深低温停循环大鼠大脑缺氧诱导因子-1α和信号转导分子2表达情况

目的探讨深低温停循环大鼠大脑缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)和信号转导分子2(signal transduction molecule 2,Smad2)的表达情况,及HIF-1α和Smad2在深低温脑保护中的作用。方法 39只大鼠随机分为深低温停循环组、常温停循环组和常温不停循环组,每组各13只。深低温停循环组在肛温20℃下循环10min停循环10min,常温停循环组在肛温36.5~37.0℃循环10min停循环10min,常温不停循环组大鼠在肛温36.5~37.0℃体外循环20min。观察3组大鼠大脑脑组织组织病理变化,采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织HIF-1α和Smad2蛋白表达情况。结果常温停循环组大鼠大脑少量神经元肿胀、神经元变性、胶质细胞增生、炎细胞浸润;深低温停循环组和常温不停循环组大鼠大脑神经细胞的数量和形态均正常,无明显病理学改变;深低温停循环组大鼠脑组织中HIF-1α和Smad2呈高水平表达,常温停循环组大鼠脑组织中HIF-1α和Smad2呈中等水平表达,常温不停循环组大鼠脑组织中HIF-1α和Smad2仅少量表达;深低温停循环组大鼠脑组织HIF-1α和Smad2蛋白平均灰度值(101.32±9.23、104.36±7.12)明显低于常温停循环组(123.35±7.26、113.42±7.33)和常温不停循环组(148.14±5.47、124.75±6.36)(P0.05),常温停循环组低于常温不停循环组(P0.05)。结论停循环能使大鼠脑组织中HIF-1α和Smad2表达水平升高,深低温能促进停循环脑组织中HIF-1α和Smad2表达增加,发挥脑保护作用。     

海马线粒体通透性转换孔在深低温停循环大鼠模型中的开闭情况研究

目的探讨深低温停循环大鼠模型海马线粒体通透性转换孔的开闭情况,及深低温对脑保护的作用机制。方法21只大鼠随机分为深低温停循环组、常温停循环组和对照组,每组7只。深低温停循环组大鼠体温降至20℃以下体外循环10min,维持深低温条件下停循环10min;常温停循环组大鼠常温体外循环10min,停循环10min;对照组大鼠常温体外循环20min,不降温不停循环。采用酯化钙黄绿素钴荧光技术检测3组大鼠海马组织荧光染色情况,采用Western blot法检测海马线粒体细胞色素C表达情况。结果对照组海马组织荧光亮度最强,常温停循环组荧光亮度最弱,深低温停循环组荧光亮度介于对照组和常温停循环组之间;深低温停循环组和对照组大鼠海马组织荧光强度值(1 387.9±19.3、1 774.6±48.3)和线粒体细胞色素C灰度值比(16.82±1.47、23.54±1.86)高于常温停循环组(1 125.6±37.4、12.31±1.43)(P0.05)。结论停循环能使大鼠海马线粒体通透性转换孔开放增加,深低温能降低海马线粒体通透性转换孔的开放数量,具有脑保护作用。     

深低温停循环对大鼠大脑信号转导分子4和Nestin蛋白表达的影响

目的 探讨深低温停循环对大鼠大脑信号转导分子4(brain signal transduction molecule 4,Smad4)和Nestin蛋白表达的影响。方法 45只SD大鼠随机分为深低温停循环组、常温停循环组和常温不停循环组各15只,建立体外循环后3组大鼠肛温分别控制在20.0℃、36.5~37.0℃、36.5~37.0℃,深低温停循环组和常温停循环组大鼠体外循环10min后停循环10min,常温不停循环组大鼠体外循环20min后处死大鼠取额顶叶皮质脑组织行组织病理学HE染色,采用Western blot法检测大鼠脑组织Smad4和Nestin蛋白表达情况。结果 常温停循环组大鼠大脑呈轻度缺血性改变,深低温停循环组和常温不停循环组大鼠大脑椎体细胞核仁清楚,呈椭圆形;深低温停循环组大鼠脑组织中Smad4和Nestin呈高水平表达,常温停循环组大鼠脑组织中Smad4和Nestin呈中等水平表达,常温不停循环组大鼠脑组织中Smad4和Nestin呈少量表达;深低温停循环组大鼠大脑组织Smad4(105.23±8.04)和Nestin(103.98±4.16)平均灰度值明显低于常温停循环组(118.38±7.24、120.52±6.73)和常温不停循环组(136.85±5.78、140.41±6.27)(P0.05),常温停循环组明显低于常温不停循环组(P0.05)。结论 停循环可上调大鼠脑组织中Smad4和Nestin的表达水平,深低温可进一步促进停循环脑组织中Smad4和Nestin的表达水平。     

