转化生长因子-β_3对兔牙髓干细胞增殖及骨向分化的影响

目的探讨转化生长因子-β_3(transforming growth factor-β_3,TGF-β_3)对体外培养的兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)增殖和分化的影响。方法采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养获得DPSCs,光镜下行形态学观察;将体外培养的第3代DPSCs分为5组,分别为对照组、20μg/L TGF-β_3组、40μg/L TGF-β_3组、80μg/L TGF-β_3组和100μg/L TGF-β_3组,分别加入0、20、40、80、100μg/L TGF-β_3;采用MTT法检测5组DPSCs A490值,采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ型胶原酶(collagenⅠ,Col-Ⅰ)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)表达情况,采用茜素红染色检测出现矿化结节情况,并进行比较。结果兔DPSCs呈集落状生长,在体外有一定克隆形成能力;对照组及20、40、80、100μg/L TGF-β_3组兔DPSCs A490值分别为0.34±0.55、0.34±0.19、0.33±0.47、0.33±0.30、0.34±0.47,各组间两两比较差异均无统计学意义(P0.05);80、100μg/L TGF-β_3组诱导后第3天出现Col-Ⅰ阳性表达,第7天开始消失,第5~7天出现BSP阳性表达,第7~14天出现OC阳性表达,第7天出现矿化结节;40μg/L TGF-β_3组第5~7天均有Col-Ⅰ阳性表达,第7天出现BSP阳性表达,第14天出现OC阳性表达,第14天出现矿化结节;20μg/L组第7天出现Col-Ⅰ阳性表达,第14天消失,第14天出现BSP阳性表达,第21天出现OC阳性表达,第21天出现矿化结节;对照组Col-Ⅰ、BSP和OC均为阴性,未出现矿化结节。结论TGF-β_3对体外培养的兔DPSCs增殖无影响,但对兔DPSCs向成骨细胞分化能力有一定促进作用,并在一定范围内呈浓度依赖关系。     

转化生长因子-β_3和牙髓干细胞在兔面神经损伤修复中作用

目的探讨再生室内联合应用牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)和转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)修复兔面神经横断性损伤的可行性,比较各时间段不同药物干预后面神经的恢复情况。方法健康成年新西兰大白兔36只,随机分为DPSCs+TGF-β3组(实验组)、TGF-β3组和PBS组,每组各12只,3组均于兔左面颊部分离面神经上颊支并切断,利用硅胶管作为再生室桥接离断的神经上颊支,建立面神经上颊支横断伤模型。实验组在再生室内加入100ng/μL TGF-β3液和1×108/LDPSCs悬液0.1mL,TGF-β3组加入等量100ng/μL TGF-β3液,PBS组加入等量PBS液,术后4、12周比较3组兔面神经修复再生情况。结果4、12周时实验组神经纤维数[(1 034.58±94.28)、(1 425.92±188.98)根]和纤维直径[(2.05±0.14)、(7.18±0.40)μm]高于TGF-β3组[(935.00±44.60)、(1 053.42±135.26)根,(1.56±0.12)、(6.21±0.47)μm]和PBS组[(555.50±80.20)、(694.36±24.11)根,(1.26±0.08)、(3.64±0.56)μm](P0.05);12周时3组再生神经纤维总数和纤维直径均高于4周时(P0.05)。结论 TGF-β3与DPSCs联合应用可有效促进面神经再生,二者联合应用较单用TGF-β3修复效果好;DPSCs可作为种子细胞应用于面神经组织工程。     

