参芪扶正注射液对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究参芪扶正注射液对基底细胞样(basal-like型)乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞增殖和凋亡的影响,探讨参芪扶正注射液对三阴性乳腺癌的治疗作用机制。方法:体外培养人乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞,将其分为参芪扶正注射液组和空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法分别于24,48,72 h检测参芪扶正注射液对人乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞增殖的影响。采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期分布和凋亡情况。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫印迹(Western blot)检测参芪扶正注射液对MDA-MB~(-2)31细胞p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)表达的影响。结果:参芪扶正注射液可抑制MDA-MB~(-2)31细胞增殖,高浓度者抑制作用强,即呈现浓度依赖性,体外培养48 h时抑制作用最显著。参芪扶正注射液将MDA-MB~(-2)31细胞阻滞于细胞周期的S期,进而诱导MDA-MB~(-2)31细胞凋亡。Real-time PCR和Western blot发现参芪扶正注射液可上调MDA-MB~(-2)31细胞PUMA蛋白和基因表达。结论:参芪扶正注射液可显著抑制人乳腺癌MDA-MB~(-2)31细胞增殖,导致细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调PUMA基因有关。     

南瓜蛋白对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响

目的观察南瓜蛋白对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法观察南瓜蛋白对PANC-1细胞生长抑制情况;非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷性小鼠(NOD/SCID)小鼠体内观察南瓜蛋白对胰腺原位移植瘤的抑瘤率;电镜观察南瓜蛋白作用后PANC-1细胞超微结构的改变;流式细胞仪定量检测其细胞周期和凋亡发生率的影响;ELISA法定量检测南瓜蛋白作用后PANC-1细胞Caspase-3活性变化。结果 0.125、0.25、0.5mg/kg的南瓜蛋白对小鼠移植瘤抑瘤率(%)分别为45.2、50.0、59.7(P<0.05)。南瓜蛋白10μg/mL作用PANC-1细胞24h,部分细胞开始凋亡,表现为核内染色质浓集,出现核碎裂,作用72h,凋亡细胞增多,表现为染色质聚集,部分核膜消失,凋亡小体出现;南瓜蛋白(0、2.5、10、40μg/mL)作用PANC-1细胞72h,流式细胞周期分析显示G0/G1期的比例(%)分别为46.56±5.08、53.33±5.05、67.50±6.50和77.00±6.73(P<0.05),annexin V/PI分析显示PANC-1细胞凋亡率(%)分别为2.50±0.13、8.30±1.23、23.40±2.45和48.50±3.65(P<0.05);Caspase-3活性分别为0.009±0.002、0.011±0.003、0.035±0.009和0.065±0.009酶活力单位(P<0.05),提示南瓜蛋白以浓度依赖性诱导PANC-1细胞凋亡;40μg/mL南瓜蛋白作用PANC-1细胞24、48、72h,G0/G1期的比例(%)分别为56.60±6.65、67.83±6.76和77.00±6.73(P<0.05),annexin V/PI分析显示PANC-1细胞凋亡率(%)分别为16.51±2.97、38.51±2.38和48.50±3.65(P<0.05),提示南瓜蛋白以时间依赖性诱导PANC-1细胞凋亡。结论南瓜蛋白对PANC-1细胞具有明显的抑制作用,诱导G0/G1周期阻滞和细胞凋亡可能是其主要机制。     

华蟾素联合健择对人胰腺癌PANC-1细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察华蟾素联合健择对人胰腺癌PANC-1细胞增殖及细胞周期的影响。方法①采用MTY法检测华蟾素联合健择对人胰腺癌PANC．1细胞的增殖作用;采用流式细胞仪检测不同浓度华蟾素对人胰腺癌细胞PANC-1的细胞周期的影响;采用WesternBlot检测PANC-1细胞pRb和Bax的蛋白表达水平。②将人胰腺癌PANC-1移植瘤裸小鼠随机分为对照组、健择组、华蟾素组、华蟾素加健择组,予药物干预后观察移植瘤生长情况,计算各组的抑瘤率。结果人胰腺癌细胞株PACN-1预先给予浓度为0．5U／ml的华蟾素2h后,再加入不同浓度的健择后的Ic。为0．00275μg/ml;随着华蟾素浓度的增加,细胞周期停滞于S期;pRb的蛋白表达逐渐增强,而Bax的蛋白表达变化不显著。健择组、华蟾素组、华蟾素加健择组的抑瘤率分别是59．79％、64．96％,65．75％;华蟾素联合健择组与健择组、对照组之间有显著性差异（P〈0．05）。结论华蟾素联合健择对人胰腺癌细胞PANC-1增殖有明显抑制作用,效果优于单纯健择组;华蟾素可使PANC-1细胞中的pRb高表达,将细胞周期阻滞于S期,这是其协同作用的机制之一。     

