黄芩苷通过调控miR-451对高糖诱导滋养层细胞损伤的保护作用

目的 探讨黄芩苷通过调控miR-451对高糖诱导滋养层细胞损伤保护作用及机制.方法 采用葡萄糖(5.5、25 mmol/L)和黄芩苷(25、100 μmol/L)处理人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo,随机分为对照组、高糖组、高糖+黄芩苷低剂量组、高糖+黄芩苷高剂量组.将anti-miR-NC和anti-miR-...     

六味地黄苷糖中糖苷部位的化学成分研究

目的:对六味地黄苷糖中糖苷部位的化学成分进行研究,阐明其活性的物质基础.方法:用大孔树脂柱色谱制备糖苷部位,用硅胶和反相硅胶柱色谱分离各成分,用MS及NMR技术鉴定结构.结果:分离得到了11个化合物,其中包括9个环烯醚萜苷,1个蒎烷单萜苷,1个酚苷,分别鉴定为7-脱氢马钱素(1),7α-甲氧基莫诺苷(2),7β-甲氧基莫诺苷(3),7α-乙氧基莫诺苷(4),7β-乙氧基莫诺苷(5),莫诺苷(6),獐芽菜苷(7),马钱素(8),芍药苷(9),丹皮酚原苷(10),番木鳖酸(11).结论:该糖苷部位是新药六味地黄苷糖发挥免疫和内分泌调节作用的重要部分.化合物6～8是该部位的主要成分,具有较好的免疫调节作用,是该部位主要活性成分.     

黄芪甲苷对STZ诱导的1型糖尿病小鼠肾组织galectin-3/ERK1/2信号通路的影响

目的：研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾组织galectin-3/ERK1/2信号通路的影响,探讨AS-Ⅳ保护早期糖尿病肾病(DKD)肾损伤的作用机制。方法：使用STZ一次性腹腔注射建立1型糖尿病小鼠模型,随机分为正常组(Control组),模型组(STZ组)及黄芪甲苷干预组(STZ + AS-Ⅳ组)。Control组和STZ组给予标准饲料喂养,STZ + AS-Ⅳ组给予添加AS-Ⅳ的饲料喂养。连续给药8周后检测各组小鼠血糖,24 h尿白蛋白,血肌酐及血尿素氮含量的变化;PAS染色观察肾脏病理改变;免疫组化染色观察galectin-3、p-ERK1/2表达分布;Western blot测定肾皮质组织中galectin-3、p-ERK1/2的蛋白含量。结果：与Control组比较,STZ组小鼠24 h尿白蛋白明显增加(P<0.001),血尿素氮明显升高(P<0.01),血糖明显升高(P<0.001),肾皮质组织中galectin-3、p-ERK1/2蛋白表达明显增加(P<0.01),肾小球系膜基质明显增生(P<0.05)。与...     

黄芪甲苷抑制高糖诱导的足细胞凋亡作用及机制

目的：探讨黄芪甲苷（AS-IV）对高糖诱导的足细胞凋亡的作用及其机制。方法：条件性永生的小鼠足细胞分为正常糖组（NG）、高糖组（HG）、甘露醇高渗对照组（MA）及HG＋不同剂量（10、50、100 μg/mL）黄芪甲苷干预组（AS-IV）。流式细胞仪及Hoechst染色检测细胞凋亡;荧光探针CM-H2-DCF-DA标记细胞检测活性氧（ROS）水平;Western印迹检测足细胞p38-MAPK活性。结果：高糖促进足细胞ROS的产生并引起足细胞凋亡,AS-IV明显抑制高糖诱导的ROS的产生及足细胞凋亡,且呈剂量依赖关系。此外,高糖激活p38-MAPK信号通路,AS-IV呈剂量依赖性抑制p38-MAPK活性。结论： AS-IV能减少高糖所致的足细胞凋亡,其机制可能与AS-IV抗氧化及抑制p38-MAPK活化密切相关。     

