黄连解毒汤不同提取部位及相关单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用研究

目的:研究黄连解毒汤不同提取部位及小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法:建立体外脾T、B淋巴细胞模型,运用MTT比色法分析比较黄连解毒汤的不同提取部位及其主要化学成分与丝裂原(ConA、LPS)共同作用时对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果黄连解毒汤全方水提部位(H2O部位)、醇提总部位(EtOH部位)、二氯甲烷萃取部位(CH2Cl2部位)和正丁醇萃取部位(n-Bu部位)对未活化或LPS和ConA诱导的脾T、B淋巴细胞具有不同程度的促进或抑制作用。小檗碱、黄芩苷(10μM)能促进未活化小鼠脾淋巴细胞增殖,而栀子苷、芦丁(50μM)对未活化小鼠脾淋巴细胞的增殖作用不明显。对于脂多糖(LPS)或刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞,小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁均能抑制其增殖。结论:黄连解毒汤不同提取部位及其中主要化学成分小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁对T、B淋巴细胞均有不同程度的增殖作用。     

金黄扶正茶对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响

目的:探讨金黄扶正茶对免疫抑制小鼠脾脏T、B淋巴细胞增殖及腹腔巨噬细胞免疫功能的影响.方法:金黄扶正茶高、中、低剂量组分别连续给昆明种小鼠ig 10 d,同时隔日sc注射环磷酰胺(30 mg·kg-1)造成免疫抑制模型.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定刀豆蛋白A(Con A)诱导脾脏T淋巴细胞增殖和脂多糖(IPS)诱导B淋巴细胞增殖的影响及自然杀伤细胞(NK细胞)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)活性,酶法检测腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮合酶(NOS)的活性,用全自动酶标仪检测巨噬细胞吞噬中性红能力.结果:金黄扶正茶低、中、高剂量组均能显著提高免疫抑制小鼠的T,B淋巴细胞的吸光度(A,P＜0.01);而中、高剂量组能显著提高免疫抑制小鼠NK细胞、LAK细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬活性及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活力(P＜0.01或P＜0.05).结论:金黄扶正茶能促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖,增强NK细胞、LAK细胞活性,提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性,从而增强免疫抑制小鼠的细胞免疫功能.     

黄芩苷对T淋巴细胞增殖与活化的影响

目的:研究黄芩苷对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法:以刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PMA) 离子霉素(ionomycin,Ion)诱导小鼠淋巴细胞中T细胞增殖,用MTT法测定细胞增殖;利用ConA或PMA诱导T细胞激活,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子与CD25分子表达情况。结果:在ConA或PMA Ion刺激48h后,小鼠淋巴细胞MTT吸光度显著高于对照组(P<0.01)。黄芩苷(10~40uM)显著降低了ConA或PMA Ion引起的MTT吸光度增加(P<0.01)。在ConA或PMA刺激18h后,小鼠T细胞CD69表达率显著提高(P<0.01),ConA或PMA刺激36小时后,T细胞CD25表达率显著提高(P<0.01),黄芩苷(10~40uM)能显著降低活化(P<0.01)。结论:黄芩苷可以显著抑制多克隆刺激剂ConA或佛波醇酯(PMA)介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

六味地黄汤相关苷类单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的研究

目的：研究六味地黄汤中芍药苷、薯蓣皂苷元、马钱苷、莫诺苷、桃叶珊瑚苷对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法：制备脾淋巴细胞,MTT比色法检测不同浓度5种苷类单体单独作用及其与丝裂原（ConA、LPS）共同作用时对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果：10-5M芍药苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-6M芍药苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）;薯蓣皂苷元有一定促进淋巴细胞增殖作用,但与对照组比较无显著性差异;10-7～10-5M马钱苷能显著促进淋巴细胞增殖,10-7M马钱苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有显著协同作用,随剂量增加,增殖作用反而降低;10-7～10-5M莫诺苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。10-7～10-5M桃叶珊瑚苷基本无促进淋巴细胞增殖作用1,0-5M桃叶珊瑚苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-5M桃叶珊瑚苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）。结论：六味地黄汤中5种苷类单体对T、B淋巴细胞均有不同程度增殖作用,莫诺苷作用最明显,马钱苷低剂量促进增殖,高剂量反而抑制。     

