脓毒症患者CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞检测的临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血辅助性T细胞(T Helper,Th)17及CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)表达的变化和检测的临床意义.方法 将2008-01～2010-11在我医院ICU住院的脓毒症患者40例按照疾病严重程度分为三组:脓毒症组14例、严重脓毒症组15例和脓毒症休克组11例.再将脓毒症患者根据28 d预后分为死亡组(D,n=11)和存活组(S,n=29).所有入选的40例脓毒症患者在入选当天行流式细胞术检测血中Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的比例.比较脓毒症组、严重脓毒症组和脓毒症休克组患者血中Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化,以及生存组和死亡组上述指标的差异.分析CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞免疫平衡紊乱与病情严重程度的关系.同时选取20例健康人为对照组.结果 健康对照组Th17细胞表达率为(0.91±0.38)%,CD4+CD25+调节性T细胞表达率为(0.39±0.23)%;脓毒症患者较正常对照组这两项指标明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).其中脓毒症组分别为(2.09±0.53)%和(1.72±0.59)%;严重脓毒症组为(3.90±0.80)%和(2.72±0.22)%;脓毒性休克组为(1.85±0.35)%和(3.55±0.51)%.Th17表达率严重脓毒症组最高,与其他两组比较差异有统计学意义(P<0.05).而脓毒症休克组与脓毒症组比较差异无统计学意义(P＞0.05).CD4+CD25+调节性T细胞表达率脓毒症休克组最高,严重脓毒症组次之,脓毒症组最低,三组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05).死亡组血中CD4+CD25+调节性T细胞表达率明显高于存活组[(3.03±0.91)%和(2.43±0.79)%,P<0.05],Th17细胞表达率明显低于存活组[(2.01±0.66)%和(2.97±1.15)%,P<0.05].结论 Th17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞在脓毒症的免疫发病机制中可能起着重要作用.检测脓毒症患者外周血Th17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞能够反映机体的细胞免疫状态,对评估患者预后有重要临床价值.     

过敏性紫癜患儿外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达

目的:探讨过敏性紫癜(schonlein-henoch purpura,HSP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达及其意义。方法:采用免疫荧光抗体标记法及流式细胞仪对20例HSP患儿和20例健康儿童、20例呼吸道感染患儿、20例幼年特发性关节炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞比率进行检测。结果:HSP患儿外周血CD4+CD25+T细胞的百分率显著低于健康儿童和呼吸道感染患儿(P<0.05),而与幼年特发性关节炎患儿相当。结论:外周血CD4+CD25+调节性T细胞参与了HSP的发病。     

不同树突状细胞对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞体外扩增的影响

目的利用不同种类树突状细胞(dendritic cells,DC)体外扩增获得表型和功能稳定的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。方法免疫磁珠法(MACS)分离Balb/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞,利用与调节性T细胞同基因或异基因成熟DC、未成熟DC和调节性DC刺激其扩增,流式细胞术测定其纯度和表型。以CD4+CD25-T细胞作为反应细胞,验证扩增前后Treg细胞的免疫抑制功能。结果MACS分离的CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(95.38±1.82)%,同基因和异基因DC都能有效刺激Treg细胞体外扩增,其中同基因成熟DC扩增效果最为明显。而且同基因成熟DC扩增后CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(94.16±1.88)%,而且高表达Foxp3分子。当CD4+CD25+调节性T细胞与效应T细胞比例为1∶1时,能够有效的抑制效应T细胞的增殖,而且,同基因成熟DC扩增的CD4+CD25+调节性T细胞的抑制效果比新分离的Treg效果更好。结论同基因成熟DC能够体外扩增表型和功能稳定的Treg细胞。     

CD4+ CD25+调节性T细胞

机体的免疫系统维持着对感染性抗原的反应和自身耐受的平衡,而对自身抗原产生免疫耐受则是防止发生自身免疫病的关键。阴性选择中的克隆清除、免疫无能和克隆忽略被认为是控制自身反应性T细胞的主要机制。近些年随着研究的深入,CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在维持自身耐受中的作用得到进一步的认识。     

