转化生长因子-β1在丹红改善早期慢性肾脏病大鼠肾脏病理损伤中的作用

目的:探讨中药丹红对早期慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)大鼠肾脏病理损伤的疗效及TGF-β1在其中的作用。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为模型组、对照组和干预组,每组10只。3组大鼠分别给予单侧肾切除建立早期CKD模型、假手术(逐层分离组织至肾包膜,但不做肾切除)和建立早期CKD模型后丹红干预。观察各组大鼠肾脏病理改变、24 h尿蛋白量和肾功能,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学法检测肾皮质中转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)浓度和肾组织总TGF-β1表达情况。结果:与对照组相比,模型组大鼠肾小球轻中度系膜细胞增生伴局部系膜基质增宽、球囊壁粘连及毛细血管壁改变,肾小管间质存在不同程度炎性细胞浸润与间质纤维化;与模型组比较,干预组大鼠肾脏病变明显减轻;模型组的肾脏病理总积分高于对照组(P0.05),而干预组低于模型组(P0.05)。模型组与干预组24 h尿蛋白量高于对照组(P0.01),干预组24 h尿蛋白量低于模型组(P0.01)。3组血肌酐、尿素水平无显著差异,但模型组和干预组血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂浓度较对照组明显增高(P0.05)。模型组大鼠肾皮质TGF-β1浓度和肾组织总TGF-β1表达水平明显高于对照组(P0.05),干预组两者均低于模型组(P0.05)。肾组织TGF-β1表达与尿蛋白量、肾脏病理损伤总积分均有显著相关性(P0.01)。结论:丹红能通过下调TGF-β1表达改善早期CKD大鼠肾脏病理病变。     

转化生长因子-β_1和Smad7信号通路与大鼠肝纤维化的相关性

目的探讨肝纤维化组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad7基因在信号传导通路中的作用。方法 40只Wistar大鼠随机分为对照组和模型组各20只,模型组腹腔注射质量分数10%四氯化碳注射液8周,对照组腹腔注射质量分数0.9%氯化钠注射液。2组于8周后检测血清谷草转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)和TGF-β1水平,组织病理观察肝组织炎症反应及纤维化程度,采用Western blot与RT-PCR法检测肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白和mRNA水平。结果模型组血清GPT[(178.45±24.36)u/L]、HA[(693.37±206.35)μg/L]和TGF-β1[73.94±28.37)u/L]水平明显高于对照组[(42.80±8.37)u/L、(59.35±28.12)μg/L和(20.68±17.85)u/L](P0.05);模型组肝组织TGF-β1mRNA和蛋白(0.86±0.04、3.86±0.87)、Smad3mRNA和蛋白(0.52±0.03、2.63±0.94)表达水平高于对照组(0.31±0.03、1.07±0.60,0.21±0.01、0.81±0.04)(P0.05),Smad7 mRNA和蛋白(0.33±0.02、1.20±0.53)表达水平低于对照组(0.77±0.02、2.83±1.15)(P0.05)。结论 TGF-β1、Smad7信号传导通路过度活化及血清GPT、HA和TGF-β1水平升高,可能与肝纤维化的发生和发展密切相关,TGF-β1高表达在促进肝纤维化发生中起重要作用。     

“补肾活血”法对骨性关节炎大鼠关节液中炎性因子的影响

目的探讨"补肾活血"法对骨性关节炎大鼠关节液中炎性因子的影响。方法 2016年5月,采用72只雄性10周龄SD大鼠,分别设为正常组、对照组和实验组,每组各24例。实验组给予牛膝煎煮液灌胃给药,正常和对照组给予同等量清水灌胃。6周后观察三组大鼠关节液中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平,同时分析膝关节软骨组织中MMP-13、ADAMTS-5 mRNA相对表达量和Makin评分。结果干预前实验组和对照组IL-1β、TNF-α、MMP-13、ADAMTS-5 mRNA相对表达量和Makin评分水平均显著高于正常组,而TGF-β1均显著低于正常组(P0.05);实验组和对照组IL-1β、TNF-α、MMP-13、ADAMTS-5 mRNA相对表达量、Makin评分和TGF-β1均无统计学差异(P0.05)。与干预前比较,干预后实验组IL-1β、TNF-α、MMP-13、ADAMTS-5 mRNA相对表达量和Makin评分显著降低,而TGF-β1显著升高(P0.05)。干预后6w,实验组IL-1β显著低于对照组[(15.38±3.28)ng/L vs.(23.57±4.17)ng/L,P0.05];TNF-α显著低于对照组[(15.43±6.37)ng/L vs.(36.48±9.25)ng/L,P0.05];但TGF-β1显著高于对照组[(87.47±14.3)ng/L vs.(41.38±11.58)ng/L,P0.05];MMP-13 mRNA相对表达量显著低于对照组(0.54±0.21 vs.(0.92±0.28,P0.05);ADAMTS-5 mRNA相对表达量也显著低于对照组(0.61±0.21 vs.0.98±0.32,P0.05];Makin评分显著低于对照组(3.76±1.37 vs.8.54±4.12,P0.05)。结论 "补肾活血"法有助于降低骨性关节炎大鼠关节液中炎性因子水平和MMP-13等蛋白酶mRNA的表达。     