盐藻水提物对小鼠细胞免疫功能的影响（英）

目的阐明盐藻水提物(WEDS)对小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法以DNCB诱导小鼠迟发性超敏反应(DTH),80和250mg·kg-1环磷酰胺(Cy)分别诱导小鼠DTH反应增强和减弱模型,观察不同剂量的WEDS对小鼠DTH反应的影响;以0.6%巯基乙醇酸钠诱生小鼠腹腔巨噬细胞,观察不同剂量的WEDS对小鼠腹腔巨噬细胞生成IL1的影响;以ConA诱导T淋巴细胞增殖,观察不同浓度的WEDS体外对T淋巴细胞增殖的影响。以ConA诱导T淋巴细胞增殖,观察WEDS不同剂量、不同作用时间体内对T淋巴细胞增殖和IL2生成的影响。结果剂量为100,200和300mg·kg-1·d-1的WEDS对Cy诱导的小鼠免疫功能的增强和减弱均有显著的下调和提升作用;浓度为125～500μg·mL-1的WEDS对腹腔巨噬细胞分泌IL1有显著的促进作用,超出上述范围之外浓度的WEDS对腹腔巨噬细胞分泌IL1的促进作用显著减弱;浓度为62.5μg·mL-1的WEDS体外对T淋巴细胞增殖有显著的促进作用;剂量为100,200和300mg·kg-1·d-1的WEDS能显著促进ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖、IL2的分泌,其中200mg·kg-1·d-1的促进作用最为显著。结论WEDS对小鼠的细胞免疫功能具有双向调节作用。     

小柴胡汤对BALB/c小鼠免疫调节作用研究

目的:探讨小柴胡汤对BALB/c小鼠的免疫调节作用。方法:每日给予正常小鼠及肌肉注射环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠小柴胡汤25g/kg连续10日,于实验第11日,采用L929细胞株测定腹腔巨噬细胞细胞毒效应;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖能力;采用ELISA法检测TNF-α及TH1型(IL-2、IFN-γ)和TH2型(IL-4、IL-10)细胞因子。结果:与正常小鼠比较,免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒效应明显下降,T淋巴细胞增殖能力及细胞因子产生均明显降低。给予小柴胡汤的正常小鼠的腹腔巨噬细胞的细胞毒效应和T淋巴细胞增殖能力提高,细胞因子产生也有所增加,但与正常组比较没有显著差异。与免疫抑制小鼠相比较,给予小柴胡汤的免疫抑制小鼠的腹腔巨噬细胞的细胞毒效应、T淋巴细胞增殖能力及细胞因子的产生均明显增加。结论:小柴胡汤可增强免疫抑制小鼠免疫功能。     

黄芪皂苷Ⅲ通过IFN-γ介导体外免疫调节作用的研究

目的:黄芪皂苷类单体组分免疫调节作用研究主要集中在黄芪甲苷,而其他单体组分研究相对较少,本研究旨在探讨黄芪皂苷Ⅲ(Astragaloside Ⅲ,As Ⅲ)体外免疫调节活性及初步的作用机制.方法:采用丝裂原ConA(刀豆蛋白)、LPS(脂多糖)分别诱导T、B淋巴细胞增殖为细胞模型,3H-TdR掺入法检测黄芪皂苷Ⅲ对T、B淋巴细胞增殖的影响.酶联免疫吸附法(ELISA)测定黄芪皂苷Ⅲ对ConA诱导的小鼠脾脏淋巴细胞产生Th型细胞因子(IL-2,IFN一γ)的作用.结果:黄芪皂苷Ⅲ在10 nM时对ConA诱导的正常小鼠脾脏T淋巴细胞增殖反应具有显著的促进作用(P＜0.01);黄芪皂苷Ⅲ(10nM,100nM)对LPS诱导的正常小鼠B淋巴细胞增殖反应亦有一定的促进作用(P＜0.05);黄芪皂苷Ⅲ在10 nM时显著促进ConA诱导的小鼠脾脏淋巴细胞IFN-γ的产生(P＜0.05),然而对IL-2的分泌无明显的影响.结论:黄芪皂苷Ⅲ可能通过IFN-γ介导免疫调节活性,这一作用机制可能与黄芪临床应用于抗肿瘤免疫、扶正祛邪、缓解化疗药物副作用密切相关.     

