基于网络药理学探讨补阳还五汤治疗高脂血症的作用机制＊

目的 本研究探讨补阳还五汤治疗高脂血症的物质基础与作用机制。方法 运用TCMSP数据库和STICH数据库收集补阳还五汤化学成分和靶点信息，通过HPO数据库筛选疾病的靶点，然后利用Cytoscape 3.6.1软件对成分靶点和疾病靶点进行网络拓扑学分析，获取补阳还五汤治疗高脂血症的作用靶点，再运用DAVID在线分析工具对作用靶点进行KEGG通路富集及分析，最后构建“补阳还五汤-化学成分-核心靶点-关键通路”的多层次网络关联图。结果 共得到补阳还五汤潜在活性成分107个，药物靶点487个，疾病靶点95个，拓扑分析共得核心靶点113个，主要KEGG通路20条。本研究结果表明，补阳还五汤治疗高脂血症的作用机制可能与CREBBP、TP53和PPARA等靶点及脂肪细胞因子、FoxO、TNF、HIF-1和PI3K-Akt信号通路有关。结论 本研究筛选了补阳还五汤治疗高脂血症的关键靶点和通路，为补阳还五汤用于临床治疗提供了科学依据。     

急性脑梗死患者血清外泌体差异基因表达谱的研究

目的 分析急性脑梗死患者血清外泌体差异基因表达谱,以期阐明脑梗死损伤相关的基因表达变化和潜在血清标志物.方法 第Ⅰ期研究纳入4例急性脑梗死患者和5例健康人,外周血分离血清后用外泌体试剂盒提取外泌体,运用基因芯片技术检测mRNA表达谱,筛选有差异表达的mRNAs,同时对其进行GO功能及KEGG通路富集分析.进一步运用实时...     

补阳还五汤治疗糖尿病周围神经病变的网络药理学分子机制研究

[目的] 采用网络药理学对补阳还五汤治疗糖尿病周围神经病变（DPN）的分子机制进行探讨。[方法] 利用中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库、化学专业数据库收集补阳还五汤中7味中药的相关化学成分及作用靶点，与Drugbank、GeneCards数据库获得的DPN疾病靶点相映射，得到补阳还五汤治疗DPN的潜在靶点；通过STRING在线数据库得到蛋白互作关系并筛选出关键靶点，进而运用Cytoscape软件构建蛋白相互作用（PPI）网络和"补阳还五汤-活性成分-关键作用靶点"网络；使用R软件对补阳还五汤的关键作用靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析，并构建"补阳还五汤-活性成分-靶点-KEGG通路"多维网络图。[结果] 筛选得到补阳还五汤81个活性成分和238个作用靶点，DPN疾病相关靶点4 334个，补阳还五汤治疗DPN的关键靶点124个，槲皮素（quercetin）、β-谷甾醇（beta-sitosterol）、黄芩素（baicalein）等12个成分具有潜在抗DPN活性，其可能作用于丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、SRC、JUN、肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素-6（IL-6）等靶点，通过AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路等发挥治疗DPN的作用。[结论] 补阳还五汤通过多成分、多靶点、多途径起到干预治疗DPN的作用，为补阳还五汤治疗DPN的基础和临床研究提供新方向。     

糖尿病肛漏创面应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序及维恩图分析＊

目的 基于高通量测序及维恩图预测美洲大蠊提取液促进糖尿病肛漏创面愈合的顺、反式lncRNA及Pathway。方法 选取湖南中医药大学第二附属医院收治的糖尿病肛漏患者术后创面12例，利用高通量测序技术检测6例术后创面组（A组）和6例术后创面应用美洲大蠊提取液创面组（B组）中lncRNAs和mRNAs表达，进行GO分析和KEGG通路分析，构建lncRNA-mRNA的共表达网络图，并通过Cis-及Trans-预测与创面愈合相关lncRNA。结果 实验组差异表达的lncRNAs2242个（上调649个，下调1593个），mRNAs有13186个（上调5162个，下调8024个）。GO分析发现差异表达的lncRNA-cis主要富集在表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等；差异表达的lncRNA-trans主要富集在细胞代谢过程、蛋白质结合、细胞内部分等。通过KEGG通路分析，筛选出与本研究相关的3条通路：IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway；lncRNA靶标基因预测中最终筛选出3个lncRNA（ENST00000443364、ENST00000576797、ENST00000620167），进行PCR验证，lncRNAENST00000443364、ENST00000576797与芯片结果一致。结论 美洲大蠊提取液可能通过lncRNAENST00000443364、ENST00000576797顺式及反式调控靶标基因，影响表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等功能以及影响IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway促进糖尿病肛漏创面愈合。     