骨形成蛋白-2与转化生长因子-β_3对牙髓干细胞成骨向分化的对比研究

目的探讨转化生长因子-β_3(transforming growth factor-β_3,TGF-β_3)、骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨向分化的影响。方法健康新西兰幼兔4只,取牙髓组织采用酶解组织块法分离培养获得DPSCs,镜下观察细胞形态及生长状况。将培养的第3代DPSCs分为BMP-2组和TGF-β_3组,分别加入浓度为80μg/L的BMP-2、TGF-β_3的完全培养液,采用免疫组织化学法于诱导第3、7天检测Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ)表达,于第7、14天检测骨钙素(osteocalcin,OC)表达;诱导第7、14天,对BMP-2组、TGF-β_3组行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色后,倒置显微镜下观察ALP活性染色结果。结果兔DPSCs分离、培养48h,组织块周围有细胞游出、贴壁生长,培养的第3代兔DPSCs大多为长梭形,也可为多角形,呈巢式或集落生长;TGF-β_3组诱导第3天COL-1表达的累计吸光度(integrated optiacal density,IOD)值(159 676.79±63 959.56)高于BMP-2组(44 047.33±15 853.65)(P0.05),诱导第7天COL-1表达的IOD值(245 378.26±60 084.60)与BMP-2组(223 294.43±80 266.72)比较差异无统计学意义(P0.05);TGF-β_3组诱导第7天OC表达的IOD值(109 568.82±14 079.88)高于BMP-2组(55 168.57±1 694.93)(P0.05),诱导第14天OC表达的IOD值(411 544.95±82 803.24)与BMP-2组(360 103.54±20 835.36)比较差异无统计学意义(P0.05);BMP-2组、TGF-β_3组诱导第7天出现少量淡蓝色ALP阳性区,诱导第14天蓝色ALP阳性区增大且蓝染颜色加重,镜下观察2组无明显差异。结论与BMP-2比较,TGF-β_3对早期兔DPSCs向成骨细胞分化有较明显的促进作用。     

咪唑立宾对阿霉素肾病大鼠肾小球nephrin和转化生长因子β_1蛋白表达的影响

目的探讨咪唑立宾对阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞相关蛋白nephrin和转化生长因子β_1(transforming growth factorβ_1,TGF-β_1)表达的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为模型组、干预组和对照组各12只;模型组和干预组大鼠经尾静脉注射阿霉素6.5mg/kg建立阿霉素肾病大鼠模型,对照组注射等量生理盐水;1周后,干预组给予咪唑立宾20mg/(kg·d)灌胃,1次/d,连续8周,对照组和模型组给予等量蒸馏水灌胃。8周末,检测3组大鼠24h尿蛋白定量及血生化指标,取肾脏组织行组织病理学检查,采用免疫组织化学法检测nephrin和TGF-β_1蛋白阳性表达率,采用Western blot法检测nephrin和TGF-β_1蛋白相对表达量。结果模型组和干预组大鼠24h尿蛋白定量[(334.2±79.8)、(150.8±61.2)mg]、三酰甘油[(4.98±2.23)、(1.78±1.04)mmol/L]和总胆固醇[(6.28±2.89)、(4.99±1.98)mmol/L]水平均高于对照组[(19.4±4.2)mg、(0.28±0.12)mmol/L、(1.54±0.53)mmol/L)(P0.05),血白蛋白水平[(22.80±1.11)、(26.22±1.68)g/L]低于对照组[(32.50±0.78)g/L](P0.05),模型组24h尿蛋白定量和三酰甘油水平高于干预组(P0.05),血白蛋白水平低于干预组(P0.05),总胆固醇水平与干预组比较差异无统计学意义(P0.05);3组血清肌酐水平比较差异无统计学意义(P0.05);模型组肾小球nephrin蛋白阳性表达率和相对表达量(7%、0.11±0.02)低于干预组(24%、0.49±0.06)和对照组(43%、0.79±0.08),干预组低于对照组(P0.05);模型组肾脏TGF-β_1蛋白阳性表达率和相对表达量(94%、1.03±0.08)高于干预组(78%、0.75±0.07)和对照组(45%、0.36±0.04)(P0.05),干预组高于对照组(P0.05)。结论咪唑立宾可增加肾小球nephrin表达,从而减轻足细胞损伤,抑制TGF-β_1表达,减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白的排泄,减轻及延缓肾小球硬化。     

