Graves病患者CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞及其分泌的细胞因子表达研究

目的探讨CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)及其分泌的白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)等细胞因子和血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT_3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT_4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)和促甲状腺素受体抗体(thyrotrophin receptor antibody,TRAb)水平在Graves病患者体内表达情况。方法 Graves病患者30例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,检测2组外周血CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞比率、CD3~+CD56~+NKT分泌的细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平及血清FT_3、FT_4、TSH、TPOAb、TGAb、TRAb水平。结果观察组CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞总数比率[(1.37±0.43)%]低于对照组[(2.47±0.39)%](P0.05);观察组血清FT_3[(23.76±5.51)pmol/L]、FT_4[(88.29±31.35)pmol/L]、TSH[(1.68±1.01)mu/L]、TPOAb[(293.58±141.32)u/mL]、TGAb[(380.58±215.31)u/mL]、TRAb抗体[(10.75±8.23)u/mL]水平均高于对照组[FT_3(4.79±0.59)pmol/L、FT_4(17.84±3.15)pmol/L、TSH(0.08±0.01)u/L、TPOAb(20.06±4.85)u/mL、TGAb(31.48±22.68)u/mL、TRAb抗体(1.21±0.23)u/mL](P0.05);观察组血清IL-6[(2.51±0.31)μg/L]、IL-10[(43.79±21.54)ng/L]、IL-12[(1 306.14±514.39)ng/L]、TNF-α[(4.38±0.66)ng/L]水平均高于对照组[(1.01±0.20)μg/L、(27.68±5.41)ng/L、(584.34±214.57)ng/L、(2.41±0.81)ng/L](P0.05);观察组IL-2表达水平[(1.26±0.43)ng/L]低于对照组[(4.81±0.71)ng/L](P0.05)。结论 Graves病患者存在免疫功能紊乱情况及免疫调节细胞失衡,通过CD3~+CD56~+NKT减少及其分泌的细胞因子调节Th1/Th2分化,参与Graves病的发病过程。     

腹腔镜下直肠癌手术对免疫平衡及CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T细胞的影响

目的 通过分别测定腹腔镜手术和开腹手术直肠癌患者Th1/Th2平衡偏移情况及CD4+CD45R细胞的比例变化,以比较两种术式对直肠癌患者免疫功能的影响.方法 分别采用流式细胞学和酶联免疫吸附法方法 检测行腹腔镜下直肠癌手术和常规开腹手术2组患者术前1 d、术后2、7 d的外周血中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T细胞比率及IFN-γ和IL-4血清浓度,同时检测CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞在不同手术影响下的比例变化.结果 开腹组术后2、7 d的Th1细胞[(4.51±1.52)%,(7.26±2.59)%]与术前[(12.06±1.82)%]相比明显减少(P均<0.05),Th2细胞[(6.70±2.41)%,(6.70±2.41)%]与术前[(4.47±1.90)%]相比明显增加(P均<0.05);开腹组术后2、7 d的IFN-γ[(57.15±23.64)ng/L,(72.70±27.31)ng/L]与术前(123.47±32.52)ng/L相比明显下降(P均<0.05),而术后2、7 d的IL-4[(55.55±7.29)ng/L,(57.56±7.13)ng/L]与术前[(41.87±5.83)ng/L]相比明显升高(P均<0.05);腹腔镜组Th1细胞、Th2细胞、IFN-γ和IL-4手术前后数量无明显变化(P均>0.05);术后7 d开腹组CD4+CD45RA+T细胞(35.11±7.82)与术前(31.11±6.72)相比明显增加(P均<0.05),开腹组术后CD4+CD45R O+T细胞(61.21±9.13)较术前(68.11±11.42)减少(P<0.05).结论 腹腔镜下直肠癌手术较开腹手术对机体免疫平衡影响较小,有利于保护直肠癌患者的细胞免疫功能.     

