β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布

 目的考察β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布。方法建立了大鼠体内β-榄香烯测定的HPLC。色谱条件为:Dia-monsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-乙腈-水(40∶57∶3);检测波长:210 nm;柱温:30℃。并测定大鼠尾静脉注射β-榄香烯脂质体和榄香烯注射液后血浆及组织中的药物浓度。结果此色谱条件下血浆与组织的标准曲线、精密度等实验结果表明,该方法适于分析生物样品中β-榄香烯含量。与榄香烯注射液相比,β-榄香烯脂质体在大鼠体内的分布特性有不同程度的改变,其中β-榄香烯脂质体在肝、脾、肾组织中分布相对较多。结论β-榄香烯脂质体及榄香烯注射液在大鼠的心、脾、肾组织中分布具有显著性差异。     

PVP包覆β-榄香烯口服脂质体大鼠体内药物动力学研究

目的:研究PVP包覆的β-榄香烯口服脂质体在大鼠体内的药物动力学行为。方法:建立了血浆中β-榄香烯的分析方法,将三种药物对大鼠一次性灌胃后在不同时间眼眶取血。乙醚提取后以气相色谱法定量分析血药浓度,用统计矩方法计算药物动力学参数。结果:PVP包覆β-榄香烯口服脂质体的药物动力学参数如下:T1/2(95.07±20.46)m in,AUC(348.72±32.49)μg/m in.m l,Cm ax(4.39±0.33)μg/m l,Tm ax(60)m in。结论:以普通脂质体为参比制剂时PVP包覆的β-榄香烯口服脂质体相对生物利用度为(140.2±7.5)%。     

β-榄香烯长循环脂质体药物动力学研究

目的:研究β-榄香烯长循环脂质体药物动力学。方法:建立气相色谱法测定小鼠注射β-榄香烯长循环脂质血浆中β-榄香烯的含量。结果:β-榄香烯长循环脂质体的α、T1/2β、K12和AUC高于普通脂质体,而T1/2α、Vc、CL、K10则低于普通脂质体。结论:表明β-榄香烯循环脂质体可以延长β-榄香烯在体内的作用时间,更好地提高其临床疗效。     

叶酸受体靶向β-榄香烯固体脂质纳米粒的制备及其大鼠体内分布

 目的研究叶酸复合物修饰β-榄香烯固体脂质纳米粒(SLN)制剂在大鼠体内的药动学与组织分布情况。方法脂质中加入聚乙二醇单甲醚胆固醇琥珀酸酯(CHS-PEG)和N-硬脂酰基-N′-蝶酰谷氨酰基-聚乙二醇二胺(FA-PEG-S),采用超声-挤压过滤法制备叶酸受体靶向β-榄香烯SLN制剂(FA-PEG-SLN)并加以表征。大鼠尾静脉给药,HPLC测定该制剂的药动学特征及组织分布情况,与普通β-榄香烯SLN(SLN-1)及榄香烯注射乳剂的相比较。结果静脉给药后,FA-PEG-SLN在血浆中的消除半衰期为44.0min,显著长于SLN-1和乳剂的15.6和15.4min。与SLN-1相比,FA-PEG-SLN5min时在肝肾中的药物浓度较高,在脾中稍低。30和60min时,FA-PEG-SLN组在除肺外的各组织中的β-榄香烯浓度皆显著高于SLN-1组和乳剂组。结论FA-PEG-SLN能够在血浆中较长时间循环,在主要器官中的浓度较高且消除速度较慢,有进一步研究的价值。     