Th9、Th17、CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的变化

目的探讨慢性淋巴细胞白血病患者外周血中Th9、Thl7和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞及相关细胞因子的表达水平及意义。方法采用流式细胞仪检测36例CLL患者和45例健康对照组外周血Th9、Th17和Treg细胞的表达率,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外周血中细胞因子IL-9、IL-17、TGF-β的表达水平。结果 1)CLL组患者外周血Th9、Th17细胞比例及细胞因子IL-9、IL-17浓度均明显高于健康对照组[(1.29±0.35)%vs(0.74±0.23)%,P0.05;(2.15±0.46)%vs(1.08±0.37)%,P0.05;(24.25±7.05)%vs(16.35±5.42)%,P0.05;(11.47±3.99)%vs(7.36±2.85%),P0.05]。CD4~+CD25~+FoxP3~+细胞比例及细胞因子TGF-β浓度明显低于对照组[(4.76±0.89)%vs(7.26±1.95)%,P0.05;(3.82±1.39)%vs(6.82±2.01)%,P0.05]。2)相关性分析:患者Th9、Th17细胞比例及IL-9、IL-17浓度与淋巴细胞计数负相关(γ_s=-0.374,P=0.034;γ_s=-0.382,P=0.032;γ_s=-0.445,P=0.011;γ_s=-0.413,P=0.024);患者Treg细胞比例及TGF-β浓度与淋巴细胞计数正相关(γ_s=0.416,P=0.023;γ_s=0.403,P=0.028)。结论慢性淋巴细胞白血病患者Th9、Th17与CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞比例失衡,血清IL-9、IL-17和TGF-β水平变化,这些原因可能参与慢性淋巴细胞白血病的免疫发病过程。     

脓毒症患儿CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的 观察不同免疫状态下脓毒症婴幼儿外周血CD4+CD25+Foxp3high调节性T细胞(Treg细胞)及相关分子的变化,探讨婴幼儿脓毒症免疫功能紊乱的可能机制.方法 分别收集2007年5月至2007年11月深圳市儿童医院重症监护室收治的婴幼儿脓毒症36例血液标本,另选16例健康同龄儿童作为正常对照进行前瞻性研究;排除既往患有自身免疫性疾病、免疫缺陷病、遗传代谢病及肿瘤的患儿,排除近6个月曾使用影响免疫功能的药物.本研究获得深圳市儿童医院伦理委员会的同意.以外周血CD14+单核细胞HLA-DR表达>30%或<30%为阈值,将患儿分为免疫激活组(DR-H组)和免疫抑制组(DR-L组),用流式细胞术检测CD14+单核细胞HLA-DR表达率,CD4+CD25+Foxp3highTreg细胞比例;实时荧光定量PCR(Real time-PCR)检测CD4+T细胞Foxp3、CTLA-4、GITR、IL-10mRNA表达.统计方法采用单因素方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 急性期DR-L组CD4+CD25+Foxp3highTreg细胞比例明显高于对照组及DR-H组(P<0.05).DR-L组Foxp3、CTLA-4、IL-10等相关分子基因表达高于对照组及DR-H组(P<0.05),DR-L组GITR基因表达高于DR-H组.结论 CD4+CD25+Foxp3highTreg细胞数量异常增加可能与婴幼儿脓毒症免疫抑制状态有关.     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与自身免疫性甲状腺炎

调节性T细胞主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对效应细胞的增殖、免疫活性的发挥起抑制作用.近年来,CD4~+ CD25~+调节性T细胞在自身免疫性甲状腺疚病中的作用日益引起人们的关注,动物实验和人体研究发现CD4~+ CD25~+调节性T细胞数目和功能的异常与自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的关系密切,可能在AIT的发病机制中发挥关键作用.综述如下.     

