肺肌成纤维细胞与特发性肺纤维化研究进展

肺纤维化（pulmonary fibrosis，PF）形成过程中涉及细胞外基质（extracellula matrix，ECM）大量沉积，其主要来源于肌成纤维细胞（myofibroblast，MF）。该细胞能表达α-平滑肌肌动蛋白（α—smooth muscle actin，α—SMA），是造成ECM异常沉积的主要细胞。MF的转化受多种因素调节、有多种信号途径参与，是一个错综复杂的过程。     

肌成纤维细胞凋亡与肺纤维化

成纤维细胞受到各种刺激后可发生活化。并进而转化为表达α平滑肌肌动蛋白的肌成纤维细胞。转化生长因子β可抑制成纤维细胞调亡,而羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂等可促进成纤维细胞的凋亡。肌成纤维细胞能诱导肺泡上皮细胞的凋亡,促进肺纤维化的发生。     

特发性肺纤维化中肌成纤维细胞来源的研究进展

在特发性肺纤维化发病过程中.肌成纤维细胞是主要效应细胞,具有促进细胞外基质沉积、肺顺应性下降,肺组织结构破坏以及分泌多种炎性细胞因子的功能.因此,研究肌成纤维细胞的来源对于阐明特发性肺纤维化的发病机制以及寻求有效的分子治疗靶点具有非常重要的意义.迄今为止,肌成纤维细胞的来源集中在3个方面:肺内的成纤维细胞、肺组织上皮细胞和骨髓源性细胞或纤维细胞.本文对近年来的相关文献进行整理,加以阐述.     

肺成纤维细胞在博来霉素致肺纤维化中的作用机制

目的:探讨肺成纤维细胞(PFC)在博来霉素(BLM)致肺纤维化中的作用机制。方法:采用差时贴壁法培养与纯化PFC,传至第3代备用。分为Control组:细胞用正常的培养基培养;BLM组:依次分为0.01mol/L BLM组、0.03mol/L BLM组、0.1mol/L BLM组、1mol/L BLM组及10mol/L BLM,每组每孔细胞分别加上述浓度的BLM,5×104个PFC/孔(12孔板),干预24小时。TGF-β1组:每个孔用2ug/L TGF-β1,5×104个PFC/孔(12孔板),干预24小时。免疫细胞化学法鉴定PFC与肺肌成纤维细胞(PMFC)。采用Real-time PCR及Western-blot技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA mRNA表达与α-SMA蛋白水平。Brd U法检测细胞增殖。结果:BLM可剂量依赖性地抑制细胞增殖,BLM浓度从0.1mol/L始抑制PFC的增殖较对照组(P<0.05)。0.1mol/L BLM干预24小时后,α-SMA免疫细胞化学染色鉴定呈阳性,α-SMA mRNA的较对照组表达增加(P<0.05);Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达较对照组显著增加(P<0.01);0.1mol/L BLM能明显升高α—SMA的蛋白表达水平。结论:PFC转化成PMFC且显著增加Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,成为BLM诱导肺纤维化中的重要作用机制之一。     

肺成纤维细胞在肺纤维化中的作用

肺伦是各种间质性肺疾病的共同结局，而肺纤维化的发生发展与肺成纤维细胞密切相关。本就肺成纤维细胞在肺纤维化过程中的作用作一综述。     

肺成纤维细胞在肺纤维化中的作用

肺纤维化是各种间质性肺疾病的共同结局,而肺纤维化的发生发展与肺成纤维细胞密切相关。本文就肺成纤维细胞在肺纤维化过程中的作用作一综述。     

载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化早期血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞

目的　探讨动脉外膜成纤维细胞表型转化与早期动脉粥样硬化病灶形成的关系。　方法　选择6周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠和野生型C57BL/6小鼠,高脂喂养2、4和8周后,在各个时间点处死动物后选取升主动脉制备连续切片,用免疫组织化学方法观察不同时间血管外膜α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β₁的表达变化。体外培养高脂喂养2周的载脂蛋白E基因敲除小鼠和C57BL/6小鼠动脉外膜成纤维细胞,免疫荧光染色检测α平滑肌肌动蛋白的表达,通过透射电镜观察细胞超微结构,Western　Blot检测α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β₁蛋白的表达。结果　体内实验发现载脂蛋白E基因敲除小鼠高脂喂养2周、4周后血管外膜检测到α平滑肌肌动蛋白的阳性表达,8周后呈现弱阳性,随高脂喂养时间增加,载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉外膜细胞转化生长因子β₁表达增强。而C57BL/6小鼠血管外膜细胞一直未检测到α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β₁的阳性表达。体外实验观察到载脂蛋白E基因敲除小鼠血管外膜成纤维细胞部分表现为α平滑肌肌动蛋白阳性,肌丝明显增多,　α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β₁蛋白表达水平都明显高于野生型C57BL/6小鼠（P<0.05）,而C57BL/6小鼠血管外膜成纤维细胞则表现为α平滑肌肌动蛋白阴性,超微结构无明显改变。结论　动脉粥样硬化病灶形成早期血管外膜成纤维细胞表型即转化为肌成纤维细胞。     

精氨酸加压素及其V1a受体对心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响

目的:探讨精氨酸加压素(AVP)及其V1a受体对体外培养的SD仔鼠心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFs)转化的影响。方法:胰酶消化法分离培养SD仔鼠CFs,将CFs分别与不同浓度(10-9、10-8、10-7、10-6 mmol/L)AVP,或添加了不同浓度(0、10-9、10-8、10-7 mmol/L)AVP V1a特异性受体拮抗剂[d(CH2)5Tyr2(Me)]AVP的10-6 mmol/L AVP共同孵育48h后,用3 H-脯氨酸掺入法检测CFs胶原合成功能,Western blot检测CFs平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)表达量,α-SMA免疫荧光染色观察CFs形态。结果:AVP浓度依赖性地诱导CFs的3 H-脯氨酸掺入率和α-SMA表达量增加,其中10-6 mmol/L AVP组CFs的3 H-脯氨酸掺入率和α-SMA表达量均显著高于对照组(均P<0.05),且10-6 mmol/L AVP作用下CFs体积明显增大,胞质荧光染色亮度显著增强,胞质中有明显的张力丝样结构。而[d(CH2)5Tyr2(Me)]AVP可以浓度依赖性地抑制10-6 mmol/L AVP诱导下CFs 3 H-脯氨酸掺入率和α-SMA表达量的增加,其中10-8、10-7 mmol/L[d(CH2)5Tyr2(Me)]AVP组中CFs的3 H-脯氨酸掺入率显著低于10-6 mmol/L AVP组(均P<0.05),10-9、10-8、10-7 mmol/L[d(CH2)5Tyr2(Me)]AVP组中CFs的α-SMA表达量显著低于10-6 mmol/L AVP组(均P<0.05),且10-7 mmol/L[d(CH2)5Tyr2(Me)]AVP能够将10-6 mmol/L AVP诱导下CFs的3 H-脯氨酸掺入率、α-SMA表达量和形态学变化都抑制到对照组水平(均P>0.05)。结论:AVP通过其V1a受体诱导CFs向MFs转化。     

肺纤维化的肺成纤维细胞生物学特征的实验研究

肺纤维化的肺成纤维细胞生物学特征的实验研究赵洪文吕长俊侯显明于润江１．动物模型的复制：体重２００～３００ｇＷｉｓｔａｒ雌性大白鼠５０只，随机分博莱霉素（ＢＬＭ）组（２５只）和对照组（２５只）。（１）ＢＬＭ组：经穿刺向气管内注入０．３ｍｌ含ＢＬＭ的生理...     