β-榄香烯注射液对人肝癌HepG2细胞微管系统的影响

目的:探讨β-榄香烯对人肝癌细胞HepG2生长抑制作用及微管系统的影响.方法:将实验分为对照组(未加药物)与实验组(不同浓度β-榄香烯注射液0.02,0.04,0.08 g·L-1组);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定β-榄香烯对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞技术分析肿瘤细胞周期时相分布,激光共聚焦显微技术观察β-榄香烯处理的HepG2细胞内微管的表达、分布;逆转录-多聚酶连反应技术(RT-PCR)观察微管蛋白βmRNA水平表达;采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)分析微管蛋白β蛋白水平的表达、聚合和未聚合微管蛋白含量的变化.结果:0.1,0.08,0.06,0.04,0.02,0.01 g·L-1的β-榄香烯注射液对HepG2细胞增殖具有抑制作用,抑制效应呈时间和浓度依赖性;将细胞阻滞在S期.激光共聚焦分析表明,β-榄香烯不同浓度作用的HepG2细胞微管网络异常;β-榄香烯注射液抑制HepG2细胞β微管蛋白mRNA表达,呈浓度依赖性.蛋白免疫印迹显示β-榄香烯能抑制微管蛋白β的表达,同时抑制细胞内微管蛋白的聚合,呈浓度依赖性.结论:β-榄香烯注射液能够抑制人肝癌细胞HepG2增殖,下调微管蛋白β的表达,抑制HepG2细胞内微管的聚合可能是造成HepG2细胞生长抑制的因素之一.     

超快速液相色谱法测定榄香烯脂质体的含量及包封率的研究

目的:测定榄香烯脂质体的药物含量及包封率.方法:采用超快速液相色谱法(UFLC)检测榄香烯含量及包封率.结果:色谱条件下榄香烯与辅料、溶剂峰分离良好,β-榄香烯在3.94-27.58 μg·mL-1范围内线性关系良好.榄香烯脂质体平均包封率为(96.5±0.5)%.结论:超快速液相色谱法可用于检测榄香烯脂质体的含量和包封率,其方法简单、快速且准确.     

丹参素钠及丹参注射液在大鼠体内的药动学比较

目的:建立HPLC测定大鼠血浆丹参素的浓度,比较丹参素钠及丹参注射液在大鼠体内的药动学特点,评价丹参注射液中其他成分对丹参素药动学的影响.方法:大鼠分别iv给予丹参素钠或丹参注射液(丹参素30 mg·kg~(-1)),颈动脉取血,分离血浆,高氯酸萃取后进行HPLC分析,测定血浆丹参素浓度.DAS2.0软件处理数据.结果:丹参素在0.5～80.0 mg·L~(-1)内线性良好,最低检测浓度为0.2 mg·L~(-1).大鼠静脉给予丹参素钠和丹参注射液后的丹参素浓度-时间曲线均符合二室模型,两药t1/2a,AUC,CL等参数有显著性差异.结论:丹参注射液中共存成分可影响丹参素的体内过程,加快其分布和消除.     

红景天苷脂质体在大鼠体内药代动力学研究

目的:研究红景天苷脂质体在大鼠体内的药动学特征。方法:采用SD大鼠,随机分为红景天苷脂质体实验组和及红景天苷溶液对照组,分别灌胃给予实验组及对照组制剂,用反相高效液相色谱法测定不同时间血浆中红景天苷的浓度,采用DAS2.0程序计算药代动力学参数,并进行统计学分析。结果:红景天苷脂质体制剂和溶液制剂经灌胃给药后,t1/2β分别为(13.19±0.60),(5.16±0.19)h,AUC0-12分别为(4.75±0.69),(2.68±0.74)μg.mL-1.h-1,2种制剂的t1/2β和AUC0-12均存在显著性差异(P<0.05),脂质体剂型显著增加了红景天苷的AUC,提高了红景天苷的生物利用度,延长了其在血液循环中的时间。结论:与非脂质体相比,红景天苷脂质体灌胃给药后,具有缓释作用。     

β-榄香烯体内外对人肺癌细胞株的作用及其机制

目的:系统研究β-榄香烯体内外抗肺癌药理学作用及其作用机制。方法:体外抗肿瘤实验采用MTT法,检测浓度12.5~200μmol·L-1的β-榄香烯对人肺癌细胞株SPC-A-1,A549及人正常胚胎肺成纤维细胞MRC-5的细胞增殖抑制率;抗肿瘤机制研究采用Hoechst 33258染色,观察细胞凋亡时细胞核的形态学变化,流式细胞术FITC-Annexin V/碘化丙啶(PI)双标记染色法检测细胞凋亡率。体内以裸鼠移植瘤为模型,肿瘤生长抑制率为指标,检测β-榄香烯对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果:β-榄香烯作用48 h时SPC-A-1,A549的50%抑制浓度(IC50)分别为126.0,134.1μmol·L-1,但对人胚胎肺成纤维细胞MRC-5有促进增殖作用,表明β-榄香烯对肺癌细胞具有选择性抑制作用。β-榄香烯对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖的抑制作用呈时间和浓度依赖性,干预24,48,72 h的IC50值分别为549.7,126.0,21.2μmol·L-1;Hoechst 33258染色后倒置荧光显微镜下观察可见β-榄香烯孵育后出现凋亡细胞核固缩,浓染,着色深而呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,β-榄香烯可诱导SPC-A-1细胞出现不同程度的凋亡。给药剂量为45,135 mg·kg-1的β-榄香烯在体内对裸鼠移植性人肺癌SPC-A-1细胞的增殖抑制率分别为34.01%,49.57%。结论:β-榄香烯具有选择性抗肺癌作用,提示其在发挥抗肿瘤作用的同时其毒副作用小,而且该作用可能机制是通过诱导肺癌细胞凋亡实现的。     

