寻常型银屑病患者骨髓间充质干细胞生物学特性研究

本研究通过比较寻常型银屑病患者与对照组骨髓间充质干细胞(MSC)生物学特性的差异,揭示寻常型银屑病患者MSC的异常.     

细胞因子修饰的间充质干细胞

背景：将细胞治疗与基因治疗相结合,通过不同的细胞因子对间充质干细胞的修饰,不但可以赋予其新的能力,更能增强其本身的功能。但是在西北高原的低氧环境下,间充质干细胞的功能发挥就会受到一定的限制。 目的：文章综述了间充质干细胞近年来的研究进展,在与细胞因子联合应用后功能上的扩展,并寻找新的手段使其在高原低氧环境下充分发挥功能。 方法：应用计算机检索CNKI数据库和PUBMED数据库中关于间充质干细胞的文章,以“间充质干细胞;低氧诱导因子;肝细胞生长因子”或“mesenchymal stem cells; hypoxia inducible factor;hepatocyte growth factor”为检索词进行检索。检索文献总量为71篇,选择文章内容与间充质干细胞及其临床应用有关方面的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。 结果与结论：最终纳入35篇符合标准的文献。通过应用细胞因子的转染,将细胞因子的功能与间充质干细胞相结合,使得间充质干细胞的功能更全面,在高原低氧的恶劣环境下,依然能够有效的发挥临床效用,满足其临床上的治疗需求。     

间充质干细胞对类风湿性关节炎患者细胞因子的调节作用

目的 探讨间充质干细胞分泌物对类风湿关节炎细胞因子的调节作用,以期发现有效缓解类风湿关节炎滑膜炎症、减少炎症细胞因子产生的治疗方法.方法 随机选取49例类风湿关节炎患者作为研究对象,收集患者流行病学信息资料,采用ELISA方法检测间充质干细胞分泌物刺激下的患者外周血淋巴细胞分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-...     

人胎盘间充质干细胞生物学特性和抗凋亡细胞因子的分泌

背景：由于骨髓源性间充质干细胞的提取造成患者的二次损伤,也存在病毒、细菌污染的可能,扩增、分化能力不高,为此,实验从胎盘中提取间充质干细胞进行研究,了解其分泌抗凋亡细胞因子的情况,探讨其代替骨髓间充质干细胞的可能性。 目的：体外分离培养、扩增人胎盘源性间充质干细胞,研究其基本生物学特性和抗凋亡细胞因子的分泌水平。 方法：提取人胎盘间充质干细胞,显微镜下观察细胞形态;采用流式细胞仪测定细胞周期、凋亡情况及表面标记的表达,研究其增殖和生长特性。ELISA检测血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、肝细胞生长因子的分泌水平。 结果与结论：在体外培养条件下,人胎盘间充质干细胞为贴壁生长,为成纤维细胞样,核浆比大,细胞增殖活跃,凋亡率低,可分泌能抑制细胞凋亡的细胞因子如血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、肝细胞生长因子。     

系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞细胞因子分泌及其与病情活动的相关性研究

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者骨髓间充质干细胞（MSCs）细胞因子分泌及其与疾病活动的相关性.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离法对11例SLE患者和6例正常人骨髓MSCs进行分离培养,流式细胞术鉴定MSCs.取P2代细胞,半定量RT-PCR检测SLE患者骨髓MSCs白细胞介素-6（IL-6）,IL-7,IL-11,巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）和干细胞因子（SCF）的表达.结果 SLE患者MSCs均表达CD29、CD44和CD105,不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR.两组P2代MSCs均表达IL-6、IL-7、IL-11、M-CSF和SCF.SLE患者组MSCs IL-6、IL-7表达降低（P＜0.01）,IL-7的表达和SLE的活动评分（SLEDAI）呈负相关（r=-0.891,P＜0.05）.结论 SLE患者MSCs细胞因子分泌异常,可能与SLE血液系统损害及病情活动相关.     