深低温停循环大鼠海马线粒体变化研究

目的探讨深低温停循环对大鼠海马线粒体的影响。方法 18只大鼠分为深低温停循环组、常温停循环组和常温不停循环组,每组6只,分别给予深低温停循环、常温停循环和常温不停循环处理。观察3组大鼠电镜下海马线粒体形态学、二维参数和三维参数变化。结果常温不停循环组大鼠海马线粒体呈长条形或椭圆形,基质均匀,大小正常,板状嵴及双层膜清晰;常温停循环组大鼠海马线粒体肿胀明显,部分呈空泡化,数量明显减少,板状嵴变形,双层膜破损,基质中出现絮状物;深低温停循环组海马线粒体轻度肿胀,数量减少,双层膜尚完整,板状嵴部分断裂,少数线粒体出现空泡化改变;深低温停循环组和常温停循环组大鼠海马线粒体直径[(116.22±7.23)、(154.26±6.41)μm]、周长[(433.6±15.2)、(594.7±17.0)μm]、灰度(131.2±12.4、133.4±11.8)、平均体积[(0.187±0.001)、(0.249±0.002)μm3]、数密度[(0.131±0.004)、(0.099±0.002)μm^2]和体积密度[(0.111±0.004)、(0.098±0.001)μm^(-3)]均大于常温不停循环组[(86.37±5.84)μm、(319.5±12.5)μm、108.7±8.6、(0.164±0.001)μm^3、(0.178±0.005)μm^2、(0.129±0.003)μm^(-3)](P<0.05),常温停循环组大鼠海马线粒体直径、周长、平均体积大于深低温停循环组,灰度、数密度和体积密度与深低温停循环组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血缺氧能引起海马线粒体肿胀,数量减少,深低温能改善海马线粒体结构和数量的改变。     

深低温体外循环时脑海马神经元凋亡和神经生长因子的表达变化

目的:探讨深低温停循环时,不同体外循环方法对海马CA3区神经元凋亡及神经生长因子蛋白表达的影响及意义。方法:实验于2004-12／2005-05在第四军医大学西京医院心血管外科实验室完成。健康杂种犬18只,随机分为常温体外循环组,深低温停循环组,间断深低温停循环组,每组6只。按临床方法建立体外循环,常温体外循环组不降温,不阻闭主动脉及腔静脉,转机流量70-80 mL／(kg·min),维持120min,其余两组转机10 min后,阻闭升主动脉,主动脉根部灌注冷停跳液15 mL／kg,鼻咽温降至18℃时深低温停循环组停循环90 min,间断深低温停循环组停循环,阻断降主动脉,每停循环15 min,再灌注1 min, 流量25 mL／(kg·min),总停循环时间维持90 min,复温30 min至鼻咽温 36℃。造模结束后,取各组大鼠海马头部,经病理常规处理后,切片分别应用免疫组织化学方法、末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法观察海马 CA3区神经元凋亡及神经生长因子的表达。各组数据以x±s表示,组间比较采用两样本均数比较的t检验。结果:18只实验犬全部进入结果分析,末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法及免疫组化法检测结果显示,与常温体外循环组比较,深低温停循环组、间断深低温停循环组海马CA3区凋亡细胞数及神经生长因子阳性细胞数明显增加[(6．83±1．02,22．17±1．47),(24．5±0．77,37．13±2．16), (12．07±1．12,29．93±1．51),(P<0．01-0．05)],与间断深低温停循环组比较, 深低温停循环组海马CA3区凋亡细胞数及神经生长因子阳性细胞数显著增加(P<0．01-0．05)。结论:间断深低温停循环脑保护效果优于深低温停循环,神经生长因子可能参与了深低温停循环脑缺血缺氧损伤后中枢神经系统的修复与重建。     