Notch3表达下调在诱导心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中的作用

目的:探讨Notch3在心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFs)转化中的作用。方法:用胶原酶消化法分离培养SD仔鼠的CFs,将其于不同浓度的转化生长因子-β1(TGF-β1)孵育24 h。用Western blot检测CFs中平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)及Notch3的表达量,用ELISA法检测细胞上清羟脯氨酸含量,用Real-Time PCR检测Notch3 mRNA表达量;利用RNAi法干扰CFs中Notch3的表达,用实时PCR及Western blot检测干扰效果;Western blot检测α-SMA蛋白表达量,ELISA检测各组细胞上清羟脯氨酸含量。结果:TGF-β1可浓度依赖性地诱导CFs细胞上清羟脯氨酸含量增加和α-SMA表达增加,同时使Notch3表达下降,其中2 ng/ml,5 ng/ml,10 ng/ml 3个浓度组与对照组相比有统计学差异(P0.05)。RNAi法干扰Notch3后,干扰组与对照组相比,Notch3 mRNA及蛋白表达均下降(P0.05),同时,干扰组细胞上清羟脯氨酸含量及α-SMA表达均增加(P0.05)。结论:Notch3表达下调能诱导CFs向MFs转化。     

肺纤维化中成纤维细胞的激活机制

肺纤维化被公认为多种慢性肺疾病的病理特征,并且它也是特发性肺纤维化发病机制的中心环节.目前的研究现状决定了成纤维细胞的激活在肺纤维化中起关键作用,这种细胞能够产生基质,而且它可能来源于循环血液的纤维细胞或者由上皮细胞和内皮细胞转化而来.许多研究表明肺纤维化中大量基因之间的相互作用及其下游的多种信号途径参与了成纤维细胞表...     

碱性成纤维细胞生长因子与肺纤维化

碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一种重要的多肽生长因子,也是成纤维细胞因子(fibroblast growth factor,FGF)家族原型成员之一.随着对细胞因子在特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)发病中作用认识的逐渐深入,近年研究发现bFGF在纤维化的肺组织、血清、肺泡灌洗液中有高表达并与肺纤维化程度呈正相关,这提示bFGF表达上调与肺纤维化关系密切,抑制促纤维化的细胞因子为IPF的治疗提供了一条新的有效途径[1].     

特发性肺间质纤维化与肺肌成纤维细胞

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是一种病因不明、发病机制不清、缺乏治疗手段的致命性弥漫性肺间质疾病，其病理特征是肺泡上皮损伤、成纤维细胞灶(fihrohlast foci)的形成以及细胞外基质的过度沉积，最终导致了肺组织结构的异常重塑。近年来的研究发现成纤维细胞灶主要由表达α-平滑肌肌动蛋白(α—smooth muscle actin，α-SMA)的肌成纤维细胞构成，是造成细胞外基质异常沉积的主要细胞。大量成纤维细胞灶的出现可提示纤维化处于进行性活动期，可作为IPF进入不可逆纤维化过程的一个组织病理上的指标。     

糖尿病肾病肾小管间质纤维化与肌成纤维细胞

糖尿病肾病 (DN)是糖尿病重要的慢性并发症 ,是肾功能衰竭的主要原因之一。 DN中肾小球病变得到了广泛关注 ,肾小管间质的病变却未引起足够重视。糖尿病初期表现为肾小管肥大、肾小管管腔扩张、肾小管基底膜增厚 ,晚期则出现肾小管萎缩及肾小管间质纤维化 ,肾小管间质纤维化的部位常伴有肾小球纤维化 ,但也可以不伴有肾小球纤维化。与此病理表现相对应 ,尿白蛋白正常的糖尿病患者 38.4 6 %可以出现尿肾小管蛋白水平增高 [1 ]。这说明肾小管间质的损害并不依赖肾小球病变 ,是 DN的重要病理变化之一。所谓肾纤维化就是指细胞外间质过度沉积…     

肺成纤维细胞在实验肺纤维化中释放生物活性物质和体外研究

目的 阐明在肺纤维化过程中肺成纤维细胞（ＬＦ）产生透明质酸（ＨＡ）,白细胞介素８（ＩＬ－８）和胶原的动态变化及作用。方法 检测博莱霉素（ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化不同时期ＬＦ培养上清中ＩＬ－８活性,ＨＡ和羟脯氨酸（ＨＹＰ）水平。结果 ＢＬＭ组ＬＦ的上清中（１）ＨＡ水平于第１天明显升高,第３天达高峰,随后降低,第１４￣２８天降至正常。（２）ＩＬ－８活性于第１天明显增高,每高倍镜视野细胞数为４．０６±０．     

