实时荧光定量PCR法检测淋病奈瑟菌感染的效果

①目的 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术准确定量检测临床标本中淋病奈瑟菌基因，同时与金标准—细菌培养法比较其灵敏度和特异度，为临床淋病的诊疗提供依据。②方法 采集l73例病人临床标本，以PE5700全自动PCR扩增分析仪和淋病奈瑟菌实时荧光定量PCR检测试剂盒进行核酸检测。同时，用含PolyViteX的巧克力板对淋病奈瑟菌进行分离，用ATB Expression自动细菌鉴定仪及配套的APINH进行鉴定。③结果 173份临床标本中，荧光定量PCR法示47例淋病奈瑟菌阳性，阳性率为27．2％；细菌培养法示41例淋病奈瑟菌阳性，阳性率为23．7％。与细菌培养法相比，荧光定量PCR法的灵敏度为100％，特异度为95．5％，两者的符合率为96．5％。④结论 荧光定量PCR技术具有简便、快捷、灵敏度高、特异度高、定量准确等优点，在临床检测淋病奈瑟菌中具有良好的应用前景。     

实时荧光定量PCR法检测淋病奈瑟菌感染的临床价值分析

目的此次研究旨在探讨实时荧光定量PCR方法对淋病奈瑟菌基因的影响,以期为临床工作中淋病的筛查提供科学合理的依据。方法使用细菌培养法作为对照,将接种完成的含Poly Vite X巧克力的平板置于35℃含5%二氧化碳的培养箱中24~48 h,采用生化反应进行鉴定并使用APINH鉴定试条进行检验;实时荧光定量PCR的检测方法采用试剂盒提供的方法进行。结果此次研究中的200例临床样本53例呈淋病奈瑟菌阳性,其阳性率为26.5%。实时荧光定量PCR结果显示200例临床样本中共61例呈淋病奈瑟菌阳性,其阳性率为30.5%。以细菌培养法为评价依据,结果显示实时荧光定量PCR法其灵敏度为的灵敏度为100%(53/53),其特异度为95.77%(181/189),总符合率为96%(192/200)。结论采用实时荧光定量PCR法对淋病奈瑟菌感染患者进行筛查具有较好的开发价值,应对其进行深入研究。     

NDM1基因常规PCR与荧光定量PCR检测方法的建立及其检测结果比较

目的：建立NDM1基因常规PCR和荧光定量PCR（FQ-PCR）检测方法,并对其检测结果进行比较。方法：设计3对NDM1基因常规PCR与FQ-PCR引物,建立常规PCR与FQ-PCR反应体系和条件,比较2种检测方法的特异性、灵敏度和对模拟临床样品的检测效果。结果：成功建立NDM1基因常规PCR和FQ-PCR检测方法;特异性检测,常规PCR与FQ-PCR检测7种常见病原菌均为阴性;灵敏度检测,常规PCR检测限为10⁶ mL^-1 ,FQ-PCR检测限为10⁴ mL^-1;模拟临床样品检测,常规PCR和FQ-PCR检测结果一致。结论：常规PCR与FQ-PCR均有很好的特异性,FQ-PCR灵敏度比常规PCR高100倍。     

荧光定量PCR与普通PCR检测HBV DNA的对照分析

目的 比较普通PCR（CommonPCR）和实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测人血清HBVDNA结果之间的相互关系,为临床提供最有效的诊断方法。方法 对117例份清标本用两种方法同时进行检测,分析其相关性,比较其差异。结果 荧光定量CPR不仅能几乎100％检测出普通PCR阳性的标本,还能在其阴性的76份标本中检测出36份阳性,其拷贝数均在较低水平。在不同的血清标志物模式下,定量方法的阳性率均明显高于定性方法。结论 荧光定量PCR具有一定优势,尤其适合于使用抗病毒药物的病人的疗效观察和病情预测。     

实时荧光定量PCR法对女性衣原体和淋球菌感染的检测

目的采用PCR方法结合荧光探针外扩增的检测技术,检测妇科衣原体和淋球菌感染,评价性病高危人群的感染率。方法应用FQ-PCR法检测临床疑似性病的150例女性患者及50例健康妇女生殖道标本中的衣原体和淋球菌。结果FQ-PCR法检出疑似性病患者中衣原体为29.3%(44/150),淋球菌检出率为24.00%(36/150);对照组中衣原体为4%(2/50),淋球菌为2%(1/50)。经χ2检验,FQ-PCR法检测疑似患者与健康妇女的衣原体有显著性差异(P<0.05),淋球菌检测也有显著性差异(P<0.05)。结论在疑似性病的女性中应进行衣原体和淋球菌的检测,特别是应用实时荧光定量PCR方法进行检测,对淋病和衣原体感染的诊断有快速、准确、特别的效果,对于淋病和衣原体感染复发和治疗有指导作用。     