黄芩苷对人肺腺癌LTEP-A2细胞的抑制作用及机制研究

目的:研究观察黄芩苷对人肺腺癌LTEP-A2细胞株体外的抑制作用及相关机制。方法:采用不同浓度的黄芩苷干预人肺腺癌LTEP-A2细胞株,用CCK-8方法检测不同时间点不同浓度的黄芩苷对肺癌细胞增殖的抑制程度,接着用细胞划痕试验和Transwell小室侵袭试验观察黄芩苷对肺癌细胞体外迁移、侵袭能力的影响;用Western blot进一步检测黄芩苷干预后肺癌细胞MMP-2、MMP-9、TGF-β的表达的变化。结果:黄芩苷能明显抑制肺癌细胞增殖;能不同程度降低肺癌细胞的迁移、侵袭、体外划痕愈合能力,呈浓度依赖性;黄芩苷能不同程度下调MMP-2、MMP-9表达,其中以高浓度效果明显,中浓度居中,低浓度作用稍弱,与空白对照组比较,组间差异有统计学意义,P0.05;对肺癌细胞TGF-β的表达没有显著影响,与对照组比较,P0.05。结论:黄芩苷能不同程度地降低肺癌增殖迁移侵袭的能力,其机制可能是通过下调MMP-2、MMP-9的表达从而对肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭发挥抑制作用。     

六味地黄汤相关苷类单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的研究

目的：研究六味地黄汤中芍药苷、薯蓣皂苷元、马钱苷、莫诺苷、桃叶珊瑚苷对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法：制备脾淋巴细胞,MTT比色法检测不同浓度5种苷类单体单独作用及其与丝裂原（ConA、LPS）共同作用时对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果：10-5M芍药苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-6M芍药苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）;薯蓣皂苷元有一定促进淋巴细胞增殖作用,但与对照组比较无显著性差异;10-7～10-5M马钱苷能显著促进淋巴细胞增殖,10-7M马钱苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有显著协同作用,随剂量增加,增殖作用反而降低;10-7～10-5M莫诺苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。10-7～10-5M桃叶珊瑚苷基本无促进淋巴细胞增殖作用1,0-5M桃叶珊瑚苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-5M桃叶珊瑚苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）。结论：六味地黄汤中5种苷类单体对T、B淋巴细胞均有不同程度增殖作用,莫诺苷作用最明显,马钱苷低剂量促进增殖,高剂量反而抑制。     

红景天苷通过ERK/HIF-1α通路介导Warburg效应抗胆囊癌的机制研究

目的：以人胆囊癌细胞作为研究对象,探索红景天苷对胆囊癌细胞生物学行为的影响及其抗肿瘤的分子机制。方法：用CCK-8法检测不同浓度红景天苷(20、40、80μmol/L)对胆囊癌细胞活力的影响,试剂盒检测细胞葡萄糖摄取率和乳酸生成量,划痕实验和Transwall小室法检测红景天苷对胆囊癌细胞迁移和侵袭的影响,RT-qPCR和Western Blot技术研究红景天苷抗胆囊癌的分子机制。结果：与对照组比较,红景天苷20、40、80μmol/L组胆囊癌细胞的活力、迁移和侵袭能力显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高,N-cadherin、Vimentin、HIF-1α蛋白表达及p-ERK1/2/ERK1/2水平显著降低,红景天苷40、80μmol/L组葡萄糖摄取率、乳酸生成量及GLUT1、LDHA mRNA表达显著降低。结论：红景天苷可抑制胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与介导糖酵解效应和ERK/HIF-1α通路有关。     