强化阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征行介入治疗患者内皮细胞微粒和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的 探讨强化剂量阿托伐他汀治疗对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗患者外周血内皮细胞微粒(endothelial microparticles,EMP)水平和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及细胞因子水平的影响。方法 行PCI治疗的ACS患者104例,根据治疗方法分为阿托伐他汀强化治疗组(强化组)和阿托伐他汀常规治疗组(常规组)各52例。常规组PCI术前、术后均口服阿托伐他汀20mg/d,强化组PCI术前口服阿托伐他汀80mg/d,术后40mg/d。分别于术前、术后1周检测2组外周血EMPs水平、CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平,分析EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平的相关性。结果 强化组和常规组术后CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率[(4.62±0.51)%、(3.85±0.60)%]、Foxp3 mRNA[(224.2±10.9)%、(173.7±11.6)%]和TGF-β1[(305.2±33.9)、(214.6±36.1)ng/L]均高于术前[(3.19±0.55)%、(3.25±0.49)%,(99.9±8.2)%、(101.2±9.4)%,(159.8±32.8)ng/L、(167.3±38.2)ng/L],EMPs水平[(1 062.2±336.8)个/μL、(1 387.8±353.6)个/μL]低于术前[(1 661.9±346.5)个/μL、(1 647.4±368.2)个/μL](P0.01),且强化组较常规组变化更明显,差异有统计学意义(P0.01);EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平均呈负相关(r=-0.526,P=-0.000;r=-0.487,P=-0.001;r=-0.581,P=0.000)。结论 强化剂量阿托伐他汀治疗可能通过下调EMPs水平,从而上调CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞和TGF-β1水平,进而减轻炎症反应,稳定斑块。     

Th9、Th17、CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的变化

目的探讨慢性淋巴细胞白血病患者外周血中Th9、Thl7和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞及相关细胞因子的表达水平及意义。方法采用流式细胞仪检测36例CLL患者和45例健康对照组外周血Th9、Th17和Treg细胞的表达率,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外周血中细胞因子IL-9、IL-17、TGF-β的表达水平。结果 1)CLL组患者外周血Th9、Th17细胞比例及细胞因子IL-9、IL-17浓度均明显高于健康对照组[(1.29±0.35)%vs(0.74±0.23)%,P0.05;(2.15±0.46)%vs(1.08±0.37)%,P0.05;(24.25±7.05)%vs(16.35±5.42)%,P0.05;(11.47±3.99)%vs(7.36±2.85%),P0.05]。CD4~+CD25~+FoxP3~+细胞比例及细胞因子TGF-β浓度明显低于对照组[(4.76±0.89)%vs(7.26±1.95)%,P0.05;(3.82±1.39)%vs(6.82±2.01)%,P0.05]。2)相关性分析:患者Th9、Th17细胞比例及IL-9、IL-17浓度与淋巴细胞计数负相关(γ_s=-0.374,P=0.034;γ_s=-0.382,P=0.032;γ_s=-0.445,P=0.011;γ_s=-0.413,P=0.024);患者Treg细胞比例及TGF-β浓度与淋巴细胞计数正相关(γ_s=0.416,P=0.023;γ_s=0.403,P=0.028)。结论慢性淋巴细胞白血病患者Th9、Th17与CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞比例失衡,血清IL-9、IL-17和TGF-β水平变化,这些原因可能参与慢性淋巴细胞白血病的免疫发病过程。     