Egr-1与肺纤维化

异常的细胞外基质的沉积破坏了正常的肺结构是肺纤维化的特征。Egr-1被发现与肺纤维化有关，据研究其作用大多是通过TGF-β1实现的。Egr-1能诱导TGF-β1的表达，而TGF-β1又能诱导Egr-1表达。Egr-1影响成纤维细胞增殖、向肌成纤维细胞分化，并且与肺泡上皮细胞、内皮细胞凋亡，肺泡、气道炎症以及细胞外基质形成有关。血管紧张素转换酶系统对肺纤维化的作用亦与Egr-1有关。但Egr-1对肺纤维化的具体作用还不完全明了，需要作深入研究。     

肌成纤维细胞在心肌梗死后重构中的作用及机制

成纤维细胞在心肌梗死后心脏修复和重构中起着重要作用,参与其中多个环节,调节细胞外基质的代谢,具有分化为肌成纤维细胞的潜能。肌成纤维细胞比成纤维细胞的表型更丰富,能更有效地对坏死细胞及间质进行修复和重构。然而,持久的肌成纤维细胞激活则会引起病理性纤维化,导致心律失常、心肌僵硬、心力衰竭的发生。     

老年大鼠肺成纤维细胞表型改变和转化生长因子-β1水平变化

目的 对比观察老年大鼠和成年大鼠肺脏成纤维细胞表型的改变和转化生长因子(TGF)-β1水平的变化,寻找肺间质纤维化发病率随年龄增长而增高的可能机制.方法 免疫组化法测定大鼠肺组织内α-平滑肌肌动弹白(α-SMA)含量,观察成纤维细胞表型的改变.ELISA法测定TGF-β1蛋白水平.荧光定量PCR(realtime PCR)技术测定TGF-β1 mRNA表达量的变化.结果 老年大鼠肺脏较成年大鼠肺脏肌成纤维细胞比例增加(P＜0.01),TGF-β1蛋白水平升高[分别为(999.54±246.11)pg/g和(755.7±160.38)pg/g](P＜0.05),TGF-β1 mRNA(P＜0.01)表达水平降低.结论 老年大鼠肺脏肌成纤维细胞比例增加和TGF-β1蛋白水平升高可以构成肺间质纤维化随年龄增长发病率增高的基础,老化肺脏内TGF-β1水平升高是受到mRNA转录后调控机制的影响.     

特发性肺纤维化的发病机制的研究进展

目前认为,特发性肺纤维化(IPF)是由于持续或反复的有害刺激,使肺泡上皮细胞损伤增加,正常肺泡结构再生修复发生障碍,成纤维细胞激活进行异常修复,最终导致纤维化.我们就此机制进行阐述. 一、上皮细胞的异常 1.肺泡上皮细胞凋亡:国际上普遍采用博莱霉素诱导的鼠类肺纤维化模型来研究特发性肺纤维化的发病机制.凋亡相关通路主要有Fas/FasL介导的死亡受体通路和线粒体通路.有研究[1]表明,博莱霉素诱导的肺泡上皮细胞凋亡依赖的活性氧激活的线粒体途径是一条非Fas/FasL依赖的途径.线粒体途径是通过Bc1-2蛋白家族的促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白进行调节的,关键的调控步骤是Bcl-2家族蛋白通过在线粒体上形成离子通道改变线粒体膜的通透性,进而调控CytC释放.因此,线粒体途径也可被称为Bcl-2敏感的细胞凋亡途径.     

肌成纤维细胞在哮喘气道重塑中的作用

肌成纤维细胞（myofibroblast,MF）是一种介于平滑肌细胞（smooth muscle cell,SMC）和成纤维细胞（fibroblast,FB）之间的特殊类型的细胞,是一类分化了的FB,具有活跃的增殖和分泌胶原的能力,是细胞外基质（extracellular matrix,EMC）的主要来源。