糖肾平含药血清对高糖诱导肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK 信号通路影响的研究

目的：探讨糖肾平含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK信号通路的影响。方法：制备鼠含药血清;培养肾小管上皮细胞分为：正常组,高糖组,抑制剂（Y27632）组,厄贝沙坦组,糖肾平低、中、高剂量组,3000细胞/孔种于96孔板,每组8个复孔,12、24、48、60 h观察细胞,MTT法检测细胞增殖。Western blotting检测肾小管上皮细胞中RhoA、ROCK1、α-SMA和E-Cadherin蛋白的表达。结果：高糖诱导后细胞呈梭型或不规则三角形;含药血清干预后,细胞呈扁平不规则多角形。MTT：12 h,与正常组比,各组OD值升高;24、48、60 h,与正常组比,高糖组OD值显著升高（P<0.01）;与高糖组比,各治疗组OD值有不同程度降低（P<0.05）,48 h,与Y27632组、厄贝沙坦组和糖肾平高剂量组比,糖肾平低、中剂量组OD值降低（P<0.05）;60 h,与Y27632组比,糖肾平中剂量组降低;与厄贝沙坦组比,糖肾平各剂量组OD值降低（P<0.05）;与糖肾平高剂量组比,糖肾平低剂量组升高（P<0.05）。Western blotting,与正常组比,高糖组E-Cadherin蛋白表达减少,RhoA、ROCK1和α-SMA蛋白表达增加（P<0.01）;与高糖组比,各组E-Cadherin蛋白表达增加,RhoA、ROCK1和α-SMA蛋白表达减少,高剂量组有显著差异（P＜0.01）;与Y27632组比,糖肾平高剂量组ROCK1、E-Cadherin和α-SMA蛋白表达无统计学差异（P＞0.05）,RhoA蛋白表达减少（P＜0.01）;与厄贝沙坦组比,糖肾平高剂量组RhoA、ROCK1、E-Cadherin和α-SMA蛋白表达无统计学差异（P＞0.05）。结论：糖肾平通过抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖和RhoA/ROCK信号通路相关分子的表达,从而逆转上皮-间质转分化,抑制肾间质纤维化,延缓糖尿病肾病病情进展。     

淫羊藿苷对高糖诱导内皮细胞衰老的干预作用

目的:观察淫羊藿苷对高糖环境下内皮细胞衰老的影响及可能的作用机制研究。方法:人脐静脉内皮细胞分别培养在正常糖浓度(5.5 mmol/L),高糖浓度(33 mmol/L),高糖+淫羊藿苷低剂量及高糖+淫羊藿苷高剂量组中,药物干预48 h后,β半乳糖苷酶染色测定细胞衰老,流式细胞术检测细胞周期,NO检测试剂盒检测细胞培养上清中NO水平,Westernblot检测培养细胞PI3K,Akt蛋白表达水平。结果:与正常糖浓度组比较,高糖浓度组衰老细胞的阳性率明显增高,G0/G1期细胞比率增加,S期显著减少,细胞培养上清中NO水平减少,PI3K和磷酸化Akt蛋白水平降低。而淫羊藿苷能够明显降低高糖环境下衰老细胞阳性率,增加S期细胞比率,提高培养上清中NO水平,同时能够提高高糖环境下内皮细胞PI3K和磷酸化Akt蛋白表达水平。结论:淫羊藿苷能延缓高糖诱导的内皮细胞衰老进程,提高内皮细胞功能,其作用机制可能与调节高糖环境下内皮细胞PI3k/Akt通路有关。     

斑蝥素酸镁通过ERK1/2信号通路对肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨斑蝥素酸镁抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖及其裸鼠皮下移植瘤生长的作用。方法 体内外实验随机分为空白对照组、斑蝥素酸镁组、ERK1/2激动剂组(EGF组)、ERK1/2抑制剂组(SCH772984组)、斑蝥素酸镁+EGF组、斑蝥素酸镁+SCH772984组。CCK-8法、流式细胞术分别检测各组细胞增殖、周期及凋亡变化,Western blot法检测各组细胞周期蛋白(Cdc25C、Cdc2、p-Cdc2)、ERK1/2蛋白磷酸化表达及凋亡蛋白(Bad、cleaved caspase-3和Bcl-2)表达;观察各组裸鼠皮下移植瘤的生长及质量变化,Western blot法检测裸鼠移植瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达及裸鼠移植瘤组织ERK1/2蛋白磷酸化表达。结果 斑蝥素酸镁+EGF组、斑蝥素酸镁+SCH772984组SMMC-7721细胞增殖率、p-ERK1/2、Cdc25C、Cdc2、Bcl-2蛋白表达分别低于EGF组、SCH772984组(P<0.01),而G₂/M期细胞比例、凋亡率、p-Cdc2、Bad、cleaved caspase-...     