CD4~+及CD8~+T淋巴细胞预测人类免疫缺陷病毒感染患者抗反转录病毒治疗效果的价值

目的探讨人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染患者接受抗反转病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)前CD4~+及CD8~+T淋巴细胞表达水平在免疫重建效果预测中的价值。方法 HIV感染患者48例,分别于ART治疗前及治疗6个月后采用实时荧光定量PCR技术检测HIV-RNA,观察HIV-RNA转阴情况;采用流式细胞技术检测CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞,观察CD4~+T淋巴细胞上升情况;比较治疗6个月后HIV-RNA转阴与未转阴组,CD4~+T淋巴细胞上升与未上升组治疗前Th1、Th2、Th17、调节性T(regulatory,Treg)细胞、CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞百分比及Th1/Treg、Th2/Treg、Th17/Treg、Th1/Th17、Th2/Th17、Th1/Th2、CD4~+/CD8~+淋巴细胞比值等指标;绘制ROC曲线,分析治疗前CD4~+T淋巴细胞组成预测ART治疗6个月后HIV-RNA阴转、CD4~+T淋巴细胞上升的效能。结果 ART治疗6个月后失访22例,余26例中HIV-RNA转阴22例、未转阴4例,CD4~+T淋巴细胞上升22例、未上升4例;HIV-RNA转阴组治疗前Th17细胞百分比[(6.89±5.23)%]、CD4~+/CD8~+(0.44±0.29)高于HIV-RNA未转阴组[(1.47±1.26)%、0.14±0.09],Th2/Th17(1.80±1.32)低于HIV-RNA未转阴组(4.22±0.63)(P0.05);CD4~+T淋巴淋巴细胞上升组治疗前Th17细胞百分比[(6.62±5.24)%]、CD4~+/CD8~+(0.47±0.29)高于CD4~+T淋巴细胞未上升组[(2.05±1.68)%、0.13±0.08],Th2/Th17(1.66±0.88)低于CD4~+T淋巴细胞未上升组(4.81±1.27)(P0.05);治疗前Th17细胞百分比、Th2/Th17、CD4~+/CD8~+预测治疗后6个月HIV-RNA转阴的AUC分别为0.850(95%CI:0.688~1.000,P0.001)、0.933(95%CI:0.827~1.000,P0.001)、0.817(95%CI:0.614~1.000,P0.001),最佳截断值分别为3.06%、2.45、0.628,灵敏度分别为97.0%、66.7%、98.0%,特异度分别为72.3%、90.9%、71.4%;预测治疗后6个月CD4~+T淋巴细胞上升的AUC分别为0.768(95%CI:0.567~0.969,P0.001)、0.976(95%CI:0.918~1.000,P0.001)、0.875(95%CI:0.730~1.000,P0.001),最佳截断值分别为3.35%、2.45、0.268,灵敏度分别为56.2%、91.3%、77.3%,特异度分别为96.8%、96.2%、97.1%。结论 Th17细胞百分比、Th2/Th17、CD4~+/CD8~+在预测ART治疗短期内免疫重建效果中有一定价值。     

慢性牙周炎患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达

目的探讨外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg表达;采用ELISA法测定3组血浆转化生长因子-β(transforming grow factor-β, TGF-β)水平;Pearson法分析CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg与CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg,CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与牙周袋探诊深度的相关性。结果轻中度组、重度组CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg[(2.88±1.50)%、(2.52±1.03)%]、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达[(4.42±1.49)%、(3.85±1.02)%]、血浆TGF-β水平[(1 054.18±370.35)、(1 003.78±398.76)ng/L]低于对照组[(3.57±1.11)%、(6.27±1.67)%、(1 296.60±303.17)ng/L](P0.05),轻中度组与重度组比较差异无统计学意义(P0.05);Pearson线性相关分析结果显示,CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达呈正相关(r=0.776,P0.001),CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg均与牙周袋探诊深度呈负相关(r=-0.333,P=0.005;r=-0.551,P0.001)。结论慢性牙周炎CD4~+CD25~+Treg介导的免疫应答减弱,可能促进疾病的发生、发展。     