深低温体外循环时脑海马神经元凋亡和神经生长因子的表达变化

目的：探讨深低温停循环时,不同体外循环方法对海马CA3区神经元凋亡及神经生长因子蛋白表达的影响及意义.方法：实验于2004-12/2005-05在第四军医大学西京医院心血管外科实验室完成.健康杂种犬18只,随机分为常温体外循环组,深低温停循环组,间断深低温停循环组,每组6只.按临床方法建立体外循环,常温体外循环组不降温,不阻闭主动脉及腔静脉,转机流量70～80 mL/（kg&;#183;min）,维持120 min,其余两组转机10min后,阻闭升主动脉,主动脉根部灌注冷停跳液15 mL/kg,鼻咽温降至18℃时深低温停循环组停循环90min,间断深低温停循环组停循环,阻断降主动脉,每停循环15 min,再灌注1 min,流量25 mL/（kg&;#183;min）,总停循环时间维持90 min,复温30 min至鼻咽温36℃.造模结束后,取各组大鼠海马头部,经病理常规处理后,切片分别应用免疫组织化学方法、末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法观察海马CA3区神经元凋亡及神经生长因子的表达.各组数据以x&;#177;s表示,组间比较采用两样本均数比较的t检验.结果：18只实验犬全部进入结果分析,末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法及免疫组化法检测结果显示,与常温体外循环组比较,深低温停循环组、间断深低温停循环组海马CA3区凋亡细胞数及神经生长因子阳性细胞数明显增加[（6.83&;#177;1.02,22.17&;#177;1.47）,（24.5&;#177;0.77,37.13&;#177;2.16）,（12.07&;#177;1.12,29.93&;#177;1.51）,（P＜0.01～0.05）],与间断深低温停循环组比较,深低温停循环组海马CA3区凋亡细胞数及神经生长因子阳性细胞数显著增加（P＜0.01～0.05）.结论：间断深低温停循环脑保护效果优于深低温停循环,神经生长因子可能参与了深低温停循环脑缺血缺氧损伤后中枢神经系统的修复与重建.     

线粒体通透性转化孔骨架蛋白在深低温停循环大鼠海马线粒体中的表达情况

目的探讨深低温停循环对大鼠海马线粒体通透性转化孔骨架蛋白的影响。方法 SD大鼠24只随机分为深低温停循环组、常温停循环组和常温不停循环组各8只,分别给予深低温停循环、常温停循环和常温不停循环处理。采用RT-PCR法测定3组大鼠海马线粒体中亲环蛋白D(cyclophilin D,CYPD)mRNA、腺嘌呤核苷酸转运蛋白1(adenine nucleotide transporter,ANT1)mRNA和电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)mRNA的表达情况,用△Ct值表示mRNA相对表达量,△Ct值越小表示mRNA含量越高;采用Western blot法测定3组大鼠海马组织CYPD、ANT1和VDAC蛋白表达情况。结果深低温停循环组和常温停循环组大鼠海马线粒体CYPD mRNA(4.26±0.37、1.87±0.24)和蛋白(0.53±0.17、0.87±0.22)、ANT1 mRNA(6.12±0.67、3.43±0.34)和蛋白(0.36±0.07、0.59±0.08)、VDAC1 mRNA(6.22±0.41、4.49±0.45)和蛋白(1.12±0.18、1.72±0.26)、VDAC2 mRNA(5.21±0.34、4.19±0.43)和蛋白(0.94±0.13、1.39±0.11)、VDAC3 mRNA(3.45±0.57、1.81±0.42)和蛋白(1.09±0.22、1.55±0.34)表达水平高于常温不停循环组[CYPD mRNA和蛋白(6.01±0.42、0.21±0.14)、ANT1 mRNA和蛋白(7.14±0.72、0.17±0.04)、VDAC1mRNA和蛋白(7.91±0.52、0.53±0.12)、VDAC2mRNA和蛋白(6.52±0.37、0.47±0.09)、VDAC3 mRNA和蛋白(5.41±0.67、0.62±0.10)](P0.05),深低温停循环组低于常温停循环组(P0.05)。结论停循环可使线粒体中CYPD、ANT1和VDAC mRNA和蛋白表达量升高,深低温可降低线粒体中CYPD、ANT1和VDAC mRNA和蛋白的表达量,对脑组织有保护作用。     

