细胞因子及免疫抑制剂对大鼠脑内神经递质的影响

目的研究白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、戊四氮致痫和免疫抑制剂抗痫效应过程中谷氨酸(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)在大脑皮质及海马内表达的变化,探讨IL-1β、IL-6在癫痫发病中的作用机制及免疫抑制剂的抗痫效应。方法将实验大鼠随机分为6组;即:对照组;IL-1β组;IL-6组;戊四氮组;IL-1ra(IL-1受体拮抗剂) 戊四氮组;地塞米松 戊四氮组。行侧脑室注射相应试剂120min后观察大鼠行为变化,并采用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马内Glu及GABA的表达变化。结果动物行为学观察,IL-1β组、IL-6组癫痫发作程度达中度;戊四氮组癫痫发作程度达重度。IL-1ra 戊四氮组癫痫发作较戊四氮组减轻,地塞米松 戊四氮组无明显癫痫发作。免疫组化染色显示,IL-1β组、IL-6组、戊四氮组Glu表达在大脑皮质及海马较对照组明显升高,GABA表达较对照组明显降低,差异具有显著性意义。IL-1ra 戊四氮组及地塞米松 戊四氮组与单独注射戊四氮组比较,Glu免疫染色减弱,GABA免疫染色增强,有显著性差异。结论IL-1β或IL-6可能通过升高Glu含量并降低GABA的含量参与致痫过程,从而使神经元兴奋性升高促进癫痫发作。免疫抑制剂具有抗痫效应。     

托吡酯对颞叶癫痫大鼠海马神经细胞粘附分子表达的影响

目的观察托吡酯对红藻氨酸(KA)诱导颞叶癫痫大鼠海马突触重建标记物神经细胞粘附分子(NCAM)表达的影响,进一步探讨托吡酯的抗痫作用机制。方法采用免疫组织化学染色观察KA诱导癫痫大鼠及托吡酯给药大鼠海马神经细胞粘附分子表达水平,并对两组NCAM表达进行比较。结果KA组NCAM表达水平各时间点平均NCAM阳性密度OD率均明显高于N S组和KA TPM组(P<0.01)。结论本研究提示托吡酯可能通过抑制突触重建的形成,减少痫性放电,从而控制癫痫发作。     

癫痫大鼠骨髓干细胞移植后海马组织中氨基酸含量分析

目的了解人骨髓间充质干细胞(hMSC)移植后致痫大鼠海马组织中氨基酸含量变化。方法采用氯化锂-毛果芸香碱诱发雄性SD大鼠癫痫持续状态(SE)模型。大鼠随机分为MSC组、磷酸缓冲液(PBS)组、假手术组(Sham)和正常对照组。术后10周断头取海马组织,测定兴奋性神经递质谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)及抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)含量。结果hMSC组和正常对照组海马组织Asp、Glu和GABA含量差异有统计学意义(P<0.05),Gly含量差异无统计学意义(P=0.0617);致痫成功的hMSC组、PBS组和假手术组海马组织中氨基酸含量比较差异均无统计学意义。结论所有致痫大鼠海马组织中氨基酸含量均低于正常对照组,hMSC移植并未明显改变SE大鼠海马组织中氨基酸含量。     

中枢组胺对戊四氮点燃大鼠海马GABA能神经元的影响

目的:探讨中枢组胺抗癫痫的作用机制。方法:应用免疫组织化学方法研究中枢组胺对戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠海马神经元GABA、GAD67表达的影响。结果:戊四氮致痫组大鼠海马神经元GABA、GAD67的表达量明显低于正常对照组,L-组胺酸干预组明显高于戊四氮致痫组,L-组胺酸干预组与正常对照组之间差异无显著性意义。结论:中枢组胺通过激活海马GABA能神经元来抑制癫痫的发生和发展。     