β-榄香烯抗凝血溶血栓活性研究

目的：研究β-榄香烯体外抗凝血与溶血栓活性以及体内抗凝血,抗血小板聚集作用,为探讨β-榄香烯活血化瘀药效提供参考。方法：采用新西兰兔体外抗凝血法、血浆复钙时间实验及体外血栓法、全血块法研究β-榄香烯的体外抗凝血、溶血栓作用;采用皮下注射盐酸肾上腺素和冰水刺激复制大鼠急性寒凝血瘀证模型,通过观察凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）以及二磷酸腺苷（Adenosine diphosphate,ADP）和花生四烯酸（Arachidonic acid,AA）诱导血小板最大聚集率,研究β-榄香烯口服制剂对血瘀大鼠体内凝血功能的影响。结果：β-榄香烯各剂量组均能延长新西兰兔血浆复钙时间（P〈0.05）,加快体外血栓及全血凝块的溶解（P〈0.05）;β-榄香烯口服制剂高剂量组延长寒凝血瘀大鼠的凝血酶原时间（PT）（P〈0.05）,β-榄香烯口服制剂各剂量组延长寒凝血瘀大鼠的凝血酶时间（TT）（P〈0.01）,且对ADP和AA诱导的血小板最大聚集率有显著的抑制作用（P〈0.01）。结论：β-榄香烯具有抗凝血和溶血栓的作用。     

β-榄香烯脂质体的制备工艺研究

目的确定β-榄香烯脂质体较佳的配方组成和制备方法。方法比较薄膜水化(TFH)、逆相蒸发(REV)和REV结合高压挤压法制备β-榄香烯脂质体方法,优选出较优的制备方法;光子相关衍射法测量β-榄香烯脂质体的粒径;气相色谱法测定包封率。结果薄膜水化法制备的β-榄香烯脂质体的包封率大于逆相蒸发法脂质体的包封率,但该法不易于批量生产。逆相蒸发法脂质体经高压挤压后在一定挤压程度内,粒径减小、包封率和载药量增加,所制得的β-榄香烯脂质体稳定性良好,6个月未发现凝絮分层现象。结论逆相蒸发结合高压挤压方法制备的β-榄香烯脂质体粒径小而分布较均匀,且有较高的载药量和包封率。     

齐墩果酸长循环脂质体大鼠体内药动学及组织分布研究

目的研究齐墩果酸(OA)长循环脂质体在大鼠体内的药动学及组织分布。方法用薄膜超声分散法制备分别以PEG2000、PEG4000、PEG6000修饰的OA长循环脂质体,HPLC法测定血浆及组织中OA的浓度,药动学分析软件DAS2.0计算药动学参数。结果 3种OA长循环脂质体的AUC分别为4 797.03,4 536.53,4 819.69μg·min·mL~(-1),其平均值约为OA溶液及普通脂质体组的3倍和1.5倍。 t_(1/2)分别为148.35,135.15,162.98 min,其平均值约为OA溶液及普通脂质体组的2.5倍和1.5倍。长循环脂质体给药后,各组织中C_(max)的顺序为:肝心血肺脾肾。而采用不同种类PEG制成的长循环脂质体的药动学及组织特征分布无明显差异。结论与OA溶液及普通脂质体相比,长循环脂质体可显著提高OA大鼠体内循环时间和生物利用度。     

