艾叶乙酸乙酯提取物通过LINC01606/微小RNA-26b对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响

目的研究艾叶乙酸乙酯提取物对结直肠癌SW1116细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的分子机制。方法2018年6月至2019年11月,用12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L的艾叶乙酸乙酯提取物处理结直肠癌细胞SW1116,分别称为实验1、2、3组,人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法、流式细胞术和克隆形成实验检测SW1116细胞存活率、凋亡率、细胞周期和克隆形成能力,蛋白质印迹法检测周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中LINC01606和微小RNA(miR)-26b的转录水平,双荧光素酶报告系统验证LINC01606和miR-26b 的关系。结果实验1、2、3 组的SW1116 细胞克隆形成数(101±9、79±8、56±6)、存活率［(81.57±8.02)%、(68.17±6.69)%、(48.26±4.91)%］、S期细胞百分比［(31.98±2.39)%、(26.10±2.21)%、(23.21±2.04)%］及细胞中LINC01606含量(0.76±0.05、0.51±0.05、0.34±0.04)逐渐降低(P<0.05),P21(0.34±0.03、0.47±0.04、0.67±0.05)、caspase-3(0.26±0.02、0.38±0.03、0.59±0.04)蛋白表达量、miR-26b 含量(1.26±0.09、1.41±0.10、1.69±0.12)、细胞凋亡率［(13.37±1.21)%、(17.94±1.47)%、(24.36±1.69)%］和G1期细胞百分比［(32.17±2.41)%、(37.04±2.75)%、(41.20±3.24)%］均逐渐升高(P<0.05),呈显著剂量依赖趋势,剂量越高效果越显著;过表达LINC01606和抑制miR-26b均可提高细胞克隆形成数、存活率和S期细胞百分比,降低P21、caspase-3蛋白表达量、细胞凋亡率及G1期细胞百分比;LINC01606靶向调控miR-26b。结论艾叶乙酸乙酯提取物通过LINC01606/miR-26b途径抑制SW1116细胞的增殖,促进细胞凋亡。艾叶乙酸乙酯提取物对结直肠癌具有潜在治疗作用。     

布比卡因调控LncRNA LBX2-AS1对宫颈癌细胞SiHa增殖及凋亡的影响

摘要：目的:探讨布比卡因对宫颈癌细胞SiHa增殖、凋亡的影响及其对LncRNA LBX2-AS1的调控作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分别加入不同剂量的布比卡因处理细胞,分别将si-NC、si-LBX2-AS1转染至SiHa细胞,分别将pcDNA、pcDNA-LBX2-AS1转染至SiHa细胞后使用布比卡因处理;采用MTT实验检测细胞增殖;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测LBX2-AS1的表达量;Western blot法检测Cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达量。结果:布比卡因可明显降低光密度（OD）值、S期细胞比例、LBX2-AS1的表达水平及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;转染si-LBX2-AS1可明显降低OD值、S期细胞比例及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期细胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;转染pcDNA-LBX2-AS1可明显逆转布比卡因对SiHa细胞增殖、细胞周期及凋亡的作用（P<0.05）。结论:布比卡因可通过下调LBX2-AS1的表达从而抑制宫颈癌细胞增殖、诱导细胞周期阻滞于G0-G1期细胞比例及促进细胞凋亡。     

LncRNA HULC通过调控NF-κB信号通路对淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨长非编码RNA(LncRNA)HULC对淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响和机制。方法 将淋巴瘤细胞JVM-2分为对照组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-HULC组(转染si-HULC)、Vector组(转染Vector)、HULC组(转染HULC)、si-HULC+PMA组(转染si-HULC+0.5μmol·L^-1佛波酯)。实时反转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HULC表达;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;流式细胞术检测凋亡和周期分布;蛋白质印迹法检测人核因子κB抑制蛋白α(IKBα)、磷酸化IKBα(p-IKBα)和p-p65蛋白表达。结果 si-NC组、si-HULC组、Vector组、HULC组JVM-2细胞HULC表达水平分别为0.97±0.08,0.19±0.04,1.01±0.11和11.41±0.85;细胞活力分别为(98.15±5.14)%,(51.01±5.95)%,(98.10±4.80)%和(138.25±13.24)%;G0/G1期比例分别为(54.01±2.77)%,(70.85±2.93...     

黄秋葵多糖调控p73反义RNA 1T对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨黄秋葵多糖调控p73反义RNA 1T(TP73-AS1)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,及其作用机制.方法 实验分为对照组(正常DMEM培养基),低、中、高剂量实验组(分别用含0.6,1.2,1.8 mg·mL-1黄秋葵多糖的DMEM培养基)、si-NC组(转染TP73-AS1阴性对照质粒)、si-TP73-A...     