1型糖尿病大鼠心肌病变及转化生长因子β_1和结缔组织生长因子表达的变化及意义

目的 探讨不同病程糖尿病模型大鼠心肌的病理变化及转化生长因子β_1(TGF-β_1)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达变化及意义.方法 腹腔注射链尿佐菌素(65 mg/kg)建立SD大鼠1型糖尿病模型,分别于4、12、24周检测心肌羟脯氨酸含量(HPC),Masson染色观察胶原纤维容积分数(CVF)及血管周围胶原面积(PVCA),用免疫组织化学法对心肌胶原蛋白(Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ)、TGF-β_1和CTGF在心肌的分布及表达进行半定量分析,心肌光镜与透射电镜观察,并与同龄正常大鼠进行比较.结果 ①与对照组相比,糖尿病组大鼠心肌纤维化指标HPC[4周:(134.67±37.86)、(184.30±31.26)μg/g,12周:(151.17±21.59)、(202.80±40.06)μg/g,24周:(169.67±48.27)、(250.17±53.96)μg/g,P均<0.05]、CVF[4周:(3.38±0.70)%、(5.68±0.93)%,12周:(4.76±1.34)%、(11.17±1.65)%,24周:(6.08±0.88)%、(13.36±0.85)%,P均<0.05]、PVCA[4周:(26±13)%、(58±18)%,12周:(36±15)%、(93±33)%,24周:(54±44)%、(154±57)%,P均<0.05]、Collagen Ⅰ[4周:(1.33±0.33)×10~3、(4.55±0.74)×10~3,12周:(2.16±0.11)×10~3、(6.06±0.73)×10~3,24周:(3.00±0.32)×10~3、(7.20±0.18)×10~3,P均<0.05)、Collagen Ⅲ[4周:(1.56±0.23)×10~3、(3.42±1.40)×10~3,12周:(2.93±0.40)×10~3、(5.58±1.29)×10~3,24周:(3.25±0.26)×10~3、(4.20±0.17)×10~3,P均<0.05]表达均明显增高.电镜发现糖尿病组心肌细胞肌丝稀疏,线粒体肿胀,闻质胶原增生.②与对照组相比,糖尿病组TGF-β_1[4周:(1.15±0.14)×10~3、(2.13±0.49)×10~3,12周:(2.96±0.24)×10~3、(5.28±0.24)×10~3,24周:(3.25±0.65)×10~3、(4.41±0.73)×10~3,P<0.05]和CTGF的表达[4周:(2.28±0.86)×10~3、(5.98±1.38)×10~3,12周:(3.92±0.91)×10~3、(6.47±0.50)×10~3,24周:(4.54±1.01)×10~3、(7.85±1.45)×10~3,P均<0.05]表达均明显增高.TGF-β_13个月时迭高峰,6个月时减少;CTGF随病程进展逐渐增高(F=4.06,P<0.05).结论 早期糖尿病大鼠模型已出现心肌纤维化改变,糖尿病心肌纤维化与TGF-β_1、CTGF表达增强有关.     

转化生长因子-β_1和Smad7信号通路与大鼠肝纤维化的相关性

目的探讨肝纤维化组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad7基因在信号传导通路中的作用。方法 40只Wistar大鼠随机分为对照组和模型组各20只,模型组腹腔注射质量分数10%四氯化碳注射液8周,对照组腹腔注射质量分数0.9%氯化钠注射液。2组于8周后检测血清谷草转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)和TGF-β1水平,组织病理观察肝组织炎症反应及纤维化程度,采用Western blot与RT-PCR法检测肝组织TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白和mRNA水平。结果模型组血清GPT[(178.45±24.36)u/L]、HA[(693.37±206.35)μg/L]和TGF-β1[73.94±28.37)u/L]水平明显高于对照组[(42.80±8.37)u/L、(59.35±28.12)μg/L和(20.68±17.85)u/L](P0.05);模型组肝组织TGF-β1mRNA和蛋白(0.86±0.04、3.86±0.87)、Smad3mRNA和蛋白(0.52±0.03、2.63±0.94)表达水平高于对照组(0.31±0.03、1.07±0.60,0.21±0.01、0.81±0.04)(P0.05),Smad7 mRNA和蛋白(0.33±0.02、1.20±0.53)表达水平低于对照组(0.77±0.02、2.83±1.15)(P0.05)。结论 TGF-β1、Smad7信号传导通路过度活化及血清GPT、HA和TGF-β1水平升高,可能与肝纤维化的发生和发展密切相关,TGF-β1高表达在促进肝纤维化发生中起重要作用。     

