休克后TPN支持导致肠源性感染的实验研究

采用五联悉生大鼠造成创伤后失血性休克和标准全胃肠外营养（ＴＰＮ）支持实验模型，观察休克后不同营养途径对肠屏障功能的影响。结果发现：休克后第８天，与经胃肠道营养（ＴＥＮ）支持组相比，ＴＰＮ支持组各项肠屏障功能指标发生显著变化，表现为肠道菌群紊乱；肠粘膜变薄，微绒毛缩短，粘膜缺损和大量Ｇ－杆菌侵入粘膜和粘膜下层；二胺氧化酶（ＤＡＯ）活性显著下降，肠细胞功能降低。与上述改变相平行，出现肠道细菌易位率增高     

表皮生长因子对全胃肠外营养大鼠肠道细菌易位的影响及其机制

目的 探讨表皮生长因子对全胃肠外营养大鼠肠道细菌易位的影响及其机制。方法 ４８只ＳＤ大鼠随机分为对照组,常规ＴＰＮ组,ＴＰＮ＋ＥＧＦ组。测定肠系膜淋巴结细菌易位率;对小肠粘膜组织形态学进行观测;采用免疫组织化学及地高辛随机引物原位杂交技术,分别测定小肠粘膜ＥＧＦ受体及其ｍＲＮＡ的表达。     

全肠外营养和消炎痛对创伤后应激反应及蛋白质代谢的影响

比较了全肠外营养和消炎痛对创伤性应激反应和蛋白质代谢的影响。将１９例因贲门癌行经腹根治性全胃切除的中等创伤病人，分为对照组，全肠外营养组和消炎痛组，监测了体温，血浆蛋白，应激激素，尿中尿素氮，肌酐和３－甲基组氨酸的变化。结果发现：ＴＰＮ组病人血浆Ｃ－反应蛋白、儿茶酚胺、皮质醇、胰岛素均增高；消炎痛组病人体温降低，儿茶酚胺和皮质醇升高不明显，尿中尿素氮和３－甲基组氨酸排出减少，说明ＴＰＮ能促进蛋白质     

术后早期序贯肠内营养支持与全肠外营养比较研究

目的：比较研究食管贲门癌术后早期序贯肠内营养支持和术后全肠外营养的临床效果。方法：选择食管贲门癌术后43例,随机分为序贯肠内营养支持（SEN）组22例及全肠外营养（TPN）组21例。比较观察两组术后并发症发生情况、肠内营养耐受情况及肛门排气时间。术前、术后第1天及第8天分别测定血清清蛋白（ALB）、血清前清蛋白（PA）;术前及术后第8天测量体重。结果：SEN组肛门排气时间（50±5）h,显著短于TPN组的（70±6）h（P〈0.05）;两组术后第8天体重均较术前下降,但TPN组下降更为显著（P〈0.05）;两组术后第1天ALB及PA均降低,第8天SEN组已接近术前水平,而TPN组仍然较低（P〈0.01）;两组患者均无吻合口瘘、肺部感染等严重并发症发生。结论：术后早期采用SEN较TPN更有利于营养状况改善和体重恢复。     

铝对大鼠骨质明胶诱导性异位骨形成及矿化影响的研究

采用不脱钙骨切片技术，配合四环素双标记和骨组织形态计量学及铝染色，研究了不同的铝浓度在肾功能正常与肾功能不全时对诱导性异位骨形成及矿化的影响。实验大鼠分为５组：对照组（Ｃ）；低剂量铝组（ＬＤＡ）；高剂量铝组（ＨＤＡ）；慢性肾功能不全组（ＣＲＦ）；慢性肾功能不全加高剂量铝组（ＣＲＦ－ＨＤＡ）；实验结果表明：ＬＤＡ、ＣＲＦ组与Ｃ组之间无明显差异（Ｐ〉０．０５）；ＨＤＡ及ＣＲＦ－ＨＤＡ组骨组织内四环素荧     

猪原位全小肠移植模型的建立

猪原位全小肠移植模型的建立２１０００２南京南京军区南京总医院江志伟，黎介寿，李宁，李幼生，汪志明关键词移植，小肠，模型，外科，猪中国图书资料分类号Ｒ６１７小肠移植的成功，为长期依赖全肠外营养（ＴＰＮ）生存的肠衰竭病人的治疗开辟了新的途径，但小肠移植由...     