ESET通过lncRNA GMDS-AS1调控肝癌细胞增殖、凋亡、糖酵解的研究

目的 探究组蛋白甲基转移酶集合域分叉1(ESET)、长链非编码RNA甘露糖4,6-脱水酶反义RNA1(lncRNA GMDSAS1)对肝癌细胞增殖、凋亡、糖酵解的调控及二者之间的潜在关系。方法 收集右江民族医学院附属医院和百色市人民医院2019年1月至2020年1月期间手术切除的肝癌组织及癌旁组织49例。脂质体法将空白组（不做任何处理）、空载体组（转染pcDNA或si-con）、敲减ESET组（转染si-ESET）、过表达lncRNA GMDS-AS1组（转染pcDNA-GMDS-AS1）转染至HepG2细胞;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）实验、蛋白质印迹法实验检测ESET、lncRNA GMDS-AS1、细胞增殖抗原标志物Ki-67、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、活化胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)的表达;细胞计数试剂盒（CCK8）法、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡;RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）实验检测ESET与lncRNA GMDS-AS1的关系。结果 肝癌组织中ESETmRNA和蛋白表达量为5.18±0.94、0.69±0...     

长链非编码 RNA LINC01419调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的机制

目的研究长链非编码 RNA(lncRNA)LINC01419调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的机制。方法收集漯河市中心医院 2015年 10月至 2018年 5月因结直肠癌手术切除的组织标本 20例,以距离结直肠癌边缘 ≥3 cm的癌旁正常组织标本 20例为对照。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测结直肠癌组织中 lncRNA LINC01419和微小 RNA-132-3p(miR-132-3p)表达。构建干扰 lncRNA LINC01419或 miR-132-3p过表达的结直肠癌 SW620细胞, MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡, Transwell检测细胞迁移、侵袭,蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1A(P21)、 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)蛋白、 Bcl-2相关 X(Bax)蛋白、基质金属蛋白酶 -2(MMP-2)、基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)蛋白表达。生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析 lncRNA LINC01419和 miR-132-3p的靶向关系。 si-LINC01419和 anti-miR-123-3p共转染,观察抑制 miR-132-3p表达对干扰 lncRNA LINC01419诱导的 SW620细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。结果与癌旁组织［(1.00±0.09)、(1.01±0.08)］比较,结直肠癌组织中 lncRNA LINC01419表达量( 2.74± 0.26)明显增加( P<0.05)miR-132-3p表达量( 0.51±0.05)显著减少( P<0.05)。干扰 lncRNA LINC01419或 miR-132-3p过表达显著抑制 SW620细胞增殖、,迁移、侵袭、 cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达,并促进细胞凋亡、 P21、Bax蛋白表达。 lncRNA LINC01419靶向调控 miR-132-3p的表达。抑制 miR-132-3p表达逆转了干扰 lncRNA LINC01419对结直肠癌细胞 SW620增殖、迁移、侵袭的抑制作用,以及对细胞凋亡的促进作用。结论 lncRNA LINC01419通过靶向 miR-132-3p调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭。     

南方红豆杉提取物对人前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨南方红豆杉提取物对人前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法检测不同浓度(0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.5、3、6μg/μL)南方红豆杉提取物对人前列腺癌细胞株DU145和PC-3增殖的抑制作用,分别计算IC₅₀。使用南方红豆杉提取物0、1.5μg/μL分别处理PC-3和DU145细胞,并于第1～7天收集细胞进行存活细胞计数。检测不同浓度(0、1、2、3μg/μL)南方红豆杉提取物对PC-3细胞凋亡及周期的影响。结果不同浓度南方红豆杉提取物对DU145和PC-3细胞均有抑制作用(P<0.05),且随着药物浓度的增加,其抑制作用逐渐增强。PC-3细胞的IC₅₀为2.39μg/μL,DU145细胞的IC₅₀为3.84μg/μL。南方红豆杉提取物1.5μg/μL对PC-3和DU145细胞均有抑制作用,并且随着作用时间的延长,抑制作用逐渐增强。与南方红豆杉提取物0μg/μL相比,南方红豆杉提取物2、3μg/μL处理PC-3细胞处于早期凋亡与晚期凋亡的数量和G₁期细胞比例逐渐增加...     

甘露糖抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和诱导凋亡的影响

目的 研究甘露糖抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和诱导凋亡及其对Wnt/β-catenin通路的影响。方法 体外培养宫颈癌HeLa细胞,分为对照组(未经任何处理)和低、中、高剂量实验组(用甘露糖浓度为5、10、25 mmol·L^-1处理细胞)。以细胞计数试剂盒8(CCK-8)和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,以蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达。结果 对照组和低、中、高剂量实验组的细胞抑制率分别为(0.00±0.13)%、(11.25±3.42)%、(23.78±3.41)%和(35.98±4.52)%,凋亡率分别为(4.59±0.35)%、(11.45±1.32)%、(18.47±2.01)%和(25.69±2.43)%, p21蛋白相对表达水平分别为0.21±0.03、 0.34±0.04、 0.51±0.06和0.69±0.05, Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.89±0.06、 0.67±0.04、 0.52±0.05和0.35±0.06, Bax蛋白相对表达...     