盐酸恩丹西酮的高效毛细管电泳手性分离及其大鼠体内立体选择性药动学研究

 目的建立血浆中盐酸恩丹西酮(OND)的高效毛细管电泳手性分离分析方法,并运用该法对盐酸恩丹西酮两对映体在大鼠体内的立体选择性药动学进行研究,同时使用计算机辅助分子模型设计及计算的方法确定两对映体的毛细管电泳峰位。方法以羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)为手性选择剂,测定条件为:分离介质4%HP-β-CD的50 mmol·L^-1磷酸-三乙胺缓冲液(HCl调至pH 2.77);分离电压30 kV,柱温20℃,进样电压30 kV,进样时间45 s,检测波长308 nm;大鼠血浆碱化后,乙酸乙酯提取。结果测定条件下OND基本达到基线分离,大鼠血浆样品测定不受内源性物质干扰。大鼠灌胃给药OND后,经血药浓度随时间变化的测定,计算两对映体在体内的药动学参数,得到两对映体之间在大鼠体内存在立体选择性药动学差异。结论本法简便可靠,可适用于OND在大鼠体内立体选择性代谢研究。     

葛根素在正常和β-淀粉样蛋白所致痴呆模型大鼠体内药代动力学比较

目的:探讨葛根素在正常和β-淀粉样蛋白所致痴呆模型大鼠(AD模型大鼠)体内的动力学过程。方法:AD模型组大鼠基底核定位注射A,β7天后灌胃500mg/kg葛根素注射液,正常组灌胃等剂量葛根素注射液。采用反相高效液相色谱法测定给药后不同时间点血浆样品中葛根素的药物浓度,3P87软件拟合药动学参数。结果:葛根素口服给药在正常和AD大鼠体内的药动学过程均为开放性一室模型。AD大鼠的半衰期(t1/2,m in)、药时曲线下面积(AUC,μg.m in-1.mL-1)、平均驻留时间(MRT,m in)、表观分布容积(Vd/F,L)分别为19.2、301.5、42.8、45.8;相对应的正常大鼠则为40.8、453.0、56.9、65.1。结论:葛根素在AD大鼠体内消除更快,半衰期与平均驻留时间缩短;从血浆中向其他组织的分布速率减慢。提示葛根素在AD病理状态下代谢、排泄速度更快。同时,葛根素在AD病理状态下更多地积蓄在血浆中。     

齐墩果酸长循环脂质体大鼠体内药动学及组织分布研究北大核心CSCD

目的研究齐墩果酸(OA)长循环脂质体在大鼠体内的药动学及组织分布。方法用薄膜超声分散法制备分别以PEG2000、PEG4000、PEG6000修饰的OA长循环脂质体,HPLC法测定血浆及组织中OA的浓度,药动学分析软件DAS2.0计算药动学参数。结果 3种OA长循环脂质体的AUC分别为4 797.03,4 536.53,4 819.69μg·min·mL^(-1),其平均值约为OA溶液及普通脂质体组的3倍和1.5倍。 t_(1/2)分别为148.35,135.15,162.98 min,其平均值约为OA溶液及普通脂质体组的2.5倍和1.5倍。长循环脂质体给药后,各组织中C_(max)的顺序为:肝>心>血>肺>脾>肾。而采用不同种类PEG制成的长循环脂质体的药动学及组织特征分布无明显差异。结论与OA溶液及普通脂质体相比,长循环脂质体可显著提高OA大鼠体内循环时间和生物利用度。     

积雪草苷修饰脂质体在大鼠体内的药动学及组织分布研究

目的将积雪草苷制成修饰脂质体,考察该制剂在体内的药动学过程及组织分布情况。方法 SD大鼠尾iv积雪草苷溶液及经过D-甘露糖或十八胺修饰和未经修饰的脂质体制剂,不同时间点采集大鼠血浆及组织,样品处理后采用HPLC法检测血浆与组织中的药物浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数,比较积雪草苷剂型间在体内药动学参数和组织分布的差异。结果积雪草苷、积雪草苷脂质体、D-甘露糖-积雪草苷脂质体、十八胺-积雪草苷脂质体4种制剂的药-时曲线均符合权重为1/C2的单室模型。积雪草苷溶液及各脂质体的消除半衰期(t1/2)分别为(14.52±0.56)、(101.35±12.47)、(149.82±20.00)、(159.58±16.46)min,药时曲线下面积(AUC)分别为(1 929.70±159.00)、(57 004.35±8 710.89)、(93 736.52±12 710.76)、(64 737.48±6 365.28)min·μg/m L。同时制成脂质体后,积雪草苷在各器官中的质量分数显著上升,在肺部的质量分数由(4.94±0.94)μg/g升至(39.12±12.04)μg/g。结论将积雪草苷制成修饰脂质体制剂后,缓释明显,并能增强靶向作用。     

