA-4、IL-2Rα、IL-2Rβ、IL-2Rγ和CD 4＋CD25-T 细胞 IL-17A、RoR-γt 等基因mRNA表达。结果（1）急性期KD患儿CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞比例及相关分子Foxp3、GITR、CTLA-4 mRNA表达明显低于同龄对照组（P＜0．05）,Th17细胞相关因子IL-17A、ROR-γt mRNA表达明显增高（P＜0．05）,IVIG治疗后呈不同程度的恢复（P＜0．05）。（2）急性期KD患儿CD4＋CD25＋T细胞pSTAT5蛋白水平显著下调（P＜0．05）,IVIG治疗后明显上调（P＜0．05）。（3）急性期KD患儿血浆sIL-2R浓度显著增高（P＜0．05）,IVIG治疗后下降（P＜0．05）;其中KD合并冠脉损伤组（KD-CAL＋）明显高于无冠脉损伤组（KD-CAL-）（P＜0．05）;IL-2、IL-7、IL1-5浓度无明显改变（P＞0．05）。（4）急性期KD患儿CD4＋CD25＋T细胞IL-2Rα、IL-2Rβ基因mRNA表达明显低于同龄对照组（P＜0．05）,IVIG治疗后呈不同程度的升高（ P＜0．05）;IL-2Rγ基因mRNA表达无明显改变;sIL-2R血浓度与IL-2RβmRNA、pSTAT5及Foxp3 mRNA表达呈负相关（ P＜0．05）;pSTAT5与Foxp3 mRNA表达呈正相关（ P＜0．05）。结论血浆sIL-2R明显增高可致IL-2/STAT5信号途径传导异常,这可能是导致急性期KD Treg细胞下调的因素之一。     

消化道恶性肿瘤患者CD4^＋ CD25^＋ Treg的检测及意义

目的：探讨消化道恶性肿瘤患者外周血CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Regulatory T cell,Treg）水平的特点及其临床意义。方法：采用流式细胞术对60例消化道恶性肿瘤患者与30名健康体检者的外周血CD4^＋ CD25^＋Treg水平进行检测。结果：消化道恶性肿瘤外周血CD4^＋ CD25^＋ Treg占总T细胞7.16%±3.37%,与对照组CD4^＋ CD25^＋ Treg4.52%±1.76%比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：恶性肿瘤患者外周血CD4^＋ CD25^＋Treg水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生、发展密切相关。     

慢性HBV感染者调节性T细胞水平及Foxp3与CD127表达关系的研究

目的 探讨慢性HBV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（RegulatoryT,Treg）的水平,并研究其两种细胞标志--CD127分子的低表达与Foxp3转录因子表达之间的关系.方法 采集34例免疫耐受期、26例免疫清除期和31例非活动或低（非）复制期慢性HBV感染者的外周全血,用流式细胞术分析CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋CD127^（low）T细胞的频率.结果 在慢性HBV感染者外周血中,免疫耐受组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋CD127^（low）T细胞的频率均比非活动或低（非）复制组高（Z=-2.693,P=0.007和t=3.251,P=0.002）;且病毒阳性组（免疫耐受组＋免疫清除组）比非活动或低（非）复制组高（t=2.266,P=0.026和t=3.208,P=0.002）;ALT异常组（免疫清除组）与ALT正常组（免疫耐受组＋非活动或低（非）复制组）之间的比较差异无统计学意义（P〉0.05）.91例病例外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋CD127^（low）T细胞之间的表达有一致性,但两者频率的差异有统计学意义（Z=-4.718,P〈0.001）.结论 调节性T细胞在慢性HBV感染者病毒高复制组中明显升高.CD4^＋CD25^＋T细胞中CD127分子的低表达与Foxp3转录因子的表达有一致性,但前者代表Treg的频率明显高于后者.     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+和CD4~+CD25~-Foxp3~+T细胞

目的：研究初发系统性红斑狼疮患者（Systemic lupus elythematosus，SLE）外周血CD4^＋T细胞中CD25和Foxp3表达及其在SLE发病中的意义。方法：根据SLE疾病活动积分（SLEDAI）将初发SLE患者分为活动组（10例）和不活动组（11例），流式细胞仪检测治疗前后外周血CD4^＋T细胞中CD25、Foxp3和CD127表达百分率，并对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和anti-ds-DNA相关性进行研究。结果：初发活动组和不活动组SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞表达百分率分别为（1．91％～6．75％）和（2．74％～7．01％），与正常对照（2．11％～9．90％）相比没有统计学差异（P=0．524，P=0．794）；且初发SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞在体外增殖反应和增殖抑制功能与正常对照相比无明显差别（P=0．174，P=0．689）；外周血CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞百分率在初发活动组（3．71％～10．94％）和不活动组（2．97％～7．69％）SLE患者均比正常对照（1．01％～3．62％）显著增高（P〈0．01和P〈0．01）；而CD4^＋CD2^＋Foxp34^-T百分率在初发活动组SLE患者（1．19％～9．23％）显著低于正常对照（2．67％～11．26％）和初发不活动组SLE患者（3．73～8．27％）（P=0．039，P=0．048）；与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞类似，90％左右的CD4^＋CD25一Foxp3^＋T细胞不表达或低表达CD127，其百分率与anti-ds-DNA浓度呈正相关，且尽管未达到统计学意义，但激素和免疫抑制治疗后其水平下降。结论：初发未经治疗的SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞数量和功能无明显异常，而CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞数量增多，与SLE疾病活动相关，可能具有调节功能。     