氟伐他汀对高糖状态下肾小球系膜细胞JAK/STAT信号蛋白表达的影响

目的 观察氟伐他汀对体外培养的肾小球系膜细胞信号蛋白Janus酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子1(STAT1)、STAT3表达的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和氟伐他汀干预.采用免疫沉淀和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测JAK2磷酸化表达;Westernblotting检测信号蛋白JAK2、STAT1、p-STAT1、STAT3和p-STAT3的表达;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中TGF-β1和纤维连接蛋白(FN)的含量.结果 与低糖组比较,高糖组肾小球系膜细胞p-JAK2(802±124比204±31)、p-STAT1(2 856.6±337.8比617.7±76.2)和P-STAT3(3 049.8±421.3比946.7±141.2)表达均明显增强;上清液中TGF-β1[(2.87±0.34)μg/L比(1.20±0.11)μg/L]和FN((6.34±0.61)mg/L比(3.24±0.26)mg/L]的含量均增高,TGF-β1 mRNA表达增加(P均＜0.01).与高糖组比较.高糖+氟伐他汀组p-JAK2(412±67)、p-STAT1(1 178.4±137.1)和p-STAT3(1 572.6±181.2)表达均明显下调,TGF-β1[(1.94±0.27)μg/L]和FN[(4.27±0.33)mg/L]含量减少,同时TGF-β1 mRNA表达降低(P均＜0.05).结论 高糖能激活肾小球系膜细胞JAK/STAT信号途径,氟伐他汀抑制肾小球系膜细胞TGF-β1和FN的分泌可能部分是通过影响JAK/STAT信号通路的激活而实现的.     

骨髓间充质干细胞对大鼠痛风肾的修复作用

目的探讨经鼠尾静脉移植的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对大鼠痛风肾的影响,具体为延缓上皮到间叶组织转化(EMT)、促进肾脏细胞分化和生长,以及抗氧化应激等方面的作用。并进一步研究其相应的机制。方法幼年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用腺嘌呤200 mg/(kg·d)灌胃4周制作痛风肾大鼠模型,造模成功24 h后,造模组再次被随机分为3组,分别为磷酸盐缓冲液模型组和BM-MSCs治疗组,BM-MSCs治疗组经鼠尾静脉移植入骨髓间充质干细胞(BM-MSCs是经密度梯度离心法结合贴壁筛选法在体外分离培养而成),同时磷酸盐缓冲液(PBS)模型组经鼠尾静脉注入相同量的PBS。注射6周后,收集大鼠的血液和尿液标本用来测定血肌酐、尿素氮和24 h尿蛋白含量;对大鼠肾石蜡标本切片进行H-E染色、糖原染色和马松染色,观察并半定量评分评价各组肾病理情况;免疫组织化学法测定大鼠肾石蜡标本切片中的转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平,Western-Blot法测定肾组织中P38蛋白、P-P38蛋白、硫氧还蛋白还原酶1(Trx R1)的表达情况。数据经过正态性及方差齐性检验后,正常组和造模组两两比较采用LSD-t检验,3组之间比较采用单因素差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。结果经腺嘌呤诱导制作的痛风肾大鼠相比正常组大鼠出现明显的肾功能降低,大量蛋白尿以及肾间质和肾小管尿酸结晶沉积,肾间质纤维化、炎症细胞浸润、肾小管上皮细胞坏死、肾小球硬化等,提示痛风肾模型制造成功,并出现了慢性肾功能衰竭;BM-MSCs治疗组较PBS模型组而言,血肌酐水平降低[(88.90±7.89)μmol/Lvs.(117.40±6.13)μmol/L],尿素氮降低[(7.85±0.88)mmol/L vs.(10.97±1.03)mmol/L],24 h尿蛋白减少[(27.72±4.90)mg vs.(54.66±6.72)mg],TGF-β1表达减少[(11.00±2.28)个vs.(20.67±1.63)个],P-P38/P38比值降低[(0.31±0.09)μmol/L vs.(0.50±0.13)μmol/L],Trx R1/β-actin表达增加[(0.80±0.19)μmol/L vs.(0.41±0.23)μmol/L]。差异有统计学意义。结论 BM-MSCs改善腺嘌呤诱导的痛风肾/慢性肾功能衰竭大鼠的肾功能,这可能与增加Trx R1的表达增加有关,Trx R1可以促进转分化、肾脏细胞生长并且具有抗氧化应激作用;同时与降低TGF-β1水平减轻EMT有关,此过程可能是通过抑制肿瘤坏死因子(TNF)-α/P-P38信号通路实现的。     