食管癌根治术患者的TPN治疗体会

食管癌根治术患者的ＴＰＮ治疗体会武警四川总队重庆医院外一科黄鼎孝，孙李法，郑圣勇（重庆６３００６１）自１９９０年２月至１９９４年８月，我们采用全胃肠外营养（ＴＰＮ）支持治疗食管癌根治术患者３５例，无死亡及吻合口瘘等并发症，取得了满意的效果。现报告如下...     

输血对环磷酰胺合并全淋巴照射的骨髓移植大鼠存活的影响

作者以环磷酰胺合并６０Ｃｏγ射线一次１０Ｇｙ全淋巴照射（致死剂量）后进行骨髓移植，探讨了移植前后不同时间和不同供体输血对大鼠存活的影响．对照组和单给输血组于照后４天～１２天全部死亡；骨髓移植后１天同供体输血组６０天存活率与单给骨髓移植组相同（１０％），移植前１天同供体和非同供体输血的两组分别为２０％和４０％（Ｐ＜０．０５），移植前３天同供体输血组发生过敏加速死亡（全部死于４天～１０天）．当分次使用环磷酰胺时，移植前１天同供体输血组６０天存活率提高至８０％（Ｐ＜０．０１）．结果表明输血对大鼠骨髓移植疗效的影响与输血时间有关．     

输血对环磷酰胺合并全淋巴照射的骨髓移植大鼠存活的…

作者以环磷酰胺合并＾６０Ｃｏγ射线一次１０Ｇｙ全淋巴照射（致死剂量）后进行骨髓移植，探讨了移植前后不同时间和不同供体输血对大鼠的影响。对照组和单给输血组于照后４天－１２天全部死亡；骨髓移植后１天同供体输血组６０天存活率与单给骨髓移植相同，移植前１天同供体和非同供体输血的两组分别为２０％和４０％，移植前３天同供体输血组发生过敏加速死亡（全部死于４天－１０天）。当分次使用环磷酰胺时，移植前１天同供体输     

早期肠道营养与静脉营养对大鼠烧伤后代谢的影响

目的 设计肠道和静脉营养的烧伤大鼠模型,比较两种营养途径对烧伤后早期代谢的影响。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为早期肠道营养组（ＴＥＮ组）,正常对照组。ＴＥＮ组和ＴＰＮ组均为３０％Ⅲ度烧伤,液体复苏,分别灌喂和静脉输注营养液,两组给予热量和氮量相同。观察６小时至３天的体重、静息能量消耗（ＲＥＥ）、尿氮、尿儿茶酚胺和血浆胰岛素、胰高血糖素、皮质醇变化。结果 ＴＰＮ组ＲＥＥ在烧伤后７２小时明显高于Ｃ组入ＴＥ     

HGF基因转染促进同种瓣移植后体内再内皮化研究

目的探讨同种瓣经去内皮和肝细胞生长因子(HGF)转染处理后,不同移植时间点的再内皮化效果及CD137、Gab1表达情况。方法成年健康近交系中国雄性家兔为供体,近交系成年新西兰雌性大白兔为受体,行同种瓣补片法移植。受体随机分为3组,每组20只,新鲜组不做任何处理,作为对照;去内皮组行去内皮细胞处理;HGF组医用生物蛋白胶携载HGF质粒,对去内皮处理的移植物进行基因转染。分别于术后2、4、8、12周取出移植物,移植物行光镜与电镜观察组织形态变化,免疫组化法测定CD137与移植后2周Gab1的表达。结果去内皮组与新鲜组分别于移植后4周与8周出现新生内皮细胞,早期伴有不同程度的平滑肌细胞损伤;术后2周,HGF组移植物表面即出现大量内皮细胞覆盖,且无平滑肌细胞钙化坏死。新鲜组与去内皮组4、8、12周3个不同时间点的CD137表达较HGF组显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);HGF组样本中,移植物各时间点CD137表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组CD137的表达高峰均出现在第2周。移植2周时,HGF组Gab1表达量(0.198 2±0.024 3)明显高于新鲜组(0.107 7±0.010 4)与去内皮组(0.110 2±0.014 5),差异有统计学意义(P<0.01);新鲜组与去内皮组Gab1表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论去内皮及HGF基因转染处理同种瓣能够上调Gab1的表达,在移植早期(2周)实现体内再内皮化,同时抑制早期免疫反应。     