中国健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞频率

目的：初步确定健康人外周血中具有CD4^＋ CD25^nt/hi CD127^lo特征的调节性T细胞（Treg）频率，为临床相关疾病的研究及Treg的分选提供参考。方法：采集312名8—60岁（5个年龄组）、不同性别健康人的静脉血，经三重免疫荧光染色，用流式细胞术分析CD4^＋ CD25^nt/hi CD127^lo Treg细胞频率，并观察细胞内Foxp3转录因子的表达。结果：健康人CD4^＋ CD25^nt/hi CD127^lo Treg细胞在外周血中约占CD4^＋ T细胞的（6．55±0．11）％，各年龄组之间有差异（P=0．015），组内性别之间也存在统计学意义（P〈0．05）； CD25^nt/hi CD127^lo细胞特异性地表达Foxp3转录因子。结论：初步确定了中国健康人外周血中具有CD4^＋ CD25^nt/hi CD127^lo表达特征的细胞频率，为Treg细胞的临床研究奠定了基础； CD25^nt/hi CD127^lo作为CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞表面的特征性标志，可在分选时排除其他细胞干扰，获得较完整的Treg细胞。     

慢性肝脏疾病中CD3^-CD161^＋NK和CD3^＋CD161^＋NKT细胞亚群的变化研究

目的探讨CD3^-CD161^＋NK、CD3^＋CD161^＋NKT细胞在慢性肝炎／肝硬化及肝细胞癌患者肝脏组织及外周血中表达及意义。方法利用流式细胞仪对31例肝细胞癌患者、59例慢性肝炎／肝硬化患者肝脏组织及外周血、15例正常肝脏组织、48例正常人外周血中的CD3^-CD161^＋NK和CD3^＋CD161^＋NKT进行定量分析。结果慢性肝炎／肝硬化组CD3^-CD161^＋NK细胞[（13．4±1．3）％]和肝细胞癌癌周组CD3^-CD161^＋NK细胞[（16．7±4．8）％]及远离肝癌组的肝脏组织CD3^-CD161^＋NK细胞[（22．0±4．4）％]与正常肝脏组织CD3^＋CD161^＋NK细胞[（35．1±7．2）％]相比,肝细胞癌癌周肝脏组织内含量最低（t值分别为2．301、2．137、2．034,P〈0．05）;外周血中肝细胞癌组CD3^-CD161^＋NK细胞f（11．6±6．3％）]、CD3^＋CD161^＋NKT细胞[（14．7±6．2）％]与慢性肝炎／肝硬化组CD3^-CD161^＋NK细胞[（10．8±1．7）％]、CD3^＋CD161^＋NKT细胞[（12．5±0．8）％]、正常对照组CD3^＋CD161^＋NK细胞[（7．5±0．8）％]、CD3^-CD161^＋NKT细胞[（13．8±1．7）％]相比肝癌组CD3^-CD161^＋NKT细胞含量最高（t值分别为2．134,2．099,P〈0．05）,肝癌组CD3^＋CD161^＋NKT细胞含量最高（t值分别为2．125,2．154,P〈0．05）。结论由于NK细胞及NKT细胞数量减少或／和活性降低,使肿瘤细胞逃逸了免疫监视,可能促进了肿瘤的发生、发展及转移。     