脓毒症患者CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞检测的临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血辅助性T细胞(T Helper,Th)17及CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)表达的变化和检测的临床意义.方法 将2008-01～2010-11在我医院ICU住院的脓毒症患者40例按照疾病严重程度分为三组:脓毒症组14例、严重脓毒症组15例和脓毒症休克组11例.再将脓毒症患者根据28 d预后分为死亡组(D,n=11)和存活组(S,n=29).所有入选的40例脓毒症患者在入选当天行流式细胞术检测血中Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的比例.比较脓毒症组、严重脓毒症组和脓毒症休克组患者血中Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化,以及生存组和死亡组上述指标的差异.分析CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞免疫平衡紊乱与病情严重程度的关系.同时选取20例健康人为对照组.结果 健康对照组Th17细胞表达率为(0.91±0.38)%,CD4+CD25+调节性T细胞表达率为(0.39±0.23)%;脓毒症患者较正常对照组这两项指标明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).其中脓毒症组分别为(2.09±0.53)%和(1.72±0.59)%;严重脓毒症组为(3.90±0.80)%和(2.72±0.22)%;脓毒性休克组为(1.85±0.35)%和(3.55±0.51)%.Th17表达率严重脓毒症组最高,与其他两组比较差异有统计学意义(P<0.05).而脓毒症休克组与脓毒症组比较差异无统计学意义(P＞0.05).CD4+CD25+调节性T细胞表达率脓毒症休克组最高,严重脓毒症组次之,脓毒症组最低,三组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05).死亡组血中CD4+CD25+调节性T细胞表达率明显高于存活组[(3.03±0.91)%和(2.43±0.79)%,P<0.05],Th17细胞表达率明显低于存活组[(2.01±0.66)%和(2.97±1.15)%,P<0.05].结论 Th17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞在脓毒症的免疫发病机制中可能起着重要作用.检测脓毒症患者外周血Th17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞能够反映机体的细胞免疫状态,对评估患者预后有重要临床价值.     

脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对辅助性T细胞漂移的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨脓毒症大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡对辅助性T细胞(Th)漂移的影响及血必净注射液的干预作用.方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血必净组,每组8只.行盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.于第3日采用免疫磁珠法分选各组CD4+CD25+Treg并培养12 h,用流式细胞仪检测Treg凋亡率及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)的分泌量;再将CD4+CD25+ Treg与CD4+CD25-T细胞1∶1共培养,刀豆素A刺激68 h,ELISA检测Th1、Th2、Th17分泌的γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-17水平.结果 正常组Treg凋亡率[(12.03±0.89)%]与假手术组[(9.48±2.17)%]比较差异无统计学意义;模型组Treg凋亡率[(5.87±0.44)%]明显低于正常组和假手术组;而血必净组的Treg凋亡率[(27.29±2.48)%]显著高于其他各组(P均<0.01).Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌量随Treg凋亡率增加而减少,相关系数(r)分别为-0.878(P=0.042)、-0.877(P=0.042)、-0.743(P=0.010).与正常组比较,模型组IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显升高[IFN-γ:(254.70±44.88)ng/L比(0.68±0.78)ng/L,IL-4:(8.82±0.61)ng/L比(3.48±0.98)ng/L,IFN-γ/IL-4比值:30.28±4.87比0.23±0.30,P均<0.01];而血必净组IFN-γ[(491.54±84.28)ng/L]和IFN-γ/IL-4比值(45.31±8.01)均显著高于模型组(P<0.01和P<0.05);各组间IL-17水平无明显差异(P均>0.05).结论 脓毒症时Treg凋亡率增加可减轻对效应T细胞的抑制功能,血必净注射液能有效促进脓毒症Treg凋亡,介导Th2向Th1漂移.     

再生障碍性贫血外周血Th17和CD4~+ CD25~+ Treg细胞表达情况研究

本研究旨在探讨成人再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。45例初发AA患者分为轻型AA(n=25)和重型AA(n=25)两组,15例正常人作为对照。应用流式细胞术检测AA患者外周血中Th17和CD4+CD25+Treg的比例,ELISA检测血清及刺激后外周血单个核细胞(PBMNC)上清液中的白介素(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并与正常对照组比较。结果表明:重型AA(SAA)组外周血Th17细胞比例,血清中IL-17及IFN-γ表达高于轻型AA(MAA)和正常人组,而重型AA组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例降低。与轻型AA和正常对照相比,重型AA患者单个核细胞培养后上清液中IL-17及IFN-γ表达水平显著增加。AA患者血红蛋白计数与Th17细胞及血清IL-17表达呈负相关,与CD4+CD25+Treg表达成正相关。结论:重型AA患者外周血Th17细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,贫血的严重程度与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。     

