硫辛酸对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的研究硫辛酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,进一步探讨其机制。方法 54只雄性清洁SD大鼠按照随机原则平均分成3组:假手术组(18只)、脑缺血再灌注组(对照组18只)、脑缺血再灌注+硫辛酸治疗组(治疗组18只)。大鼠大脑中动脉局灶性缺血2 h(MCAO),再灌注24 h。治疗组在再灌注同时经颈外静脉给予硫辛酸20 mg/kg,假手术组和对照组给予相同体积的溶媒。采用TTC染色法检测大鼠脑组织梗死体积;采用RT-PCR法检测大鼠脑组织TNF-α的表达;采用TUNEL法检测大鼠脑组织凋亡细胞数。结果与假手术组相比,对照组和治疗组大鼠脑组织梗死体积,TNF-α的表达和凋亡细胞数均明显增加(均P0.05)。与对照组相比,治疗组大鼠脑组织梗死体积,TNF-α的表达以及凋亡细胞数均明显减少(均P0.05)。结论我们的研究结果表明,硫辛酸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可能机制为减轻脑缺血再灌注引起的炎症反应和细胞凋亡。     

缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤神经保护作用的研究

目的探讨大鼠脑缺血后处理对缺血再灌注损伤后神经元的保护作用。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(SO组)、缺血再灌注对照组(MCAO组)、缺血后处理组(IPOC组)3组。采用线栓法制备大鼠MCAO模型及IPOC模型,分别用TTC染色法计算脑梗死体积、流式细胞术和ELISA法观察,对于大鼠缺血半暗带神经细胞凋亡率及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量的影响。结果 (1)大鼠脑缺血再灌注后24h,IPOC组较MCAO组梗死体积明显减小(P<0.05);(2)MCAO组大鼠脑缺血再灌注24h细胞凋亡发生率及血清中NSE的含量较SO组显著增加(P<0.01);(3)IPOC组神经元凋亡发生率及血清NSE较MCAO组显著降低(P<0.05或0.01)。结论大鼠脑缺血后处理对缺血再灌注神经元损伤有保护作用。     

神经调节素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及机制

目的 观察大鼠脑缺血再灌注损伤基质金属蛋白酶-9(matrix metallopmteinases,MMP-9)表达及神经调节素-1β(neuregulin-1β,NRG-1β)的干预作用.方法 成年健康雄性Wistar大鼠200只,应用线栓法经颈外-颈内动脉插线建立大脑中动脉闭塞再灌注(models of middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)动物模型,治疗组经颈内动脉单剂量注射1.5%NRG-1β 5μl干预.氯化三苯基四氮唑(TFC)染色测定脑梗死体积,原位脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡,免疫组织化学、免疫荧光双标记法和免疫印迹法观察脑组织MMP-9表达.结果 脑缺血再灌注损伤可诱导大脑皮质和纹状体区脑组织细胞凋亡和MMP-9表达.随着缺血缺氧时间的延长,对照组皮质区细胞凋亡数量自缺血0、0.5、1.0、1.5和2.0 h逐渐增加,分别为1.78±0.15、5.78±0.51、10.35±0.77、21.50±1.19和32.00±1.78;而纹状体区细胞凋亡数量自缺血0、0.5、1.0、1.5和2.0 h也逐渐增加,分别为1.46±0.21、4.12±0.54、7.33±0.71、16.54±1.63和19.03±1.44(t=9.31～37.78,P<0.01);对照组MMP-9蛋白表达逐渐增加(t=7.73～27.75,P<0.01).应用NRG-1β后,皮质区细胞凋亡数量自缺血0、0.5、1.0、1.5和2.0 h明显减少,分别为1.66±0.11、4.80±0.61、5.63±0.56、9.75±1.22和13.54±1.26;而纹状体区细胞凋亡数量自缺血0、0.5、1.0、1.5和2.0 h也明显减少,分别为1.34±0.14、3.35±0.32、4.55±0.50、7.63±1.41和10.46±0.98(t=2.74～18.93,P<0.05);MMP-9表达水平较对照组同一时间点相应脑区显著降低(t=3.85-12.09,P<0.01);脑梗死体积明显缩小(t=4.645～13.043,P<0.01).结论 脑缺血后MMP-9表达增强,参与了脑缺血再灌注损伤后的炎症反应过程.NRG-1β可能通过下调MMP-9的表达而抑制脑缺血再灌注损伤后炎症反应诱发的细胞凋亡.     

丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的研究丁苯酞预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法健康成年SD雄性大鼠48只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、丁苯酞预处理组,每组各16只。各组均灌胃5d后,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注(MCAO)模型,缺血2h、再灌注24h,进行神经功能缺损评分,TTC染色及图像分析观察脑梗死体积,免疫组化法检测脑组织caspase-3、bcl-2表达的变化。结果与缺血再灌注组相比,丁苯酞预处理组神经缺损程度改善,梗死灶体积减少,caspase-3阳性细胞数量减少,bcl-2表达上调。结论丁苯酞可减轻缺血性脑血管病的发作,具有一定的神经保护作用。     

步长脑心通胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的研究步长脑心通胶囊对脑缺血再灌注(IR)损伤的神经保护作用。方法采用Longas法制备大鼠脑IR模型,分为IR组、步长脑心通组;再灌注后2h开始给药,依照IR的持续时间不同又分为1d、3d、7d、10d及15d共5组。各时相点取材,用HE染色和电镜观察脑部组织学改变,用干湿重法进行脑含水量测定;免疫组化染色检测脑组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并使用多媒体彩色病理图像分析系统进行定量分析。结果与IR组比较,步长脑心通组脑组织中皱缩或肿胀神经元数目少,胞浆肿胀较轻,胶质细胞肿胀不明显,血管周围间隙水肿和渗出较轻;脑含水量及VEGF的表达差异具有显著性(均P<0.05)。结论步长脑心通胶囊可减少IR后脑含水量并增强VEGF表达,从而起到神经保护作用。     

托吡酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨托吡酯(TPM)对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法将健康30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和TPM干预组。用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,TPM干预组给予TPM80mg/kg腹腔注射,2次。缺血再灌注24h时进行神经功能评分、TTC染色法测量梗死体积、高效液相色谱分析法测定脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)的含量;免疫组化法检测GABAA受体阳性表达。结果(1)与缺血再灌注组比较,TPM干预组神经功能评分明显增高(P<0.01),脑梗死体积减少(P<0.05);(2)TPM干预组缺血侧脑皮质Glu含量显著低于缺血再灌注组(P<0.01),与假手术组比较差异无显著性;GABA含量显著高于假手术组和缺血再灌注组(均P<0.01);(3)TPM干预组缺血侧脑皮质GABAA受体阳性细胞数显著高于缺血再灌注组(P<0.01)。结论TPM对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,其机制可能为TPM降低兴奋性递质Glu水平、增加抑制性递质GABA的释放及GABAA受体的表达。     

纳络酮对全脑缺血大鼠的神经保护作用研究

全脑缺血后如何保护脑功能、减轻缺血/再灌注损伤是目前研究热点,但有效的神经保护剂并不多,仅tempol、MK-801等在实验中证明有效。纳络酮,作为传统意义的阿片受体拮抗剂,在许多实验和临床研究中亦被证明有神经保护作用,但仍存在较多争议。最近研究揭示纳络酮具有抑制钙超载的作用,本文通过研究其对钙结合蛋白表达的影响来探讨纳络酮的神经保护作用。1材料与方法实验选用健康SD大鼠29只,雌雄不拘,体重185.5～294.0g,建立窒息 艾司洛尔的大鼠心肺骤停模型[1],实验参数设计和记录均参照实验研究的Utstein模型。实验动物随机分为4组:假手术组…     