托吡酯对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的影响

目的分析托吡酯对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的影响。方法随机双盲法将36只雄性SD大鼠分为3组,各12只,通过线栓法形成脑缺血再灌注模型,A组大鼠行假手术,B组大鼠行8mg/mL托吡酯治疗,A组、C组(脑缺血再灌注)则于同时间点给予10mL/kg生理盐水干预,比较B、C 2组大鼠神经功能评分,同时比较3组大鼠脑组织Glu、GABA、GABA/Glu水平。结果 A组大鼠无神经功能缺损症状发生,B组神经功能评分为(2.90±0.92)分,显著高于C组的(1.55±0.74)分,差异有统计学意义(P0.001)。3组大鼠Glu、GABA、GABA/Glu水平两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论托吡酯能明显促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能改善,可能是通过抑制Glu水平,增多GABA含量达到神经保护的目的。     

贝美格致痫大鼠皮层、海马γ—氨基丁酸和谷氨酸免疫反应细胞的改变

目的 γ－氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（Glu）是脑内重要的抑制性和兴奋性神经递质，二者与癫痫发作密切相关，为了阐明癫痫发病的病理生理机制。方法 我们采用免疫细胞化学及PAP法，观察了贝美格（Bemegride,Be)腹腔致痫大鼠顶叶大脑皮层、海马CA1、CA3、齿状回Glu和GABA免疫反应细胞的改变。结果 图像分析结果显示：Be致痫组大脑皮层、海马Glu免疫反应平均阳性细胞数及光密度较正常对照组明显增加（P＜0．01）；GABA细胞数及光密度减少（P＜0．01）。结论 提示贝美格致痫作用与调节脑内GABA和Glu系统的兴奋性有关。     

托吡酯对癫痫大鼠海马细胞外液氨基酸和神经元凋亡的影响

目的研究托吡酯对癫癎大鼠海马区细胞外液氨基酸和神经元凋亡的影响.方法采用戊四氮(PTZ)致癎模型,大鼠癫癎发作后连续给予托吡酯(TPM)80 mg·kg-1·d-1和卡马西平40 mg·kg-1·d-1,共14 d.以TUNEL方法标记DNA片段,原位检测海马凋亡的神经细胞.脑内微透析技术采集大鼠海马细胞外液,反相高效液相色谱技术测定氨基酸类神经递质的含量.结果TPM组、卡马西平组与对照组比较,凋亡细胞数存在显著差异(P＜0.001),TPM组与卡马西平组相比无显著差异(P＞0.05).TPM可明显升高海马细胞外液γ-氨基丁酸(GABA)水平,并降低谷氨酸(Glu)浓度.结论TPM可减轻大鼠癫癎发作后的神经元损伤,这种作用可能是氨基酸变化的结果;但在我们的实验中,没有发现TPM对癫癎后脑损伤比卡马西平有更明显的神经保护作用.     

托吡酯对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用

目的　探讨托吡酯对癫痫发作大鼠海马神经元凋亡的影响及其可能的机制。方法　采用戊四氮致痫模型 ,大鼠癫痫发作后连续给予托吡酯 80mg/ (kg·d)和 4 0mg/ (kg·d) ) ,共 14d。以TUNEL方法标记DNA片段 ,原位检测海马CA1和CA3区的神经细胞凋亡。结果　各组大鼠海马CA1、CA3区均出现TUNEL阳性细胞。对照组 ,海马CA1、CA3区TUNEL阳性细胞数分别为 (35 .83± 4 .5 8)个和(36 .83± 3.87)个 ;4 0mg/ (kg·d)托吡酯组分别为 (31.5 2± 3.4 3)个和 (32 .35±4 .6 9)个 ;80mg/ (kg·d)托吡酯组为 (2 1.17± 3.0 6 )个和 (2 1.16± 3.87)个。 80mg/ (kg·d)托吡酯组与对照组比较存在显著差异(P<0 .0 0 1) ,4 0mg/ (kg·d)托吡酯组TPM组与对照组相比无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　TPM对癫痫发作后神经元凋亡具有一定的保护作用     