系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞细胞因子分泌及其与病情活动的相关性研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)细胞因子分泌及其与疾病活动的相关性.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离法对11例SLE患者和6例正常人骨髓MSCs进行分离培养,流式细胞术鉴定MSCs.取P2代细胞,半定量RT-PCR检测SLE患者骨髓MSCs白细胞介素-6(IL-6),IL-7,IL-11,巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和干细胞因子(SCF)的表达.结果 SLE患者MSCs均表达CD29、CD44和CD105,不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR.两组P2代MSCs均表达IL-6、IL-7、IL-11、M-CSF和SCF.SLE患者组MSCs IL-6、IL-7表达降低(P＜0.01),IL-7的表达和SLE的活动评分(SLEDAI)呈负相关(r=-0.891,P＜0.05).结论 SLE患者MSCs细胞因子分泌异常,可能与SLE血液系统损害及病情活动相关.     

寻常性银屑病患者皮损及尿液中表皮生长因子的检测

应用＾１２５Ｉ人类表皮生长因子放射免疫分析法对３０例寻常性银屑病患者及２０例正常人皮损及尿液中ＥＧＦ进行了检测。结果显示：银屑病进行期皮损表皮中ＥＧＦ含量显著高于正常人及恢复期表皮和未受累表皮。而银屑病患者尿液中ＥＧＦ在银屑病各期及正常人之间比较均无显著性差异。提示ＥＧＦ可能在银屑病表皮的过度增殖及异常分化中起重要作用。     

银屑病患者与正常人皮肤间充质干细胞的生物学特性

BACKGROUND:Skin-derived mesenchymal stem cells may reflect the onset of psoriasis. OBJECTIVE:To analyze the biological characteristics of skin-derived mesenchymal stem cells in psoriasis patients. METHODS:Skin-derived mesenchymal stem cells from 30 patients with psoriasis and 20 healthy controls were isolated and cultured by trypsin. Flow cytometry was used to detect the cellular immune phenotypes CD34, CD44, CD29, CD45, CD90, CD105, CD73 and HLA-DR. The mesenchymal stem cells were induced by the corresponding cartilage, osteogenic and osteogenic inducing agents, to identify the multi-directional differentiation ability. The cell proliferation curve was plotted at passage 3, and the levels of transforming growth factor-β1 and epidermal growth factor in culture supernatant were detected by ELISA assay. RESULTS AND CONCLUSION:Under an inverted phase contrast microscope, primary skin-derived mesenchymal stem cells isolated from patients with psoriasis and normal controls both exhibited heterogeneity. In the two groups, CD29, CD90, CD44, CD73 and CD105 were highly expressed, and CD45, CD34, and HLA-DR were lowly expressed. Under certain conditions, skin-derived mesenchymal stem cells were induced to differentiate into adipocytes, osteoblasts or chondrocytes. Proliferation of skin-derived mesenchymal stem cells in the psoriasis group was significantly faster than that in control group, but the final number of cells in the two groups tended to be consistent. The levels of transforming growth factor-β1 and epidermal growth factor in the psoriatic skin had no correlation with the severity of the disease (P > 0.05). Compared with the control group, the epidermal growth factor level in the cell supernatant was significantly higher in the psoriasis group (P < 0.01), while the level of transforming growth factor-β1 was significantly lower (P < 0.01). These results showed that there is heterogeneity in the morphology of skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis patients, and the biological activity of mesenchymal stem cells is abnormal.     

间充质干细胞移植中的旁分泌作用

间充质干细胞是细胞移植和组织工程中理想的种子细胞,然而在移植中发挥治疗作用的具体机制仍然不明确。间充质干细胞可以分泌多种细胞因子和生长因子,促进周围细胞的存活,发挥旁分泌作用。间充质干细胞可以通过调节免疫,促进周围细胞的增殖,抑制凋亡以及促血管生成作用发挥其在细胞移植治疗中的作用。     