绞股蓝总皂甙对小鼠脾淋巴细胞增殖反应及白细胞介素2产生的作用

绞股蓝总皂甙(GP)皮下注射可增强正常小鼠和环磷酰胺所致免疫低下小鼠由Con A诱导的脾T淋巴细胞增殖反应和由LPS诱导的脾B淋巴细胞增殖反应,并且提高脾细胞白细胞介素2的生成。GP对免疫低下小鼠的作用更为显著。     

野生仙人掌多糖对小鼠特异性免疫功能的调节作用

目的:观察野生仙人掌多糖(ODPs)对小鼠特异性(体液及细胞)免疫功能的调节作用。方法:采用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,检测ODPs对血清溶血素IgMI、gG含量、脾淋巴细胞增殖反应和外周血T淋巴细胞亚群比例的影响;检测分离纯化的ODPs主要组分ODP-I对体外培养的淋巴细胞增殖作用。结果:ODPs能显著增强免疫抑制小鼠血清溶血素IgMI、gG的生成;显著增强免疫抑制小鼠T、B淋巴细胞的增殖能力,且均使之恢复至正常水平;显著降低免疫抑制小鼠CD4+T细胞亚群比例,从而显著降低CD4+/CD8+T细胞比值,使之接近正常水平,且均有剂量关系。ODP-I可极显著促进小鼠脾淋巴细胞自然增殖,协同有丝分裂原ConA或LPS诱导T、B淋巴细胞的增殖。结论:ODPs对免疫抑制小鼠特异性免疫功能具有调节作用,对体外淋巴细胞具有增殖作用,是一种良好的免疫调节剂。     

驱白巴布期片对小鼠免疫功能的影响

目的 探讨驱白巴布期片对小鼠免疫功能的影响.方法 观察驱白巴布期片对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠脾脏和胸腺的重量、Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化、腹腔巨噬细胞吞噬功能以及血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的影响.结果 驱白巴布期片高、中、低剂量治疗组均可明显提高小鼠免疫器官脾、胸腺的重量,可提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,可促进脾脏B、T淋巴细胞的增殖,可以显著降低免疫抑制小鼠血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM含量.结论 驱白巴布期片对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的非特异性免疫(巨噬细胞吞噬功能)和特异性细胞免疫(脾脏淋巴细胞的增殖)等功能都有上调作用,说明驱白巴布期片对免疫功能有显著的调节作用.     

何首乌浸膏提取物对小鼠T、B淋巴细胞免疫功能的作用

何首乌浸膏提取物(简称PM2)增加小鼠脾重,对胸腺重量无影响;可提高脾脏PFC数量,并显著增强ConA诱导的胸腺及脾脏T淋巴细胞增殖反应,但对LPS诱导的脾脏B淋巴细胞增殖反应仅轻度增强。这些结果表明PM2对小鼠淋巴细胞具有选择性作用,以增强T细胞功能为主,进而间接增强B细胞对T依赖抗原的抗体应答。     