实时荧光定量PCR技术在食源性细菌检测中的应用效果评价

【目的】探讨应用实时荧光定量PCR技术在食源性细菌检测中应用效果。【方法】分别应用细菌培养法,PCR检测法,实时荧光定量PCR方法对987例群体食源性食物中毒腹泻患者和疑似患者的粪便或呕吐物2084份样品进行食源性病原体检测。【结果】检测2084个感染性腹泻标本,细菌培养法阳性检出率45.2%,普通PCR检测法阳性检出率63.4%;采用实时荧光PCR技术阳性检出率90.1%。实时荧光定量PCR检测法阳性检出率显著高于细菌培养检测法和普通PCR检测法,相比较均有显著性差异（P〈0.05）。【结论】实时定量荧光定量PCR技术准确、快速、简便、特异性强,在食源性细菌检测中,能为突发食源性食物中毒事件提供更早的控制措施并争取时间。     

应用荧光定量PCR法快速诊断柯萨奇病毒性脑炎

目的：采用逆转录PCR结合荧光探针对体外RNA扩增和检测技术即荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法测定脑脊液中柯萨奇病毒（CBV）的数量，诊断柯萨奇病毒性脑炎。方法：采用CBV FQ-PCR诊断试剂盒，以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量PCR法，检测了113例临床诊断为病毒性脑炎患儿的脑脊液标本。结果：46例脑脊液FQ-PCR CBV阳性患者中，CBV拷贝数与临床病情轻重呈正相关，在病程早期CBV阳性率较高。结论：FQ-PCR法可用于柯萨奇病毒性脑炎的早期诊断，对指导治疗和疗效观察有一定的临床意义。     

荧光定量PCR法检测血清中HCV-RNA

目的：分析125例患者以荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测的HCV-RNA结果,评价其临床价值。方法：血清标本同时以酶联免疫吸附法检测抗HCVIgG,以荧光定量PCR法检测HCV-RNA。结果：在125例标本中,HCV-RNA阳性率为55.2%（69/125）,抗HCVIgG阳性率为77.6%（97/125）,两者差别有统计学意义（P〈0.05）。结论：荧光PCR检测HCV-RNA可以直接反映体内丙型肝炎病毒（HCV）的活动性和复制程度,优于抗HCVIgG对HCV感染的检测准确性,有利于抗病毒治疗的疗效观察。     

乙肝表面抗原ELISA法弱阳性样本与PCR检测结果对比观察

目的探讨对乙肝表面抗原（HBsAg）酶联免疫吸附测定（ELISA）法为弱阳性样本应用荧光定量PCR（FQ-PCR）复检的意义。方法选择ELISA法检测HBsAg吸光度值/临界值（S/CO）〈1.5的样本210例作为研究对象,将患者分为A组70例（S/CO〈0.3）、B组70例（0.70≤S/CO〈1.0）、C组70例（1.0≤S/CO〈1.5）,所有样本应用FQ-PCR进行复检,比较两种方法的检测结果。结果 A组FQ-PCR复检均为阴性;B组FQ-PCR复检3例HBV-DNA阳性;C组FQ-PCR复检14例HBV-DNA阳性。结论对ELISA法检测HBsAg为弱阳性的样本进行FQ-PCR复检,可减少临床误诊和漏诊,避免医疗纠纷的发生。     

1206例呼吸道感染儿童肺炎支原体DNA检测结果分析

目的：了解儿童肺炎支原体（MP）感染情况。方法：采用荧光定量PCR（FQ-PCR）技术检测1206例疑似MP感染患儿的咽拭子标本中的MP-DNA。结果：1206例呼吸道感染患儿中MP-DNA阳性435例,占36.0%。结论：提示FQ-PCR可快速、敏感、准确地定量检测标本中MP-DNA,了解MP在患儿体内感染情况,有助于临床明确诊断与治疗方案的选择。     