托吡酯对戊四氮致癫癎大鼠海马AQP4表达水平的影响

目的探讨托吡酯对戊四氮致癫癎大鼠海马AQP4表达水平的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为戊四氮致癫癎组、托吡酯干预组和正常对照组，每组各10只；癫癎模型点燃后在不同时相点灌注取材，通过HE染色观察大鼠海马神经元的变化，并应用免疫组化法检测大鼠海马AQP4表达水平。结果HE染色显示托吡酯干预组神经元变性和坏死较戊四氮致癫癎组明显减轻；免疫组化显示戊四氮致癫癎组在致癫癎后12hAQP4的表达显著增强，致癫癎后24h达高峰，托吡酯干预组在致癫癎后12h～36h各时相点AQP4表达水平均分别低于戊四氮致癫癎组相应时间点（P〈0．05）。结论托吡酯通过下调大鼠海马AQP4的表达可能参与了对大鼠海马神经元的保护过程。     

氯喹对戊四氮慢性致痫大鼠脑皮质及海马腺苷激酶表达的影响

目的 观察氯喹对戊四氮致痫大鼠皮质和海马区腺苷激酶(ADK)表达的影响,探讨ADK与癫痫发作的关系及氯喹在癫痫发生过程中的作用. 方法 30只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、戊四氮(PTZ)致痫组和氯喹干预组,每组10只.观察大鼠行为学表现,记录其脑电改变,采用免疫组化法检测3组大鼠皮质和海马区ADK的表达. 结果 对照组大鼠无癫痫发作,PTZ致痫组大鼠出现Racine评分中Ⅳ～Ⅴ级严重发作,氯喹干预组大鼠出现Ⅰ～Ⅲ级发作,差异有统计学意义(P＜0.05).PTZ致痫组大鼠脑电记录呈频发高幅的痫样波,氯喹干预组大鼠脑电记录显示慢波、小棘波.PTZ致痫组大鼠脑内ADK表达明显增强,以海马区最为显著,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).氯喹干预组大鼠脑内ADK表达降低,但距离正常水平仍有较大差距,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 癫痫脑组织中存在ADK的表达异常,氯喹可以抑制这种表达,有效控制癫痫发作.     

大鼠杏仁核电刺激癫痫持续状态后颞叶癫痫模型海马区神经生长相关蛋白43的表达

目的 探讨神经生长相关蛋白43(GAP-43)在大鼠杏仁核电刺激癫痫持续状态后颞叶癫痫(SE)模型海马区的表达及意义.方法 健康雄性Wistar大鼠60只,分成4组:空白对照组、未刺激组、未发作组和发作组.空白对照组:不植入电极；未刺激组:植入电极未行电刺激；发作组:植入电极电刺激后15d内、30 d内能观察到稳定的自发性反复发作(SRS)的大鼠归为发作组,其余归为未发作组.分别在15d、30 d时,将标本应用RT-PCR及免疫荧光检测方法检测大鼠海马GAP-43的表达.结果 致痫15d,发作组、未发作组和未刺激组的GAP-43表达高于空白对照组,并依次降低(P＜0.05).致痫30 d,发作组和未发作组GAP-43表达仍高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)；未刺激组与空白对照组水平相当,二者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 GAP-43参与了神经元损伤修复和突触重塑,其可能是颞叶癫痫的病理基础——突触重塑的重要分子机制.     

依达拉奉对SAH大鼠JNK信号通路及海马区神经细胞自噬的影响

目的探讨依达拉奉对蛛网膜下腔出血大鼠JNK信号通路及海马区神经细胞自噬的影响。方法雄性SD大鼠40只,随机等分为假手术组(Sham组)、SAH模型组、依达拉奉治疗组(Edaravone组)、JNK抑制剂组(SP600125组)。改良血管内穿刺法制成大鼠SAH模型;SP600125组于建模前30min,侧脑室注射SP600125(3μg/μl,10μl);Edaravone组于建模后5mg/kg Edaravone腹腔注射,12 h后重复给药。24h处死,检测各组海马区神经元形态、数量及Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-JNK蛋白的变化。结果与Sham组相比,SAH组海马区神经元排列紊乱、细胞多呈三角锥形、存活数量明显减少,(P0.05);Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-JNK表达升高,(P0.05)。与SAH组相比,Edaravone组、SP600125组神经元坏死率明显下降、形态正常细胞数增多,(P0.05);Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-JNK表达明显降低,(P0.05)。结论依达拉奉可降低SAH大鼠海马区神经元Beclin-1和LC3-Ⅱ表达,减轻SAH后早期脑损伤,其可能是JNK通路依赖性的。     