盐藻水提物对小鼠细胞免疫功能的影响

目的:阐明盐藻水提物(WEDS)对小鼠细胞免疫功能的调节作用.方法:以DNCB诱导小鼠迟发性超敏反应(DTH),80和250mg·kg-1环磷酰胺(Cy)分别诱导小鼠DTH反应增强和减弱模型,观察不同剂量的WEDS对小鼠DTH反应的影响;以0.6%巯基乙醇酸钠诱生小鼠腹腔巨噬细胞,观察不同剂量的WEDS对小鼠腹腔巨噬细胞生成IL-1的影响;以Con A诱导T淋巴细胞增殖,观察不同浓度的WEDS体外对T淋巴细胞增殖的影响.以Con A诱导T淋巴细胞增殖,观察WEDS不同剂量、不同作用时间体内对T淋巴细胞增殖和IL-2生成的影响.结果:剂量为100,200和300mg·kg-1·d-1的WEDS对Cy诱导的小鼠免疫功能的增强和减弱均有显著的下调和提升作用;浓度为125～500μg·mL-1的WEDS对腹腔巨噬细胞分泌IL-1有显著的促进作用,超出上述范围之外浓度的WEDS对腹腔巨噬细胞分泌IL-1的促进作用显著减弱;浓度为62.5μg·mL-1的WEDS体外对T淋巴细胞增殖有显著的促进作用;剂量为100,200和300mg·kg-1·d-1的WEDS能显著促进Con A诱导的小鼠T淋巴细胞增殖、IL-2的分泌,其中200mg·kg-1·d-1的促进作用最为显著.结论:WEDS对小鼠的细胞免疫功能具有双向调节作用.     

巴戟天对人体及小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的:探讨巴戟天体外免疫调节的作用机制。方法:用体外细胞培养法观察巴戟天对丝裂原诱导的健康老人的淋巴细胞增殖及对丝裂原诱导的小鼠淋巴细胞增殖的影响及小鼠巨噬细胞产生肿瘤坏死因子(TNF)的影响。结果:巴戟天可促进刀豆蛋白A(ConA)活化的人体淋巴细胞的增殖;可促进ConA和细菌多糖(LPS)活化的小鼠淋巴细胞的增殖;并提高小鼠巨噬细胞产生TNF的水平。结论:研究结果为巴戟天做为免疫调节剂提供了细胞水平的实验依据。     

人参炔醇抑制实验性迟发型超敏反应

目的:考察人参炔醇(PAN)对实验性迟发型超敏反应的影响及可能作用途径。方法:应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)造成小鼠变态反应性接触性皮炎(ACD)模型,考察PAN诱导相给药对耳廓肿胀的影响,并进行病理组织学检查;MTT法检测PAN对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响。ELISA方法检测ConA刺激的脾细胞培养上清IFN-γ水平。结果:PAN10 mg.kg-1诱导相给药可明显抑制小鼠耳肿胀;病理组织学结果显示PAN可减轻模型小鼠局部水肿及血管扩张,减少淋巴细胞浸润;PAN对ConA诱导的T细胞增殖有明显的抑制作用,而对静息状态的脾细胞未观察到显著影响;PAN10μmol.L-1起明显抑制体外ConA刺激脾细胞的IFN-γ分泌,且作用在早期(6 h)即已呈现。结论:PAN对实验性迟发型超敏反应有显著的抑制作用,该作用可能与抑制T细胞增殖和IFN-γ的分泌有关。     

阿里红多糖体外免疫活性的研究

目的:探讨阿里红多糖(FoP)对小鼠体外免疫的调节作用。方法:采用体外淋巴细胞增殖实验考察FoP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度FoP单独作用及其与有丝分裂原ConA、LPS共同作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELSA)法检测不同浓度FoP体外刺激对小鼠脾淋巴细胞诱生白介素2(IL-2)、白介素13(IL-13)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的影响。结果:Fop在25~100μg/m L浓度范围内能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,并与Con A、LPS协同促进T、B淋巴细胞增殖,还能诱导脾淋巴细胞分泌IL-2、TNF-α。结论:FoP具有免疫促进作用。     