槲皮素联合顺铂对HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨槲皮素联合顺铂对HepG2细胞生长抑制及凋亡的影响.方法:采用MTT检测槲皮素及槲皮素联合顺铂对HepG2细胞增殖影响;用Annexin-v-FITC联合PI及流式细胞仪检测槲皮素及槲皮素联合顺铂处理后HepG2细胞的凋亡变化.结果:槲皮素能抑制HepG2细胞增殖,且有剂量效应关系;在其他条件相同情况下,槲皮素联合顺铂与相同浓度顺铂单用处理HepG2细胞相比,前者对HepG2细胞的抑制作用更显著(P＜0.05);不同浓度槲皮素与顺铂联合处理HepG2细胞与顺铂单用相比,前者显著提高了HepG2细胞的凋亡率(P＜0.05).结论:槲皮素能促进顺铂对HepG2细胞的生长抑制及凋亡诱导.     

参芪扶正注射液对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及机制研究

目的:研究参芪扶正注射液在体外对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及其机制。方法:体外培养PC-3细胞,MTT和SRB法检测细胞增殖抑制率;PI染色法测PC-3细胞凋亡率;ELISA法测Caspase-3、Caspase-9、Fas含量;Bradford法测SOD、MDA含量。结果:参芪扶正注射液对PC-3细胞的体外增殖具有抑制作用,并具有浓度依赖性;参芪扶正注射液能诱导PC-3细胞凋亡,促进Caspase-3、Caspase-9、Fas蛋白表达,增加细胞内SOD的活性,降低MDA的含量。结论:参芪扶正注射液可抑制PC-3细胞的增殖,其作用机制与启动线粒体通路、死亡受体通路和内质网通路及增加机体的抗氧化功能有关。     

参芪扶正注射液联合顺铂治疗肺癌恶性胸腔积液临床观察

目的:观察参芪扶正注射液联合顺铂治疗肺癌恶性胸腔积液的效果。方法:86例随机分为两组各43例。两组均用顺铂治疗,研究组加用参芪扶正注射液治疗,比较两组疗效以及治疗前后SF-36生活质量评分情况。结果:总有效率研究组高于对照组(P0.05)。两组治疗后SF-36评分均有所改善,研究组SF-36评分改善程度大于对照组(P0.05)。结论:顺铂联合参芪扶正注射液治疗肺癌恶性胸腔积液能够提高疗效,改善胸腔积液情况,提高患者生活质量。     

大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨大黄素对人胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响。方法人胰腺癌细胞株Panc-1经不同浓度大黄素(10、20、40、80、160μmol/L)分别作用24、48、72 h后,应用CCK-8法检测细胞增殖,光学显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡。结果大黄素对Panc-1细胞的增殖抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性,20、40、80μmol/L大黄素作用Panc-1细胞24 h后凋亡率分别为7.1%、15.2%、21.4%。结论大黄素可显著抑制人胰腺癌Panc-1细胞生长,大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞株的增殖抑制作用可能以诱导细胞凋亡方式为主。     

参芪扶正注射液联合顺铂治疗肺癌恶性胸腔积液40例临床观察

目的分析肺癌恶性胸腔积液患者采用顺铂与参芪扶正注射液联合用药方案的疗效。方法收集2014年7月—2016年7月间本科接收的患肺癌恶性胸腔积液的80例患者,随机分成2组:对照组40例,给予顺铂进行治疗;研究组40例,在参照组基础上加用参芪扶正注射液联合用药治疗。治疗后评估2组患者的临床疗效,且记录患者用药后的不良反应发生情况。结果与对照组相比,研究组治疗后的总有效率与生活质量改善率均显著(P0.05)。结论顺铂与参芪扶正注射液联合用药能够有效提高肺癌恶性胸腔积液患者的疗效,有效改善其生活质量,值得广泛推广。     