基于网络药理学的升陷汤治疗心力衰竭的作用机制研究＊

目的 基于网络药理学方法探讨升陷汤治疗心力衰竭（heart failure，HF）的潜在作用机制。方法 采用TCMSP、TCM-MESH、化学专业数据库、ETCM平台筛选出升陷汤的活性成分，利用TCMSP靶点预测模型预测活性成分的潜在靶点；利用Genecards、OMIM、Disgenet、DigSee数据库检索心力衰竭的相关靶点；利用Biogenet分别对药物与疾病靶点进行蛋白质相互作用网络进行构建，并提取交集网络以获得升陷汤治疗心力衰竭的关键靶点；利用Metascape对关键靶点进行GO和KEGG富集分析。结果 得到药效成分60个、药物靶点156个、心力衰竭靶点1387个，最终获得关键靶点197个、KEGG通路157条。升陷汤治疗心力衰竭主要成分为槲皮素、山奈酚、黄芪多糖、黄芪甲苷等，关键靶点为TP53、ESR1、FN1、UBC、TNF-α，关键的生物学进程和通路可能包括PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、TLR信号通路、HIF-1α信号通路、FoxO信号通路、细胞周期信号通路等。结论 本研究初步揭示了升陷汤多成分、多靶点、多途径治疗心力衰竭的机制，为升陷汤的临床开发利用提供了依据。     

基于系统药理学的麻黄细辛附子汤治疗缓慢型心律失常的作用机制研究＊

目的 基于系统药理学方法探究麻黄细辛附子汤治疗缓慢型心律失常的作用机制。方法 利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)和PharmMapper数据库筛选出麻黄细辛附子汤的有效成分和作用靶点,并构建成分—靶点网络,然后利用OMIM、GeneCards、CTD数据库筛选缓慢型心律失常的相关靶点,通过Draw Venn Diagram网站进行交集比对,获取麻黄细辛附子汤作用于缓慢型心律失常的相关靶点;然后利用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体（GO）功能富集分析和KEGG通路富集分析;利用Cytoscape进行网络靶点特性分析,并在 Systemsdock 数据库进行系统分子对接。结果 筛选出了51个满足条件的药物有效成分及其263个作用靶点,566个缓慢型心律失常相关的疾病靶点,交集靶点共14个。GO分析得到63个相关生物过程,6项分子功能,10类细胞组成;KEGG 通路富集筛选得到5条重要的信号通路;各分子与靶点之间有较好的结合活性。结论 麻黄细辛附子汤可能是通过唾腺分泌、心肌细胞的肾上腺素能、cGMP-pkg信号通路、钙信号通路、cAMP信号通路来发挥对缓慢型心律失常的治疗作用。     

基于网络药理学探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用机制

目的:利用网络药理学探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:通过TCMSP数据库检索中药成分、靶点,利用SwissTargetPrediction、PubChem 2个在线网站预测中药成分靶点;通过OMIM、DisGeNE、TTD、DrugBank 4个数据库检索动脉粥样硬化靶点;以VENN图展现补阳还五汤靶点与动脉粥样硬化靶点的交集;利用STRING网站构建PPI网络,筛选出关键靶点;通过Cytoscape3.6.0软件筛选出补阳还五汤主要成分;利用DAVID6.8网站对交集靶点精细GO功能分析和KEGG通路富集分析.结果:补阳还五汤靶点与动脉粥样硬化靶点的交集靶点有94个,补阳还五汤活性成分62个,补阳还五汤关键成分3个.GO分析结果显示,补阳还五汤治疗动脉粥样硬化潜在生物学过程有炎症反应、药物反应等43个.KEGG通路富集分析结果显示,补阳还五汤抗动脉粥样硬化通路主要涉及到Toll样受体信号通路、T细胞受体信号传导途径、核转录因子-kappaB (NF-KB)信号通路等.结论:补阳还五汤主要通过红花、黄芪所含有的3个关键成分槲皮素、木犀草素和山奈酚,以及Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、T细胞受体信号通路发挥抗炎症反应机制,达到抗动脉粥样硬化的作用.     