24h尿微量蛋白联合胱抑素C及β_2-微球蛋白在老年早期肾损伤筛查中价值

目的探讨24h尿微量蛋白联合胱抑素C及β_2-微球蛋白联合检测在老年早期肾损伤筛查中的价值。方法年龄60岁以上无糖尿病、高血压、肾脏病患者52例(对照组),60岁以上有糖尿病、高血压、未进行肾脏病筛查患者82例(观察1组),年龄60岁以上有糖尿病、高血压、肾脏病患者28例(观察2组),比较3组血清胱抑素C(cystatin C,Cys C)、β_2-微球蛋白(β_2-microglobulin,β_2-MG)、肌酐及24h尿微量蛋白水平,比较观察1组和观察2组Cys C、β_2-MG、24h尿微量蛋白单独及联合检测的阳性率。结果观察2组血清Cys C[(2.81±0.71)mg/L]、β_2-MG[(3.59±0.78)mg/L]、肌酐[(238.62±36.21)mmol/L]、24h尿微量蛋白[(251.30±104.50)mg/24h]水平均高于对照组[(1.18±0.32)mg/L、(0.46±0.16)mg/L、(75.26±14.12)mmol/L、(29.87±1.82)mg/24h]和观察1组[(1.32±0.29)mg/L、(1.21±0.52)mg/L、(83.60±19.26)mmol/L、(99.50±26.78)mg/24h](P0.05);观察1组血清Cys C、β_2-MG及24h尿微量蛋白高于对照组(P0.05);观察2组Cys C、β_2-MG、24h尿微量蛋白单独及联合检测阳性率均90%;观察1组Cys C+β_2-MG+24h尿微量蛋白联合检测阳性率(89.0%)高于单项分别检测阳性率(74.4%、54.9%、56.1%)(P0.05)。结论血清Cys C、β_2-MG及24h尿微量蛋白联合检测有助于老年人肾损伤的早期筛查。     

经肾动脉内膜或外膜射频消融术后高脂饮食饲养猪肾间质纤维化改变

目的探讨经肾动脉内膜、外膜射频消融术(renal denervation, RDN)后高脂饮食饲养猪的肾间质纤维化改变情况及可能机制。方法 18头雄性广西巴马小型猪,随机分为内膜消融组、外膜消融组、假手术组各6头。3组全身麻醉下行双侧肾动脉造影后,内膜消融组在肾动脉内侧行双侧肾动脉RDN,外膜消融组在肾动脉外侧行双侧肾动脉RDN,假手术组仅将射频导管送入肾动脉、不行肾动脉RDN。术后3组均喂养高脂饮食6个月。检测术前及术后6个月血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)水平及术后6个月血清转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1, TGF-β_1)水平;术后6个月处死动物后取肾组织行HE和Masson染色,观察肾组织病理改变,Western blot法检测Smad3蛋白相对表达量。结果术后6个月,内膜消融组、外膜消融组、假手术组血清TC[(3.53±0.47)、(3.46±0.95)、(3.54±0.55)mmol/L]、LDL-C[(3.88±0.95)、(4.04±0.73)、(4.09±0.71)mmol/L)]水平均较术前[TC:(2.57±0.43)、(2.62±0.82)、(2.59±0.61)mmol/L;LDL-C:(2.11±0.40)、(2.12±0.67)、(2.12±0.40)mmol/L]增高(P0.05),3组术前及术后6个月TC、LDL-C水平比较差异均无统计学意义(P0.05);肾组织病理示,假手术组出现明显肾小球损伤和肾间质纤维化,内、外膜消融组肾间质纤维化程度较假手术组明显减轻;术后6个月,内膜消融组、外膜消融组血清TGF-β_1[(227.25±51.10)、(205.98±49.16)ng/L]水平,肾皮质Smad3蛋白相对表达量(0.32±0.10,0.38±0.03)均低于假手术组((324.19±42.03)ng/L,1.27±0.64)(P0.05),内膜消融组与外膜消融组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论肾动脉外膜、内膜消融均能抑制高脂血症诱导的肾间质纤维化,其机制可能与抑制TGF-β_1信号通路激活,降低信号通路中Smad3蛋白表达有关。关键字     

