蛋白酶体抑制剂对胶质瘤U251细胞增殖的抑制作用

细胞内存在两种蛋白降解的途径,一种是通过自噬途径降解大分子的蛋白,另一种是通过泛素-蛋白酶体途径降解,泛素-蛋白酶体（ubiquitin-proteasome system,UPS）途径是细胞内非溶酶体途径蛋白质降解通路,不仅降解变性、异常或起短暂作用的蛋白质,     

去泛素化酶USP22与肿瘤关系的研究进展

去泛素化酶USP22为人类基因组编码的50多种特异性蛋白酶之一,属去泛素化酶的亚家族,是一种重要的去泛素化酶。USP22通过特异性识别靶蛋白,使靶蛋白去泛素化并阻止其降解。研究表明,USP22可通过多种途径影响肿瘤的发生及发展,如细胞的凋亡和自噬、肿瘤信号通路、细胞周期的调节和DNA损伤修复等,而且抑制USP22表达可影响细胞的增殖、成瘤和浸润。该文就USP22与肿瘤发生及发展的关系作一综述。     

Cks1在P27蛋白泛素化降解过程中的作用

在细胞分裂周期中，Cks1蛋白参与并促进P27蛋白泛素化降解，从而解除其对细胞周期蛋白激酶的抑制作用，促使细胞通过G1／S转折期。在大部分肿瘤细胞中Cks1蛋白表达上调，P27蛋白过多泛素化降解，Cks1蛋白参与并促进P27蛋白泛素化降解与细胞周期调控和肿瘤发生发展关系密切。本文综述了Cks1蛋白参与P27蛋白泛素化降解的基础和临床研究进展。     

线粒体自噬参与帕金森病发病机制的研究进展

帕金森病是中老年人常见的中枢神经系统退行性疾病,近年的研究表明线粒体自噬是帕金森病的发病机制之一。目前已知帕金森病相关基因PINK1、PARKIN、SNCA、DJ-1、LRRK2以及ATP13A2和GBA均参与线粒体自噬的调节。其中PINK1参与线粒体代谢、线粒体动力和异常蛋白的降解过程,并参与PARKIN移位至受损线粒体触发线粒体自噬;PARKIN参与泛素-蛋白降解途径,调节自噬小体吞噬、降解陈旧线粒体,以保护线粒体DNA、维持线粒体呼吸链活性来发挥细胞保护作用;DJ-1参与细胞应激环境下线粒体活性和形态的调节;SNCA编码的α-突触核蛋白通过影响自噬小体的形成、调节线粒体动力和保持线粒体的钙平衡来调控线粒体自噬;LRRK2基因突变也可以引发线粒体自噬。此外,环境因素也可能直接或间接地对线粒体自噬产生调控。本文将对线粒体自噬与帕金森病之间的关联作一简要综述。     

细胞自噬与肿瘤的研究进展

细胞自噬是细胞在某些刺激因素下,细胞内膜性结构包绕损伤的蛋白或细胞器,并通过溶酶体融合降解损伤的蛋白质或细胞器的过程;生理状况下的自噬,对于维持细胞稳态有积极作用;肿瘤形成以后,细胞自噬反为癌细胞提供更多的营养,起到促进肿瘤发展的功能。自噬主要有三种方式,即分子伴侣介导的自噬、微自噬和巨自噬,均通过两个泛素化途径实现。细胞自噬可以通过影响DNA损伤修复、细胞应激反应、肿瘤基因表达、凋亡及病毒感染反应等诸多过程参与细胞癌变,也可能在肿瘤治疗过程中降低了对于化疗和放疗的敏感性,但是在肿瘤进展的不同时期,不同肿瘤之间自噬活性的变化不一。自噬过程中的重要中间产物或关键酶可能成为抗肿瘤药物的靶标,拓展了肿瘤防治思路。     