参芪扶正注射液通过肿瘤相关巨噬细胞提高人乳腺癌MDA-MB-231细胞对顺铂的敏感性

目的:观察参芪扶正注射液通过免疫调节提高顺铂化疗的敏感性,并探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定参芪扶正注射液1,10,100 m L·L^-1对细胞的敏感性,流式细胞法检测细胞凋亡率,酶联免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子表达水平。结果:参芪扶正注射液能显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231与THP-1共培养细胞生长,参芪扶正注射液10,100 m L·L^-1时,其细胞存活率分别为71.8%,59.9%;参芪扶正注射液10 m L·L^-1与顺铂联合运用,提高了共培养细胞对顺铂的敏感性,顺铂的半数抑制浓度(IC50)由30μmol·L^-1降低至15μmol·L^-1;联合运用参芪扶正注射液10 m L·L^-1和顺铂,比15μmol·L^-1顺铂诱导的细胞凋亡率增加了15.5%(P<0.05);联合用药均能明显抑制B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-w(Bcl-w)和细胞外大淋巴瘤(Bcl-xl)的表达,增加Bcl-2相关X蛋白(Bax)和人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)的表达(P<0.05);参芪扶正注射液降低顺铂诱导的白细胞介素-10(IL^-10)和前列腺素E2(PGE2)的释放(P<0.05)。结论:参芪扶正注射液通过调节免疫细胞改善了乳腺癌细胞MDA-MB-231对顺铂的敏感性,起到协同抑制肿瘤细胞增殖的作用。该研究为益气扶正防治肿瘤提供实验依据,为中医药缓解肿瘤耐药研究提供实验参考。     

参芪扶正注射液对肺癌细胞凋亡及NCR1/NKp46通路的影响

目的:探讨参芪扶正注射液对肺癌细胞凋亡及负性调节区域因子1/自然杀伤因子蛋白46 (NCR1/NKp46)通路的影响。方法:将人肺癌LEWIS细胞分为LEWIS组、顺铂组、参芪扶正注射液低、高剂量组(低、高剂量组),以上各组每孔设6个平行样。LEWIS组取10 mL肺癌LEWIS细胞液(细胞浓度为5×106/mL)于10%胎牛血清的DMEM培养液中;顺铂组细胞培养方法同LEWIS组,加入顺铂使终浓度为50.0μg/mL;低、高剂量组细胞培养方法同LEWIS组,分别加入参芪扶正注射液,使终浓度为50.0μg/mL、100.0μg/mL,培养72 h。培养结束后,MTT法测定各组细胞活力,结晶紫染色测定单克隆形成数目,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡水平,RT-PCR法及Western blot法测定NCR1、NKp46基因与蛋白表达水平。结果:与LEWIS组比较,顺铂组与低、高剂量组细胞OD值、存活率、克隆形成数目降低,凋亡率、G1期水平及NCR1、NKp46 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。与顺铂组比较,低剂量组细胞OD值、存活率、克隆形成数...     

参芪扶正注射液联合奥沙利铂及替吉奥治疗晚期胃癌临床研究

目的:观察联合应用参芪扶正注射液、奥沙利铂、替吉奥治疗晚期胃癌患者的临床效果。方法:选取晚期胃癌患者30例作为研究对象,分为观察组(参芪扶正注射液+奥沙利铂+替吉奥治疗)与对照组(奥沙利铂+替吉奥治疗)各15例,比较两组患者的临床疗效。结果:观察组患者总有效率为53.3%,显著高于对照组的33.3%,差异有统计学意义(P0.05);观察组患者毒副反应发生率为53.3%,低于对照组的60.0%,差异无统计学意义(P0.05);随访1~5年,观察组患者的1年、3年、5年存活率分别为46.7%、33.3%、20.0%,均显著高于对照组的26.7%、20.0%、6.7%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:采用参芪扶正注射液联合奥沙利铂、替吉奥治疗晚期胃癌患者效果显著,能有效提高患者近期及远期效果,且不良反应发生率低,值得临床推广应用。     

