冠心康对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞形态结构和Caspase-3活性的影响

目的观察冠心康对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞形态结构和Caspase-3活性的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组,每组10只。冠心康组灌胃给予冠心康,盐酸地尔硫卓组灌胃给予盐酸地尔硫卓,假手术组和MIRI模型组于相同时间分别灌胃给予等容积的0.9%NaCl溶液,各组术前灌胃均每天1次,连续7天。灌胃7天后,采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30 min、再灌注2 h复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。造模后,在MIRI结扎线以下区域至心尖取材,运用常规苏木素-伊红(HE)染色,光镜下用图形分析系统定量观察单位视野全部心肌细胞核染色部分的面积、积分光密度,采用生化法检测Caspase-3活性。结果 MIRI模型组大鼠心肌细胞结构破坏,冠心康组大鼠心肌细胞保持完好。与假手术组比较,MIRI模型组大鼠单位视野全部心肌细胞核染色部分的面积和积分光密度显著降低(P0.01);冠心康组和盐酸地尔硫卓组则显著升高,与MIRI模型组比较差异有统计学意义(P0.01);MIRI模型组大鼠心肌组织Caspase-3活性较假手术组明显升高(P0.01),冠心康组和盐酸地尔硫卓组Caspase-3活性则较MIRI模型组明显降低(P0.01)。结论冠心康对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织具有保护作用,其机制与冠心康抑制心肌组织Caspase-3活性有关。     

中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤（MIRI）心肌细胞相关凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、MIRI模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注2h复制大鼠MIRI模型,分别以HE染色、TUNEL法及免疫组织化学法检测心肌组织病理学、心肌细胞凋亡指数、心肌细胞Bcl-2、Bax的阳性表达。结果 MIRI组与假手术组比较心肌细胞凋亡指数值显著升高（P〈0.01）,而冠心康组明显降低（P〈0.01）;抑凋亡因子Bcl-2在MIRI后表达明显降低,而促凋亡因子Bax表达则明显升高,冠心康可明显升高Bcl-2的表达,同时降低Bax的表达（P〈0.01）。结论中药复方冠心康对大鼠MIRI心肌细胞具有明显的保护作用,其作用机制与调控心肌细胞的凋亡因子Bcl-2、Bax的表达有关。     

山楂叶原花青素对乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究山楂叶原花青素对缺血再灌注损伤心肌细胞的直接作用,阐明山楂叶原花青素治疗缺血性心脏病的机理.方法:体外培养大鼠乳鼠原代心肌细胞,模拟在体心肌缺血再灌注损伤,即复制缺氧.复氧损伤模型;使用山楂叶原花青素提取物进行干预;酶反应动力学法测定细胞LDH漏出率,MTT法测定细胞活力,以观察药物疗效;硫代巴比妥酸法测定细胞匀浆MDA含量,羟胺法测定细胞匀浆SOD活性,对药物的治疗机制做进一步探讨.结果:24～60 mg·L~(-1)的山楂叶原花青素浓度依赖性地抑制缺氧复氧导致的心肌细胞LDH漏出(与模型组比较均P<0.01),提高受损心肌细胞活力(与模型组比较,24～48 mg·L~(-1)各剂量组均P<0.05,60 mg·L~(-1)组P<0.01),降低心肌细胞MDA含量(与模型组比较,均P<0.01),提高SOD活性(与模型组比较24 mg·L~(-1)组P<0.05,其余均P<0.01).结论:山楂叶原花青素对体外培养的乳鼠心肌细胞的缺血再灌注样损伤具有显著的治疗作用,这一作用可能与它提高细胞抗氧化能力,抑制脂质过氧化损伤有关.山楂叶原花青素对缺血再灌注损伤心肌细胞的直接保护作用可能是其治疗缺血性心脏病的机制之一.     