前列腺癌Gleason 3+4和Gleason 4+3经直肠超声造影参数与转化生长因子β_1相关性分析

目的探讨前列腺癌Gleason 3+4和Gleason 4+3患者超声造影参数与前列腺组织中转化生长因子-β_1(transforming growth factor-beta 1, TGF-β_1)的相关性。方法中度风险前列腺癌(Gleason=7分)患者87例,均行经直肠超声造影检查和前列腺穿刺活检组织病理检查,根据组织病理学结果分为Gleason 3+4组42例和Gleason 4+3组45例;比较2组超声造影参数及前列腺组织中TGF-β_1表达情况,分析超声造影参数与TGF-β_1的相关性,绘制ROC曲线,评估各指标区分Gleason 3+4与Gleason 4+3前列腺癌的诊断效能。结果 Gleason 4+3组超声造影病灶峰值强度[(9.60±2.81)dB]、AUC[(606.93±284.55)dBs]大于Gleason 3+4组[(7.24±2.19)dB、(412.53±164.35)dBs](P0.05),Gleason 4+3组前列腺组织TGF-β_1的高表达率(55.6%)高于Gleason 3+4组(31.0%)(P0.05);TGF-β_1与造影参数的峰值强度(r=0.537,P0.001)、平均渡越时间(r=0.281,P=0.008)、AUC(r=0.607,P0.001)、强度降半时间(r=0.380,P0.001)呈正相关,与上升时间(r=0.124,P=0.254)、上升支斜率(r=0.126、P=0.243)、达峰时间(r=-0.076,P=0.485)无相关性;当病灶峰值强度、AUC的最佳截断值分别9.19 dB、582.84 dBs以及TGF-β_1高表达时,区分前列腺癌组织学评分Gleason 3+4与Gleason 4+3的AUC分别为0.753(95%CI:0.649～0.839,P0.001)、0.730(95%CI:0.624～0.819,P0.001)、0.612(95%CI:0.501～0.750,P0.001),灵敏度、特异度分别为62.2%、85.71%,53.33%、92.86%,53.33%、69.05%。结论超声造影参数可反映前列腺癌血管灌注情况,前列腺组织TGF-β_1表达情况和超声造影参数对评估中等风险前列腺癌患者预后有一定价值。     

转化生长因子-β_1对人牙周膜干细胞生物学行为的影响

目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖和迁移能力的影响及作用机制。方法对数生长期人PDLSCs随机分为TGF-β1组(培养液+10μg/L TGF-β1)和对照组(培养液),采用CCK-8法检测2组培养第1、2、3、4、5、6、7天细胞增殖能力;培养48h,采用Transwell小室法检测2组细胞迁移能力,Western blot法检测2组Notch1胞内段(Notch1intracellular domain,NICD)蛋白相对表达量。结果 TGF-β1组培养第1天细胞吸光度值(0.45±0.02)与对照组(0.45±0.03)比较差异无统计学意义(P0.05),培养第2、3、4、5、6、7天细胞吸光度值(0.81±0.08、1.82±0.07、2.14±0.09、2.49±0.11、2.69±0.12、2.78±0.08)均高于对照组(0.61±0.04、1.17±0.05、1.47±0.10、1.99±0.11、2.20±0.03、2.29±0.08)(P0.05);培养48h,TGF-β1组迁移细胞数目[(61.40±2.30)%]较对照组[(31.80±1.48)%]多,NICD蛋白相对表达量(0.49±0.01)较对照组(0.35±0.01)高(P0.05)。结论 TGF-β1可激活Notch1信号通路,促进人PDLSCs增殖和迁移。     