KISS-I/MMP-9对子宫内膜异位症的表达及意义研究

目的:通过检测KISS-I及MMP-9在EMs患者增生期与分泌期子宫内膜中的表达及对比研究,探讨其临床意义及两者相关性。方法:通过免疫组化和图像分析法对KISS-I、MMP-9蛋白在EMs患者的ECE组(48例)、匹配的EUE组(30例)以及CE组(27例)中的表达进行定位和半定量分析。结果:①KISS-I、MMP-9在ECE组、EUE组以及CE组子宫内膜组织中表达清楚;②MMP-9表达顺序为:ECE组>EUE组>CE组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。三组表达强度在不同的月经周期中无统计学差异(P>0.05);KISS-I表达顺序为:CE组>EUE组>ECE组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:KISS-I及MMP-9在EUE、ECE以及CE均有表达,且表达存在差异性,可能共同参与EMs患者发病过程中子宫内膜异位侵袭、种植的过程。     

糖肾宁对高糖诱导的足细胞损伤模型Rho/ROCK通路的影响

目的：基于Rho/ROCK信号通路研究中药糖肾宁对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。方法：高糖培养足细胞,以不同药物分组干预足细胞24 h,用罗丹明染色的鬼笔环肽法检测足细胞骨架,细胞免疫荧光检测足细胞标志蛋白Nephrin,Western Blotting检测RhoA、ROCK1、Nephrin蛋白的表达。比较不同药物或药物浓度对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。结果：糖肾宁可改善足细胞骨架结构,下调高糖诱导的足细胞损伤模型中异常升高的RhoA和ROCK1蛋白表达,上调Nephrin表达。结论：中药糖肾宁可抑制高糖诱导的足细胞损伤模型RhoA/ROCK1信号通路,减轻足细胞骨架重构,改善足细胞损伤。     

桂竹糖芥苷对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:考察桂竹糖芥苷对血管平滑肌细胞增殖的影响。方法:应用80%乙醇回流提取,正己烷萃取,MCI柱层析甲醇洗脱获得桂竹糖芥苷。采用体外培养的血管平滑肌细胞,检测细胞增殖、细胞内钙和c-myc基因的mRNA表达,并与哇巴因、地高辛进行比较。结果:(1)桂竹糖芥苷浓度在10-5mg·mL-1时具有促血管平滑肌细胞增殖作用;哇巴因和地高辛浓度分别在10-14和10-9mg·mL-1时具有促血管平滑肌细胞增殖作用,最大增殖率分别为49.08%和51.05%。(2)桂竹糖芥苷浓度在10-3mg·mL-1时可暂短升高细胞内钙;哇巴因浓度在10-4mg·mL-1时可持久升高细胞内钙。(3)桂竹糖芥苷浓度在10-8mg·mL-1时对c-myc mRNA表达没有影响;哇巴因和地高辛浓度在10-12mg.mL-1时可增加c-myc mRNA表达。结论:与哇巴因和地高辛相比,桂竹糖芥苷对血管平滑肌细胞增殖的影响较小。     

何首乌总苷对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块部位MMP-9蛋白表达的影响

急性冠脉综合征(ACS) 是一组由急性心肌缺血引起的临床综合征,病理基础为冠状动脉粥样硬化不稳定(As)斑块破裂(rupture)或糜烂(erosion)[1],引起继发完全或不完全闭塞性血栓形成的一组临床综合征,而斑块中胶原含量,特别是覆盖斑块脂质坏死核心的纤维帽中胶原含量[2]对斑块稳定起重要作用.     