骨髓间充质干细胞对异体T细胞几种细胞因子分泌的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对异体T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的影响,从而进一步探讨MSC诱导免疫耐受的机制。方法:将培养了3代后的MSC经照射后作为基底层细胞,接种分离的异体T淋巴细胞。共培养7天后,用ELASA方法检测上清中的上述四种细胞因子的蛋白含量,同时计数T淋巴细胞数量的变化,应用流式细胞仪检测与MSC共孵育前后T淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD25的变化。结果:(1)ELASA检测IFN-γ分泌量为667·07±14·76pg/ml;IL-10为46·19±1·41pg/ml;IL-2为33·01±5·92pg/ml;IL-4为0·15pg/ml。(2)共孵育组T淋巴细胞在数量上明显减少。(3)CD8+细胞数增多,CD25+细胞减少。结论:骨髓MSC在体外与异体T淋巴细胞共孵育后IFN-γ高分泌,可能与共孵育后T淋巴细胞亚群的改变有关。这一研究结果为预防HLA不相合的骨髓移植的GVHD的发生提供了一条新的思路。     

银屑病患者血清对真皮间充质干细胞基因表达及功能的影响

目的:探讨银屑病患者血清对真皮间充质干细胞(DMSCs)免疫功能的影响.方法:用银屑病患者血清作用于正常DMSCs,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time-PCR)检测IL-10、PGE2、TLR4的mRNA表达水平,同时检测作用后的DMSCs对PHA活化的T细胞增殖的抑制能力.结果:银屑病患者血清作用后的D...     

银屑病患者损伤处皮肤间充质干细胞对T细胞增殖的影响

BACKGROUND:Studies have found abnormalities in the biological activity and cytokine levels of bone marrow mesenchymal stem cells from psoriasis patients, while the biological activity of skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis lesions is rarely reported.  OBJECTIVE: To explore the influences of skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis lesions on T cell proliferation METHODS:After isolation and culture, skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis lesions and normal controls were separately co-cultured with peripheral blood T cells. T cell proliferation was detected using MTT assay, and levels of epidermal growth factor and transforming growth factor β1 in cell supernatant determined using ELISA method. RESULTS AND CONCLUSION:Skin-derived mesenchymal stem cells from both psoriasis lesions and normal controls significantly inhibited T cell proliferation (P < 0.05). Furthermore, skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis lesions exhibited a weaker inhibitory effect on T cell proliferation than normal skin-derived mesenchymal stem cells (P < 0.05). Skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis lesions significantly increased epidermal growth factor but reduced transforming growth factor β1 compared with the normal skin-derived mesenchymal stem cells (P < 0.05). In conclusion, maybe the imbalances of growth factor levels due to skin injury elicit a decrease in the inhibitory effect of skin-derived mesenchymal stem cells from psoriasis lesions on T lymphocytes.     

间充质干细胞体外对ITP患者T淋巴细胞分泌功能的影响

目的： 体外观察间充质干细胞（MSCs）对特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者T淋巴细胞分泌细胞因子功能的影响。方法: 采用Ficoll分离和体外贴壁、传代培养,扩增出骨髓MSCs;通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取ITP患者外周血T淋巴细胞。以经丝裂霉素（MMC）处理后不同数量（2×103、1×104、5×104 cells/well）的MSCs作为基底层细胞,接种体外分离纯化的异体ITP患者T淋巴细胞,分别于2 d、4 d、6 d后各自收集培养上清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法动态测定T淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化。结果: ITP患者T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IFN-γ较正常人高(P<0.05),IL-4、IL-10较正常人低(P<0.05)。MSCs可显著抑制ITP患者或正常对照组T淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ(P<0.05),且随MSCs数量的增加,抑制增强(P<0.05),共培养4 d、6 d时作用明显强于2 d时(P<0.05);MSCs可促进ITP患者T淋巴细胞分泌IL-4、IL-10 (P<0.05),且随MSCs量的增加,促进作用增强(P<0.05),对IL-10的作用随时间延长而增强(P<0.05),但对IL-4的作用在培养第2 d、4 d、6 d时无显著差异(P>0.05);在正常对照组,当MSCs数量>1×104可以促进T淋巴细胞分泌IL-4 与IL-10 (P<0.05),且随MSCs数量的增加,作用增强(P<0.05),共培养4 d、6 d时作用明显强于2 d时(P<0.05)。结论: MSCs能够在体外调节ITP患者辅助性T细胞1 (Thl)和辅助性T细胞2 (Th2)反应平衡,可使ITP患者Th1极化状态部分改善。     

强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞调控巨噬细胞的功能异常

 BACKGROUND: Ankylosing spondylitis is an autoimmune disease at high inflammatory state, and its pathogenesis is still unclear. Besides, there is a lack of entirely satisfactory curative strategies.     