人参皂苷Compound K对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察人参皂苷Compound K(CK)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及与细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的关系。方法体外培养宫颈癌细胞株HeLa细胞,低、中、高剂量实验组及对照组分别以2.5,5,10μmol·L^-1的人参皂苷CK和等量生理盐水处理,各组分别干预24,48,72 h。用活细胞计数(CCK-8)法检测宫颈癌HeLa细胞增殖情况;用Hoechst 33258染色法观察宫颈癌HeLa细胞核形态变化及凋亡情况;用蛋白质印迹(WB)法检测宫颈癌HeLa细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、p-c-Fos和p-c-Jun蛋白表达水平。结果干预72 h时,低、中、高剂量实验组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率分别为(39.73±3.22)%,(53.16±3.93)%和(71.42±4.37)%;干预72 h时,对照组和低、中、高剂量实验组宫颈癌HeLa细胞凋亡率分别为(11.24±3.56)%,(32.37±2.85)%,(56.42±3.12)%,(87.23±4.74)%;宫颈癌HeLa细胞ERK1/2蛋白相对表达量分别为0.86±0....     

沉默MALAT1基因对蜂毒素诱导HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨沉默HepG2细胞株中MALAT1基因对蜂毒素诱导的细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法采用MTT法检测蜂毒素对HepG2细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;qPCR法检测HepG2细胞中MALAT1基因的表达;采用特异性siRNA对HepG2细胞的MALAT1基因进行沉默;比较单独用蜂毒素处理和给予蜂毒素同时沉默MALAT1的细胞增殖抑制率和凋亡率变化。结果蜂毒素明显抑制HepG2细胞的增殖并促进细胞凋亡,呈浓度依赖性;和正常肝细胞株L0-2相比,MALAT1 mRNA在HepG2细胞中存在高表达(P<0.05);蜂毒素可下调细胞中MALAT1的表达,并随着浓度的增加抑制率升高;给予蜂毒素同时沉默MALAT1的研究组中,细胞增殖抑制和凋亡率都明显高于单独给予蜂毒素组(P<0.05)。结论蜂毒素可下调HepG2细胞株中MALAT1的表达,且沉默MALAT1可促进蜂毒素诱导的HepG2细胞增殖抑制和凋亡。     

硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

目的 研究硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7（CASC7）对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 膀胱癌T24细胞分成对照组、Vector组、CASC7组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组。Vector组转染阴性对照载体、CASC7组转染CASC7过表达载体。对照组正常培养,实验组给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-NC组先转染shRNA control再给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-CASC7组先转染CASC7 shRNA再给予48μmol·L^-1的硫利达嗪处理。转染前将对数期的T24细胞调整浓度为每毫升5×10⁴个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75%～85%时,使用0.5%胰蛋白酶消化,用Lipofectamine^? 2000转染试剂将阴性对照载体、CASC7过表达载体、shRNA control、CASC7 shRNA转染进细胞。以实时定量反转录聚合酶链反应检测CASC7表达水平;以细胞...     

Linc-NeD125通过调控微小RNA-19b对缺氧/复氧诱导的心肌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探究上调长链非编码RNA(lncRNA)Linc-NeD125对缺氧/复氧心肌细胞增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法 采用缺氧/复氧诱导HCM细胞建立损伤模型,通过实时定量聚合酶链反应（RT-q PCR）技术检测缺氧/复氧诱导的HCM细胞Linc-NeD125表达水平。将阴性对照慢病毒和Linc-NeD125慢病毒分别感染缺氧/复氧诱导的HCM细胞,HCM细胞分为NC组和Linc-NeD125组。细胞计数（CCK-8）法和流式细胞术分别检测NC组和Linc-NeD125组HCM细胞的增殖水平和凋亡率。双荧光素酶报告基因实验检测Linc-NeD125与微小RNA(miR)-19b的靶向关系。RT-qPCR检测NC组和Linc-NeD125组HCM细胞中miR-19b表达水平。蛋白免疫印迹法检测NC组和Linc-NeD125组HCM细胞中细胞周期蛋白（Cdk2、Cyclin E）、抗凋亡蛋白（Bcl-XL、Mcl-1）以及促凋亡蛋白Bax的表达。结果 缺氧/复氧诱导HCM细胞中LincNeD125表达水平低于正常HCM细胞（P<0.01）。Linc-NeD125组HCM细胞中...     