基于网络药理学探讨肉苁蓉-巴戟天药对治疗股骨头坏死的作用机制＊

目的 基于网络药理学方法探讨肉苁蓉-巴戟天药治疗股骨头坏死的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）对肉苁蓉-巴戟天药对中活性成分进行筛选，通过GeneCards、OMIM数据库检索股骨头坏死疾病靶点，取得交集基因后使用Cytoscape 3.7.1建立化合物-疾病-靶点调控网络，基于生物学信息注释数据库（DAVID）对核心靶点进行基因本体（GO）功能富集分析与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果 共得到肉苁蓉-巴戟天药对的21个活性成分和182个潜在靶点，相关的疾病靶点727个，GO富集分析主要包括细胞凋亡、脂质代谢异常、活性氧反应等功能途径；KEGG通路分析主要包括缺氧诱导因子-1信号通路、p53信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等。结论 基于网络药理学初步揭示出肉苁蓉-巴戟天药对治疗股骨头坏死多成分、多靶点、多通路的整体调节作用，其作用机制可能与脂质代谢异常、细胞凋亡、缺氧诱导因子-1信号通路、p53信号通路密切相关。     

光污染对大鼠卵巢MicroRNA的影响及滋阴补阳方序贯干预作用的研究＊

目的 探讨光污染大鼠、正常光照大鼠与滋阴补阳方序贯法干预后的大鼠卵巢的microRNA测序表达谱的差异情况。方法 将80只SD雌性大鼠随机分为对照组25只和造模组55只，对照组大鼠25只给予12/12h光/暗循环的光照条件，造模组大鼠55只给予24 h持续光照的条件，造模时间定为50天，剔除造模失败者5只，剩余造模大鼠随机分为模型组25只和实验组25只。对照组、模型组予以生理盐水灌胃，实验组予以滋阴补阳方序贯法。取三组大鼠卵巢，采用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术进行测序，比较三组的microRNA表达差异。对差异表达的microRNA进行筛选，并进行GO和KEGG功能显著性富集分析。荧光定量RT-PCR对差异表达microRNA进行验证。结果 本研究发现光污染组和正常光照组组间呈显著性差异表达的16个已知的microRNA，其中5个microRNA表达上调，11个microRNA表达下调。光污染组和实验组组间呈显著性差异表达的4个已知的microRNA，其中3个microRNA表达上调，1个microRNA表达下调。GO分析显示差异表达的microRNA在富集的分子功能上多集中于生物调节、生长过程、分子的结合等方面，KEGG通路富集分析示，受microRNA调控的靶基因参与的这些通路中多集中于神经组织受体相互作用、癌症、雌激素、MAPK等相关信号通路。荧光定量RT-PCR结果示差异性 miRNA 的表达趋势与测序结果相一致。结论 差异表达的microRNA可能在光污染环境下对卵巢的生长发育具有重要的作用，滋阴补阳方序贯法可能通过这些相关信号通路作用于卵巢组织起到改善卵巢功能的作用。     

基于网络药理学探究补肾活血汤治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的作用机制

[目的] 探究补肾活血汤（BHD）治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎（KOA）的关键靶点以及作用。[方法] 通过Swiss Target Prediction检索BHD中主要活性化合物的相关靶点;GeneCards数据库搜集KOA的疾病靶点,相交得出药物与疾病的共有靶点;将BHD中的主要靶点与活性化合物,使用STRING数据库绘制蛋白互作（ PPI）网络图,对关键靶点进行GO及KEGG通路富集分析。[结果] BHD主要有效活性成分82个,潜在靶点615个;KOA疾病靶点482个,药物基因靶点533个。GO富集分析得到细胞生物学条目119个,续用KEGG通路富集分析方法得到信号通路总数共95个。[结论] 阐述了BHD多成分、多途径、多靶点治疗KOA的分子作用机制,为后续研究及临床提供依据。     