睾丸内胰岛移植对CD4~+ CD25~+调节性T细胞分布的影响

背景:CD4 CD25 调节性T细胞是维持机体免疫耐受的重要调控者,参与了多种移植免疫耐受的诱导。目的:拟观察小鼠睾丸内胰岛移植后CD4 CD25 调节性T细胞分布的特点。设计、时间及地点:观察对照动物实验,2007-04/2008-01在江西省实验动物中心完成。材料:成年Balb/c小鼠。方法:分离小鼠胰岛细胞,采用胰管内注射胶原酶水浴消化及Ficoll400不连续密度梯度离心法纯化,以双硫腙染色,计算胰岛细胞纯度,以体外葡萄糖刺激胰岛素分泌试验判定胰岛细胞功能。将胰岛移植至小鼠睾丸或肾包膜下,每只移植300～400个胰岛。在胰岛移植24h后麻醉处死小鼠,取脾脏、睾丸及淋巴结,制成细胞悬液,免疫磁珠法分离CD4 CD25 T细胞,通过流式细胞仪分析计数。主要观察指标:胰岛细胞的纯度及功能,CD4 CD25 调节性T细胞的分布。结果:纯化后每只胰腺获得(478±53)个胰岛细胞,纯度为(81.5±12.3)%,纯化后细胞形态完好,活度大于90%。睾丸内胰岛移植时,睾丸、淋巴结及脾脏中CD4 CD25 调节性T细胞均显著增多(P<0.05～0.01)。结论:睾丸内胰岛移植能明显上调睾丸、淋巴结及脾脏中CD4 CD25 调节性T细胞数量。     

外周血Th17及CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞失衡与不明原因反复自然流产的相关性研究

目的观察不明原因反复自然流产(URSA)孕妇外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例的变化,探讨Th17/T细胞比例失衡在URSA孕妇发病机制中的作用。方法选择36例URSA孕妇为实验组,健康早孕妇女40例为对照组,应用流式细胞仪检测Th17与CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比例,应用ELISA法检测IL-6、TGFβ-和IL-17的水平。结果 URSA孕妇外周血中,CD3+CD8-IL-17+T细胞占CD3+T淋巴细胞的百分比高于对照组,P<0.05;CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显低于对照组,P<0.05。相关细胞因子测定结果显示,IL-6、IL-17水平在URSA孕妇血清中均明显升高,TGF-β水平在2组间比较,差异无统计学意义。结论外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的比例及相关细胞因子数量的异常可能下调母胎免疫耐受功能,参与URSA的发生。     

儿童过敏性紫癜急性期Th17细胞功能和CD4~＋CD25~＋调节性T细胞水平变化

目的观察过敏性紫癜（HSP）病儿急性期Th17细胞功能和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）水平变化,探讨其在HSP免疫发病机制中的作用。方法选择54例HSP急性期病儿为研究对象,根据尿检有无异常分为肾炎组（HSPN组）和非肾炎组（NHSPN组）,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血浆白细胞介素17（IL-17）水平,采用流式细胞术检测外周血CD4＋CD25＋Treg、CD4＋细胞、CD8＋细胞、CD3＋细胞、NK细胞（CD3-CD56＋）、B淋巴细胞（CD19＋）和CD3＋HLADR＋细胞水平。以30名健康儿童作为对照。结果HSP病儿血浆IL-17水平较对照组明显增高（t=14.66,P〈0.01）,HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP病儿外周血CD4＋CD25＋Treg比例明显低于对照组（t=7.28,P〈0.01）,HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP病儿CD4＋CD25＋Treg水平与CD4＋细胞呈正相关（r=0.554,P〈0.01）,与CD19＋细胞呈负相关（r=-0.305,P〈0.05）,而与CD8＋细胞、CD3＋细胞、CD3-CD56＋细胞以及CD3＋HLADR＋细胞则无相关性（r=-0.109～0.287,P〉0.05）。HSP病儿血浆IL-17水平与CD4＋CD25＋Treg水平呈负相关（r=-0.295,P〈0.05）。结论 HSP病儿急性期Th17细胞功能增强,免疫抑制效应不足;HSP病儿存在Th17/Treg平衡紊乱,Th17/Treg失衡参与了HSP的发病过程。     

骨髓增生异常综合征患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th3细胞变化

研究表明,骨髓增生异常综合征(MDS)患者T细胞、B细胞、NK细胞和单核-巨噬细胞等固有免疫细胞和适应性免疫细胞存在质或量的异常[1-2].调节性T细胞是体内具有抑制免疫病理和自身免疫性疾病的CD4+T细胞,包括自然产生的CD4+CD25+调节性T细胞、分泌IL-10的Tr1细胞和分泌TGF-β的Th3细胞.     