蛇莓提取物调控锌指蛋白217的表达对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨蛇莓提取物对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响,及其作用。方法实验分为对照组(正常培养的T24细胞,未做任何处理)、实验1,2,3,4组(用质量浓度分别为0.05,0.10,0.20和0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)、siNC组[转染锌指蛋白217(ZNF217)阴性对照质粒]、si-ZNF217组(转染ZNF217抑制表达载体质粒)、实验4+pc DNA3.1组(转染ZNF217阳性对照质粒,同时用0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)、实验4+pc DNA3.1-ZNF217组(转染ZNF217过表达载体质粒,同时用0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时荧光定量聚合酶链反应检测ZNF217 mRNA的表达水平。结果对照组、实验1,2,3,4组、si-NC组、si-ZNF217组、实验4+pc DNA3.1组和实验4+pc DNA3.1-ZNF217组的细胞存活率分别为(100.01±6.64)%,(98.16±6.53)%,(90.12±5.38)%,(70.69±4.62)%,(52.31±4.03)%,(100.00±7.12)%,(56.35±5.25)%,(52.16±3.94)%和(83.53±3.10)%,细胞凋亡率分别为(8.41±0.86)%,(9.10±0.90)%,(14.12±1.01)%,(18.23±1.35)%,(22.17±1.61)%,(8.31±0.84)%,(20.16±1.35)%,(22.10±1.41)%和(11.16±1.01)%,ZNF217 mRNA表达水平分别为1.00±0.05,0.98±0.05,0.81±0.05,0.60±0.04,0.34±0.03,1.01±0.05,0.24±0.02,0.75±0.06和0.33±0.03,实验2,3,4组的上述指标与对照组相比,si-ZNF217组的上述指标与si-NC组相比,实验4+pc DNA3.1-ZNF217组的上述指标与实验4+pc DNA3.1组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论蛇莓提取物可能通过下调ZNF217的表达,从而抑制膀胱癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

硫利达嗪对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响及机制探讨

目的 探讨硫利达嗪（TDZ）对胰腺癌细胞SW1990增殖、凋亡的影响及其对LINC00470的调控作用。方法 用不同浓度（5、10、20μmol/L）的TDZ处理人胰腺癌细胞SW1990,si-NC(si-NC组)、si-LINC00470(siLINC00470组)转染至SW1990细胞,分别将pcDNA(TDZ+pcDNA组)、pcDNA-LINC00470(TDZ+pcDNA-LINC00470组)转染至SW1990细胞后加入TDZ处理细胞;MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖及克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测LINC00470的表达量;Western blot检测活化的胱天蛋白酶（cleavedcaspase）3、cleaved-caspase9蛋白表达。结果 与对照组比较,TDZ不同剂量组SW1990细胞增殖抑制率、凋亡率和cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白水平升高,细胞克隆形成数减少,LINC00470的表达量降低（P<0.05）。与si-NC组比较,si-LINC00470组SW1990细胞增殖抑制率...     

长链非编码RNA ATB调控miR-144对胶质瘤迁移和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA ATB （lncRNA ATB）调控miR-144对胶质瘤迁移和侵袭的影响。方法 采用qPCR检测lncRNA ATB在胶质瘤组织和癌旁正常组织中的表达差异以及慢病毒si-ATB对胶质瘤细胞的转染效率情况;通过双荧光素酶报告基因进行检测lncRNA ATB和miR-144之间的关系;通过平板克隆实验检测lncRNA ATB对胶质瘤细胞株U87和U251增殖能力的影响;流式细胞术检测lncRNA ATB对胶质瘤细胞株凋亡行为的影响;Transwell实验检测lncRNA ATB对细胞株侵袭能力的影响;裸鼠体内实验检测lncRNA ATB对裸鼠移植瘤的体积和质量的影响情况。结果 胶质瘤lncRNA ATB的表达水平高于癌旁正常组织（P<0.05）,高水平lncRNA ATB患者的生存率低于低水平lncRNA ATB患者;使用si-ATB1和si-ATB2分别转染胶质瘤U87和U251细胞后,lncRNA ATB的表达水平降低;过表达miR-144后,野生型lncRNA ATB的荧光素酶活性受到抑制,对突变型lncRNA ATB的荧光素酶活性影响不明显。转染si-ATB 24、48和72小时后,U87[（186.4±12.4）个比（73.6±8.6）个比（62.6±5.6）个,P<0.05]和U251细胞[（192.2±15.3）个比（63.6±6.3）个比（68.3±7.6）个,P<0.05]和U251细胞的增殖能力低于对照组;lncRNA ATB的下调提高了U87和U251凋亡百分比（P<0.05）;抑制lncRNA ATB后,U87细胞和U251细胞的细胞侵袭能力降低;与对照组相比,si-ATB组肿瘤体积和肿瘤重量均小于或低于对照组（P<0.05）。结论 lncRNA ATB通过调控miR-144的表达促进胶质瘤细胞的生物学行为。