中西医结合治疗急性期脑梗塞60例

[目的]观察中西医结合治疗急性脑梗死的临床疗效。[方法]将120例急性脑梗死患者随机分为两组,对照组60例采用西医综合治疗,治疗组60例采用西医综合治疗,同时用加味补阳还五汤辨证治疗。治疗前后分别测定两组神经功能缺损程度,进行评分,疗程为3周,疗程结束后分析患者治疗前后评分情况,进行疗效判定。[结果]两组治疗前后神经功能缺损评分减少程度比较有显著性差异(P<0.01),有效率比较有显著性差异(P<0.05),治疗组优于对照组。[结论]补阳还五汤加西医综合治疗急性脑梗死疗效确切可靠,优于单纯的西医综合治疗。     

加味补阳还五汤治疗急性脑梗死临床研究

目的：观察加味补阳还五汤治疗急性脑梗死的临床疗效及血栓前体蛋白（TpP）治疗前后的变化。方法：将60例急性脑梗死（气虚血瘀型缺血性中风）患者随机分为治疗组和对照组各30例。2组均予急性脑梗死常规基础治疗,治疗组口服加味补阳还五汤煎剂。观察2组患者入组时及2疗程后（14天为1疗程）TpP、凝血4项[凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（Fib）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）]变化,以及加味补阳还五汤治疗4周的临床疗效。结果：总有效率治疗组92．6％,对照组82．1％,2组比较,差异有显著性意义（P〈0.05）;治疗后2组神经功能缺损程度评分均有所降低,与治疗前比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）;治疗后治疗组TpP及Fih与对照组比较,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05,P〈0.01）。而pT、APTT、TT治疗前后无显著性差异（P〉0．05）。结论：加味补阳还五汤治疗急性脑梗死临床疗效显著,可降低Fib和TpP,可用于观察抗血栓效果的评价。     

补阳还五汤加味治疗糖尿病合并脑梗死随机对照临床研究

[目的]探讨补阳还五汤加味结合西医综合疗法治疗糖尿病合并脑梗死的效果。[方法]将285例糖尿病合并脑梗死的患者随机分组,对照组应用西医综合治疗,治疗组在西医综合治疗的基础上,加用补阳还五汤加味口服或鼻饲,疗程6周。[结果]治疗组治愈显效率和总有效率均高于对照组(P<0.05)。[结论]补阳还五汤加味结合西医综合疗法治疗糖尿病合并脑梗死,疗效显著,有临床推广价值。     

补阳还五汤加清脑方联合针刺治疗脑梗死急性期气虚血瘀证临床观察

目的探究补阳还五汤加清脑方联合针刺治疗脑梗死急性期气虚血瘀证的临床效果。方法本研究选取2019年2月—2020年10月至本溪市中医院就诊的75例脑梗死急性期气虚血瘀证患者作为本次研究的对象,以掷硬币方式将患者分为单一组(共37例,给予针刺疗法)和联合组(共38例,在单一组基础上联合补阳还五汤加清脑方治疗),比较2组患者治疗前后的肢体运动功能、神经功能损伤程度以及日常生活活动能力的情况,同时对比2组最终疗效。结果治疗前,2组患者的肢体运动功能(Fugl-Meye量表评分)、神经功能损伤程度(NIHSS评分)以及日常生活活动能力(Barthel指数评分)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,联合组患者各项评分均明显优于单一组(P<0.05)。联合组患者治疗总有效率97.37%(37/38)高于单一组81.06%(30/37)(P<0.05)。结论补阳还五汤加清脑方联合针刺治疗脑梗死急性期气虚血瘀证的临床优势明显,能有效改善运动功能和神经功能,提升患者的活动能力,提高临床治疗有效率。     

补阳还五汤加味对急性脑梗死患者氧化应激水平及神经功能恢复的影响

目的研究补阳还五汤加味对急性脑梗死患者氧化应激机制及神经功能的影响。方法将80例急性脑梗死患者随机分为对照组和治疗组各40例,对照组采用抗凝、降纤、抗血小板凝胶、扩容等西医常规治疗,治疗组在对照组的基础上采用补阳还五汤加味治疗,疗程均为14天。于治疗前后进行美国国立卫生研究院卒中量表(NHISS)评分及日常生活活动能力(Barthel指数)评定,并检测血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的变化。结果两组患者治疗后NHISS评分、Barthel指数及SOD、MDA水平与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗组各项指标的改善优于对照组,两组治疗后差异均有统计学意义(P<0.05)。结论补阳还五汤加味能显著改善急性脑梗死患者的神经功能,降低氧化应激水平可能是其作用机制之一。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的保护作用,阐明该方抗脑缺血的机理。方法采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,造模后24 h给药,补阳还五汤组给予补阳还五汤灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃。造模后7 d,评价各组大鼠神经功能并处死取材,四氮唑红染色观察大鼠脑组织梗死体积,HE染色观察大鼠脑微血管的一般形态,ELISA检测大鼠脑组织内基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平及血清中血管性血友病因子(vWF)的表达。结果与模型组比较,补阳还五汤组能显著改善神经功能行为评分,减少脑梗死体积,降低MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF水平。病理观察结果显示,补阳还五汤组脑组织病理变化较模型组减轻。结论补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其作用可能与保护血脑屏障,抑制MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF的表达有关。     