脑保护液联合尼莫地平对深低温停循环大鼠的脑保护作用

目的探讨脑保护液联合尼莫地平在深低温停循环大鼠脑损伤中的作用及机制。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、深低温停循环组、脑保护液组和脑保护液联合尼莫地平组(联合组)各20只。假手术组仅暴露颈总动脉,不进行降温和阻断;深低温停循环组、脑保护液组和联合组大鼠肛温控制在20℃,夹闭颈总动脉后停循环60 min。脑保护液组在停循环15、45 min以1 mL/min速率经颈外动脉泵入脑保护液12 mL/kg;联合组脑保护液用法用量同脑保护液组,并于停循环前30 min和停循环后30 min腹腔注射尼莫地平1.0 mg/kg;深低温停循环组和假手术组泵入等量生理盐水。深低温停循环再灌注24 h,测定4组血清S100β蛋白表达;处死大鼠,取脑组织称质量并制作切片,计算大鼠脑组织含水量和凋亡细胞指数。结果停循环再灌注24 h,深低温停循环组血清S100β蛋白水平[(1.22±0.06)μg/L]和脑组织S100β吸光度值(0.638±0.007)高于假手术组[(0.42±0.07)μg/L,0.241±0.003]、脑保护液组[(0.73±0.03)μg/L、0.463±0.005]和联合组[(0.56±0.05)μg/L、0.386±0.004],且脑保护液组高于假手术组和联合组,联合组高于假手术组,差异均有统计学意义(P0.05);深低温停循环组大鼠脑含水量[(0.809 4±0.0009)%]高于假手术组[(0.787 9±0.00.1 2)%]、脑保护液组[(0.799 8±0.000 6)%]和联合组[(0.794 6±0.000 7)%],脑保护液组高于假手术组和联合组,联合组高于假手术组,差异均有统计学意义(P0.05);深低温停循环组大鼠脑组织凋亡细胞指数[(59.15±2.16)%]高于假手术组[(18.32±0.21)%]、脑保护液组[(30.26±1.37)%]和联合组[(23.73±1.25)%],脑保护液组高于假手术组和联合组,联合组高于假手术组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论深低温停循环可引起大鼠脑组织损伤,脑保护液联合尼莫地平对脑组织的保护作用优于单纯脑保护液,其脑保护机制可能与降低血清和脑组织S100β蛋白表达有关。     

深低温停循环猪脑组织中小泛素样修饰蛋白表达实验研究

目的观察深低温停循环后猪脑组织中小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)2/3水平的表达。方法 24只中华小型猪中,6只行体外循环1h(体外循环组);其余18只行深低温停循环1h,其中仅行深低温停循环6只(停循环组);深低温停循环过程中行顺行脑灌注,灌注流量25mL/(kg·min)为脑灌注25组6只,灌注流量50mL/(kg·min)为脑灌注50组6只。术后2h处死猪留取海马及皮质脑组织标本,采用Western blot法检测SUMO2/3水平、SUMO特异性结合酶(E2)Ubc9、SUMO特异性蛋白酶(sentrin-specific protease,SENP)、凋亡因子Bax和caspase-3、抗凋亡因子Bcl-2表达水平。结果停循环组海马区及皮质区SUMO2/3(2 505.80±140.85、2 516.20±169.17)、Ubc9(646.32±18.46、868.39±20.63)、Bax(645.91±8.89、784.31±13.03)、caspase-3(765.80±20.84、818.06±10.86)表达水平明显高于体外循环组[SUMO2/3(889.12±5.71、886.73±10.32)、Ubc9(218.37±6.74、291.58±4.05)、Bax(202.26±2.05、300.40±3.69)、caspase-3(129.45±14.20、292.15±5.41)]、脑灌注25组[SUMO2/3(1 587.50±135.10、1 656.74±120.00)、Ubc9(522.60±14.42、569.30±19.09)、Bax(506.05±1.78、650.23±24.40)、caspase-3(566.41±20.67、408.66±13.85)]和脑灌注50组[SUMO2/3(1 207.91±115.78、1 196.63±28.37)、Ubc9(350.48±14.70、454.71±17.74)、Bax(462.20±6.86、502.49±16.73)、caspase-3(449.45±20.67、357.75±18.87)](P0.01);SENP(251.99±12.50、340.27±16.39)、Bcl-2(431.78±19.77、224.36±14.53)表达水平明显低于体外循环组[SENP(752.26±4.45、874.10±7.93)、Bcl-2(761.33±5.77、791.97±7.27)]、脑灌注25组[SENP(380.60±13.20、411.13±11.68)、Bcl-2(535.85±18.00、420.35±21.47)]和脑灌注50组[SENP(426.63±16.42、599.30±17.55)、Bcl-2(634.86±14.84、624.67±13.15)](P0.01);脑灌注50组海马和皮质区脑组织中SUMO2/3、Ubc9、Bax和caspase-3表达水平明显低于脑灌注25组(P0.01),高于体外循环组(P0.01),SENP和Bcl-2表达水平高于脑灌注25组(P0.01),低于体外循环组(P0.01)。结论在猪的深低温停循环模型中,选择性顺行脑灌注能起到较好的脑保护作用,其中灌注流量50mL/(kg·min)较25mL/(kg·min)具有更好的保护效果;SUMO2/3水平增加是深低温停循环脑损伤时启动的内源性应激反应,通过增加SUMO化、减少去SUMO化共同实现。     