慢性牙周炎患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达

目的探讨外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg表达;采用ELISA法测定3组血浆转化生长因子-β(transforming grow factor-β, TGF-β)水平;Pearson法分析CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg与CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg,CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与牙周袋探诊深度的相关性。结果轻中度组、重度组CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg[(2.88±1.50)%、(2.52±1.03)%]、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达[(4.42±1.49)%、(3.85±1.02)%]、血浆TGF-β水平[(1 054.18±370.35)、(1 003.78±398.76)ng/L]低于对照组[(3.57±1.11)%、(6.27±1.67)%、(1 296.60±303.17)ng/L](P0.05),轻中度组与重度组比较差异无统计学意义(P0.05);Pearson线性相关分析结果显示,CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达呈正相关(r=0.776,P0.001),CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg均与牙周袋探诊深度呈负相关(r=-0.333,P=0.005;r=-0.551,P0.001)。结论慢性牙周炎CD4~+CD25~+Treg介导的免疫应答减弱,可能促进疾病的发生、发展。     

CD4+CD25+调节性T细胞的研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其功能紊乱或数目下降是导致自身免疫性疾病的重要原因之一。近年来,研究发现Foxp3在调控CD4^＋CD25^＋Treg细胞的发育和功能上起着重要作用。本文就CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制机制、Foxp3在其发育和功能上的作用、IL-2和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）等对其产生、维持及活化的作用等方面作一综述。     

哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞及Foxp3表达的变化

目的 探讨哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量的变化及相关转录因子Foxp3表达的变化.方法 24只5周龄C57BL/6小鼠随机分为哮喘模型组和对照组,每组12只,于第0天和第14天,哮喘组以腹腔注射致敏液[0.1%的鸡卵蛋白(OVA)0.1ml与等体积液态铝混合]0.2ml致敏,对照组注射等体积生理盐水,第24、25、26天开始雾化吸入1%的OVA(哮喘组)或生理盐水(对照组)进行激发,连续3 d,于最后1次激发后48 h处死小鼠.取脾脏,制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾脏CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例.取脾脏组织以RT-PCR和Western blot分别检测脾脏Foxp3 mRNA和蛋白的表达.数据结果以Levene法行方差齐性检验后,进行独立样本的t检验,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 脾脏CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例哮喘组为(7.03±2.19)%,对照组为(9.70±2.80)%,哮喘组低于对照组,两者相比差异有统计学意义(P=0.016);脾脏Foxp3 mRNA的表达水平哮喘组为(0.37±0.11),对照组为(0.237±0.118),哮喘组高于对照组,两者相比差异有统计学意义(P=0.009);脾脏Foxp3蛋白的表达水平哮喘组(0.692±0.171),对照组(0.515±0.135),哮喘组高于对照组,两者相比差异有统计学意义(P=0.01).结论 哮喘时抗原对CD4+CD25+T细胞的激活不足,可能在哮喘发病机制中起一定作用.     

CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞在结核病发生中的作用研究

目的:探讨CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞在结核病发生中的作用。方法:采用回顾性分析的方法,分析我院收治的60例结核病患者(观察组)和60例健康体检者(对照组)的临床资料。结果:观察组治疗前CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞比例明显高于对照组,治疗2、6个月末观察组患者CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞比例明显降低,观察组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞比例与CD4+T细胞、CD8+T细胞、IFN-γ和IL-4呈现明显的负相关(P<0.05)。结论:针对CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞在结核病发生机制中的作用,开展从免疫治疗和结核病疫苗设计提供新的作用靶点和诊疗依据,值得临床推广应用。     