寻常型银屑病皮损中免疫复合物观察

<正> 银屑病的发病机理有免疫因素参与,已受到重视.用直接免疫荧光(DIF)法检测所得结果,国内外报道不尽一致。现将我们所作的33例银屑病的DIF检测结果分析如下。     

寻常型银屑病患者皮损表皮TNFa受体及其mRNA的表达

目的：探讨肿瘤坏死因子TNFa受体及其mRNA在寻常型银屑病皮损表皮中的表达及其意义。方法：采用RT-PCR和免疫组织化学方法对27例寻常型银屑病患者皮损表皮及16例正常对照表皮TNFa受体及其mRNA的表达进行了检测。结果：正常人皮肤表皮TNFa受体及其mRNA无表达；银屑病皮损表皮TNFa受体及其mRNA高表达。结论：银屑病患者皮损表皮TNFa受体的异常上调表达可能是造成银屑病发生和发展的原因之一。     

骨髓异常增生综合征患者骨髓来源的间充质干细胞免疫功能异常

目的 研究骨髓异常增生综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)难治性贫血(refractory anemia,RA)型患者(MDS-RA)和健康成年人骨髓来源的间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cell,BMSC)的免疫学特征,比较它们是否存在免疫功能的异常.方法 分离MDS-RA和健康成年人来源的间充质干细胞,分别检测它们对T细胞周期、活化、抑制和增殖的作用情况.结果 MDS-RA的BMSC抑制T细胞增殖和活化能力均减弱,但是抑制活化的T细胞凋亡的作用反而增强.结论 MDS-RA患者骨髓来源的MSC存在明显的免疫调节功能缺陷,MDS-RA患者骨髓微环境可能存在免疫异常,如果使用MDS患者自体的MSC移植治疗可能不是一种很好的选择.对于MDS患者最好是选用异基因的MSC移植.     

间充质干细胞治疗脊髓小脑性共济失调

背景：脊髓小脑性共济失调是临床上较常见的以进行性加重的四肢共济运动障碍为主要临床表现的中枢神经系统变性疾病,常规药物治疗效果欠佳。 目的：观察自体骨髓间充质干细胞以及异体脐带间充质干细胞输注治疗脊髓小脑性共济失调的临床效果。 方法：对接受间充质干细胞治疗的27例确诊脊髓小脑性共济失调患者进行综合统计分析,其中6例行自体骨髓间充质干细胞腰穿治疗,21例行异体脐带间充质干细胞腰穿结合静脉输注治疗,两组患者均采用世界神经病联合会国际合作共济失调量表(International Cooperative Ataxia Rating Scale,ICARS)对患者治疗前后神经功能进行评定。 结果与结论：所有27例脊髓小脑共济失调患者行间充质干细胞治疗过程中以及治疗前后均未及明显不良反应。其中6例患者采用自体骨髓间充质干细胞治疗后效果均不明显,另外21例患者行异体脐带间充质干细胞输注治疗,治疗后3个月与治疗前比较,患者自觉症状均有一定程度改善,ICARS评分明显降低(P < 0.05)。说明脐带间充质干细胞治疗是安全的,可以一定程度地改善脊髓小脑性共济失调患者的临床症状,提高患者生活质量。     

细胞因子体外诱导外胚间充质干细胞向树突状细胞分化

目的:探讨外胚间充质干细胞(EMSC)向树突状细胞(DCs)分化的能力.方法:利用基因重组大鼠GM-CSF和IL-3连续诱导17 d,在第19天加入基因重组大鼠TNF-α继续诱导,观察其形态、超微结构、表面标记、混合淋巴细胞反应、IL-12分泌功能等,以SD大鼠骨髓间充质干细胞向DC分化作为对照.结果:经过诱导的EMSC出现细长伪足和毛刺,变为半贴壁状态;扫描电镜显示长的细胞突起和许多毛刺;其表面标记与骨髓来源的DC相似;混合淋巴细胞反应证实其可以刺激淋巴细胞增殖;诱导后的EMSC有分泌IL-12功能.结论:EMSC在体外经诱导可向DC分化.