选择性深低温血流阻断猴海马超微结构和波形蛋白表达的变化

背景:前期研究显示,选择性深低温顺行脑灌注能提高猴脑对缺血缺氧的耐受性。目的:观察选择性深低温血流阻断对猴海马超微结构和波形蛋白表达的影响。方法:将8只健康成年恒河猴随机分为两组:深低温组(n=5)在常温下阻断猴双侧颈总动脉及颈内静脉10min,然后通过一侧颈内动脉灌注4℃林格氏液,同侧颈内静脉回流,使脑温维持在18℃以下,60min后恢复脑血流;常温组(n=3)除灌注液改为37℃林格氏液外,其余与深低温组相同。结果与结论:深低温组猴全部成功复苏,海马组织形态及超微结构未见明显异常。常温组猴全部死亡,未能成功复苏,海马组织形态及超微结构有不同程度异常。与常温组比较,深低温组海马波形蛋白表达显著降低(P<0.01)。说明阻断双侧颈总动脉10min后行选择性深低温顺行脑灌注可下调海马波形蛋白表达,保护海马组织,减轻脑缺血损害。     

深低温停循环时不同脑保护方法对猪大脑组织含水率的影响

目的:观察试验用小型猪脑海马头部组织含水率,揭示深低温停循环时不同脑保护方法对脑水肿的影响。方法:①实验于1998-10/2000-02在解放军总医院动物实验中心完成。选用北京农业大学实验用小型猪16头。随机将猪分为4组:深低温停循环组,顺行脑灌注组,逆行脑灌注组,逆行脑灌注+尼莫地平组,每组4头。②鼻咽温降至18℃时分别给予如下处理90min:深低温停循环组通过上、下腔静脉放血至氧合器的静脉储血罐,冰袋敷头;顺行脑灌注组阻断降主动脉,通过主动脉弓灌注头臂三支血管,维持灌注压在50mmHg(1mmHg=0.133kPa)左右;逆行脑灌注组阻断降主动脉,结扎奇静脉,通过上腔静脉逆行灌注,维持灌注压在25mmHg左右;逆行脑灌注+尼莫地平组在体外循环开始10min内经氧合器的标本口加入尼莫地平注射液,其他操作同顺行脑灌注组。③复温120min至鼻咽温36℃。取左侧海马头部组织称湿质量,于110℃烘箱内干燥24h,测干质量,计算组织含水率。④多组比较采用单因素完全随机设计方差分析。结果:小型猪16只均进入结果分析。大脑组织含水率:逆行脑灌注组明显高于深低温停循环组、顺行脑灌注组和逆行脑灌注+尼莫地平组[(83.60±0.68)%,(81.52±1.16)%,(81.04±0.59)%,(80.92±0.74)%,F=9.22,P=0.0019],而深低温停循环组、顺行脑灌注组、逆行脑灌注+尼莫地平组间差异不明显(P>0.05)。结论:①逆行脑灌注加重深低温停循环后的脑水肿,脑水肿可能是深低温停循环后神经功能障碍的一原因。②尼莫地平在深低温停循环时有降低逆行脑灌注引起的脑水肿的作用。     