脂质沉积性肌病中自噬和泛素相关蛋白表达研究

[目的]探讨自噬相关蛋白和泛素相关蛋白的表达对脂质沉积性肌病(lipid storage myopathy,LSM)的影响.[方法]选择2010年1月至2015年12月在本院就诊的LSM患者30例作为本次临床研究对象,采用随机数据表法选择其中15例作为观察组,选取同时段于本院进行健康体检且年龄性别相匹配的15例正常体检者作为对照组,采用Western Blot检测上述两组骨骼肌中自噬相关蛋白和泛素相关蛋白的表达情况.[结果]观察组骨骼肌中自噬相关蛋白p62、LC3 Ⅰ的表达水平显著高于对照组,而LC3 Ⅱ的表达水平显著低于对照组,且观察组骨骼肌中LC3 Ⅰ/LC3 Ⅱ的比值明显高于对照组;此外,观察组骨骼肌中泛素蛋白连接酶MuRF1、Astrogin-1和锌指蛋白ZNF216的表达水平均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05).[结论]人体自噬功能的抑制以及泛素化相关蛋白表达水平的升高对脂质沉积性肌病的发生发展具有诱导作用.     

泛素蛋白酶体抑制剂的分子机制

<正>生物体细胞在精细的调节之下进行蛋白质合成,这有助于维持机体细胞的正常增殖、分化和代谢运转,以及选择性地降解多余无用的蛋白质。泛素化蛋白质降解系统,是机体内蛋白质降解的另一主要方式。该系统步骤多、过程复杂,主要包括底物蛋白质的多泛素化修饰和26S蛋白水解酶复合物对底物蛋白质的降解。由机体细胞自然识别程序识别出需要降解的蛋白质,泛素蛋白分子通过共轭双键与底物蛋白质连接形成标签蛋白(即泛素降解底物蛋白质),再被26S蛋白水解酶复合物     

泛素羧基端水解酶L1在人类疾病发生发展中的调控作用

泛素–蛋白酶系统(ubiquitin proteasome system,UPS)在细胞分裂、细胞信号转导以及细胞程序死亡的过程中起到非常重要的作用。此系统主要是靠泛素化酶和去泛素化酶来实施对于目的蛋白的快速精确调控。其中,泛素羧基端水解酶L1(ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1,UCH-L1)是去泛素化酶家族中的一个重要的分子,是由223个氨基酸组成的一类半胱氨酸水解酶,通过识别和裂解目标蛋白上羧基末端第76位甘氨酸,可把泛素分子从目标蛋白的多聚泛素化链上切割下来,阻止目标蛋白被UPS系统降解,从而对目标蛋白的降解代谢负向调控。由此而产生游离的泛素单体,则进一步循环参与下一个目标蛋白的泛素化代谢。UCH-L1是一个多功能的分子,除了去泛素化酶功能,还有稳定泛素单体,泛素连接酶及参与细胞骨架蛋白调控,细胞微管形成等多功能作用。     

泛素特异性蛋白酶24的作用机制及研究进展

泛素特异性蛋白酶24(ubiquitin-specific protease 24,USP24)属于去泛素化蛋白酶家族,可以水解靶蛋白上的泛素分子从而调节靶蛋白的稳定性和活性。USP24在调控肿瘤的发生及发展、神经退行性疾病、细胞自噬、DNA损伤修复、感染性疾病中发挥着重要作用。近年来对USP24的文献报道尚少,对USP24的深入研究仍有较大空间,该文将USP24研究进展作一综述。     

羟脑苷脂(CRBN)在来那度胺抗骨髓瘤活性中的分子机制

羟脑苷脂(Cereblon,CRBN)是一种具有离子蛋白酶活性的大脑相关蛋白,可与DNA损伤结合蛋白-1(DDB1)、滞蛋白4(Cullin4,Cul4A或Cul4B)和调节因子Cullins 1(RoC1)相互作用形成功能性E3泛素连接酶复合物(CRBN-CRL4),结合底物后通过泛素-蛋白酶体途径进行蛋白水解。它也是免疫调节剂(IMiD)抗骨髓瘤作用的必需靶蛋白。来那度胺与CRBN结合时会招募新的底物,使其结合在CRBN-CRL4上,导致其泛素化和蛋白酶体依赖的降解增加,从而产生抗骨髓瘤活性。与该复合物结合的底物有IKZF1、IKZF3蛋白和谷氨酰胺合成酶(GS)等,来那度胺处理后的IKZF1和IKZF3的CRBN依赖性降解也是H2O2介导的氧化应激的结果。除了泛素化依赖外,来那度胺还能通过介导非泛素依赖性途径,以竞争性阻止CRBN结合CD147-MCT1,以调节其抗肿瘤活性;其还能通过调节miRNA水平,CRBN结合下游蛋白AGO2的表达在多发性骨髓瘤(MM)细胞中起作用。来那度胺抗骨髓瘤活性的分子机制有很多种,本文从泛素化途径和非泛素化途径2方面就CRBN在来那度胺抗骨髓瘤活性的分子机制作一综述。     