肝素雾化吸入治疗喘息样支气管炎反复发作的免疫学机制

目的探讨在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗小儿喘息样支气管炎反复发作的疗效及免疫学机制。方法喘息性支气管炎患儿50例,随机分为观察组30例和对照组20例,对照组给予吸氧、抗感染等常规治疗,观察组在对照组基础上给予肝素100u/kg+生理盐水5mL雾化吸入,2次/d,共14d。记录2组喘息时间和肺部啰音时间;分别于治疗前及治疗14d后检测2组血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-8、正常T细胞表达分泌的活性调节蛋白(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)、干扰素-γ(interferon-gamma,INF-γ)水平及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,并与18例体检健康者(阴性对照组)进行比较。结果观察组喘息时间[(4.5±1.1)d]及肺部啰音时间[(6.9±0.8)d]较对照组[(6.6±1.4)、(8.1±0.9)d]短(P<0.01);治疗前,观察组和对照组血清IL-4[(2.45±0.22)、(2.38±0.18)ng/L]、IL-8[(33.90±2.20)、(32.10±2.00)ng/L]、RANTES[(48.8±8.7)、(41.9±9.5)μg/L]水平均明显高于阴性对照组[IL-4(1.41±0.17)ng/L、IL-8(15.60±2.20)ng/L、RANTES(13.3±4.8)μg/L](P<0.01),INF-γ[(0.37±0.14)、(0.38±0.09)ng/L]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(6.4±0.9)%、(5.5±0.8)%]均低于阴性对照组[(1.44±0.20)ng/L、(7.9±1.2)%](P<0.01);观察组治疗后血清IL-4[(1.52±0.13)ng/L]、IL-8[(18.60±2.10)ng/L]及RANTES[(23.1±4.5)μg/L]水平均较对照组治疗后[(1.78±0.16)ng/L)、(22.90±1.20)ng/L、(28.0±6.1)μg/L]降低(P<0.05),观察组治疗后血清INF-γ[(1.46±0.16)ng/L)]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(7.2±0.9)%]均较对照组治疗后[(0.83±0.09)ng/L、(6.4±1.0)%]增高(P<0.05)。结论喘息样支气管炎反复发作患儿在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗,可下调血清IL-4、IL-8、RANTES水平,上调INF-γ和CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,缩短喘息时间及肺部啰音时间。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增龄性变化及其与老年肺癌的关系

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的增龄性变化及其与老年肺癌发生、发展的关系。方法肺癌患者70例和体检健康者60例,分别按年龄(青年18~45岁、中年45~60岁、老年60岁)分为青年肺癌组21例、中年肺癌组25例、老年肺癌组24例和青年健康组20例、中年健康组20例、老年健康组20例。采用流式细胞分析法测定各组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分率,采用实时荧光定量PCR法测定功能基因Foxp3 mRNA的相对表达量;分析肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞百分率与临床特征的关系。结果老年肺癌组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(11.81±2.40)%]及Foxp3 mRNA相对表达量(3.14±1.30)高于中年肺癌组[(11.25±1.84)%、2.53±1.16]和青年肺癌组[(9.05±2.14)%、2.28±1.21],中年肺癌组高于青年肺癌组(P0.05);老年健康组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(9.82±1.19)%]及Foxp3mRNA相对表达量(2.67±0.99)高于中年健康组[(7.81±1.16)%、1.76±0.80]和青年健康组[(6.23±0.91)%、1.17±0.51],中年健康组高于青年健康组(P0.05);相同年龄段,各肺癌组中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量均明显高于各健康组(P0.05);肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率在肺癌分期、有无淋巴结转移上差异有统计学意义(F=28.660,P=0.002;t=21.084,P0.001),在不同性别、病理类型上差异无统计学意义(t=2.330,P=0.120;F=0.020,P=0.980)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的增龄性变化可能是导致老年肺癌发生、发展的原因之一。     