深低温停循环时不同脑保护方法对猪大脑组织含水率的影响

目的：观察试验用小型猪脑海马头部组织含水率，揭示深低温停循环时不同脑保护方法对脑水肿的影响。方法：①实验于1998—10／2000—02在解放军总医院动物实验中心完成。选用北京农业大学实验用小型猪16头。随机将猪分为4组：深低温停循环组，顺行脑灌注组，逆行脑灌注组，逆行脑灌注＋尼莫地平组，每组4头。②鼻咽温降至18℃时分别给予如下处理90min；深低温停循环组通过上、下腔静脉放血至氧合器的静脉储血罐，冰袋敷头；顺行脑灌注组阻断降主动脉，通过主动脉弓灌注头臂三支血管，维持灌注压在50mmHg（1mmHg=0．133kPa）左右；逆行脑灌注组阻断降主动脉，结扎奇静脉，通过上腔静脉逆行灌注，维持灌注压在25mmHg左右；逆行脑灌注＋尼莫地平组在体外循环开始10min内经氧合器的标本口加入尼莫地平注射液，其他操作同顺行脑灌注组。③复温120min至鼻咽温36℃。取左侧海马头部组织称湿质量，于110℃烘箱内干燥24h，测干质量，计算组织含水率。④多组比较采用单因素完全随机设计方差分析。结果：小型猪16只均进入结果分析。大脑组织含水率：逆行脑灌注组明显高于深低温停循环组、顺行脑灌注组和逆行脑灌注＋尼莫地平组[（83．60&;#177;0．68）％，（81．52&;#177;1．16）％，（81．04&;#177;0．59）％，（80．92&;#177;0．74）％，F=9．22，P=-0．0019]，而深低温停循环组、顺行脑灌注组、逆行脑灌注＋尼莫地平组间差异不明显（P〉0．05）。结论：①逆行脑灌注加重深低温停循环后的脑水肿，脑水肿可能是深低温停循环后神经功能障碍的一原因。②尼莫地平在深低温停循环时有降低逆行脑灌注引起的脑水肿的作用。     

自制降主动脉球囊插管在深低温停循环猪模型中的应用

目的 探讨自制降主动脉球囊插管在深低温停循环猪模型中的有效性与安全性.方法 选取健康普通猪12只,体质量(48.3±0.9)kg,开胸建立体外循环,逐步降温至鼻咽温20℃,建立深低温停循环模型,随机分为两组(n=6).A组为实验组:深低温联合降主动脉顺行灌注;B组为对照组:单纯深低温停循环;分别于麻醉诱导后(T1)、体外循环开始(T2)、恢复循环后5min(T3)、复温至36℃(T4)采集血液样本,检测血气、乳酸、血糖、血肌酐、尿素氮.结果 与B组比较,在T3时间点,A组的PH、动脉血氧分压、静脉血氧饱和度高,二氧化碳分压较低,差异有统计学意义(P<0.05);T3、T4点的乳酸、血糖、血肌酐、尿素氮A组均低于B组(P<0.05);两组T3、T4点的乳酸、血糖、血肌酐、尿素氮均高于T1(P<0.05).结论 自制降主动脉球囊插管顺行灌注可以减轻深低温停循环的引起损害.本研究证实此方法在猪深低温停循环模型中安全、有效.     