筋骨草总黄酮治疗系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾组织NF-κB变化的实验研究

目的：探讨筋骨草总黄酮（TFA）治疗系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）大鼠后核转录因子-κB（NF-κB）及下游转化生长因子-β1（TGF-β1）的变化。方法采用改良慢性血清病MsPGN大鼠模型,于造模第5周末检测尿蛋白,将尿蛋白阳性者随机分为模型组、雷公藤多甙（TWP）组、不同剂量TFA组。于造模第6周开始给药,6周后,测定各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血生化和肾组织病理变化,MaxVisionTM即用型快速免疫组化一步法检测大鼠肾组织中NF-κB p65的表达,双抗体夹心法检测血清中TGF-β1的变化。结果 TFA可显著降低尿蛋白,明显减小系膜区面积占毛细血管丛面积的百分比（P＜0.05或P＜0.01）;高、中剂量的TFA治疗效果与TWP相近（P＞0.05）。模型对照组大鼠肾组织NF-κB p65、血清TGF-β1的表达明显高于正常对照组[NF-κB p65：28.93±4.45 vs.4.51±0.96,P＜0.01;TGF-β1：（247.63±51.55）pg/ml vs.（127.52±27.84）pg/ml,P＜0.01];干预性治疗后,TFA高、中剂量组、TWP组大鼠血清中NF-κB p65、TGF-β1的表达[NF-κB p65：10.35±2.81,15.21±4.71,11.70±3.97,P＜0.01;TGF-β1：（181.96±52.93） pg/ml,（204.33±38.30）pg/ml,（188.07±42.92）pg/ml,P＜0.05]较模型对照组明显降低。结论 TFA降低NF-κB并进而降低TGF-β1可能是治疗MsPGN大鼠的作用机制之一。     

转化生长因子β1在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及川芎嗪与氯沙坦联合干预对其影响的研究

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦和中药川芎嗪对其表达的影响,探讨中西医结合治疗糖尿病肾病的新方法。方法右侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病肾病模型。随机分为肾切除对照组(NC组)、氯沙坦治疗组(DN1组)、川芎嗪与氯沙坦联合治疗组(DN2组)、安慰剂治疗对照组(DN组)。分别应用ELISA法和免疫组化检测血浆和肾皮质TGF-β1蛋白表达。结果 NC组血浆及肾小球TGF-β1蛋白低表达,各治疗组血浆及肾小球TGF-β1蛋白高表达;DN1组较DN组血浆及肾小球TGF-β1蛋白表达降低(P均<0.05);DN2组较DN1组血浆及TGF-β1蛋白明显下降(P均<0.05)。结论糖尿病肾病大鼠血浆及肾脏中TGF-β1明显升高,氯沙坦可下调其表达;川芎嗪与氯沙坦联合干预对其表达的下调作用更明显,提示川芎嗪与氯沙坦联合应用可能更有利于糖尿病肾病的治疗。     

电针对慢性疲劳综合征大鼠脑组织转化生长因子-β1 基因转录和蛋白表达的影响

目的:探讨电针治疗对慢性疲劳综合征(CFS)模型大鼠脑组织中TGF-β_1基因转录及蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为正常组、模型组、束缚组和针刺组,各12只。模型组采用慢性复合应激因素制备CFS模型;束缚组仅给予与针刺相同时间的捆绑;针刺组给予百会、额区、顶区电针治疗;共15 d。RT-PCR技术检测各组TGF-β_1m RNA的转录水平,Western blot技术检测各组TGF-β_1蛋白表达水平。结果:模型组和束缚组大鼠海马和下丘脑中TGF-β_1m RNA转录水平显著高于正常组(P0.01),针刺组与正常组差异无统计学意义(P0.05);针刺组海马和下丘脑中TGF-β_1m RNA转录水平显著低于模型组(P0.01),束缚组和模型组差异无统计学意义(P0.05)。正常组中TGF-β_1蛋白表达显著低于其他3组(P0.01);针刺组大鼠海马和下丘脑中TGF-β_1蛋白表达水平明显低于模型组(P0.01),束缚组和模型组差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针能够降低CFS模型大鼠海马与下丘脑中TGF-β_1m RNA转录水平和TGF-β_1蛋白表达水平。     