β-细辛醚对缺血再灌注损伤心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的观察石菖蒲有效成分β-细辛醚对缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞线粒体膜电位(MMP)的影响。方法采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立心肌细胞MIRI模型,将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞分6组:正常对照组、MIRI模型组、β-细辛醚高、中、低剂量组(25,12.5,6.25μg/mL)、基质组。利用流式细胞术(FCM)检测MMP平均荧光强度。结果MIRI模型组心肌细胞MMP明显降低,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05);β-细辛醚能不同程度升高MMP,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论β-细辛醚能有效抑制MIRI心肌细胞线粒体的损伤,稳定MMP。     

壮药扶芳藤对兔缺血再灌注心肌细胞超微结构的影响

目的:观察扶芳藤对兔缺血再灌注心肌细胞超微结构的影响。方法:48只新西兰大白兔随机分为假手术组、缺血再灌注组、卡托普利组、扶芳藤大剂量组、扶芳藤中剂量组、扶芳藤小剂量组,每组8只,分别灌胃给药。实验结束以透射电镜观察心肌细胞超微结构。结果:缺血再灌注组心肌细胞严重水肿,部分肌节结构破坏,肌丝断裂、溶解,线粒体排列紊乱、肿胀,嵴部分断裂。卡托普利组、扶芳藤大剂量组可以明显减轻缺血再灌注时心肌细胞结构的损害,心肌细胞超微结构形态较好,肌丝排列整齐,肌节明暗带清晰可见,大部分细胞膜完整,核膜清楚,核仁明显,线粒体排列较规整,外膜清晰,嵴排列较规则。提示扶芳藤的这种保护作用呈剂量依赖关系。结论:扶芳藤可以减轻心肌细胞超微结构损伤,从而抑制缺血再灌注心肌细胞损伤,而且这种保护作用呈量效关系。     

冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道的影响

目的 观察中药复方冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾（ATP-sensitive potassium channel,KATP）通道的影响,进一步探讨冠心康保护心血管、抗心肌缺血可能的作用机制。 方法 随机选取Wistar大鼠分为正常组、模拟缺血再灌注损伤模型组、模型加格列苯脲组、模型加吡那地尔组、模型加冠心康组、模型加冠心康加格列苯脲组,每组8只。用无钙台式液灌流10 min,停灌30 min再灌注45 min模拟心肌缺血再灌注损伤模型。检测各组心肌细胞钙-镁-ATP（Ca2+-Mg2+-ATP）酶、钠-钾-ATP（Na+-K+-ATP）酶活性及全细胞膜片钳技术的电流电压钳模式记录各组心室肌细胞的ATP敏感钾通道（KATP通道）电流变化。 结果 在缺血的基础上,中药复方冠心康可使KATP通道进一步开放,通道电流明显增大,与KATP通道开放剂吡那地尔具有同等开放效应（P >0.05）。与模型组比较,冠心康组Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量明显增高（P <0.05）。 结论 中药复方冠心康对于心肌缺血再灌注损伤具有一定的干预作用,促进KATP通道开放,减轻Ca2+内流,抑制Ca2+超载可能是冠心康在心肌缺血过程中发挥干预作用的有效途径。     

抗凝护心Ⅱ号对大鼠心肌缺血再灌注损伤血清cTn-T含量的影响

目的:探讨抗凝护心Ⅱ号对大鼠心肌缺血再灌注损伤血清cTn-T含量的影响。方法:取50只清洁级Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、抗凝护心Ⅱ号高剂量组、抗凝护心Ⅱ号低剂量、通心络组。开胸结扎冠状动脉,造成心肌缺血,30min后放松再灌注建立心肌缺血再灌注模型。采用酶联免疫吸附定量测试血清cTn-T含量。结果:模型组与假手术组cTn-T比较有统计学意义(P<0.05),抗凝护心Ⅱ号高、低剂量组与模型组cTn-T对比有统计学意义(P<0.05,P<0.05),抗凝护心Ⅱ号高、低剂量组与通心络组比较有统计学差异,低剂量组效果低于通心络组,高剂量组优于通心络组。结论:抗凝护心Ⅱ号对大鼠心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

扶正补虚活血中药对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞保护作用的研究

目的：观察具有扶正补虚活血作用的中药对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞的保护作用。方法：制备含药血清,将培养好的心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧复氧（AR）组和麦贞花＋AR组,采用自动化分析仪检测LDH活性,RT-PCR检测AE3的表达。结果：与正常对照组比较,AR组细胞悬液中LDH增加3倍;麦贞花＋AR组与AR组比较细胞悬液中的LDH活性降低65.8%。AR组AE3mRNA表达较正常对照组增加,有显著性差异。麦贞花＋AR组心肌细胞AE3mRNA不仅均较正常对照组表达显著增加,且较AR组也显著上调。结论：本研究结果提示麦贞花颗粒对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与诱导内源性心肌保护物质AE3生成有关。     