老年膝关节骨性关节炎患者血清脂联素和白细胞介素-17及转化生长因子-β_1水平变化及临床意义

目的探讨血清脂联素(adiponectin, APN)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)及转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1, TGF-β_1)水平与老年膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)严重程度的相关性,评估其对老年KOA的诊断价值。方法 170例老年KOA患者为KOA组,70例体检健康者为对照组,采用ELISA法检测血清APN、IL-17及TGF-β_1水平,并进行2组及不同K-L分级患者间比较;绘制ROC曲线,分析APN、IL-17及TGF-β_1对老年KOA的诊断价值;采用Pearson相关性分析血清APN、IL-17、TGF-β_1水平与K-L分级等临床指标的相关性。结果 KOA组血清APN[(3 162.40±418.25)μg/L]、IL-17[(32.75±16.38)ng/L]及TGF-β_1[(54.87±13.16)μg/L]水平均高于对照组[(684.72±205.63)μg/L、(15.84±8.20)ng/L、(10.42±2.63)μg/L](P0.05),K-L分级Ⅳ级、Ⅲ级、Ⅱ患者血清APN、IL-17及TGF-β_1水平依次降低(P0.05);当血清APN、IL-17及TGF-β_1最佳截断值分别为2 483.50μg/L、27.42 ng/L、40.35μg/L时,三项联合诊断老年KOA的AUC(0.960)大于APN、IL-17、TGF-β_1单独检测的AUC(0.825、0.796、0.863),其敏感度为90.7%,特异度为83.5%;老年KOA患者血清APN、IL-17、TGF-β_1水平与K-L分级呈正相关(r=0.316,P=0.004;r=0.241,P=0.026;r=0.289,P=0.015),与年龄、性别、体质量指数无明显相关性(P0.05)。结论血清APN、IL-17及TGF-β_1水平升高与老年KOA严重程度密切相关,三项联合检测对老年KOA诊断有参考价值。     

实验性松质骨缺损修复过程中血管内皮生长因子与转化生长因子β1的表达

目的 观察实验性松质骨缺损修复过程中血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况,探讨实验性松质骨缺损愈合的分子生物学机制.方法 选用中国家兔60只,在其双侧股骨髁造成一直径6.0mm、深12.0 mm之孔洞状骨缺损.将左侧作为实验侧,右侧作为对照侧.4周后,对实验侧采用自制微型剥离器插入骨缺损处做反复切割,以造成二次创伤模型.于经皮骨折端二次创伤术后1 d(总4周+1 d)、1周、2周、4周、8周各处死6只实验兔,行X线片检查后,于双侧骨缺损区取材.使用免疫组化染色技术对标本进行检测和观察.结果 实验侧松质骨缺损多在12周时得以修复.而未经二次创伤处理的对照侧松质骨缺损则不能自行修复;VEGF和TGF-βl的局部表达贯穿于松质骨修复的全过程,但经二次创伤处理,实验侧的表达强度明显高于对照侧,且VEGF和TGF-B1的表达呈正相关关系.结论 二次创伤可以促进松质骨缺损的修复和内源性VEGF和TGF-β1在骨缺损局部的表达,而VEGF和TGF-β1表达增强可能是其促进松质骨缺损修复的重要因素.     