金丝桃苷对高糖诱导视网膜周细胞损伤的保护作用

目的 探讨金丝桃苷对高糖诱导视网膜周细胞（RPCs）损伤的保护作用，并对其可能机制做出初步探索。方法 将RPCs正常培养传代后接种至细胞培养板，按不同处理分为5组：正常葡萄糖（NG）组（葡萄糖5 mmol/L）、高糖（HG）组（葡萄糖20 mmol/L）、甘露醇（MT）组（葡萄糖5 mmol/L、渗透压20 mmol/L）、高糖+低浓度金丝桃苷（HG+L-HY）组（葡萄糖20 mmol/L、金丝桃苷100μg/mL）、高糖+高浓度金丝桃苷（HG+H-HY）组（葡萄糖20 mmol/L、金丝桃苷400μg/mL）。培育相应时间后，CCK-8法检测各组RPCs活性，Annexin V/PI及TUNEL法检测RPCs凋亡率，Real-time PCR及Western Blot法检测RPCs中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)、Gasdermin-D蛋白-N(GSDMD-N)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-18(IL-18)mRNA及蛋白表达水平。结果 与NG组比较，HG组RPCs活性降低，凋亡率升高（P<0.01）,NLRP3、c...     

糖肾一号胶囊对早期糖尿病肾病血清MMP-9及TIMP-1水平影响

目的:观察糖肾一号胶囊对早期糖尿病肾病患者(气阴两虚瘀血内阻型)血清MMP-9及THMP-1水平、尿微量白蛋白影响,以探讨其作用机理.方法:选择60例患者,随机分为两组,对照组予以常规西医治疗;治疗组在常规治疗的基础上口服糖肾一号胶囊(生黄芪30 g,熟地12 g,山药15 g,山萸肉12 g,泽泻15 g,茯苓15 ...     

积雪草苷对足细胞α-actinin-4、synaptopodin蛋白及ERK/JNK通路的影响

目的:探讨积雪草苷对阿霉素诱导的足细胞中α-actinin-4、synaptopodin蛋白及ERK/JNK通路的影响.方法:1)MTT法检测积雪草苷对足细胞及阿霉素诱导的足细胞活力的影响.2)选用1μmol/L阿霉素制造足细胞损伤模型,蛋白印迹法(Western blotting)检测足细胞α-actinin-4、s...     

黄芪甲苷抑制IKK/NF-κB炎症通路减轻高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤

[目的]观察黄芪甲苷减轻高糖诱导H9c2细胞损伤的作用机制。[方法]通过高糖孵育诱导H9c2心肌细胞损伤模型,MTT法测定细胞存活率,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,蛋白印迹(Western Blot)法检测细胞内IκB激酶β(IKK-β)、核转录因子κB(NF-κB)、p-NF-κB及TNF-α蛋白表达水平。[结果]给予高糖处理H9c2心肌细胞12 h能明显下调细胞存活率(P0.05);黄芪甲苷(20、40、80μmol/L)预处理10 min可呈剂量依赖性增强细胞活力,降低细胞培养液上清中TNF-α和IL-6的含量(P0.05),下调IKK-β蛋白表达(P0.05),抑制NF-κB磷酸活化水平(P0.05),并降低TNF-α蛋白表达(P0.05)。[结论]黄芪甲苷可通过抑制IKK/NF-κB炎症通路过度激活减轻高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤。     

白芍总苷对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用研究

目的:探究白芍总苷对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:选择人胰腺癌细胞ASPC-1细胞,采用CCK8检测不同浓度白芍总苷的细胞毒性,选择合适的浓度将ASPC-1细胞分为白芍总苷低剂量组、白芍总苷中剂量组和白芍总苷高剂量组,另外将正常培养、不做任何处理的细胞作为空白对照组.采用CCK8和平板克隆实验检测各组细胞的增...     

三七总苷对急性心肌梗死再灌注病人血清MMP-9表达的影响

再灌注挽救了无数急性心肌梗死患者的生命。但再灌注后出现的一系列并发症,如再灌注心肌损伤、心律失常、无复流以及再狭窄均与血管内皮的损伤和细胞异常增殖关系密切。而基质金属蛋白酶(MMP-9)的表达与上述病理过程密切相关。三七总苷是传统中药三七的有效成分,本研究通过血清MMP-9表达的变化来证实三七总苷对急性心肌梗死再灌注的保护作用。1材料和方法1.1研究对象和分组方法选自2004年3月至2006年11月在本院心血管内科住院患....