重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞变化及意义

目的探讨重度子痫前期(s PE)患者外周血Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞变化及意义。方法选取2011-2013年镇江妇幼保健院40例s PE患者及40名健康对照者。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-22、TGF-β和IL-10水平,并分析其与s PE的相关性。结果 s PE患者组外周血Th17细胞水平为(1.21±0.82)%,显著高于健康对照组的(0.74±0.63)%,差异有统计学意义(t=3.45,P=0.002)。s PE患者组外周血CD4~+CD25~+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于健康对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.001)。s PE患者组IL-17、IL-22水平分别为80.03±31.25、60.22±18.32ng/L,高于健康对照组的32.84±17.23、35.24±14.33ng/L,差异有统计学意义(t值分别为10.74、5.89,P均0.01),IL-10、TGF-β水平为26.29±10.31、25.65±11.81ng/L,低于健康对照组的33.24±11.93、48.261±13.85ng/L,差异有统计学意义(t值分别为3.35、6.78,P均0.01)。s PE患者血浆IL-17、IL-22水平与Th17细胞水平呈显著正相关(r=0.69、0.58,P0.01)。结论 s PE患者Th17细胞数量增高,CD4~+CD25~+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在s PE的发病机制中可能起到重要作用。     

2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者外周血T淋巴细胞和相关细胞因子的变化及研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)合并颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis, CAS)患者外周血T淋巴细胞比率、相关细胞因子表达及其与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness, IMT)和糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA_1c)的相关性。方法 80例T2DM患者,其中有CAS斑块者40例为CAS组,无CAS斑块者40例为无CAS组;体检健康者40例为对照组。3组采用流式细胞仪测定外周血Th1、Th2、Th17及Treg细胞比例,采用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin, IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素(interferon, IFN)-γ水平,并测量IMT和HbA_1c水平,分析外周血T淋巴细胞与IMT和HbA_1c的相关性。结果 CAS组Th1细胞和Th17细胞百分率[(19.47±2.45)%、(2.34±0.33)%]及IL-2[(211.24±31.49)ng/L]、IL-17[(19.54±3.27)ng/L]、IFN-γ[(19.72±3.21)ng/L]水平、HbA_1c[(11.28±1.56)%]、IMT[(1.45±0.40)mm]明显高于无CAS组[(15.24±1.62)%、(1.50±0.28)%、(184.32±25.74)ng/L、(15.76±2.08)ng/L、(15.68±2.07)ng/L、(8.92±1.09)%、(1.01±0.27)mm]和对照组[(10.02±1.14)%、(0.96±0.25)%、(128.46±17.49)ng/L、(7.32±0.99)ng/L、(10.43±1.21)ng/L、(5.22±0.84)%、(0.76±0.13)mm](P0.05),无CAS组高于对照组(P0.05);CAS组Th2细胞和Treg细胞百分率[(2.25±0.49)%、(4.03±0.75)%]及IL-4[(4.72±0.32)ng/L]、IL-6[(11.21±1.04)ng/L]、IL-10[(11.07±1.27)ng/L]水平低于无CAS组[(2.97±0.67)%、(5.67±1.33)%、(5.36±0.61)ng/L、(13.24±1.96)ng/L、(14.77±1.93)ng/L]和对照组[(3.36±0.83)%、(6.57±1.52)%、(7.32±0.95)ng/L、(17.75±2.36)ng/L、(22.72±2.59)ng/L](P0.05),无CAS组低于对照组(P0.05);CAS组患者IMT与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.809,P0.001;r=0.648,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.580,P0.001;r=-0.643,P0.001),HbA_1c与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.601,P0.001;r=0.528,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.844,P0.001;r=-0.602,P0.001)。结论糖尿病合并CAS患者存在Th1、Th17细胞比率上调,Th2、Treg细胞比率下调,IL-2、IL-17、IFN-γ分泌增多,IL-4、-6、-10分泌减少,且与患者疾病进展程度相关。     