温肾健脾方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的观察温肾健脾方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin表达的影响。方法将链脲佐菌素诱导的30只糖尿病肾病模型大鼠分为五组,每组各6只,即模型对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg~(-1)·d~(-1))、阳性对照组(缬沙坦25 mg·kg~(-1)·d~(-1))及低剂量组(温肾健脾方7.5 g·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(温肾健脾方15 g·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量组(温肾健脾方30 g·kg~(-1)·d~(-1)),并以6只正常大鼠作正常对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg~(-1)·d~(-1))。各组大鼠连续灌胃8周后,分别采用免疫组织化学法和荧光定量PCR检测各组大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin蛋白及mRNA的表达。结果免疫组织化学结果显示,六组大鼠肾脏组织足细胞nephrin和podocin蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=6.656、8.667,P=0.016、0.007)。进一步两两比较发现,模型对照组足细胞nephrin和podocin蛋白表达量均较正常对照组降低(P均0.05);与模型对照组比较,中、高剂量组nephrin和podocin蛋白表达量均升高(P均0.05),而低剂量组仅podocin蛋白表达量较模型对照组有所升高(P0.05);与阳性对照组相比,低、中、高剂量组仅podocin蛋白表达量均较阳性对照组升高(P均0.05)。荧光定量PCR结果显示,六组大鼠肾脏组织足细胞nephrin和podocin mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=5.412、3.308,P=0.034、0.015);进一步两两比较发现,模型对照组足细胞nephrin和podocin mRNA相对表达量较正常对照组均显著降低(P均0.05);与模型对照组比较,中、高剂量组及阳性对照组nephrin和podocin mRNA的相对表达量均显著升高(P均0.05),而低剂量组仅podocin mRNA相对表达量有所升高(P0.05);与阳性对照组相比,仅低剂量组nephrin mRNA相对表达量有所降低(P0.05)。结论温肾健脾方对肾小球足细胞nephrin和podocin有不同程度的保护作用,从而维持肾小球的正常滤过功能,减轻尿蛋白排泄率,以达到防治糖尿病肾病的目的。     

咪唑立宾对大鼠急性Thy1肾炎肾小球系膜细胞增殖的抑制作用

目的 探讨咪唑立宾对急性Thy1肾炎大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及其作用机制.方法 15只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、Thy1肾炎模型组(模型组)及咪唑立宾治疗组(MZ组),各5只.应用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量,PAS染色评估系膜细胞增殖,RT-PCR检测血小板源生长因子-β的基因表达水平,Western blot检测血小板源生长因子-β的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组24 h尿蛋白明显增多(P＜0.05),系膜细胞明显增殖,细胞外基质大量积聚(P＜0.05),血小板源生长因子-β的mRNA及蛋白量高度表达(P＜0.05);与模型组比较,MZ组24 h尿蛋白明显减少(P＜0.05),系膜细胞增殖及细胞外基质大量积聚程度明显减轻(P＜0.05),血小板源生长因子-β的mRNA及蛋白质的表达明显下降(P＜0.05).结论 咪唑立宾能明显抑制急性Thy1肾炎大鼠系膜细胞增殖,减少尿蛋白,其对急性Thy1肾炎的治疗作用至少部分是通过下调血小板源生长因子-β的表达实现的.     

代谢综合征大鼠左心室外膜收缩功能不全与心外膜脂肪小窝蛋白-1表达降低平行出现

目的:探讨代谢综合征大鼠心脏收缩功能及心外膜脂肪小窝蛋白-1表达的改变。方法:16只6周龄雄性SD大鼠随机分为代谢综合征模型组及对照组。模型大鼠给予小剂量链脲佐菌素、N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐联合高脂、高盐、高糖饲养6周。实验开始及结束时测定大鼠的体重、空腹血糖、胰岛素、血脂、口服糖耐量及血压水平,超声检测大鼠左心室射血分数及应变指数。实验结束时分离心外膜脂肪检测小窝蛋白-1的表达。结果:6周后,模型大鼠体重[(462±31.6)g比(406±49.4)g]、空腹胰岛素[(5.47±2.26)ng/mL比(2.69±0.61)ng/mL]、口服糖耐量曲线下面积[(1544.6±502.2)mg/(L.min)比(911.0±69.8)mg/(L.min)]、甘油三酯[(0.66±0.44)mmol/L比(0.28±0.07)mmol/L]、总胆固醇[(1.71±0.43)mmol/L比(1.01±0.29)mmol/L]及低密度脂蛋白水平[(0.66±0.25)mmol/L比(0.22±0.08)mmol/L]、收缩压[(163.0±26.0)mmHg比(117.5±11.5)mmHg]及舒张压[(121.8±15.5)mmHg比(90.5±16.6)mmHg]均高于对照组(P<0.05),而空腹血糖及高密度脂蛋白水平与对照组比较无明显差异(P>0.05)。左心室外膜收缩期周向应变及应变率均低于对照组[(-7.20±1.46)%比(-9.87±1.93)%],[(-1.56±0.35)1/s比(-2.19±0.49)1/s;均P<0.05]。模型大鼠心外膜脂肪小窝蛋白-1的表达明显低于对照组。结论:代谢综合征大鼠左心室外膜收缩功能不全与心外膜脂肪小窝蛋白-1表达降低平行出现。     