阿魏酸钠对慢性脑缺血大鼠的神经保护作用机制研究

目的探讨阿魏酸钠对慢性脑缺血大鼠的神经保护作用及其机制。方法以双侧颈总动脉结扎(2-VO)法制备慢性脑缺血模型,于术后6周分别给予阿魏酸钠和PBS干预,分为阿魏酸钠干预组和模型对照组。另设假手术组(仅分离双侧颈总动脉,但不结扎)作为空白对照。术后8周行Morris水迷宫实验,评价大鼠的空间学习记忆功能,同时观察双侧颞叶内侧缺血区脑组织血管密度、激光共聚焦法检测毛细血管内径、缺血边界地区的毛细血管分支点数目和微血管总面积等指标、海马细胞增殖情况(免疫组化法)和血浆血管内皮生长因子(VEGF)水平(ELISA法检测),以探讨其可能的机制。结果 Morris水迷宫结果显示,阿魏酸钠干预组第2、3、4、5天逃避潜伏期[分别为(43.55±6.34)s、(38.11±1.20)s、(34.75±5.30)s、(24.39±3.93)s]明显短于模型对照组[分别为(50.89±6.31)s、(43.72±8.21)s、(50.79±9.36)s、(44.39±3.93)s,均P0.01];阿魏酸钠干预组第一象限游泳时间明显长于模型对照组[分别为(27.36±3.89)s、(14.68±2.36)s,P=0.002]。阿魏酸钠干预组毛细血管内径与模型对照组比较变短[分别为(3.02±0.21)μm、(3.35±0.18)μm,P=0.003],阿魏酸钠干预组缺血边界地区的毛细血管分支点数目与模型对照组同源组织区比较显著增加(分别为205.80±12.70、158.42±10.92,P=0.001),0.002mm3体积内阿魏酸钠干预组微血管总面积与模型对照组比较明显增加[分别(83389±4026)μm2、(73349±3986)μm2,P=0.004]。阿魏酸钠干预组缺血脑组织内的BrdU阳性细胞数明显高于模型对照组(分别为23.82±3.05、10.26±2.89,t=18.26,P=0.004)。阿魏酸钠干预组VEGF水平明显高于模型对照组[分别为(67.58±9.61)pg/mL、(21.90±5.16)pg/mL,P=0.008]。结论阿魏酸钠可以显著改善慢性脑缺血大鼠的空间学习记忆能力,其机制可能与VEGF介导的血管密度增加有关。     

轻度低温对大鼠脑缺血损伤的保护作用

本文观察了轻度低温对大鼠脑缺血的保护作用。Ｗｉｓｔａｒ大鼠在３６．８℃下将四血管阻断１０分钟，低温组３３℃低温再灌流３小时，正常体温组保持在３６．８℃，缺血后第２～６天观察动物行为，第７天处死大鼠进行脑组织病理分析。结果发现，正常体温组神经系统损害积分明显高于低温组，学习记忆能力也明显减退；正常体温组海马ＣＡ１段神经细胞损害率（９１．７％）明显高于低温组（３８．９％）。提示轻度低温对短暂脑缺血后再灌流期脑组织有明显保护作用。     

塞来昔布对大鼠局灶性脑缺血再灌注的保护作用及机制研究

目的 探讨塞来昔布对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制.方法 采用线栓法制作Wistar大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）90min再灌注模型,分为假手术组、等渗盐水组塞来昔布12.5mg/kg治疗组及塞来昔布25mg/kg治疗组.缺血后30min灌胃给予等渗盐水或两种剂量（12.5mg/kg或25mg/kg）的塞来昔布,检测各分组大鼠缺血侧额顶部皮质在再灌注不同时点前列腺素代谢物、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性的动态变化.结果 （1）塞来昔布12.5mg/kg治疗及塞来昔布25mg/kg治疗均可明显缩小脑I/R时脑损伤范围,减轻脑水肿程度;（2）塞来昔布12.5mg/kg治疗和塞来昔布25mg/kg治疗均能不同程度的降低前列腺素E2（Prostaglandin E2,PGE2）、血栓素B2（Thromboxane B2,TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-ketto-prostaglandin F1α,6-K-PGF1α）在缺血侧额顶部皮质中聚集,同时使TXB2/6-K-PGF1α比值下降.也能不同程度的降低MDA含量,提高SOD活性.结论 COX-2抑制剂可能通过减少PGE2的集聚,改善TXB2/6-K-PGF1α比值,减少氧自由基的产生,提高SOD活性而发挥脑保护作用.     

新型抗癫痫药物对脑缺血损伤的神经保护作用

目前很多体内体外的实验研究了新型抗癫痫药物的脑保护机制，本文将脑缺血和癫痫对脑的损伤机制以及新型抗癫痴药物的脑保护作用进行综述。     

普伐他汀对脑缺血大鼠的神经保护及神经发生的作用

目的研究中枢神经系统缺血损伤后,普伐他汀的神经保护和促进神经发生作用。方法采用线栓法造成大鼠大脑中动脉的暂时性缺血,在以下时间点给予普伐他汀：伤后6h,伤后每天直至伤后14天。用神经学评分、平衡实验和旋转实验评价伤后神经学恢复情况。检测血清胆固醇和甘油三酯的含量,计算脑梗塞面积。通过三染色法（BrdU, DCX, NeuN染色）研究普伐他汀对神经发生的作用。结果各组间血清胆固醇和甘油三酯无显著性差异;与对照组相比,实验组动物术后旋转实验评分显著性增加,梗塞面积减小;普伐他汀显著增加了齿状回和脑室下区的BrdU阳性细胞数,并增加了齿状回、脑室下区和纹状体中的BrdU/DCX阳性细胞数。结论中枢神经系统损伤早期重复使用低剂量的普伐他汀是相对安全的,并能够显著改善伤后的神经功能恢复,减少梗死面积。普伐他汀能够诱导大鼠齿状回及脑室下区的神经发生并增加纹状体中迁移神经元的数量,这与普伐他汀的降脂作用无关。     