胃癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞检测及临床意义

目的观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞与胃癌患者的关系,探讨其临床意义。方法用流式细胞术分析胃癌患者外周血淋巴细胞中Treg细胞的表达。结果胃癌患者手术前、后外周血淋巴细胞中Treg细胞比例分别为(6.35±1.85)和(4.54±1.42)%(P<0.05),术后复发时比例为(7.17±1.55)%;化疗前、后分别为(6.47±1.97)%和(8.81±2.01)%(P<0.05)。早期胃癌Treg细胞为(5.88±1.54)%,明显低于进展期胃癌(7.04±1.66)%(P<0.05)。结论胃癌患者外周血Treg细胞在术后1周比例减少,复发时比例上调,提示其参与了胃癌发生、发展的全过程。化疗后Treg细胞增加,可能与药物诱导的增值分化有关。不同进展期病人外周血中Treg细胞的水平有助于了解病情,判断预后。     

CD4+CD25+调节性T细胞与GVHD

源于胸腺的表达转录因子Foxp3的CD4＋CD25＋调节性T细胞具有免疫调节功能,在外周免疫耐受中有重要作用,可控制异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）的移植物抗宿主病（GVHD）,而不影响移植物抗白血病作用（GVL）,许多移植模型和临床试验均在探索中。植入CD4＋CD25＋调节性T细胞后所获得的抗GVHD作用的动物移植模型及早期HSCT临床研究结果表明,CD4＋CD25＋调节性T细胞输注将能极大改变allo—HSCT的现状。     

CD4+CD25+CD127-/low调节性T细胞和Th17细胞在ITP发病中的研究进展

正原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是一种常见的获得性器官特异性自身免疫性出血性疾病,育龄期女性发病率稍高于同年龄组男性,60岁以上老年人是该病的高发群体。该病患者的主要临床表现为皮肤黏膜出血,严重者甚至可发生内脏出血或颅内出血,进而危及生命~([1])。临床上,大部分慢性ITP患者病程迁延至1年以上,可有反复出血表现;部分急性ITP病情重,出血风险高,严重影     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞体外诱导扩增与临床应用研究进展

CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞在维持外周免疫耐受、预防自身免疫性疾病及移植排斥反应的过程中起着重要作用。Treg细胞治疗方法具有作用时间持久、低毒和靶向特定抗原的特点,但由于Treg细胞在外周血中数量甚少,限制其在临床的应用。研究表明体外扩增得到的Treg细胞的免疫治疗效果大于初始Treg细胞。本文就目前Treg细胞的体外诱导扩增和临床应用等方面的研究进展进行总结。     

支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞CD19~+CD23~+和CD4~+CD25~+的表达及意义

目的探讨支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞CD19＋CD23＋和CD4＋CD25＋的表达及意义。方法采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法分别检测34例哮喘发作期（哮喘发作组）和32例哮喘缓解期（哮喘缓解组）外周血CD19＋CD23＋表达率、CD4＋CD25＋表达率和血清总IgE水平,并与25例体检儿童（对照组）进行比较。结果哮喘发作组外周血CD19＋CD23＋表达率为（19.31&#177;9．08）％分别高于哮喘缓解组（8．63&#177;3．54）％和对照组;哮喘发作组CD4＋CD25＋表达率为（2．79&#177;1．69）％和哮喘缓解组为（3.36&#177;1．17）％均低于对照组;哮喘发作组IgE水平为（177．01&#177;90．38）IU/ml和哮喘缓解组为（160．76&#177;77．54）IU／ml均高于对照组．三组的差异均有统计学意义（F分别=36．62、24．67、24．35,P均〈0．05）。CD19＋CD23＋表达率与IgE呈正相关,CD4＋CD25＋表达率和IgE呈明显负相关,CD19＋CD23＋表达率和CD4＋CD25＋表达率亦呈明显负相关,差异均有统计学意义（r分别：0．22、-0．41、-0．34,P均〈0．05）。结论哮喘急性发作时外周血CD19＋CD23＋和CD4＋CD25＋改变明显。