老年膝关节骨性关节炎患者血清脂联素和白细胞介素-17及转化生长因子-β_1水平变化及临床意义

目的探讨血清脂联素(adiponectin, APN)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)及转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1, TGF-β_1)水平与老年膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)严重程度的相关性,评估其对老年KOA的诊断价值。方法 170例老年KOA患者为KOA组,70例体检健康者为对照组,采用ELISA法检测血清APN、IL-17及TGF-β_1水平,并进行2组及不同K-L分级患者间比较;绘制ROC曲线,分析APN、IL-17及TGF-β_1对老年KOA的诊断价值;采用Pearson相关性分析血清APN、IL-17、TGF-β_1水平与K-L分级等临床指标的相关性。结果 KOA组血清APN[(3 162.40±418.25)μg/L]、IL-17[(32.75±16.38)ng/L]及TGF-β_1[(54.87±13.16)μg/L]水平均高于对照组[(684.72±205.63)μg/L、(15.84±8.20)ng/L、(10.42±2.63)μg/L](P0.05),K-L分级Ⅳ级、Ⅲ级、Ⅱ患者血清APN、IL-17及TGF-β_1水平依次降低(P0.05);当血清APN、IL-17及TGF-β_1最佳截断值分别为2 483.50μg/L、27.42 ng/L、40.35μg/L时,三项联合诊断老年KOA的AUC(0.960)大于APN、IL-17、TGF-β_1单独检测的AUC(0.825、0.796、0.863),其敏感度为90.7%,特异度为83.5%;老年KOA患者血清APN、IL-17、TGF-β_1水平与K-L分级呈正相关(r=0.316,P=0.004;r=0.241,P=0.026;r=0.289,P=0.015),与年龄、性别、体质量指数无明显相关性(P0.05)。结论血清APN、IL-17及TGF-β_1水平升高与老年KOA严重程度密切相关,三项联合检测对老年KOA诊断有参考价值。     

经迷走神经复合体注射胰高血糖素样肽-1对糖尿病大鼠胃排空的影响

[目的]研究经迷走神经复合体(DVC)注射胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对糖尿病大鼠胃排空的影响,并探讨相关作用机制.[方法]30只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组及糖尿病GLP-1注药组.腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,DVC区埋置套管.糖尿病成模2周后,GLP-1注药组经套管注入GLP-1,对照组注入等量生理盐水.检测各组大鼠体质量、血糖、胃排空率、血浆GLP-1浓度及胃黏膜GLP-1受体(GLP-1R)mRNA的表达量.[结果]糖尿病大鼠体质量较正常组显著降低(P＜0.05),血糖浓度[(28.0±1.8)mmol/L]较正常组[(5.7±0.5)mmol/L]明显升高(P＜0.05),胃排空率[(72±11)％]较对照组[(35±8)％％]明显升高(P＜0.05),血浆GLP-1浓度及胃黏膜GLP-1R较对照组无明显变化.GLP-1注药组大鼠的胃排空率[(39±12)％]、血糖浓度[(14.6±1.3)mmol/L]较糖尿病组明显降低(P均＜0.05),血浆GLP-1浓度[(15.35±2.21)pmol/L]及胃窦GLP-1R mRNA/β-肌动蛋白(β-actin)(1.33±0.22)较糖尿病组[(10.78±2.06)pmol/L、1.10±0.14,P均＜0.05)显著升高,胃排空率与血浆GLP-1浓度及胃窦GLP-1R mRNA表达量呈负相关(r=-0.786、-0.731,P均＜0.05),与胃底GLP-1R mRNA表达量无相关性.[结论]DVC区注射GLP-1可减慢糖尿病早期加速的胃排空率,作用机制可能是促进血浆GLP-1的分泌及胃窦GLP-1R的表达.     

STF083010对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的肾保护作用

目的探讨STF083010对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的肾保护作用。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、IRI组与STF083010组,每组10只。假手术组大鼠开腹后仅分离双侧肾动脉,不夹闭肾动脉;IRI组和STF083010组大鼠采用无创动脉夹同时夹闭左、右肾动脉45 min后放开,建立IRI模型;STF083010组大鼠建立IRI模型前2h腹腔注射STF083010 15mg/kg。缺血再灌注24h后,应用全自动生化仪检测3组大鼠血清尿素氮和肌酐水平,3组大鼠均行肾组织病理学PAS染色,采用免疫组织化学法检测肾组织XBP1、GRP78蛋白阳性表达率,采用实时荧光定量PCR检测肾组织XBP1、GRP78 mRNA表达水平。结果IRI组血清肌酐[(322.10±18.93)μmol/L]、尿素氮[(41.16±3.09)mmol/L]水平、肾小管损伤评分(202.50±9.15)高于STF083010组[(149.70±14.80)μmol/L、(25.22±3.81)mmol/L、129.50±5.49]和假手术组[(49.58±2.82)μmol/L、(7.56±0.70)mmol/L、25.88±1.46](P0.05),STF083010组高于假手术组(P0.05);IRI组和STF083010组大鼠肾组织GRP78蛋白阳性表达率[(27.16±3.98)%、(58.72±7.12)%]、GRP78 mRNA表达水平(0.086±0.007、0.335±0.023)、XBP1蛋白阳性表达率[(56.32±5.21)%、(29.83±3.78)%]、XBP1mRNA表达水平(0.172±0.053、0.088±0.054)高于假手术组[(4.86±2.30)%、0.015±0.001、(5.68±1.37)%、0.039±0.004](P0.05),STF083010组GRP78蛋白阳性表达率和GRP78mRNA表达水平高于IRI组,XBP1蛋白阳性表达率和XBP1mRNA表达水平低于IRI组(P0.05)。结论 STF083010可通过抑制XBP1表达,增加GRP78表达保护大鼠肾功能。     