抗癌药物β-榄香烯及其衍生物的研究进展

β-榄香烯(β-elemene)是从姜科植物温郁金Curcuma rcenyujin中提取出来的倍半萜烯类有效活性单体,为国家二类非细胞毒性抗肿瘤的药物。目前β-榄香烯在临床上用于治疗肺癌、肝癌、乳腺癌等,由于在抗肿瘤方面具有广谱、安全、有效、廉价等突出优点,其应用前景十分广阔。随着对β-榄香烯抗癌研究的不断深入,为了提高其生物利用度和抗癌活性,进行了β-榄香烯结构改造和给药剂型研究,筛选了众多活性显著的衍生物,设计了脂质体、微乳等新型给药系统,为进一步开发利用β-榄香烯提供了科学的理论指导。就目前β-榄香烯的重要衍生物、抗肿瘤活性及其抗癌机制、新型给药系统和不良反应等方面的研究进展进行系统性阐述,以期为深入研究β-榄香烯,提高其临床抗癌活性提供思路。     

参麦注射液联用低分子肝素钙后在大鼠体内药动学特征研究

目的:以人参皂苷Rg1、Re、Rb1为参麦注射液药动学研究的指标成分,探讨低分子肝素钙对参麦注射液在大鼠体内药动学的影响。方法:采用HPLC方法测定大鼠血浆中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的浓度,应用DAS 2.0药动学软件求算药动学参数。结果:参麦注射液与低分子肝素钙联用后人参皂苷Rg1、Rb1的血药浓度均升高,CL降低,MRT延长,AUC(0-144)和AUC(0-∞)均显著高于参麦注射液单独用药组;但联用低分子肝素钙后人参皂苷Re的血药浓度和药动学参数没有显著性变化。结论:本研究建立的测定大鼠血浆中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的HPLC法,专属性强,精密度与回收率高,稳定性良好。首次探明低分子肝素钙对参麦注射液体内药动学的影响,为临床上中西药合理联用奠定研究基础。     

金港榄香烯与榄香烯脂质体注射液的指纹图谱研究

[目的]通过检测金港榄香烯与榄香烯脂质体注射液的指纹图谱,考察它们的质量稳定性。[方法]分别对10批金港榄香烯与榄香烯脂质体注射液,采用气相色谱法检测其指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度计算软件计算相似度。[结果]采用气相色谱法检测它们的指纹图谱稳定可靠,发现榄香烯和榄香烯脂质体注射液都有6个共有特征峰,各批次榄香烯和榄香烯脂质体注射液的相似度都不低于0.995。[结论]建立的金港榄香烯和榄香烯脂质体注射液指纹图谱符合要求,为不同批次产品的质量稳定性提供了保证。     

3种中药制剂对Hep G2细胞增殖的抑制作用的实验研究

目的:探讨3种中药制剂肝复乐、黄芪注射液、β-榄香烯对Hep G2细胞增殖的抑制作用。方法:长满单层的对数生长期HepG2细胞,分别加入用DMEM完全培养基进行连续二倍稀释的中药复方肝复乐,以及黄芪注射液、β-榄香烯注射液,并设环磷酰胺药物对照与细胞空白对照,于37℃5%CO2分别培养48 h,采用MTT法测药物对Hep G2细胞的增殖、生长的抑制作用。结果:肝复乐、黄芪注射液、β-榄香烯对Hep G2细胞有明显的抑制作用,与空白对照组及环磷酰胺比较,差异均有统计学意义(P0.05);3种中药对Hep G2细胞增殖的半数抑制率(IC50)分别为27.0 mg/mL、1.30 mg/mL、4.03 mg/mL。结论:肝复乐、黄芪注射液、β-榄香烯具有抑制Hep G2细胞增殖的作用,可为临床应用继续进行机理探讨。