头部亚低温干预对大鼠缺血脑组织保护作用的实验研究

目的研究脑缺血后即时亚低温干预对脑缺血损伤的影响。 方法将48只SD大鼠随机分为假手术组（8只）、常温（37～38℃）脑缺血组（8只）和亚低温（33～34℃）脑缺血组（32只）,后者又根据亚低温持续作用时间细分为4个亚组（n=8）。将常温脑缺血组和亚低温脑缺血组大鼠制成全脑缺血20 min、再灌注240 min模型。亚低温脑缺血组大鼠于脑缺血20 min时给予亚低温治疗,4个亚组亚低温持续作用时间分别为30,60,120,240 min。于脑缺血再灌注240 min后检查上述各组大鼠脑组织中一氧化氮（NO）代谢产物亚硝酸盐（NO2）、内皮素-1（ET1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β含量;同时对各组大鼠血液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）水平进行检测。 结果常温脑缺血组大鼠脑组织中ET1、NO2、TNF-α和IL-1β水平均明显高于假手术组（P<0.01）;亚低温持续作用30 min对脑缺血组织中ET1、NO2、TNF-α和IL-1β含量无明显影响（P&rt;0.05）;亚低温持续作用60～240 min可显著降低脑缺血组织中ET1、NO2、TNF-α和IL-1β水平（P<0.05或0.01）。常温脑缺血组大鼠血液中LDH、AST、CK和CK-BB水平均明显高于假手术组（P<0.01）;亚低温持续作用60～240 min可显著减少脑缺血大鼠血液中LDH、AST、CK和CK-BB含量（P<0.05或0.01）。 结论脑缺血后即时亚低温干预能明显减轻脑缺血损伤,亚低温持续作用时间以超过1 h为宜。     

低温闭胸心肺转流复苏后心肺脑组织的电镜改变

目的　观察狗心脏停搏 15min后 ,用浅低温和深低温闭胸心肺转流 (CPB)复苏后心肺脑组织的电镜改变。方法　 13只实验狗分三组 ,浅低温组 (33～ 34℃ ) (n =5 ) ,深低温组 (2 6～ 2 7℃ ) (n =5 ) ,狗心脏停搏 15min后行闭胸CPB ,维持平均动脉压大于 80mmHg ,3h后取心、肺和海马组织 ,对照组 (n =3)停搏 15min后立即取组织。结果　浅低温组海马组织的神经元数为 (4 6± 0 9)个 ,明显少于深低温组 (13 6± 5 2 )个 (P <0 0 5 )和对照组 (8 3± 4 7)个 ;少突胶质细胞核平均直径为 (5 86± 0 80 ) μm ,显著大于深低温组 (3 94± 0 90 ) μm(P <0 0 1)和对照组 (4 5 6± 1 0 35 ) μm(P <0 0 5 ) ,细胞膜破损明显 ;肺表面活性物质减少 ,毛细血管内皮细胞连接松弛。深低温组心肌肌原纤维变细、变稀 ,部分断裂 ,明显受损。结论　狗心脏停搏 15min后 ,浅低温闭胸CPB结合头部深低温或深低温闭胸CPB结合心肌保护治疗 ,可能更有益于心肺脑复苏     

低温闭胸心肺转流对狗心肺复苏后脑损伤的保护作用

目的　观察闭胸低温心肺转流 (CPB)对狗心肺复苏后脑损伤的保护作用。方法制作狗心搏骤停模型 ,停搏 15min后行浅低温 (33～ 34℃ ) (n =5 )和深低温 (2 6～ 2 7℃ ) (n=5 )闭胸CPB复苏。于停搏前、停搏后 15min、CPB开始后 1h、 3h抽血 ,于 3h取大脑皮层 ,测定血浆和脑组织肌酸磷酸激酶 BB (CK BB)浓度。另设 5只为缺血对照组。结果　CPB开始后3h ,浅低温组和深低温组血浆CK BB浓度明显高于停搏前 (P <0 0 5 ) ,深低温组大脑皮层中CK BB浓度明显低于浅低温组 (P <0 0 5 )。结论　狗心脏停搏 15min后行深低温闭胸CPB复苏对大脑皮层的损伤较轻 ,有一定保护作用     