基于“瘀阻经络”病机探讨自噬与脊髓损伤修复的关系北大核心CSCD

脊髓损伤是各种创伤所致的中枢神经系统损伤的一种疾病。研究发现脊髓损伤后自噬水平一定程度的上调能促进脊髓损伤后功能的修复。自噬在应激状态下通过降解体内过多的错误折叠蛋白及受损细胞器,为细胞供能,以维持细胞内环境的稳定。具有活血祛瘀通络功效的中药在治疗脊髓损伤中广泛受到关注,其作用与细胞自噬的调节有着密切的联系。     

基于“瘀阻经络”病机探讨自噬与脊髓损伤修复的关系

脊髓损伤是各种创伤所致的中枢神经系统损伤的一种疾病。研究发现脊髓损伤后自噬水平一定程度的上调能促进脊髓损伤后功能的修复。自噬在应激状态下通过降解体内过多的错误折叠蛋白及受损细胞器,为细胞供能,以维持细胞内环境的稳定。具有活血祛瘀通络功效的中药在治疗脊髓损伤中广泛受到关注,其作用与细胞自噬的调节有着密切的联系。     

泛素结合酶E2在肝细胞癌中的机制研究进展

泛素化在蛋白降解过程中发挥重要作用,参与基因转录和翻译、信号转导和细胞周期调控等生物学过程.泛素化由泛素激活酶E1-泛素结合酶E2-泛素连接酶E3级联依次介导.泛素结合酶E2可促进泛素与底物的结合,调节各种蛋白的稳定性以及蛋白间的相互作用.在肝细胞癌中,泛素结合酶E2参与DNA修复、细胞凋亡及细胞周期调节等,并可激活促...     

亮氨酸对局灶性脑缺血自噬病变的影响

自噬是细胞受到刺激后,通过溶酶体途径降解细胞内物质的统称,广泛存在于真核细胞中,主要负责长半衰期蛋白及细胞器的降解和再利用,以电镜下出现大量双层膜结构的自噬体为特征.自噬存在于脑缺血病灶中,但作用仍不明确,可能具有双刃剑作用,氨基酸尤其是亮氨酸、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是自噬的重要调控因子.为探讨局灶性脑缺血中自噬病变的调节机制,本实验拟通过亮氨酸干预,观察其对mTOR的表达及脑缺血自噬病变的影响.     

自噬与糖尿病

自噬是一种降解自身细胞质蛋白和细胞器的过程,是机体应对体内外应激反应的机制之一,发挥着保护细胞的作用。越来越多的研究表明自噬与糖尿病密切相关,自噬可能通过多种途径影响糖尿病的发生,如影响胰岛β细胞的功能。此外,自噬还可能与糖尿病并发症有关,如神经病变,心肌病变等。     