补阳还五汤对Cav^-1-/-小鼠脑缺血模型PI3K、Akt、PTEN表达的影响

目的观察补阳还五汤对Cav-1^-/-小鼠脑缺血模型PI3K、Akt、PTEN表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法将野生型小鼠(WT)及Cav-1^-/-小鼠(KO)随机分为假手术组、模型组与补阳组。采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血模型,干预10 d后运用Ayelet Levy 14分评分法观察小鼠神经功能评分。免疫组化和qRT-PCR分别检测小鼠脑组织PI3K、Akt、PTEN蛋白和mRNA的表达。结果与假手术组比较,各模型组小鼠均出现明显神经功能障碍(P<0.01),且PI3K、Akt蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.01),PTEN蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.01),WT模型组小鼠脑组织PI3K、Akt、PTEN蛋白和mRNA表达更显著,且神经功能评分优于KO模型组(P<0.01,P<0.05);WT补阳组小鼠脑组织PI3K、Akt、PTEN蛋白和mRNA的调控程度及神经功能恢复程度均优于WT模型组和KO补阳组(P<0.01)。结论补阳还五汤可能通过Cav-1调控PI3K/Akt信号通路活性,发挥抗脑缺血损伤的作用。     

补阳还五汤对脑出血大鼠模型相关蛋白表达的作用

目的:研究补阳还五汤对脑出血大鼠模型基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、谷氨酸(Glu)及PI3K、AKT表达的作用。方法:选取90只SD大鼠,以随机抽签法分成模型组、正常对照组及补阳还五汤组。模型组与补阳还五汤组建立脑出血模型,造模后第2 d。补阳还五汤组行补阳还五汤灌胃,模型组行生理盐水灌胃,给药14 d。比较3组MMP-9、TIMP-1、Glu,脑组织PI3K、AKT以及Bcl-2、BAX蛋白表达。结果:补阳还五汤组、模型组的MMP-9、TIMP-1、Glu均高于正常对照组,且补阳还五汤组MMP-9、Glu低于模型组,而TIMP-1高于模型组(均P<0.05);补阳还五汤组、模型组脑组织PI3K、AKT蛋白表达较正常对照组更高,补阳还五汤组脑组织PI3K、AKT蛋白表达较模型组更高(均P<0.05);补阳还五汤组、模型组脑组织Bcl-2、BAX蛋白表达均高于模型组,补阳还五汤组脑组织Bcl-2、BAX蛋白表达较模型组更高(均P<0.05)。结论:补阳还五汤可改善脑出血大鼠MMP-9、TIMP-1、Glu,可由激活PI3K/AKT信号转导通路,调控Bcl-2、BAX表达,继而发挥保护脑组织作用。     

补阳还五汤联合运动训练对脑梗死大鼠神经元突触重建的影响

目的 :研究补阳还五汤联合运动训练对脑梗死大鼠神经元突触重建的影响。 方法 :用自体血栓经导管注入右侧大脑中动脉建立大鼠局灶性脑梗死模型,分别给予生理盐水、运动训练、补阳还五汤以及补阳还五汤联合运动训练处理,观察神经功能损伤情况,脑组织中突触体素P38(P38) 和生长相关蛋白-43(GAP-43)的动态表达变化。 结果 :运动训练、补阳还五汤和联合治疗均能够使大鼠神经功能损伤评分降低,P38,GAP-43表达增加,以联合治疗组最为明显。 结论 :补阳还五汤联合运动训练可改善脑缺血后神经行为症状,促进神经细胞突触再生重建,两者联合具有协同增效的作用。