参芪扶正注射液联合hTR反义核酸对白血病小鼠骨髓细胞端粒酶活性及凋亡的影响

目的 观察参芪扶正注射液联合hTR反义核酸对急性白血病小鼠骨髓细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响.方法选取近交系8～12周龄DBA-2雄性小鼠尾静脉注射L1210淋巴细胞白血病株建立白血病小鼠模型,随机分为空白对照组及治疗组,治疗组分别给予参芪扶正注射液、参芪联合放射、参芪联合hTR反义核酸、参芪联合hTR反义核酸及放射治疗,疗程结束后活杀部分小鼠,采用端粒重复扩增(TRAP)-ELISA方法检测治疗后小鼠骨髓细胞的端粒酶活性,采用AnnexinV-FITC及PI双染,FACScan流式细胞术定量检测细胞凋亡率,观察各组小鼠骨髓细胞端粒酶活性、细胞凋亡率的变化.结果成功建立L1210/DBA-2白血病小鼠模型,检测到白血病小鼠的骨髓细胞端粒酶活性较正常小鼠明显升高,细胞凋亡率较正常小鼠下降;经参芪扶正注射液以及联合治疗后,各组小鼠骨髓细胞端粒酶活性明显下降,细胞凋亡率升高,以参芪联合hTR反义核酸及放射治疗组疗效最为显著,与其他各组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论急性白血病骨髓细胞端粒酶活性高表达可能是其治疗的靶点;参芪扶正注射液联合hTR反义核酸可通过下调端粒酶活性水平,促进白血病细胞的凋亡,对白血病小鼠放疗有一定增敏效应.     

参芪扶正注射液联合化疗对机体免疫功能的影响

目的观察参芪扶正注射液联合FOLFOX方案治疗结直肠癌的临床效果,并探讨中药辅助化疗的作用与机制。方法将结直肠癌患者40例随机分为2组,每组20例。对照组用FOLFOX方案化疗,试验组在对照组化疗基础上静脉滴注参芪扶正注射液,2组疗程均5 d。检测2组患者治疗前后外周血中CD4+CD25+调节性T细胞、白细胞介素10(IL-10)、IL-12及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量变化。结果结直肠癌患者CD4+CD25+调节性T细胞含量较健康人明显升高;化疗后CD4+CD25+Treg细胞含量2组均降低;化疗后IL-12及TNF-α试验组升高,对照组降低;IL-10试验组降低,对照组反而升高。试验组较对照组化疗毒副作用明显减轻。结论参芪扶正注射液辅助化疗可调节机体免疫功能,提高治疗效果,同时减轻化疗药物的毒副作用。     

参芪扶正注射液对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药性的逆转作用研究

目的:探讨参芪扶正注射液对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药性的逆转作用以及机制。方法:将A549/DDP细胞随机分组,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,计算顺铂对非小细胞肺癌细胞的IC_(50)以及参芪扶正注射液对A549/DDP的逆转倍数。采用流式细胞术测算细胞凋亡率,采用Western blot法检测A549/DDP细胞中LRP蛋白表达。结果:采用MTT法测算A549/DDP细胞增殖抑制率,顺铂+参芪扶正注射液组顺铂对A549/DDP的IC_(50)为(19.840±1.337)μmol/L,顺铂为(43.517±3.842)μmol/L,参芪扶正注射液的逆转耐药倍数为2.19,流式细胞术测得参芪扶正注射液联合顺铂组A549/DDP细胞细胞凋亡显著高于空白对照组及顺铂组(P0.05),参芪扶正注射液联合顺铂对LRP蛋白抑制程度显著高于空白对照组及顺铂组(P0.05)。结论:参芪扶正注射液可在一定程度上逆转肺癌A549/DDP细胞株对顺铂的耐药性,作用机制与加速A549/DDP细胞凋亡、下调LRP蛋白的表达有关。     

参芪扶正注射液对乳汁分泌的影响

产后乳汁分泌不足或无乳,除与产妇身体素质和乳腺发育情况相关外,与产后气血虚也有直接关系.为了探讨一种简便、安全、有效的催乳药,80例产妇应用参芪扶正注射液,并与同期未应用药物的对照组80例比较,现报告如下.     

参芪扶正注射液对SGC-7901荷瘤裸鼠的抑制及诱导凋亡的影响

目的:研究参芪扶正注射液体内外对胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法:常规培养细胞,MTT法检测参芪扶正注射液对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;建立SGC-7901细胞裸鼠异种移植瘤模型,随机分为阴性对照组,5-Fu阳性对照组及参芪扶正3个剂量组(25、50、100 mg.kg-1),腹腔注射给药,8 d后处死裸鼠,计算抑瘤率;测脾脏指数;免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达变化。结果:参芪扶正组可显著抑制SGC-7901细胞增殖,呈剂量依赖性;参芪扶正组可抑制SGC-7901细胞裸鼠异种移植瘤的生长,提高脾脏指数,使Bax、Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少,Bcl-2/Bax值下降。结论:参芪扶正注射液体内外可抑制SGC-7901细胞增殖,对SGC-7901荷瘤裸鼠具有诱导癌细胞凋亡的作用,并能一定程度上提高机体的免疫功能。     

参芪扶正液联合顺铂治疗肺癌恶性胸腔积液临床观察

一直以来,胸膜腔内药物注射是肺癌恶性胸腔积液的主要治疗手段,药物种类、剂量、周期的选择都不尽相同,笔者采用两种不同的方法治疗肺癌恶性胸腔积液的患者共41例,结果报道如下.     