GeneXpert MTB/RIF Ultra在结核病特殊标本检测中的应用价值

目的 比较全自动荧光定量PCR系统超强版本（GeneXpert MTB/RIF Ultra,GeneXpert Ultra,GeneXpert）、全自动荧光定量PCR系统（GeneXpert MTB/RIF,Xpert,GeneXpert）、DNA实时荧光定量核酸检测（FQ-PCR）、结核分枝杆菌RNA实时荧光恒温扩增（SAT-RNA）、DNA实时荧光恒温扩增检测（恒温扩增法）及传统BACTEC MGIT 960液体培养（培养法）对结核病特殊标本的诊断效能，为临床诊疗提供依据。方法 收集2021年1—9月西安市胸科医院特殊标本共170例（包括胸腹水标本47例，24 h尿沉渣标本34例，组织标本49例，脓液标本40例），分别采用GeneXpert Ultra、Xpert、FQ-PCR、SAT-RNA、恒温扩增法及传统培养法进行检测，以临床诊断为标准，对比其灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率及Kappa值。结果 GeneXpert Ultra、Xpert、FQ-PCR、SAT-RNA、恒温扩增法及传统培养法的灵敏度分别为65.18%(73/112)、49.11%(55/112)...     

淋病奈瑟氏菌三种检测方法的结果比较

目的：分析评价聚合酶链反应（PCR）、细菌培养、直接涂片染色3种方法检测淋病奈瑟氏菌（neisseria gonorrboeae,NG）的应用效果。方法：分别采用PCR检测法、细菌培养法、直接涂片染色法分别对366份女性阴道分泌物以及325份男性尿道分泌物进行检测,并对三种方法的阳性检测结果进行比较分析。结果：PCR检测180份女性阴道分泌物标本,NG-DNA阳性率为21.67%,150份男性尿道分泌物,NG-DNA阳性率为44.67%,经统计学处理,男女之间差异有统计学意义（P〈0.001）;细菌培养：108份女性阴道分泌物进行细菌培养,NG的检出率为16.64%,95份男性尿道分泌物进行细菌培养,NG的检出率为22.85%;直接涂片Gram染色：80份男性尿道分泌物进行Gram染色,NG的检出率为21.49%,78份女性阴道分泌物,NG的检出率为10.79%。3种检测方法经统计学处理,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论：PCR检测法特异性强,灵敏度高,可作为慢性淋病检测的首选方法。细菌培养检出率次之,直接涂片Gram染色的检出率最低。直接涂片Gram染色的检出率虽较低,但特异性高,在基层医院无PCR设备及细菌培养条件者可首选,是一种经济实用、简便易行的检测方法。     

荧光定量PCR检测性病的结果分析

目的通过荧光定量PCR（FQ—PCR）法对支原体（UU）、衣原体（CT）、淋球菌（NGH）、人乳头瘤病毒（HPV）检测数据，论证该方法在性病诊断中的价值。方法采用荧光定量PCR（FQ-PCR）法对疑有泌尿、生殖系感染及不孕的630例女性患者的宫颈分泌物做检测。结果630例样本中呈阳性的有292例，阳性率为46．34％，其中，支原体、衣原体、乳头瘤病毒、淋球菌分别占阳性总人数的34．28％、9．84％、1．75％、0．48％。结论采用荧光定量PCR（FQ-PCR）法，提高了检测的准确性。对临床治疗效果起到促进作用。     

涂片、培养和实时荧光定量PCR检测在妇科的临床应用

目的：比较涂片革兰染色、培养和实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测妇科性病淋球菌感染的临床应用价值,寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法。方法：同时用涂片革兰染色、培养和FQ-PCR检测临床疑诊淋病123例女性阴道标本中的淋球菌,以培养法为“金标准”,将另外两种方法与之比较,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值。结果：涂片检出率为76．4％、培养法检出率为66．7％、FQ-PCR检出率为69．9％;经配对计数资料Х^2检验,FQ-PCR与培养法的检出率比较差异无显著性（P〉0．05）。涂片法和FQ-PCR法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为94．2％、66．7％、87．2％、82.8％和97．6％、89．7％、95．3％、94．6％。结论：FQ-PCR检测淋球菌,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点。FQ-PCR具有准确快速,敏感性和特异性较高的特点,是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法。     

荧光定量PCR检测性病的结果分析

目的通过荧光定量PCR(FQ-PCR)法对支原体(UU)、衣原体(CT)、淋球菌(NGH)、人乳头瘤病毒(HPV)检测数据,论证该方法在性病诊断中的价值。方法采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法对疑有泌尿、生殖系感染及不孕的630例女性患者的宫颈分泌物做检测。结果630例样本中呈阳性的有292例,阳性率为46.34%,其中,支原体、衣原体、乳头瘤病毒、淋球菌分别占阳性总人数的34.28%、9.84%、1.75%、0.48%。结论采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法,提高了检测的准确性,对临床治疗效果起到促进作用。     