急性冠脉综合征患者血清肝细胞生长因子的测定及临床意义

目的:探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清肝细胞生长因子(HGF)水平变化的临床意义。方法:160例住院患者分为急性心肌梗死(AMI)、不稳定型心绞痛(UA)、稳定型心绞痛(SA)及对照组(C),检测各组血清HGF水平。随访ACS患者5年内不良心血管事件的发生情况。结果:ACS患者早期血清HGF水平明显升高,发生不良心血管事件者血清HGF水平与未发生者有显著差异。结论:血清HGF浓度对ACS的早期诊断、危险分层及预后均有重要意义。     

高原缺氧环境下重症急性胰腺炎合并肠损伤的实验研究

目的:观察高原缺氧环境下重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肠黏膜组织的变化,初步探讨高原SAP(H-SAP)时肠黏膜屏障损伤的机制。方法:48只Wistar大鼠,根据海拔不同随机分为2个大组,西安组(X组)和马衔山组(M组),每组24只,再将每个大组随机分为4个小组,假手术组(SO组),SAP-6 h组,SAP-12 h组和SAP-24 h组,每组6只。采用逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠制备SAP动物模型。分别测定小肠组织TNF-α、IL-10水平;取胰腺及肠组织行病理学检查,透射电镜观察肠黏膜超微结构的变化。结果:X-SAP组与M-SAP组相比,TNF-α、IL-10的表达具有显著性差异(P<0.05);光镜下可见M-SAP组各时间点胰腺及肠组织的损伤程度均较X-SAP组显著(P<0.05);SAP组胰腺组织与肠组织病理评分均呈正相关关系(r=0.902,P<0.01),透射电镜结果显示M-SAP组大鼠造模后肠组织超微结构损伤程度较X-SAP组明显。结论:高原缺氧可诱导、加重H-SAP时肠黏膜屏障损伤;TNF-α和IL-10表达失衡可能在H-SAP合并肠黏膜屏障损伤的发生、发展中起重要作用。     

携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒对大鼠局灶性脑缺血治疗的实验研究

目的 :观察携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒 (Ad_HGF)对大鼠局灶性脑缺血的治疗作用。方法 :建立大鼠局灶性脑缺血动物模型。携带人肝细胞生长因子基因的穿梭质粒与携带复制缺陷的人血清 5型腺病毒基因组的质粒在 2 93细胞进行同源重组 ,构建Ad_HGF。携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒 (Ad_GFP)载体注射到局灶性缺血大鼠的缺血侧侧脑室 ,观察其在脑内的表达部位和持续时间。动物给药治疗后 3d ,取大脑 ,平均切成 4片 ,用TTC染色评价Ad_HGF对缺血的治疗效果。结果 :Ad_GFP仅在大鼠双侧侧脑室壁及脑室内的脉络膜细胞表达 ,表达持续两周左右 ;Ad_HGF治疗组动物大脑缺血区明显小于非治疗组动物 (P <0 .0 5 )。结论 :Ad_HGF能显著缩小大鼠局灶性脑缺血区。     

HGF非融合蛋白真核表达载体的构建及其在骨骼肌细胞中的表达

目的构建以HGF为目的基因、以EGFP为报告基因的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,并观察HGF基因在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中的表达。方法利用BamHI单酶切质粒pcDNA3-HGF,得到HGF基因片段,将其正向插入到真核表达载体pCMV-IRES-EGFP的CMV后方BamHI的单克隆位点。脂质体介导转染至原代培养的大鼠骨骼肌细胞,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用ELISA法检测HGF的表达情况。结果构建了HGF的非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,转染原代培养的大鼠骨骼肌细胞24~72h后,见30%的细胞表达EGFP。ELISA检测细胞培养液证实转染后第1天即有HGF的表达,第4天HGF浓度为(5402.0±227.9)ng/L。结论成功构建了非融合蛋白真核表达载体pCMV-HGF-IRES-EGFP,其在原代培养的大鼠骨骼肌细胞中能有效表达。     

Attenuation of hepatic fibrosis through ultrasound-microbubble-mediated HGF gene transfer in rats