致痫大鼠海马神经元氨基酸类物质含量变化的研究

目的 研究癫痫发病中海马神经元氨基酸类物质的合成，分泌情况，探索癫痫发病的可能机制。方法 用马桑内酯致痫培养大鼠海马神经元细胞，用高效液相色谱法测定培养神经元细胞内外谷氨酸（Glu) ,天门冬氨酸（Asp)，γ-氨基丁酸（GABA），甘氨酸（Gly）的含量。结果 致痫海马神经元细胞Glu合成相对增加，分泌显著性增加（P＜0．01）；Asp合成没有明显增加（P＞0．05），或相对养活，分泌显著性增加（P＜0．01）；GABA分泌显著性减少（P＜0．01），合成相对地减少；Gly合成分泌有显著性减少（P＜0．01）。结论 癫痫发病中，痫性神经元细胞合成和／或分泌异常是癫痫发病中氨基酸类神经递质平衡紊乱的基础。     

癫痫对儿童学习障碍发生的影响

目的 观察癫痫患儿共患学习障碍(LD)的现状以及分型并探讨癫痫的各种因素与LD发病的相关性.方法 采用修订版学习障碍儿童筛查量表对110例癫痫儿童(癫痫组)进行测评,与120例对照组进行比较分析.结果 癫痫组LD检出率为36.4%,对照组为10.0%,两组相比较癫痫组明显高于对照组(P＜0.05).癫痫组儿童LD中非言语型学习障碍(NLD)占70.0%.回归分析可见癫痫控制与否、发病年龄和性别是癫痫患儿共患LD的相关因素.结论 癫痫儿童LD的发生率高,以NLD为常见;癫痫控制与否、发病年龄和性别与其共患LD有关.     

失眠模型大鼠脑干γ-氨基丁酸转运体-1表达的变化

目的 检测失眠模型大鼠脑干组织中γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1) mRNA及GAT-1蛋白的表达变化.方法 36只SD大鼠随机分为失眠模型组、生理盐水对照组和地西泮干预组.腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制作大鼠失眠模型.采用RT-PCR法和Western blot法分别检测大鼠脑干组织中GAT-1 mRNA和GAT-1蛋白的表达变化.结果 与对照组相比,模型组和干预组GAT-1 mRNA及GAT-1蛋白的表达均降低(P＜0.01),干预组较模型组表达更低(P＜0.01).结论脑干GAT-1表达下调可能与失眠后机体的保护性机制有关;地西泮下调GAT-1可能是其发挥催眠作用的机制之一.     

小电导钙激活型钾通道SK3在大鼠偏头痛模型中脑干的表达变化

目的初步探讨小电导钙激活型钾通道SK3与大鼠偏头痛的关系,为研究偏头痛的发病机制,寻找新治疗靶点提供实验依据。方法 40只成年雌性SD大鼠随机分为对照组8只,模型组16只,干预组16只,后两组再随机分为发作期组和间歇期组,每组8只。按Tassorelli Cristina法复制偏头痛大鼠模型。对照组用生理盐水造模。干预组每天灌服氟桂利嗪2 ml(0.5 mg/kg),对照组每天灌服生理盐水2 ml。发作期组于第5次造模后3 h、间歇期组于第5次造模后4 d断头处死取脑干组织。RT-PCR法及Western法分别检测各组脑干SK3 mRNA及其蛋白的表达。结果模型组、干预组脑干SK3 mRNA及其蛋白的表达水平均较对照组下降(P0.05),且各发作期组均较相应间歇期组更低(P0.05);而模型发作期组与干预发作期组、模型间歇期组与干预间歇期组比较SK3 mRNA及其蛋白的表达水平无明显差异(P0.05)。结论脑干SK3表达的降低可能与偏头痛的发生发展有关;氟桂利嗪防治偏头痛可能不是通过影响脑干SK3的表达量实现的。     