类风湿关节炎患者Th17细胞与调节性T细胞失衡的研究

目的观察类风湿性关节炎（RA）患者外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）平衡状态与疾病的关系,分析Th17／Treg细胞免疫失衡在RA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪四色荧光抗体标记法分别对47例RA患者和39名健康志愿者（HVs）进行CD3、CD8、IL-17与CD4、CD25、F0xP3标记,测定Th17与调节性T细胞的比例变化及相关细胞因子IL-6、IL-23和IL-17水平。结果RA组患者外周血中,CD3^＋CD8^＋IL-17^＋T细胞占CD3^＋T淋巴细胞的百分比为（1．12±0．38）％,明显高于对照组（0．68±0．29）％（t=1．83,P〈0．05）;CD4’CD25’FoxP3^＋细胞占CD4^＋T淋巴细胞的百分比为（2．74±0．71）％,明显低于对照组（4．69±1．23）％（t=-2．94,P〈0．05）。相关细胞因子测定结果：IL-6水平在RA组为（13．5±3．7）ng／L,正常人为（4．6±0．9）ng／L（t=6．24,P〈0．01）;IL-23水平在RA组为（71±19）ng／L,正常人为（25±6）ng／L（t=14．37,P〈0．01）;IL-17水平在RA组为（122±33）ng／L,正常人为（37±9）ng／L（t=19．01,P〈0．01）;RA患者血清IL-6、IL-23和IL-17水平均明显升高。结论RA患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞数量的异常可能是RA发病的重要因素,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在HIV/AIDS患者中的作用及其与HIV病毒载量的相关性研究

目的 研究HIV感染者／AIDS患者外周血CD4^＋ CD25^＋ 调节性T细胞（CD4^＋ CD25^＋ regulatory Tcell，Treg）频率、功能及其临床意义。方法 选择31例HIV感染者／AIDS患者和30例健康对照者，采用流式细胞仪检测各组外周血Treg的表型和频率。采取MACS磁珠分选CD4^＋CD25^＋T细胞，利用[^3H]胸腺嘧啶掺入法检测CD4^＋ CD25^＋T细胞在特异性HIV抗原刺激下对CD4^＋ CD25-T细胞的增殖影响。结果HIV／AIDS患者组与正常对照组相比较，外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞频率在统计学上差异无统计学意义。与正常对照组比较，HIV感染者外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞频率升高，差异有统计学意义（P〈0.01）；与正常对照组比较，AIDS患者者外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞频率降低，差异有统计学意义（P〈0．0001）。HIV RNA病毒载量与患者外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞数量呈正相关性（P〈0．01）。CD4^＋ CD25^＋ T细胞具有抑制HIV特异性的CD4^＋ CD25^- T细胞的增殖作用。结论HIV感染者／AIDS患者的细胞免疫功能紊乱，CD4^＋ CD25^＋ T细胞能抑制HIV感染者／AIDS患者的HIV特异性细胞免疫反应，促进HIV病毒复制，与形成持续HIV感染有关。     

肺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的格局变化及意义

目的：研究肺癌患者外周血（PBMC）及肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）中CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的比例改变，探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法：分离肺癌患者PBMC及TIL，FACS分析CD4^＋／CD8^＋T细胞的比值及CD4^＋ CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比例。Real-time PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果：肺癌患者PBMC及TIL中CD4^＋／CD8^＋比值降低；而CD4^＋ CD25^high T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例升高；Foxp3基因仅在TIL中高表达，而在PBMC中低或不表达，表明肿瘤局部的CD4^＋ CD25^high T细胞主要是CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论：CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高，可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8^＋T细胞的杀伤效应，最终发挥免疫抑制效应相关。     

FBL3细胞在小鼠体内外诱导CD4+CD25+调节性T细胞增殖的实验研究

目的：通过小鼠体内外实验观察肿瘤细胞是否可以诱导CD4^＋CD25^＋Treg的分化增殖。方法：将小鼠的红白血病瘤细胞系FBL3接种于C57BL/6小鼠腹壁皮下,流式细胞仪检测小鼠外周血、脾脏及瘤组织CD4^＋CD25^＋Treg细胞含量,RT-PCR检测小鼠脾脏及瘤组织Foxp3 mRNA的表达;体外实验检测FBL3细胞培养上清液对小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg细胞的作用。结果：荷瘤鼠外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例与正常鼠比较无统计学差异（P〉0.05）,但荷瘤鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg比例显著高于正常对照（P〈0.01）,荷瘤小鼠脾脏组织Foxp3 mRNA的表达量明显增加;体外实验表明FBL3培养上清液促使CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例增高,并诱导Foxp3 mRNA表达增加。结论：FBL3细胞及其分泌的可溶性物质能诱导CD4^＋CD25^＋Treg细胞的增殖,说明是肿瘤的发生促进了CD4^＋CD25^＋Treg增高。     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者CD4+CD25+T细胞的变化研究