ObjectiveThe objective was to explore the feasibility of ultrasound-microbubble-mediated hepatocyte growth factor (HGF) gene transfer for treating rat hepatic fibrosis induced by CCl₄.MethodsForty-eight male SD rats were divided into ultrasound-microbubble-HGF group (U-M-HGF group), ultrasound-HGF group (U-HGF group), microbubble-HGF group (M-HGF group), HGF group (HGF group), CCl₄ group (control group), and normal group. The serum levels of alanine transaminase (ALT), aspartate transaminase (AST), total protein, albumin (ALB), and globulin (GLB) and the ratio of ALB/GLB were determined after treatment. The degree of hepatic fibrosis was evaluated by histopathological numerical scores. The protein expressions of HGF, collagen I, collagen III, and α-smooth muscle antibody (α-SMA) were detected by immunohistochemistry.ResultsUltrasound-microbubble-mediated HGF therapy significantly reduced the serum level of ALT and AST to 59.88% and 49.18% of the control group, respectively. Ultrasound-microbubble-mediated HGF therapy prevented liver fibrosis, with an obvious decrease in fibrosis areas and extracellular matrix production of collagen I, collagen III, and α-SMA. The gene therapy could induce HGF delivery into the fibrotic liver effectively.ConclusionsUltrasound-microbubble-mediated HGF gene therapy can reduce liver fibrosis, which provides a novel strategy for gene therapy of chronic liver disease.     

肝细胞生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化的实验研究

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）诱导小鼠胚胎干细胞（ESC）体外定向分化为肝细胞的能力。方法对ESC体外悬浮培养5～7天形成的拟胚体,观察ESC自主分化、HGF诱导分化的情况。观察和检测经诱导4周的细胞的HE染色,糖原染色,尿素氮及甘油三酯合成,心肌MHC、白蛋白、AFP、CK18的表达,以及吲哚氰绿（ICG）染色情况。结果ESC自主分化难以控制。HGF可促进ESC向内胚层进一步分化,但更可能诱导其向心肌分化。表达白蛋白、AFP、CK18、ICG和FDA染色阳性。结论HGF可诱导ESC分化出肝细胞,但HGF的单一作用能力有限,提示肝细胞的诱导分化可能需要多种因素共同作用。     

The treatment of liver fibrosis induced by hepatocyte growth factor-directed,ultrasound-targeted microbubble destruction in rats

ObjectiveThe purpose of this study was to explore the feasibility of using ultrasound-targeted microbubble destruction to treat liver fibrosis induced by hepatocyte growth factor (HGF).MethodsForty Wistar rats were divided into five groups after the models of liver fibrosis were prepared: (1) HGF, ultrasound, and microbubbles (HGF+US/MB); (2) HGF and ultrasound (HGF+US); (3) HGF and microbubbles (HGF+MB); (4) HGF (HGF); and (5) model alone (MA). All rats were killed after being transfected for 14 days. Recovery of the liver was detect by diffusion-weighted imaging (DWI) and pathological methods. Collagen I expression was detected by immunohistochemistry. Hepatocyte growth factor expression in the liver was detect by western blotting.ResultsThe results of DWI and pathological examination showed the recovery of liver in HGF+US/MB group were better than those of other groups. In HGF+US/MB group, collagen I expression was less, and HGF protein was the highest among all the groups.ConclusionsUltrasound-targeted microbubble destruction could deliver HGF into the fibrotic liver and produce an antifibrosis effect, which could provide a novel strategy for gene therapy of liver fibrosis.     

肝细胞生长因子对后肢固定大鼠腓肠肌细胞凋亡的影响

目的：观察肝细胞生长因子对后肢固定大鼠腓肠肌细胞凋亡的影响。方法：按照Jozsa的方法制作模型，实验组将肝细胞生长因子注射人大鼠腓肠肌；模型组注射等量生理盐水。观察骨骼肌组织的病理改变及骨骼肌细胞凋亡的改变。结果：实验组肌纤维塑形良好，线粒体形态较正常，见新生肌纤维；Bcl-2呈强阳性表达且TUNEL显示为低表达，均较模型组明显改变（P〈0.01）。结论：肝细胞生长因子能够显著降低骨骼肌细胞凋亡，有效抑制骨骼肌废用性萎缩的发生     

肝细胞生长因子修复周围神经损伤研究

目的 探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对周围神经损伤修复的作用.方法 以Wistar大鼠坐骨神经挤挫伤为动物模型,神经损伤局部肌肉注射腺病毒介导的人肝细胞生长因子(Ad-HGF),与无注射HGF组对照,通过步态分析、肌肉湿重测定、计算机图像分析等指标评价神经损伤后再生效果.结果 术后4周,在坐骨神经指数、肌肉湿重恢复、计算机图像分析等再生指标的比较中,注射HGF组明显强于对照组(P<0.05).结论 HGF能促进大鼠坐骨神经损伤后的有髓纤维再生和功能恢复,是一种有效的治疗周围神经损伤的神经营养因子.