N-乙酰半胱氨酸对急性肺损伤大鼠肺组织转化生长因子-β1表达影响的研究

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对急性肺损伤(ALI)肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将24只SD大鼠随机分为正常对照组、ALI模型组、地塞米松干预组和NAC干预组4组,每组6只.经尾静脉注射内毒素脂多糖(LPS,5 mg/kg)制备大鼠ALI模型,在肺损伤模型成功后24 h处死大鼠,取左叶肺组织,观察各组大鼠肺组织病理和TGF-β1免疫组化染色结果.结果 NAC干预组肺部炎性细胞浸润、渗出、出血较ALI模型组明显减轻;ALI模型组肺组织TGF-β1免疫组化染色灰度值较正常对照组明显减少(155.42±3.58比190.81±6.28,P＜0.01),表示其表达明显增加;NAC干预组及地塞米松干预组肺组织TGF-β1免疫组化染色的灰度值明显高于ALI模型组(187.30±20.92和193.99±17.80比155.42±3.58,P均＜0.01),表示其表达明显降低;且NAC干预组、地塞米松干预组与正常对照组间表达水平比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 NAC在ALI的早期可抑制肺组织TGF-β1的表达,肺组织病理亦显示肺部病变明显改善,从而达到对ALI的保护作用.     

延肾口服液对肾间质纤维化大鼠肾组织转化生长因子-β和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 探讨延肾口服液对肾间质纤维化(RIF)大鼠的影响及可能的作用机制.方法 将75只SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组和模型组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)复制RIF模型,成模大鼠再随机分为模型组、贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组,每组15只.术前1 d治疗组开始灌胃贝那普利3.5 ml/d及延肾口服液2.8 ml/d、1.4 ml/d;假手术组、模型组给予等量生理盐水.术后8周留取血、尿标本,行血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)及尿肌酐(UCr)、尿尿素氮(UUN)和24 h尿蛋白定量测定;处死大鼠取肾组织,苏木素-伊红(HE)染色观察各组RIF程度;用免疫组化二步法和半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白和mRNA表达.结果 ①光镜下观察,模型组肾小管上皮细胞呈现不同程度的萎缩、变性及坏死,小管周围肾间质间隙增宽;贝那普利组和延肾口服液高、低剂量组部分肾小管轻度扩张,病变程度轻于模型组.②与假手术组比较,模型组UUN、UCr、BUN及TGF-β、α-SMA的蛋白和mRNA表达均明显升高(均P＜0.01);与模型组比较,贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组TGF-β、α-SMA蛋白和mRNA[吸光度(A)值]表达均显著减少,以延肾口服液高剂量组减少更显著(TGF-β蛋白:0.72±0.24比1.78±0.33,α-SMA蛋白:0.87±0.55比1.59±0.44;TGF-β mRNA:1.68±0.53比3.14±0.44,α-SMA mRNA:1.66±0.14比3.41±0.10,均P＜0.01);贝那普利组和延肾口服液高、低剂量组UUN(mmol/L)、UCr(μmol/L)、BUN(mmol/L)均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),以延肾口服液高剂量组降低更显著(UUN:0.56±0.19比1.34±0.22,UCr:2788.00±178.98比3652.75±188.26,BUN:7.25±0.47比16.30±0.47,均P＜0.01),延肾口服液高剂量组与贝那普利组相比差异无统计学意义(均P＞0.05),SCr及24 h尿蛋白定量在各组间比较差异均无统计学意义 (均P＞0.05).结论 延肾口服液延缓UUO 模型大鼠RIF的作用与其抑制TGF-β和α-SMA表达有关,其疗效与贝那普利组相似,并表现出明显的量效关系.     