Bruton酪氨酸激酶泛素化调节的研究

目的:探讨Bruton酪氨酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase,Btk)的代谢调节途径和可能的分子机制。方法:用蛋白酶体抑制剂和/或佛波酯(PMA)处理内源性表达Btk的B细胞系A20、Ramos细胞及转染了外源性Btk的293T、COS-7细胞,应用RT-PCR法检测上述细胞Btk mRNA表达水平,Western blot法检测Btk蛋白表达水平;通过抗Ig M抗体交联BCR刺激A20细胞,检测细胞Btk泛素化水平;用Btk、泛素和Cbl共转染COS-7细胞,检测其泛素化Btk水平;用Btk和编码野生型或突变型泛素(K29R、K48R、K63R)即单泛素的质粒共转染293T细胞,经蛋白酶体抑制剂处理后用抗泛素抗体和抗Btk抗体检测泛素化Btk水平;稳定转染并表达Btk-GFP的293T细胞经氯喹处理后,应用Western blot检测其Btk蛋白表达水平。结果:蛋白酶体特异性抑制剂和/或佛波酯可减少Btk转录,从而引起Btk蛋白表达下降。Btk通过泛素化进行翻译后修饰,泛素化修饰程度与Btk的表达及活化水平有关。Cbl为Btk的E3泛素连接酶,它可导致Btk泛素化。Btk受多聚和/或单泛素化调节,Btk可在溶酶体内发生泛素化和降解,溶酶体抑制剂氯喹可上调Btk的表达。结论:Btk蛋白的表达水平受泛素化途径调节,该调节与Btk的表达水平有关。     

去泛素化酶影响低氧诱导因子-1α泛素化过程的研究进展

低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是一种具有氧依赖性的核转录调控因子。在缺氧条件下HIF-1α大量聚集于细胞浆,继而转入细胞核促进靶基因转录表达,增强肿瘤的增殖、侵袭和转移能力;常氧条件下,HIF-1α的合成与降解水平保持相对平衡,其降解主要通过泛素-蛋白酶体途径实现。大量研究已经证实,去泛素化酶不仅可以有效逆转HIF-1α的泛素化-蛋白酶体降解过程,也可以通过各种途径促进肿瘤的发生发展,本文就去泛素化酶影响HIF-1α泛素化过程的作用机制作一综述。     

自噬对巨噬细胞极化的影响及其与慢性炎症性疾病的关系

自噬是广泛存在于真核细胞内的一种高度保守的细胞过程,它通过降解细胞内受损的细胞器、长寿蛋白、脂质以及病原体,在维持细胞能量稳态、细胞分化及器官发育、炎症及免疫调节方面发挥着重要的作用。细胞在遭受能量应激、缺氧、活性氧释放、DNA损伤、病原体入侵等刺激后会激活自噬相关蛋白及通路,诱导具有双层膜结构的自噬小体形成,自噬小体包裹异常胞内成分后与溶酶体融合,最终降解成为可供细胞循环利用的小分子物。     

烧伤早期大鼠骨骼肌组织泛素转录表达的变化研究

目的：研究烧伤后大鼠骨骼肌组织泛素－蛋白毒体（ubiquitin-proteasome)蛋白降解途径组成成分中泛素表达的变化,探讨烧伤后骨骼肌蛋白降解的增强与泛素－蛋白酶体蛋白降解途径表达变化间的关系。方法：借助烫伤大鼠动物模型,利用骨骼肌离体孵育系统,应用氨基酸自动分析仪测定孵育液和骨骼肌组织中酪氨酸（Tyr)和3－甲基组氨酸（3－MH）量的变化,用RNA印迹技术（Northern blot)方法测定骨骼肌组织中泛素mRNA表达水平。结果：烧伤后大鼠骨骼肌释放Tyr和3－MH增多,以3－MH增加显著;烧伤后骨骼肌组织中泛素－2．4kb的mRNA表达上调明显。泛素mRNA表达增加量与Tyr和3－MH增加量间均呈显著正相关。结论：烧伤后大鼠骨骼肌蛋白降解明显增强,其机制与泛素－蛋白酶体蛋白降解途径在转录水平被激活密切相关。     

细胞自噬在血液系统恶性疾病中作用研究进展

细胞自噬是通过溶酶体途径降解细胞自身成分的一种分解代谢过程,该过程异常可使细胞稳态发生变化,影响多种疾病的发生、发展以及治疗。在血液系统恶性疾病中,细胞自噬不仅在造血干细胞的功能维持中起重要作用,还与化疗药物耐药具有相关性。SQSTM1/P62是参与细胞自噬、肿瘤发生的关键蛋白,其水平与细胞自噬调节密切相关。本文就细胞自噬在血液系统恶性疾病发展中的作用及其对化疗疗效影响的研究进展作一综述。