肾上腺髓质素和转化生长因子β_1对肺成纤维细胞增殖及c-myc表达的影响

目的探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)促肺成纤维细胞增殖及c-myc基因表达的影响。方法体外原代培养人胚肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblasts,HFLFs),分为对照组、AM组、TGF-β1组和AM+TGF-β1组,采用MTT法观察各组光吸度(optical density,OD)值;各组提取细胞总RNA,采用反转录PCR观察c-myc基因mRNA表达情况。结果 AM+TGF-β1组HFLFs细胞培养24、48、72h时OD值(0.615±0.054、0.483±0.017、0.675±0.014)明显低于TGF-β1组(0.830±0.012、0.753±0.089、0.929±0.039)(P0.05),TGF-β1组HFLFs细胞培养72h时OD值(0.929±0.039)明显高于对照组(0.605±0.274)(P0.05),AM组HFLFs细胞培养24、48h时OD值(0.559±0.019、0.412±0.096)明显低于对照组(0.785±0.081、0.646±0.038)(P0.05);AM组c-myc mRNA相对表达量(0.450±0.025)明显低于对照组(P0.01);TGF-β1组c-myc mRNA相对表达量(1.160±0.100)高于对照组(P0.05);AM+TGF-β1组c-myc mRNA相对表达量(0.340±0.030)低于TGF-β1组(P0.01)。结论 AM能抑制肺成纤维细胞增殖和c-myc基因表达,AM可能具有抗纤维化作用。     

电针对慢性疲劳综合征大鼠脑组织转化生长因子-β1 基因转录和蛋白表达的影响

目的:探讨电针治疗对慢性疲劳综合征(CFS)模型大鼠脑组织中TGF-β_1基因转录及蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为正常组、模型组、束缚组和针刺组,各12只。模型组采用慢性复合应激因素制备CFS模型;束缚组仅给予与针刺相同时间的捆绑;针刺组给予百会、额区、顶区电针治疗;共15 d。RT-PCR技术检测各组TGF-β_1m RNA的转录水平,Western blot技术检测各组TGF-β_1蛋白表达水平。结果:模型组和束缚组大鼠海马和下丘脑中TGF-β_1m RNA转录水平显著高于正常组(P0.01),针刺组与正常组差异无统计学意义(P0.05);针刺组海马和下丘脑中TGF-β_1m RNA转录水平显著低于模型组(P0.01),束缚组和模型组差异无统计学意义(P0.05)。正常组中TGF-β_1蛋白表达显著低于其他3组(P0.01);针刺组大鼠海马和下丘脑中TGF-β_1蛋白表达水平明显低于模型组(P0.01),束缚组和模型组差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针能够降低CFS模型大鼠海马与下丘脑中TGF-β_1m RNA转录水平和TGF-β_1蛋白表达水平。     

转化生长因子β_1对牙周膜干细胞OPG/RANKL基因表达的影响

目的探讨转化生长因子β_1(transforming growth factor β_1,TGF-β_1)对复苏后的人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)的骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)基因表达的影响。方法复苏PDLSCs并随机分为对照组和观察组,对照组和观察组分别采用含0、10μg/L TGF-β_1的成骨诱导液进行培养,2组采用茜素红染色检测成骨情况,采用免疫组织化学法检测细胞OPG、RANKL蛋白表达情况,采用实时定量PCR法检测细胞OPG、RANKL mRNA表达情况,并比较2组OPG/RANKL比值。结果 PDLSCs大部分呈长梭形;观察组PDLSCs成骨表达更好;观察组PDLSCs细胞质中OPG、RANKL蛋白均阳性表达,且OPG表达阳性结果更强,对照组细胞胞质无着色,OPG、RANKL均为阴性表达;观察组OPG、RANKL mRNA表达水平(3.156 5±0.052 8、2.196 2±0.007 2)及OPG/RANKL比值(1.446 0±0.008 0)均高于对照组(2.645 6±0.074 9、1.963 9±0.005 3、1.350 0±0.004 0)(P0.05)。结论 TGF-β_1可影响PDLSCs中OPG、RANKL表达,提高OPG/RANKL比值,可能对牙周骨组织再生有一定调控作用。     