丹参对肢体缺血再灌注损伤保护的实验研究

目的：探讨肢体缺血再灌注损伤前后微循环变化及丹参的保护作用。方法：24只成年新西兰大耳白兔随机分成二组，以气囊止血带造成兔左下肢缺血再灌注损伤模型。实验组分别在缺血前及再灌注前静注丹参，观测骨骼肌缺血再灌注前后微循环变化。结果：对照组：血流缓慢、红细胞严重聚集、大量白细胞附壁和白色微栓形成，无复流现象严重；实验组经丹参保护，微循环障碍轻，骨骼肌组织损伤轻。结论：丹参通过疏通微循环对肢体缺血再灌注损伤起保护作用。     

冠心丹参片对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

 目的观察冠心丹参片对健康成年SD大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法SD大鼠以结扎冠脉30min再通90min造成心肌缺血再灌注损伤模型,通过观察血流动力学、生物化学和组织学指标,评价大鼠缺血再灌注前冠心丹参片预处理对左心室收缩压(LVSP)、左心室发展压(LVDP′)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dt_max)等指标的影响;通过测定再灌注90min后血中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性和心肌组织病理学观察,对药物保护心肌作用进行评价。结果大鼠冠心丹参片100,200mg·kg^-1,ig可有效改善缺血再灌注心脏的缩舒功能;降低缺血再灌注末血中LDH和CK活性;组织病理学检查表明:与溶剂对照组比较,冠心丹参片预处理组能明显减轻心肌组织的损伤。结论冠心丹参片有抗大鼠缺血再灌注引起的心肌损伤作用。     

四逆汤含药血清对阿霉素诱导心肌细胞损伤机制影响的研究

目的:观察四逆汤含药血清对阿霉素(ADR)引起的培养乳鼠心肌细胞毒性的影响。方法:采用原代培养的Wister大鼠乳鼠心肌细胞,以1.0μg/mL的ADR造成急性心肌细胞中毒模型,测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、心肌细胞丙二醛(MDA)含量、心肌细胞搏动频率及MTT分析法测定心肌细胞活力,测定过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、超氧化物歧化酶(Cu-SOD),观察大鼠生存率的变化。结果:四逆汤含药血清对ADR引起的心肌细胞损伤可减少LDH漏出量和心肌细胞内MDA含量,并改善心肌细胞活力和搏动频率,改善Cu-SOD的活性,延长大鼠生存期。结论:四逆汤含药血清对ADR引起的心肌细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制与其抑制ADR引起的脂质过氧化损伤有关。     

螺内酯对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨螺内酯对大鼠心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响。方法:选择30只健康SD大鼠,采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法复制心肌缺血再灌注的动物模型,随机分为三组:假手术组(n=10)、缺血再灌注(MI/RI)组(n=10)和药物组(n=10)。光镜及电镜观察标本病理形态改变,检测各组再灌注3h后心肌局部凋亡相关因子bcl-2、fas的表达,比较各组间差异。结果:与假手术组比较,MI/RI组中Fas含量升高(P>0.01),Bcl-2含量明显减少(P>0.05);药物组较MI/RI组Fas含量明显降低(P>0.05),Bcl-2含量明显增加(P>0.05)。结论:螺内酯减轻MI/RI中心肌细胞凋亡程度。     

β-细辛醚对缺血／再灌注损伤心肌细胞的保护作用

目的观察β-细辛醚对缺血／再灌注损伤（MI／RI）心肌细胞的保护作用。方法体外培养原代乳鼠心肌细胞，采用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）诱导心肌细胞MI／RI，测定细胞存活率（MTT法）和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量。结果在MI／RI模型中，β-细辛醚能显著提高细胞存活率，明显降低培养液中LDH、CK的含量。结论β-细辛醚对MI／RI心肌细胞具有显著的保护作用。     

氧自由基与缺血再灌注损伤

血管阻塞性疾病已成为人类致死的重要原因,为此而实行的血管再通可能会挽救有活力的细胞和组织,然而部分患者恢复血运后,组织的预后非但没有好转反而更糟糕,我们把这称为缺血再灌注损伤。其机制和预防的研究已成为基础和l临床研究的重点方向,本文就其中氧自由基增加作以较全面的综述,并对目前研究的热点问题——缺血前处理、后处理作相应介绍。     