血小板反应蛋白-1对多囊卵巢综合征大鼠血清内分泌腺来源血管内皮生长因子及卵巢组织形态学的影响

目的探讨血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1, TSP-1)对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠血清性激素、内分泌腺来源血管内皮生长因子(endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor, EG-VEGF)表达及卵巢组织形态学的影响。方法 50只雌性SD大鼠随机分为模型组30只和空白组20只,模型组将来曲唑1 mg/kg溶于质量分数1%羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose, CMC)溶液灌胃,2 mL/d,连续21 d,制备PCOS模型;空白组给予等体积质量分数1%CMC溶液灌胃,连续21 d。造模成功后,2组各处死10只大鼠。将模型组剩余20只大鼠随机分为PCOS组和治疗组各10只,空白组剩余10只大鼠为对照组,治疗组腹腔注射TSP-1溶液0.2 mL/d,PCOS组和对照组腹腔注射等体积生理盐水,均连续21 d。采用ELISA法检测血清睾酮、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、TSP-1及EG-VEGF水平;采血后处死大鼠,取卵巢,称质量后行组织病理检查,采用免疫组织化学法检测卵巢组织TSP-1、EG-VEGF蛋白阳性表达率。实验过程中记录大鼠动情周期,计算药物处理前后大鼠体质量。结果空白组、对照组大鼠动情周期均正常,模型组应用来曲唑第13天动情周期消失,治疗组应用TSP-1第14天4只大鼠恢复规律的动情周期;PCOS组体质量增加值[(190.90±8.33)g]较治疗组[(165.00±10.36)g]、对照组[(170.30±9.30)g]大(P0.05),卵巢质量[(0.09±0.01)g]较治疗组[(0.07±0.01)g]、对照组[(0.07±0.01)g]大(P0.05),治疗组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);药物处理第22天,PCOS组睾酮水平[(92.01±15.46)nmol/L]高于对照组[(60.21±10.17)nmol/L]、治疗组[(62.26±9.68)nmol/L](P0.05),LH水平[(3.04±0.16)u/L]高于对照组[(2.50±0.20)u/L]、治疗组[(2.52±0.18)u/L](P0.05),TSP-1水平[(171.84±23.48)μg/L]低于对照组[(251.44±26.04)μg/L]、治疗组[(223.44±20.64)μg/L](P0.05);治疗组TSP-1水平低于对照组(P0.05),睾酮、LH水平与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);3组FSH、EG-VEGF水平比较差异无统计学意义(P0.05);与PCOS组比较,治疗组大鼠卵泡和黄体数量略有增加,囊性扩张卵泡明显减少,颗粒细胞层增厚,排列紧密;3组TSP-1、EG-VEGF蛋白均呈阳性表达,PCOS组EG-VEGF蛋白强阳性表达率(80%)明显高于治疗组(0)和对照组(0)(P0.05),TSP-1蛋白强阳性表达率(50%)与治疗组(60%)、对照组(60%)比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 TSP-1能改善PCOS大鼠血清性激素紊乱、卵巢排卵功能和卵巢组织形态,对卵巢组织EG-VEGF蛋白的表达有一定影响,其可能通过调节EG-VEGF发挥治疗PCOS的作用。     

内皮素-1受体拮抗剂对高脂血症家兔血管内皮功能的影响

目的探讨内皮素-1受体拮抗剂对高脂血症家兔血管内皮功能的影响。方法 24只雄性新西兰大白兔随机分为对照组、模型组和BQ-123干预的内皮素-1拮抗剂组(拮抗剂组),每组8只。对照组饲喂普通饲料,模型组和拮抗剂组均饲喂高脂饲料,第6周时对照组和模型组兔静脉注射生理盐水4mL/d,连续5周,拮抗剂组静脉滴注选择性内皮素A受体拮抗剂BQ-123 4mL/d,30min滴完,连续5周。10周后检测3组血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平;采用免疫组织化学SP法检测兔主动脉组织内皮素-1和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)表达水平,采用PCR法检测兔主动脉组织CRP mRNA表达情况。结果拮抗剂组血清总胆固醇[(4.12±0.92)mmol/L]、三酰甘油[(1.43±0.58)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(1.99±0.86)mmol/L]水平均低于模型组[(6.36±1.23)、(2.14±0.70)、(2.79±0.87)mmol/L](P0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇水平[(2.15±0.56)mmol/L]高于模型组[(1.02±0.42)mmol/L](P0.05);模型组和拮抗剂组动脉粥样硬化病变相对面积(32.06%、12.35%)明显高于对照组(3.78%)(P0.01),模型组高于拮抗剂组(P0.05);拮抗剂组内膜厚度[(226.00±4.25)μm]、中膜厚度[(142.00±1.86)μm]、内膜面积[(0.34±0.04)μm2]、中膜面积[(0.46±0.04)μm2]均较模型组[(325.00±5.68)μm、(185.00±2.07)μm、(0.52±0.04)μm2、(0.73±0.05)μm2]明显下降(P0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);拮抗剂组主动脉组织内皮素-1(1.39±0.78)、CRP mRNA(3.42±1.23)水平较模型组(3.98±0.76、6.37±1.66)明显下降(P0.05);主动脉组织中内皮素-1与CRP mRNA表达水平呈正相关(r=0.346,P=0.024)。结论内皮素-1激活的内皮素A受体可导致家兔动脉粥样硬化斑块CRP表达上调,选择性内皮素A受体拮抗剂可预防家兔动脉粥样硬化进展。