参芪扶正注射液对肺癌细胞A549/DDP顺铂耐药性的逆转作用研究

目的:探讨参芪扶正注射液对于顺铂的耐药性A549/DDP细胞的逆转作用。方法:应用细胞毒性检测(CCK-8)、实时荧光定量PCR及Western blot鉴定细胞A549/DDP对于顺铂的耐药性。进一步用不同浓度的参芪扶正注射液预处理A549/DDP,通过以上3种方法检测A549/DDP细胞对于顺铂耐药性的变化。最后通过裸鼠成瘤实验,检测参芪扶正注射液的逆转耐药性的作用。结果:A549/DDP对于顺铂有明显的耐药性,A549和A549/DDP对于顺铂的IC50分别为9.89μmol/L和176.2μmol/L。A549/DDP相比于A549,多药耐药基因(multidrug resistanct,MDR1)和肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)的蛋白表达有显著的升高(P0.05)。当用低浓度(0.1 m L/L)、中浓度(1 m L/L)、高浓度(10 m L/L)的参芪扶正注射液预处理A549/DDP后,该细胞对于顺铂的耐药性随其浓度提高而降低,其半抑制浓度(IC50)分别为11.6μmol/L、30.3μmol/L、104.7μmol/L,并且参芪扶正注射液的预处理抑制了耐药基因MDR1和LRP和蛋白的表达。用中浓度的参芪扶正注射液预处理细胞A549/DDP后,也显著抑制了该细胞在裸鼠体内的成瘤能力(P0.05)。结论:参芪扶正注射液能够逆转A549/DDP对于顺铂的耐药性。     

重楼皂苷D对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

重楼皂苷D(polyphyllin D)是重楼中的一种甾体皂苷单体,具有抗菌、镇痛、镇静、抗肿瘤等多种药理作用,但在胰腺癌中少有报道。该研究通过检测凋亡相关指标,探讨polyphyllin D对人胰腺癌Panc-1细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。采用CCK-8法检测不同浓度的(0,1,2,3,4,5μg·μL-1)polyphyllin D分别处理胰腺癌Panc-1细胞24,48,72 h后,观察对细胞增殖的影响。采用流式细胞术对细胞周期、细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane protential,MMP)进行检测,Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞色素C (cytochrome C,Cyto C),Bax,Bcl-2,cleaved caspase-3,cleaved caspase-9的蛋白表达情况。结果表明,与对照组相比,polyphyllin D能够时间和浓度依赖性地抑制Panc-1细胞的增殖活性。流式细胞术检测显示polyphyllin D能浓度依赖性使细胞阻滞于S期和G2/M期,MMP明显降低,细胞凋亡率随polyphyllin D作用浓度增加而增加。Western blot结果显示,polyphyllin D能浓度依赖性地上调Bax,Cyto C,cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白表达水平,下调Bcl-2的蛋白表达水平。以上研究结果提示,polyphyllin D能抑制胰腺癌Panc-1细胞的增殖,其机制可能与阻滞细胞的生长周期以及通过线粒体途径诱导细胞的凋亡相关。     

乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响。方法将人结肠癌HT29细胞分为空白组、乙酰紫草素组(10μmol/L)、奥沙利铂组(1μmol/L)和联合给药组(10μmol/L乙酰紫草素+1μmol/L奥沙利铂),MTT法检测HT29细胞增殖抑制率,流式细胞术检测HT29细胞凋亡率、qRT-PCR法检测HT29细胞Ki-67、Bcl-2及Bax mRNA表达,Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-羟激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)蛋白表达。结果人结肠癌HT29细胞经乙酰紫草素、奥沙利铂和联合给药处理24、48、72 h后,细胞增殖抑制率均增加,其中联合给药组细胞增殖抑制率最高(P<0. 05)。药物处理HT29细胞48 h后,与空白组比较,乙酰紫草素组、奥沙利铂组和联合给药组凋亡率、Bax mRNA表达增加(P<0. 05),而Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0. 05);联合给药组的细胞凋亡率、Bax mRNA表达均高于乙酰紫草素组和奥沙利铂组,Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达低于乙酰紫草素组和奥沙利铂组。结论乙酰紫草素和奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞均具有抑制增殖及诱导凋亡作用,可能与调控PI3K/Akt信号通路有关,且两者联用时效果更好。