荧光定量检测HBV-DNA与ELISA检测乙肝标志物模式的比较分析

目的：探讨HBV-DNA复制水平与乙肝病毒标志物（HBV-M）模式的关系。方法：采用荧光定量探针PCR（FQ-PCR）法检测HBV-DNA,采用ELISA检测HBV-M。结果：1100例血清标本中,HBsAg、HBeAg、HBcAb（＋）组的HBV-DNA阳性符合率达97.13%;HBsAg、HBeAb、HBcAb（＋）组的HBV-DNA阳性符合率为45.95%;HBsAg、HBcAb（＋）组的HBV-DNA阳性符合率为54.17%,HBsAb（＋）组的HBV-DNA阳性符合率为18.42%;阴性组的HBV-DNA阳性率为11.11%。结论：FQ-PCR法检测HBV-DNA是反映乙肝病毒复制的良好标志,可以更为清楚地反映病程变化,对临床诊断治疗及判断预后具有重要的指导意义。     

涂片、培养和实时荧光定量PCR检测在妇科的临床应用

目的比较涂片革兰染色、培养和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测妇科性病淋球菌感染的临床应用价值,寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法.方法同时用涂片革兰染色、培养和FQ-PCR检测临床疑诊淋病123例女性阴道标本中的淋球菌,以培养法为"金标准",将另外两种方法与之比较,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值.结果涂片检出率为76.4%、培养法检出率为66.7%、FQ-PCR检出率为69.9%;经配对计数资料χ2检验,FQ-PCR与培养法的检出率比较差异无显著性(P＞0.05).涂片法和FQ-PCR法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为94.2%、66.7%、87.2%、82.8%和97.6%、89.7%、95.3%、94.6%.结论FQ-PCR检测淋球菌,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点.FQ-PCR具有准确快速,敏感性和特异性较高的特点,是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法.     

PCR-ELISA法及荧光定量PCR法检测HBV感染者精液HBV-DNA的探讨

目的探讨PCR-ELISA法及荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测HBV感染者精液中HBV-DNA检出情况及其临床意义。方法选取男性HBV感染者60例,采集患者精液、静脉血,用PCR-ELISA法来检测患者精液及血清中HBV-DNA。同时采用荧光定量PCR检测患者精液中HBV-DNA。结果PCR-ELISA法：60例精液标本HBVDNA阳性12例,阳性率18.33%,拷贝数为1.267×10^3-6.532×10^5/ml,平均拷贝数为4.781×10^4/ml;60例血清标本阳性53例,阳性率为88.33%,拷贝数1.462×10^3-5.153×10^7/ml,平均拷贝数为2.451×10^6/ml。荧光定量PCR法：60例精液标本HBVDNA阳性13例,阳性率21.67%,拷贝数为1.357×10^3-7.113×10^5/ml,平均拷贝数为4.983×10^4/ml;两种检验方法检测精液HBV-DNA的阳性检出率比较无显著性意义（P〉0.05）。结论PCR-ELISA法与荧光定量PCR定量检测精液中HBVDNA同样具有较强的特异性和灵敏度,为临床了解乙型肝炎患者精液中肝炎病毒的感染状态提供了帮助,具有重要的临床意义。     

女性宫颈淋病奈瑟菌三种检测方法的比较

目的比较三种女性宫颈淋病奈瑟菌检测方法。方法采用涂片法、淋病奈瑟菌培养法和荧光定量PCR法对210例临床分泌物标本进行同时检测。结果涂片法阳性率为43%,培养法阳性率为39%,PCR法阳性率为48%。结论三种方法比较,PCR法可作为女性宫颈淋病奈瑟菌首选的检测方法。     

淋病奈瑟菌的细菌培养与PCR方法检测的结果对比

目的:比较细菌培养法与聚合酶链反应(PCR)检测方法对淋病奈瑟菌的检测效果。方法:对60例疑似淋病患者生殖道分泌物同时进行细菌培养、PCR检测,并对其结果进行比较分析。结果:采用细菌培养法检测60例样本中26例为淋病奈瑟菌阳性,阳性检出率为43.3%;采用PCR方法检测60例样本中45例为淋病奈瑟菌阳性,阳性检出率为75.0%。两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于淋病奈瑟菌采用PCR检测方法具有高效率、高特异性、低误诊率、低漏诊率,是临床上检测淋病奈瑟菌的好方法。