伽玛刀低剂量照射对致疒间大鼠海马中氨基酸递质的影响

目的观察伽玛刀低剂量照射对致疒间大鼠海马中谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的影响,探讨伽玛刀治疗癫疒间的作用机制。方法将50只锂-匹罗卡品致疒间大鼠随机分为照射组和非照射组,各25只,另取正常大鼠25只(腹腔注射生理盐水)作为对照组。照射组大鼠进行伽玛刀低剂量照射(周边剂量20Gy),对照组和非照射组大鼠不进行伽玛刀照射。用高效液相色谱-质谱-质谱(HPLC-MS-MS)分析法检测各组大鼠海马Glu、GABA的含量。结果伽玛刀照射2周后,照射组和非照射组大鼠海马中Glu含量均高于对照组,照射组GLu含量低于非照射组,差异具有统计学意义(P0.05);照射组和非照射组GABA含量均低于对照组,照射组GABA含量高于非照射组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论伽玛刀低剂量照射通过调节海马中Glu与GABA的平衡,以达到抗癫疒间的作用。     

过氧化氢干预下Rab30在PC12细胞中的表达及促凋亡通路

目的探讨经过氧化氢(H_2O_2)损伤干预下Rab30在PC12细胞中的表达及可能的促凋亡通路。方法将体外常规培养的PC12细胞分为正常组和H_2O_2组。采用MTT检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western-blot检测Rab30、JNK3、GM130、Caspase-3的蛋白表达情况。结果 H_2O_2损伤干预可导致PC12细胞的存活率显著降低(P0.05),早期凋亡率和总凋亡率均显著增高(均P0.05);JNK3、Caspase-3蛋白表达水平在PC12细胞中显著增加(P0.05),而Rab30、GM130蛋白表达显著下降(P0.05)。结论 H_2O_2在PC12细胞中的促凋亡通路可能是H_2O_2激活JNK3的表达而靶向下调Rab30,致使高尔基体结构破碎,并激活Caspase-3的活性,从而诱导PC12细胞的凋亡。     

血清、脑脊液中S-100B在颅脑外伤损伤程度中的诊断意义

目的 探讨血清、脑脊液中S-100B与颅脑外伤(traumatic brain injury,TBI)损伤程度的关系.方法 选择45例TBI患者按格拉斯哥昏迷分级(GCS评分)分轻、中、重三组(病例组),采用酶联免疫吸附法(EHSA)测定TBI患者伤后第1、3、5、7天血清及脑脊液S-100B水平,并选择20例与病例组相匹配的疝或静脉曲张手术病人以及健康体检自愿者的血清、脑脊液作为对照组,分析血清及脑脊液S-100B水平与TBI损伤程度的相关性.结果 病例组血清、脑脊液S-100B水平较对照组明显升高(P ＜0.01;P ＜0.01);TBI患者GCS评分与血清及脑脊液S-100B水平比较呈负相关(r=-0.893,P＜0.01;r=-0.947,P＜0.01);血清、脑脊液S-100B在不同程度TBI间比较差异显著(P＜0.01);病例组血清和CSF中S-100B水平比较呈正相关;结论 血清、脑脊液S-100B测定均可作为判断TBI程度的指标,且各有特点.     

术中亚低温对开颅手术患者预后影响的Meta分析

目的采用Meta分析评价术中亚低温对开颅手术患者预后的影响。方法检索中国学术期刊全文数据库(CNKI),中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库、中文科技期刊数据库、Pubmed及Cochrane Library,检索时间从建库至2016年8月。收集在开颅手术中使用亚低温的随机对照研究(RCT)。采用Rev Man5.3软件对收集的资料进行Meta分析评价。结果共纳入6项研究,包括1306例病人,其中亚低温组657例,正常体温组649例。低温组患者在预后良好、中度残疾、重度残疾、植物生存及死亡状态五个方面与正常体温组相比差异无统计学意义,其合成结果分别为:[OR=1.24,95%CI(0.97~1.58),P=0.08]、[OR=0.97,95%CI(0.73~1.30),P=0.86]、[OR=0.77,95%CI(0.50~1.18),P=0.23]、[OR=1.35,95%CI(0.32~5.65),P=0.68]、[OR=0.71,95%CI(0.47~1.09),P=0.12];术后并发症在两组间差异无统计学意义(P0.05);AVDO2水平在亚低温组显著降低(P0.05)。结论术中应用亚低温不能改善颅脑手术患者预后,不能减少患者术后并发症的发生。