目的：通过观察成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）患者CD4^＋CD25^＋T细胞的变化并与速发性1型糖尿病（T1 DM）比较，了解成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者T细胞免疫功能的变化及与1型糖尿病的异同点。方法：LADA组24例，速发性T1DM18例，对照组20例，应用流式细胞技术测定3组人选者T细胞表面分子CD4、CD8、CD25、CD4^＋CD25^＋、CD8^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋，以百分比表示各表面分子阳性T细胞占外周血淋巴细胞的比例。结果：LADA与T1DM组CD4^＋T细胞、CD4／CD8比值明显高于健康对照组（P〈0．01），LADA与T1DM对比无差异。LADA组CD25^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋T细胞高于健康对照组（P〈0．05），明显高于T1 DM组（P〈0．01）。T1 DM组CD25^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋T细胞略低于健康对照组，但无统计学意义（P〉0．05）。结论：LADA患者外周血中诱导免疫耐受的CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋T细胞较对照组升高并明显高于T1 DM患者。LADA患者胰岛B细胞功能下降较速发性T1 DM患者相对缓慢可能与CD4^＋CD25^＋T细胞的免疫保护有关。     

恶性肿瘤患者CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞的研究

目的：探讨恶性肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Regulatory T cell，Treg）水平的特点及其临床意义。方法：采用流式细胞术检测Treg水平，并进行分层分析。结果：62例恶性肿瘤患者外周血中CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high Treg占T细胞的百分比分别为19.61%±8.17%和4.20%±1.90%，高于正常对照组（分别为P〈0.05和P〈0.001），它们与NK细胞呈负相关（r分别为-0.2361和-0.306）。随疾病进展，CD4^＋ CD25^＋Treg水平升高，肿瘤进展期（IV期）与前3期比较有极显著差异（P〈0.001）。CD4^＋CD25^high Treg占CD4＋T细胞的百分比率逐渐升高，中期（Ⅲ期）患者与早期患者、正常对照组比较有极显著差异（P〈0.001）；晚期患者与中期患者比较有极显著差异（P〈0.001）。结论：恶性肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high Treg水平的升高，与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关。     

CD4+CD25+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

目的初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatory T cells,CD4 CD25 Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4 CD25 T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4 CD25 T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4 CD25 T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4 CD25 T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4 CD25 Foxp3 Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4 CD25 T细胞转化为CD4 CD25 Treg,提示CD4 CD25 Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。     

Neuropilin-1在CD4+ CD25+ T细胞上的表达

目的 探讨neuropilin-1(NRPl)在外周血中CIM+ CD25+ T细胞上的表达以及意义.方法 收集肾移植术后长期存活、慢性移植物肾病和急性排斥患者以及健康成年人的外周血,分离外周血淋巴细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ T细胞上NRPl和Foxp3的阳性细胞的百分比.结果 各组CD4+ CD25+ T细胞NRPl的表达率差异有统计学意义(P＜0.05);各组CD4+ CD25+ T细胞Foxp3的表达率差异亦有统计学意义(P＜0.05).长期存活组CD4+ CD25+ T细胞上NRP1和Foxp3表达率分别为19.6%±3.84%、50.19 ±3.90%,显著高于对照及慢性移植物肾病和急性排斥组(P＜0.05);急性排斥组的CD4+ CD25+ T细胞NRP1和Foxp3表达率最低4.64%±1.26%、17.24%±5.29%.各组CD4+ CD25+ T细胞NRP1表达变化趋势与Foxp3变化趋势相同.结论 NRP1在长期存活组的外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ T细胞的表达上调,在急性排斥组时表达下调,且其在各组的表达变化趋势与Foxp3的表达变化趋势是一致的,这就提示CD4+ CD25+ NRP1+ 细胞是一群调节性T细胞,即NRP1是CD4+ CD25+ Treg的一个重要的表面标志.     

不同病程寻常型银屑病患者外周血中CD4+ CD25high调节性T细胞的比较与分析

目的：检测和分析不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞（CD4^＋CD25^high Treg）水平特点和意义。方法：选取进行期（70例）、稳定期（64例）和消退期（38例）寻常型银屑病患者，知情同意后，取外周抗凝全血，分离单一核细胞，采用流式细胞术检测不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4^＋CD25^high Treg的水平，并统计分析其特点与意义。结果：进行期、稳定期和消退期寻常型银屑病患者组外周血CD4^＋CD25^high Treg与CD4^＋淋巴细胞的百分比分别为（2．86±0．9）％、（3．95±0．6）％和（4．77±0．1）％。稳定期和消退期寻常型银屑病患者组明显高于进行期组（t^＇=8．312，P〈0．01；t=10．126，P=0．000），而消退期组明显高于稳定期组（t^＇=4．588，P〈0．01）。值得注意的是，消退期寻常型银屑病患者组与正常对照组比较，差异显著，消退期组仍低于正常对照组（t=2．281，P=0．0264）。结论：不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4^＋CD25^high Treg水平存在显著差异，提示CD4^＋ CD25^high Treg与寻常型银屑病发生和病程发展关系密切。本研究为深入研究寻常型银屑病免疫学发病机制做出了初步的尝试与探索。