骨髓瘤患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞及淋巴细胞亚群的研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)调节性T细胞(Treg)及淋巴细胞亚群的比例,初步探讨其在MM患者发生免疫抑制机制中作用。方法采用流式细胞术分别检测65例MM患者和20例健康对照组外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Tregs以及淋巴细胞亚群的比例。结果 MM患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg比例[(10.85±2.19)%]高于健康对照组[(7.48±1.66)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD4~+(Th)细胞的比例[(31.39±5.19)%]低于健康对照组[(36.55±3.02)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD8~+(Tc)细胞的比例[(34.80±4.29)%],高于健康对照组[(28.93±3.61)%],差异有统计学意义(P0.01);同时,MM组外周血中Th/Tc的比值(0.95±0.24)低于健康对照组(1.29±0.27),差异有统计学意义(P0.01)。结论 MM患者存在淋巴细胞亚群的比例异常,导致MM患者更易产生免疫功能失调;同时,由于MM患者CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg细胞比例的增加可能进一步加剧骨髓瘤患者的免疫抑制,促进了肿瘤细胞的免疫逃逸。     

中性粒细胞CD11b、1,25-(OH)2 VitD3和γ干扰素在小儿轮状病毒性肠炎中的表达及与免疫功能的关系

目的探究中性粒细胞CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、γ干扰素(INF-γ)在小儿轮状病毒性肠炎(PRE)中的表达及与免疫功能的关系。方法采用前瞻性研究方法,选取2017年9月至2019年9月琼海市人民医院收治的90例PRE患儿作为观察组,另选择同期健康体检儿童104例作为对照组。检测对比两组患儿血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ水平,Logistic回归分析探究各血清指标与PRE的关系。根据脱水程度分为轻度患儿28例、中度患儿42例、重度患儿20例,比较不同病情患儿血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ水平、细胞免疫指标(CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+)、体液免疫指标[免疫球蛋白A(Ig A)、Ig G、Ig M],采用Pearson相关性分析评价血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ与细胞免疫、体液免疫的关系。结果观察组患儿的血清CD11b[(86.24±7.16)%]、INF-γ[(3.62±0.72)pg/ml]高于对照组[(69.35±4.42)%、(1.15±0.20)pg/ml],1,25-(OH)_2Vit D_3[(20.75±5.03)pg/ml]低于对照组[(35.66±7.14)pg/ml],差异具有统计学意义(P0.05);Logistic回归分析显示,血清CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ与PRE显著相关,差异具有统计学意义(P0.05);重度患儿血清CD11b[(92.71±6.35)%]、INF-γ[(5.23±1.04)pg/ml]高于中度[(86.23±5.79)%、(3.72±0.65)pg/ml]、轻度患儿[(81.63±4.90)%、(2.32±0.49)pg/ml],1,25-(OH)_2Vit D_3[(18.10±2.16)pg/ml]低于中度[(20.42±2.77)pg/ml]、轻度患儿[(23.14±3.05)pg/ml],差异具有统计学意义(P0.05);重度患儿外周血CD3~+[(48.81±3.44)%]、CD4~+[(22.39±1.80)%]、CD4~+/CD8~+(0.52±0.04)、IgA[(0.92±0.21)g/L]、IgG[(6.48±1.02)g/L]、IgM[(0.48±0.10)g/L]低于中度[(51.06±4.02)%、(23.97±2.25)%、(0.58±0.05)、(1.18±0.26)g/L、(7.75±1.44)g/L、(0.61±0.13)g/L]及轻度患儿[(54.11±4.50)%、(26.08±2.73)%、(0.63±0.07)、(1.47±0.30)g/L、(9.22±1.93)g/L、(0.74±0.15)g/L],差异具有统计学意义(P0.05);血清CD11b(r_1=-0.400;r_2=-0.492;r_3=-0.431)、INF-γ(r_1=-0.406;r_2=-0.529;r_3=-0.577)与CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈负相关,1,25-(OH)_2Vit D_3(r_1=0.514;r_2=0.568;r_3=0.502)与CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈正相关(P0.05);血清CD11b(r_1=-0.519;r_2=-0.518;r_3=-0.506)、INF-γ(r_1=-0.616;r_2=-0.660;r_3=-0.692)与Ig A、Ig G、Ig M呈负相关,1,25-(OH)_2Vit D_3(r_1=0.669;r_2=0.551;r_3=0.663)与Ig A、Ig G、Ig M呈正相关(P0.05)。结论中性粒细胞CD11b、1,25-(OH)_2Vit D_3、INF-γ与PRE发生及其免疫功能显著相关,可作为预测疾病发生、评估免疫紊乱及病情程度的重要因子。     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。     