硫酸镁对大鼠脑缺血再灌流损伤保护作用的研究

目的:探讨ＭｇＳＯ４对大鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用。方法:线栓法将ＳＤ大鼠制成脑缺血再灌流模型,分组测定脑组织Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性、ＭＤＡ、ＮＯ含量。结果:治疗１组(３００ｍｇ·ｋｇ－１)和治疗２组(６００ｍｇ·ｋｇ－１)与对照组比较,Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性增加,ＭＤＡ、ＮＯ含量降低,且治疗２组比治疗１组作用更明显。结论:ＭｇＳＯ４对脑缺血再灌流损伤有保护作用,６００ｍｇ·ｋｇ－１较３００ｍｇ·ｋｇ－１更显著。     

他达拉非对大鼠脑缺血-再灌注损伤急性期的神经保护作用

目的探讨他达拉非对急性期大鼠脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用。方法采用夹闭双侧颈总动脉的方法 Wistar大鼠大脑缺血-再灌注模型。将30只Wistar大鼠随机分为3组(每组10只):对照组(control),再灌注组(IR)和他达拉非组(IR+TAD)。采用Garcia神经功能评分进行功能评定,TTC染色测量各组脑梗死面积,应用硫代巴比妥酸比色法检测各组丙二醛(MDA)浓度,以免疫荧光染色测定大脑梗死局部MAP2蛋白表达。结果他达拉非组再灌注后的梗死面积(1.95±2.11 mm2)、脑组织中MDA水平(8.99±0.21 nmol/g)小于再灌注组(3.78±1.87 mm2)、(12.22±0.55 nmol/g)(P<0.05),Garcia评分、脑组织微管结合蛋白(MAP)2蛋白高倍镜下单位视野密度(10.43%±7.19%)大于再灌注组(6.16%±5.22%)(P<0.05)。结论他达拉非可以降低羟自由基水平,对抗神经细胞凋亡,对脑缺血-再灌注损伤大鼠神经具有保护作用。     

雌二醇对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨雌二醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及其脑保护机制。方法线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，通过HE染色在光镜下观察神经细胞损伤变化，TTC染色测脑梗死体积．免疫组化法检测bel-2阳性表达。结果与脑缺血再灌注组相比，雌二醇用药组大鼠脑标本光镜下细胞损伤变性程度轻．脑梗死体积显著缩小（P〈0．01），bel-2阳性细胞数明显上升（P〈0．01）。结论雌二醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用，雌二醇可通过促进bcl-2的上调发挥脑保护作用。     

雌二醇对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨雌二醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及其脑保护机制。方法线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,通过HE染色在光镜下观察神经细胞损伤变化,TTC染色测脑梗死体积,免疫组化法检测bcl-2阳性表达。结果与脑缺血再灌注组相比,雌二醇用药组大鼠脑标本光镜下细胞损伤变性程度轻,脑梗死体积显著缩小(P<0.01),bcl-2阳性细胞数明显上升(P<0.01)。结论雌二醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,雌二醇可通过促进bcl-2的上调发挥脑保护作用。     

头孢曲松钠对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其机制

目的 探讨在大鼠局灶性脑缺血模型中应用头孢曲松钠对脑缺血损伤的保护作用及其相关机制.方法 制备Wistar大鼠局灶性脑缺血模型,并按随机数字表法分为单纯缺血组(MCAO组)、头孢曲松钠治疗组(MCAO+CTX组)和盐水对照组,其中MCAO+CTX组为缺血90min时给予头孢曲松钠200 mg/kg.缺血后24 h、48 h、7 d时对各组大鼠进行神经行为学评分和脑水肿程度测定,同时比较各组大鼠皮层和海马谷氨酸转运体功能的差异.结果 随着缺血时间延长,各组大鼠神经行为学评分逐渐提高;脑水肿在缺血后24 h、48 h时逐渐加重,至7 d时已逐渐消退.与MCAO组比较,各时间点MCAO+CTX组大鼠神经行为学评分明显提高,脑水肿程度明显减轻,伤侧皮层及海马谷氨酸转运体功能明显增强,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 头孢曲松钠对大鼠局灶性脑缺血损伤具有保护作用,其机制可能与增强谷氨酸转运体功能从而减轻谷氨酸神经毒性作用有关.