卡维地洛对大鼠急性缺血再灌注损伤的心肌保护作用研究

 目的研究卡维地洛对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法将大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(IRI)组、卡维地洛(CVD)组。结扎左冠状动脉前降支致缺血30min后复灌4h,制作心肌缺血再灌注损伤模型。于再灌4h末测定左室收缩压(LVP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP=LVP-LVEDP)、左室最大收缩及舒张速度(±dp/dt);测定血液中肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量以及心肌梗死范围。结果与假手术组相比,IRI组LVP,LVDP,±dp/dt及SOD降低,LVEDP,CK,LDH及MDA均升高,伴梗死范围扩大(P<0.01);与IRI比较,CVD组LVP,LVDP,±dp/dt及SOD升高,LVEDP,CK,LDH及MDA均降低,伴梗死范围缩小(P<0.01)。结论卡维地洛具有防止心肌再灌注损伤的作用,该作用与其β受体阻断和抗氧化有关。     

缺血后处理对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 观察在体条件下缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及可能的途径.方法 建立大鼠在体缺血再灌注模型,将30只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组、缺血预适应组.于再灌注末测定心肌酶,超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量,并测定心肌组织梗死面积.结果 与缺血再灌注组相比,缺血后处理组与缺血预适应组心肌梗死面积明显减小,血浆肌钙蛋白I及MDA的含量均降低（P〈0.05）,血浆SOD活性升高（P〈0.05）.结论 缺血后处理可减轻心肌缺血再灌注损伤,具有心肌保护效应.     

冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡影响的实验研究

目的:探讨冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤细胞凋亡的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(10只)、药物组(10只)。模型组和药物组大鼠通过穿线结扎左冠状动脉前降支与松开的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型(心肌缺血30min,再灌注3h)。假手术组只穿线不结扎。药物组大鼠在模型建立前5天开始每天给予冠心舒通胶囊,每次按1.5g/kg取药,溶于生理盐水,6mL/kg灌胃,每天两次,假手术组和模型组只给予同等剂量的生理盐水灌胃。各组心肌缺血30min,再灌注3h取材,采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数(AI);免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax基因蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组Bax表达增强,Bcl-2表达减弱(P<0.01);与模型组比较,冠心舒通胶囊组,AI、Bax表达下降(P<0.01),Bcl-2表达上调(P<0.05)。结论:冠心舒通胶囊通过抑制心肌细胞凋亡,下调Bax基因蛋白表达,上调Bcl-2基因蛋白表达,起到心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

骨骼肌缺血再灌注损伤机制研究进展

良好的血液循环使组织细胞获得充足的氧和营养物质供应并排出代谢产物.各种原因造成血液供给中断,灌注量减少,都会引起组织和细胞的缺血性损伤.早在20世纪60年代Blebea[1]等观察到缺血组织再灌注后,其损伤程度明显大于灌注前,由此提出了缺血再灌注损伤的概念,即恢复血液灌注后,部分组织细胞功能代谢障碍及结构破坏反而更重,这种血液再灌注使缺血性损伤进一步加重的现象称为缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,I/R).这种情况在临床中相当多见,如手术过程中止血带的绑扎,器官移植,断肢再植术等.骨骼肌缺血再灌注损伤的发病机制尚未彻底阐明,本文就近年来骨骼肌缺血再灌注损伤的发病机制的研究综述如下.     

固本抑瘤Ⅱ号及其拆方含药血清诱导MCF7细胞自噬的研究

目的:研究固本抑瘤Ⅱ号(GYⅡ)及其拆方大鼠含药血清对人乳腺癌细胞MCF7自噬的影响。方法:制备GYⅡ及其拆方大鼠含药血清,培养MCF7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制,单丹磺酰尸胺(MDC)及Hoechst 33342双染色荧光显微镜、微管相关蛋白1轻链3(MAP-LC3)蛋白Ⅱ(MAP-LC3-Ⅱ)染色激光共聚焦及透射电镜观察自噬,MAP-LC3-Ⅱ/DNA双参数流式细胞术同步分析细胞自噬与细胞周期。结果:与空白组比较,全方组、益气组含药血清处理MCF7细胞表现出细胞抑制效应,活血组、鸡血藤组含药血清处理MCF7细胞均表现出明显的自噬。结论:GYⅡ全方和益气组具有抑制MCF7细胞增殖的效应,而活血组和鸡血藤组未见抑制作用,可能与该两组含药血清诱导MCF7细胞自噬有关。