转化生长因子β1和基质金属蛋白酶在心室重构中的作用及卡维地洛的干预效果

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶(MMPs)在兔心肌梗死(MI)后心室重构中的作用及卡维地洛的治疗效果.方法采用结扎兔冠状动脉左室支建立MI模型,术后24h存活的兔随机分为MI组(8只)、MI+卡维地洛组(9只),另以开胸后在相应部位挂线不结扎为假手术组(10只).4周后行血流动力学检查,测量体重及左、右心室重量,苦味酸-酸性品红染色(VG)检测非梗死区的胶原容积分数(CVF),免疫组化检测TGF-β1的表达,酶谱法测定MMPs的活性.结果MI后4周存活动物为假手术组10只,MI组8只,MI+卡维地洛组9只.MI组较假手术组左、右心室重量/体重比值(LVW、RVW/BW)、左室舒张末压(LVEDP)、非梗死区CVF均显著升高,非梗死区TGF-β1的表达及MMPs的活性亦增强(均P＜0.01);MI+卡维地洛组与MI组比较,RVW/BW、LVEDP、CVF显著降低(P＜0.05～0.01),TGF-β1表达和MMPs的活性明显减弱(P＜0.01).结论TGF-β1、MMPs可能与MI后心室重构有关,卡维地洛能缓解MI后非梗死区的重构,其机制可能与减低TGF-β1的表达和MMPs的活性有关.     

低强度脉冲超声对骨折愈合过程中转化生长因子-β表达的影响

目的：观察兔骨折模型应用低强度脉冲超声治疗后骨折愈合过程中，转化生长因子-β（TGF-β）的表达变化，以进一步探讨其促进骨折愈合的机制。方法：将36只成年新西兰兔随机分成6个时间组，每组6只，均造成双侧桡骨骨折的模型，并于术后24h即开始超声治疗，左前肢为治疗侧，右前肢作为对照侧。各实验兔分别于术后第1、2、3、4、5、6周拍x线片并取双侧桡骨骨缺损处骨痂，制成切片，利用免疫组化染色及图像分析测定TGF-β表达强度。结果：X线片观察，治疗侧的愈合程度优于对照侧（P〈0.01）。组织学观察，术后4周，治疗侧骨、软骨组织内TGF-β染色达最高，且持续时间较对照侧长。结论：低强度脉冲超声通过影响骨折不同时期TGF-β的表达及含量的变化．促进骨、软骨组织的损伤修复．有效促进骨折愈合．     

注射胰岛素样生长因子-1、转化生长因子-β1治疗关节软骨缺损及预防骨关节炎的实验研究

目的探讨关节腔内注射胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)对修复关节软骨缺损及预防骨关节炎的作用。方法 35只雄性成年新西兰大白兔随机分成4组,空白对照组(A组)5只,实验组(B、C、D三组)每组10只,在膝关节滑车处钻孔造成关节软骨全层缺损,以右膝为实验侧,术后向关节腔内注射1mg/ml的IGF-1、TGF-β1、IGF-1+TGF-β1各0.1ml,每周1次;左膝为对照侧,与实验组同一时间注射等量0.9%氯化钠注射溶液。于术后4、8周分别取材进行大体观察,HE和SafraninO染色评分,同时运用免疫组织化学方法观察生长因子及其受体的表达情况。结果各组实验侧软骨缺损处组织的修复情况均优于对照侧,并且实验侧在各组软骨缺损周围的正常软骨未发生明显退变,而对照侧周围软骨在4、8周时发生了不同程度的退变,周围软骨中生长因子的表达实验侧与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05),而对照侧4、8周与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);受体的表达在各组实验侧和对照侧与正常组比较均差异无统计学意义(P>0.05)。结论关节软骨缺损早期行IGF-1、TGF-β1关节腔内注射可有效促进关节软骨缺损的修复,并延缓周围软骨的退变,两者联合治疗有协同作用。     