Abstract：

Objective To explore the neuroprotective effect of ceftriaxone on cerebral ischemia injury in rats with focal cerebral ischemia and its possible mechanism. Methods Focal cerebral ischemic models were established in Wistar rats and randomly divided into ischemic group (performed middle cerebral artery occlusion [MCAO]), ceftriaxone (CTX) therapy group (given CTX at a dosage of 200 mg/kg 90 min after MCAO) and control group (given physiological saline only). Twenty-four and 48 h, and 7 d after MCAO, neurological behaviors and cerebral edema level were evaluated in these 3 groups;glutamate transporter function in the cortex and hippocampus of rats was compared between each 2 groups. Results With time extended, neurological behaviors scores were obviously elevated in every group;and cerebral edema became worse at 24 and 48 h and decreased 7 d after MCAO. As compared with that in the ischemic group, glutamate transporter function, level of edema and neurological behaviors scores in cortex and hippocampus of rats in the CTX therapy group were statistically increased at different ischemic time points (P<0.05). Conclusion Ceftriaxone has a neuroprotective effect against focal cerebral ischemia in rats, which may relate to increased glutamate transporter function and reduced glutamate neurotoxicity.     

苯海索对大鼠急性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的本实验研究苯海索对脑缺血损伤的作用。方法大鼠脑缺血模型采用四血管结扎法（４－ＶＯ），即在第一颈椎处电的凝固双侧椎动脉，动脉夹夹闭双侧颈总动脉，造成前脑缺血３０ｍｉｎ，然后开夹重灌１ｈ。缺血前后和重灌期间记录大鼠ＥＥＧ。重灌结束时，测大鼠皮层、海马、脑干、间脑单胺（ＮＥ、ＤＡ、５－ＨＴ）递质含量。单胺递质测定采用荧光分光光度法。结果大鼠腹腔注射苯海索１．５ｍｇ／ｋｇ和３．０ｍｇ／ｋｇ能显著改善缺血再灌注损伤的脑电活动，脑电恢复时间可恢复到（２４±４）和（１９±６）ｍｉｎ（Ｐ＜０．０１），苯海索还能明显减轻缺血３０ｍｉｎ后再灌注１ｈ的单胺递质的降低。结论苯海索对缺血引起的损伤神经有保护作用。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用,并探讨其可能的机制。方法经体外培养并纯化BMSCs,移植前以10 mg/L的BrdU进行标记。线栓法制作大鼠MCAO模型,随机分为移植A组、B组及对照C组。在模型建立后7 d,通过尾静脉分别将3×10~6个BMSCs、1×10~6个BMSCs移植入A、B组大鼠体内,C组不作处理。于移植前、后分别进行改良神经损伤严重程度评分(mNSS)及Morris水迷宫测试,并取大鼠脑组织行免疫组织化学染色。结果移植A组与移植B组、C组比较,行为学恢复更为明显,(P0.01);B、C两组相比无显著性差异(P0.05);移植A组大鼠学习和记忆能力较C组明显改善(P0.05)。A、B组大鼠在脑损伤中心及周围区,可见Brdu单染阳性细胞及Brdu+MAP-2、Brdu+GFAP、Brdu+vWF、Brdu+VEGF双染阳性细胞。结论 BMSCs经尾静脉移植至MCAO大鼠体内后,可在大鼠体内存活、分化,并促进大鼠伸进功能恢复。疗效与移植细胞数量相关。     

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用和机制.方法 应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO/R）模型,经腹腔注射黄芪注射液（3 ml/kg）干预治疗.Longa法评价大鼠神经行为功能,氯化三苯基四氮唑（TTC）染色观察脑梗死体积,苏木精-伊红（HE）染色观察海马神经元形态结构,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化检测c-jun氨基末端激酶（JNK3）蛋白表达水平.结果 经黄芪注射液治疗后大鼠海马神经元JNK3蛋白表达水平显著降低,凋亡细胞数量显著减少,神经元形态恢复,脑梗死体积缩小,大鼠神经行为功能显著改善.结论 黄芪注射液可通过下调JNK3表达水平而抑制细胞凋亡,缩小脑梗死体积,改善大鼠神经行为功能.