低温疗法在心肺脑复苏中的研究进展

目的 探讨低温对心搏骤停复苏成功后血清炎症因子、肺组织酶学及形态学的影响.方法 对10只猪诱导心室纤颤(室颤)4 min后给予标准心肺复苏,待自主循环恢复(ROSC)后按随机数字表法均分为两组.低温组立即给予4℃的生理盐水以1.33 ml·kg~(-1)·min~(-1)补液22 min,继之以10ml·kg~(-1)·h~(-1)补液4 h;常温组采用室温生理盐水按相同用量和速度输入.实时监测血流动力学指标;分别于室颤前、ROSC后10 min、2 h、4 h检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;于ROSC后24 h取肺组织检测ATP酶活性,同时行普通病理和超微结构观察.结果 与常温组比较,低温组除可降低体温外,余血流动力学指标均无明显差异.低温组ROSC后10 min、2 h、4 h血清TNF-α[(15.55±1.65)、(17.06±0.86)、(12.52±1.82)ng/L]和IL-6[(173.80±15.01)、(184.09±13.44)、(73.17±6.95)ng/L]均较常温组(TNF-α:(20.09±1.32)、(26.18±1.16)、(29.18±1.20)ng/L,IL-6:(176.92±16.68)、(239.17±13.18)、(405.48±55.49)ng/L]显著降低(P＜0.05或P＜0.01).低温组较常温组能显著降低细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活性[(3.78±1.14)U/L比(6.22±1.23)U/L,P＜0.01].低温组肺组织病理变化较常温组损伤轻.结论 4℃生理盐水诱导的低温疗法能减少猪心搏骤停模型中炎症介质的释放,抑制肺泡细胞膜ATP酶的活性,并对肺组织形态学有一定的保护作用.     

深低温停循环下不同脑保护方法对海马区神经细胞凋亡及bcl-2、bax基因mRNA表达的影响

目的:观察深低温停循环下给予不同脑保护方法后犬海马组织中神经细胞凋亡情况,探讨其对凋亡相关基因bcl-2和bax的mRNA表达的影响。方法:健康成年杂种犬(18～22kg)18只,随机分成3组,深低温停循环(deephypothermiacirculatoryarrest,DHCA)组(A组,对照组);DHCA+间断选择性顺行脑灌注(intermittentselectiveantegradecerebralperfusion,ISACP)组(B组);DHCA+逆行脑灌注(retrogradecerebralperfusion,RCP)组(C组)。术后取出海马组织,分别采用电镜和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马组织神经细胞凋亡情况及凋亡相关基因bcl-2和bax的mRNA表达情况。结果:电镜下,A组可见明显神经细胞凋亡改变,B、C两组仅见少量神经细胞凋亡改变。bcl-2mRNA在B组表达最高(P<0.01),C组表达明显高于A组(P<0.01);baxmRNA在A组表达最强(P<0.01),B组和C组间差异无显著性(P>0.05)。结论:DHCA下,给予ISACP或PCR两种脑保护方法都可以上调bc...     

《实用临床医药杂志》2011年护理继续医学教育参考答案(5)

<正>1名词解释(1)深低温停循环:深低温停循环技术是治疗复杂心脑血管疾病的重要辅助手段。体外循环中此方法简单,术野清晰,不需专用设备,只要把停循环时的鼻咽温度控制在10℃~20℃之间即可,因低温代谢可抑制脑氧消耗,从而取得脑缺血耐受时间,此技术具有使手术在     

Tempol预处理在大鼠窒息后心跳骤停 全脑缺氧缺血脑损伤模型中的保护作用及机制研究

目的研究Tempol预处理在大鼠窒息后心跳骤停法制备全脑缺血缺氧脑损伤模型中的保护作用及机制。方法取30只雄性SD大鼠,随机分为对照组(6只)、常规复苏组(12只)与Tempol预处理组(12只)。常规复苏组与Tempol预处理组均构建缺血缺氧脑损伤模型,Tempol预处理组在气管夹闭前5 min给予100 mg/kg Tempol,常规复苏组和对照组给予等量生理盐水。取三组大鼠脑内海马组织,行苏木精-伊红染色,观察细胞组织形态学改变;在自主循环恢复后6 h、12 h、24 h采用免疫组化法测定大鼠血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况。结果对照组皮层和海马区脑组织细胞轮廓清晰,结构未见异常,海马CA1区中VEGF与HIF-1α表达较弱。相比常规复苏组,Tempol预处理组海马组织损伤范围较小,程度较轻,水肿明显改善。Tempol预处理组在自主循环恢复后6 h、12 h、24 h海马组织中VEGF较常规复苏组显著升高,自主循环恢复后12 h、24 h时HIF-1α的表达较常规复苏组显著升高(P 0. 05)。结论 Tempol预处理具有减轻缺氧缺血脑损伤大鼠海马组织损伤程度,缓解水肿和炎症的作用,其作用机制可能与激活VEGF、HIF-1α表达存在密切关系。