CD4~+ CD25~+ Treg细胞对AIED小鼠治疗效果及免疫分子调控机制的研究

目的探究CD4~+CD25~+Treg细胞对自身免疫性内耳疾病(AIED)小鼠的治疗效果及免疫分子调控机制。方法复制AIED小鼠模型,分离得小鼠脾脏Treg细胞,纯化扩增,通过尾静脉输入到观察组小鼠体内,检测小鼠外周血中Th17和CD4~+CD25~+Treg细胞比率、脑干诱发电位、外周血清中白细胞介素(IL)-2和IL-6水平。结果模型组和观察组AIED小鼠模型复制后的Th17和CD4~+CD25~+Treg细胞比率、脑干诱发电位、IL-2和IL-6水平均显著性的高于模型复制前(P0.05);观察组输入1周后外周血中的Th17细胞比率、脑干诱发电位、IL-2和IL-6显著性的低于模型复制后(P0.05),观察组输入1周后CD4~+CD25~+Treg细胞显著性的高于模型复制后(P0.05)。结论CD4~+CD25~+Treg细胞对AIED小鼠有保护作用,其作用机制可能是抑制过强的自身免疫反应。     

宫颈癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞与白细胞介素-17水平及其相关性研究

目的探讨外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)和白细胞介素-17(IL-17)水平在宫颈癌患者中的变化及其相关性。方法选取2014年1月至2015年3月该院确诊宫颈癌患者60例(宫颈癌组)和查体的健康女性60例(健康对照组),采用流式细胞仪检测外周血Tr细胞数量及占CD4~+细胞百分比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平。结果宫颈癌组外周血Foxp3~+Tr、Tr、CD4~+T淋巴细胞百分比,Foxp3~+Tr/Tr、Tr/CD4~+T淋巴细胞比值及血清IL-17水平均较健康对照组明显升高,而IL-17/Tr比值明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组患者外周血CD4~+CD25~+Tr细胞水平与血清IL-17水平呈正相关(r=0.768,P0.05)。结论宫颈癌患者存在细胞免疫功能紊乱,IL-17与Tr细胞比值失衡可能在宫颈癌发病机制中起一定的作用。     

外周血Th17及CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞失衡与不明原因反复自然流产的相关性研究

目的观察不明原因反复自然流产(URSA)孕妇外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例的变化,探讨Th17/T细胞比例失衡在URSA孕妇发病机制中的作用。方法选择36例URSA孕妇为实验组,健康早孕妇女40例为对照组,应用流式细胞仪检测Th17与CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比例,应用ELISA法检测IL-6、TGFβ-和IL-17的水平。结果 URSA孕妇外周血中,CD3+CD8-IL-17+T细胞占CD3+T淋巴细胞的百分比高于对照组,P<0.05;CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显低于对照组,P<0.05。相关细胞因子测定结果显示,IL-6、IL-17水平在URSA孕妇血清中均明显升高,TGF-β水平在2组间比较,差异无统计学意义。结论外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的比例及相关细胞因子数量的异常可能下调母胎免疫耐受功能,参与URSA的发生。