金宁方对环磷酰胺诱导免疫抑制小鼠的保护作用

目的探讨金宁方对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的保护作用。方法将30只小鼠随机分为模型组、金宁方组和正常组。第1、4、7天给予环磷酰胺75 mg/kg腹腔注射诱导免疫抑制小鼠模型,并于第1天灌胃给药,连续干预10 d。检测各组小鼠整体生存状况、血红蛋白、脾指数、脾淋巴细胞总数、外周血淋巴细胞等指标,并在体内外分别观察金宁方对淋巴细胞增殖率的影响。结果金宁方能够明显缓解环磷酰胺引起的小鼠体质量减轻,缓解免疫抑制小鼠的淋巴细胞数量减少,缓解环磷酰胺引起的脾脏缩小。在体内外实验中,金宁方能提高淋巴细胞增殖,在ConA诱导条件下更明显。结论金宁方能够明显改善小鼠经环磷酰胺干预后的副反应,保护机体免疫功能,特别对于脾指数和淋巴细胞数量具有明显的维持效应。其机制可能是通过增进T淋巴细胞发挥免疫调控作用。     

镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:探讨藏药镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠细胞和体液免疫功能的影响。方法:将60只昆明种小鼠随机分为6组:正常组、模型组、盐酸左旋咪唑组(25 mg/kg)及黄酮苷元高、中、低剂量组(336,168,84 mg/kg),每组10只。高、中、低剂量组分别灌胃给予不同剂量的黄酮苷元,正常组和模型组灌服等体积5%吐温-80溶液,共10天。第8天开始注射环磷酰胺制备免疫抑制小鼠模型,除正常组腹腔注射生理盐水外,其他各组分别腹腔注射环磷酰胺,共3天。采用ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验、NK细胞活性的测定、血清溶血素的测定方法观察镰形棘豆黄酮苷元对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果:与模型组比较,镰形棘豆黄酮苷元各剂量组能明显提高免疫抑制小鼠的淋巴细胞转化能力(P0.05)、NK细胞活性百分率(P0.05)和血清半数溶血值(HC_((50))(P0.05)。结论:镰形棘豆黄酮苷元能够提高环磷酰胺造成的免疫抑制小鼠的免疫功能。     

当归补血汤对荷瘤小鼠化疗后免疫功能的影响

目的 观察当归补血汤对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)化疗荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法 建立S180荷瘤小鼠模型后,随机分为4组,荷瘤对照组、CTX组、当归补血汤+CTX组及当归补血汤组.造模次日开始给药,共10 d,停药次日处死,测定脾脏和胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性、T淋巴细胞增殖能力.结果 当归补血汤可提高化疗荷瘤小鼠脾脏和胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性,同时还对刀豆素A(ConA)诱导的T淋巴细胞增殖有促进作用.结论 当归补血汤具有提高机体免疫功能,抵御化疗所引起的免疫功能下降的作用.     

补中益气汤的LC-MS分析及其对免疫抑制小鼠的调节作用

目的研究补中益气汤的主要化学成分及其对环磷酰胺免疫抑制小鼠的调节作用。方法采用LC-MS方法对补中益气汤进行了液相和质谱分析,通过MTT法测定补中益气汤对环磷酰胺免疫抑制小鼠的T、B淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响。结果补中益气汤中主要化学成分是多糖、黄酮类和皂苷类化合物,能够显著提高环磷酰胺免疫抑制小鼠的T、B淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性。结论LC-MS方法可以发展成为复方有效成分研究中一个有效手段,用来阐明复方药理作用的物质基础。     

香菇菌多糖对免疫低下小鼠的免疫调节作用

香菇菌多糖能使氢化可的松诱发小鼠腹腔巨噬细胞功能低下和外周血T淋巴细胞百分率减少,醋酸氢化泼尼松诱发小鼠网状内皮系统吞噬功能降低恢复正常,并能恢复环磷酰胺抑制的小鼠迟发过敏反应,促进ConA、PHA诱导淋巴细胞增殖作用。