苯那普利和氯沙坦对肾间质纤维化幼鼠组织型转谷氨酰胺酶和转化生长因子-β_1的抑制作用

目的探讨苯那普利和氯沙坦对肾间质纤维化幼鼠组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的抑制作用。方法雄性wistar幼鼠60只随机分为对照组、模型组和干预组,每组20只。对模型组和干预组幼鼠建立单侧输尿管结扎模型,干预组从建模后第2天起灌胃给予苯那普利和氯沙坦各6mg/(kg·d),1次/天,对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水。于实验开始后第3、7、14、28天每组取5只鼠制成标本进行HE染色、Masson染色,采用非生物素标记的PV6001二步法,检测3组肾组织tTG、TGF-β_1的表达。结果 Masson染色结果显示对照组肾间质纤维化面积较小,模型组肾间质纤维化面积显著增加,干预组小部分纤维化面积较模型组降低,差异有统计学意义(P0.01)。对照组TGF-β_1和tTG表达在对照组较少,模型组高表达,干预组较模型组有所减少,3组比较差异有统计学意义(P0.01),且随着时间增加,模型组和干预组幼鼠TGF-β_1和tTG表达上升,差异有统计学意义。模型组幼鼠tTG水平与Masson染色面积呈正相关关系(r=0.854,P0.01);tTG水平与TGF-β_1水平呈正相关关系(r=0.813,P0.01)。结论肾间质纤维化过程中tTG与TGF-β_1呈正相关关系,苯那普利和氯沙坦抗纤维化作用可能与抑制tTG与TGF-β_1有关。     

Bio-Oss骨粉复合BMP-2及VEGF修复大鼠胫骨缺损的实验研究

目的探讨Bio-Oss骨粉复合骨形态发生蛋白2(BMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)修复骨缺损的成骨效果。方法选取SPF级SD大鼠54只,随机分为三组:单纯骨粉组、骨粉/BMP组、骨粉/BMP/VEGF组,每组18只。麻醉后在大鼠左侧胫骨前部、胫骨结节下1 cm处磨除5 mm长的骨块缺损(包括髓腔),余留后侧1/3骨皮质和腓骨起固定和支撑作用。按分组分别植入Bio-Oss骨粉、Bio-Oss骨粉复合BMP-2、Bio-Oss骨粉复合BMP-2/VEGF。术后2、4、8周每组各取6只大鼠行X线检查、HE染色、CD31免疫组化。结果 X线检查、HE染色显示术后2周时各组新骨形成极少,4、8周时骨粉/BMP/VEGF组新骨形成最多,骨粉/BMP组次之,单纯骨粉组最少。术后2、4周时,骨粉/BMP/VEGF组的CD31阳性细胞数目最多,单纯骨粉组最少,骨粉/BMP组居中,三组间比较差异具有统计学意义(P0.01)。术后8周单纯骨粉组CD31阳性表达较前增多,但骨粉/BMP组、骨粉/BMP/VEGF组的CD31阳性表达较4周时有所下降。结论 Bio-Oss骨粉复合BMP-2和VEGF修复骨缺损的成骨效果理想,明显优于单纯应用Bio-Oss骨粉及只复合BMP-2的效果。     

兔骨缺损体外冲击波治疗后成骨细胞中TGF-β1的表达

目的：观察体外冲击波（ESW）干预兔骨缺损模型后成骨细胞中活性因子TGF-β1的表达情况,探讨其促进成骨作用的分子生物学机制。方法：将18只中国健康家兔制备双桡骨骨缺损动物模型,将右上肢作为实验组,左上肢作为对照组,1周后全麻下行右上肢体外冲击波治疗,左上肢不做治疗。定期拍X片,组织学观察,免疫组化检测。结果：X光片显示冲击波治疗4周、6周后,治疗组骨不连愈合均较对照组好;组织学观察显示治疗组骨细胞、成纤维细胞、毛细血管、成骨细胞、间充质细胞等细胞增生活跃;免疫组化方法示治疗组成骨细胞中TGF-β1含量明显高于对照组,统计学检验差异均有显著性。结论：ESW干预能够提高成骨细胞中生物学活性因子TGF-β1的表达,可能是ESW促进成骨细胞成骨活动的有力证据。