香丹注射液和清开灵注射液联合用药对急性炎症血栓模型大鼠脏器的保护作用

目的 基于血栓变化、炎性指标、脏器功能和病理改变等考察香丹注射液（Xiangdan injection,XDI）和清开灵注射液（Qingkailing injection, QKLI）联合用药在炎症血栓动物模型的治疗上是否具有协同增效作用。方法 100只雄性SD大鼠,根据体质量随机分为正常组,炎症血栓模型组,XDI组（2.5,5 mL·kg^-1）,QKLI组（5,10 mL·kg^-1）,XDI+QKLI组［（2.5+5） mL·kg^-1,（2.5+10） mL·kg^-1,（5+5） mL·kg^-1,（5+10） mL·kg^-1,每组10只大鼠。各组均腹腔注射给与相应注射液,每天1次,共4 d,正常组和模型组注射生理盐水。给药第2天,除正常组外,其余各组大鼠均造模,即先采用25 mg·kg^-1角叉菜胶腹腔注射入大鼠体内,16 h后大鼠再尾静脉注射50 μg·kg^-1脂多糖（LPS）。注射LPS 24 h后,各组大鼠测定肝脏指数、肾脏指数,测定血小板（PLT）数量,测量血栓长度,全自动生化分析仪测定各项肝肾功能天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,丙氨酸氨基转移酶（ALT）,碱性磷酸酶（ALP）,肌酐（Crea）及尿素氮（BUN）,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测炎性因子白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,苏木素-伊红（HE）染色观察心、肝、肺、肾脏组织病理学变化,以及观察脏器病变分级情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠PLT数量显著下降,大鼠尾部血栓长度显著增加,肝脏指数显著升高,肝肾功能ALT,ALP,BUN含量明显升高,IL-6和TNF-α含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,肝、肺、肾脏组织出现明显病理损伤（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,XDI 5 mL·kg^-1组明显降低大鼠血清ALT和ALP含量（P<0.05,P<0.01）,QKLI 5,10 mL·kg^-1组大鼠血清ALT,ALP和TNF-α含量明显下降（P<0.05,P<0.01）,XDI 5 mL·kg^-1和QKLI 10 mL·kg^-1单独用药均对LPS引起的肺脏病变损伤有明显减轻作用（P<0.05）;XDI和QKLI合用后,明显降低大鼠的ALT,AST,ALP和TNF-α含量,尤其是XDI和QKLI合用（5+10） mL·kg^-1组效果最为明显（P<0.05,P<0.01）,并且大鼠尾部血栓长度明显缩短（P<0.05）,肺脏病变程度也减轻（P<0.05）。与部分相同剂量XDI或QKLI单用组比较,两药合用后,大鼠血清ALT,BUN,TNF-α含量和肝脏指数都明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 XDI和QKLI单独用药对炎症血栓模型大鼠的脏器功能和器质损害及炎症反应有一定改善作用和抑制作用。两者合用后相对其单独用药,对于减少静脉血栓长度,改善肝肾功能,降低炎性因子,保护肺、肝、肾等脏器结构都有一定协同增效作用。     

酸枣仁汤通过抑制神经炎症和改善神经营养水平促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生＊

目的 观察酸枣仁汤对APP/PS1痴呆小鼠海马促炎性因子和神经营养因子的影响，并探讨其改善神经发生的可能机制。方法 32只APP/PS1小鼠随机分为模型组（Model，20 mL·kg^-1）、多奈哌齐组（Donepezil，0.92 mg·kg^-1）、酸枣仁汤低剂量组（L-SZRD，12.96 g·kg^-1）和酸枣仁汤高剂量组（H-SZRD， 25.92 g·kg^-1），8只相同月龄和相同品系的C57BL/6JNju小鼠设为空白组（Control，20 mL·kg^-1）。灌胃30天后，采用HE染色观察小鼠海马病理形态变化，采用免疫荧光（IF）对小鼠海马中5-溴脱氧尿苷（BrdU）、肾上腺皮质激素（DCX）、神经元核抗原（NeuN）进行标记，采用免疫印迹（Western blot）检测各组小鼠海马中肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6，IL-6）、c-fos、表皮细胞生长因子（Epidermal growth factor，EGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、脑源性神经营养因子（Brain derived neurotrophic factor，BDNF）的蛋白表达水平。结果 Control组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列整齐，细胞染色均匀，细胞数量较多且细胞连接紧密。Model组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列欠整齐，细胞核固缩明显，细胞数量明显减少。Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列稍整齐，细胞核固缩减少，细胞数量有所增加。与Control组比较，Model组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数明显减少（P < 0.01），与Model组比较，Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数增加（P < 0.01，P < 0.05）。与Control组比较，Model组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平明显升高（P < 0.01），而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平明显下降（P < 0.01），与Model组比较，Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平降低（P < 0.01，P < 0.05），而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平升高（P < 0.01，P < 0.05）。结论 酸枣仁汤可通过抑制神经炎症和改善神经营养促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生。     

龙胆苦苷通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻小鼠急性肝损伤的作用

目的 探究龙胆苦苷（GPS）对四氯化碳（CCl₄）诱导的急性肝损伤小鼠模型是否有保肝疗效及其对Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。方法 将60只小鼠随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、水飞蓟素（150 mg·kg^-1）组及GPS高、中、低剂量组（200,100,50 mg·kg^-1）。给药组的小鼠按10 mL·kg^-1灌胃处理,正常组和模型组灌胃相同量的蒸馏水,每天1次,连续灌胃给药10 d后,除正常组腹腔注射花生油（10 mL·kg^-1）,其余各组腹腔注射0.12% CCl₄花生油（10 mL·kg^-1）溶液建立小鼠急性肝损伤模型。腹腔注射后禁食16 h,摘除小鼠眼球取血,收集肝脏组织。苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理学改变。生化法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,总胆红素（TBIL）,碱性磷酸酶（ALP）,总超氧化物歧化酶（T-SOD）,γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）的水平,肝组织中丙二醛（MDA）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠肝脏组织中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）测定肝脏组织中TLR4,MyD88,NF-κB蛋白表达情况;免疫组化检测磷酸化NF-κB（p-NF-κB）的表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠的ALT,AST,ALP,TBIL,γ-GT及MDA水平显著升高（P<0.01）,T-SOD,GSH-Px活性显著降低（P<0.01）;与模型组比较,GPS中、高剂量组小鼠的ALT,AST,ALP,TBIL,γ-GT及MDA水平降低（P<0.05,P<0.01）,T-SOD、GSH-Px活性明显上升（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组小鼠肝组织中TNF-α,IL-1β,IL-6含量显著升高（P<0.01）,TLR4,MyD88,p-NF-κB蛋白表达显著上升（P<0.01）;与模型组比较,GPS中、高剂量组小鼠肝组织中TNF-α,IL-1β,IL-6含量明显降低（P<0.05,P<0.01）,TLR4,MyD88,p-NF-κB蛋白表达明显下调（P<0.05,P<0.01）。结论 GPS对CCl₄引起的急性肝损伤小鼠具有一定的保肝效果,其作用机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及减弱氧化应激反应相关。     

基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路探讨葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性肝损伤小鼠抗氧化应激的作用机制

目的 观察葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性肝病的改善作用,为临床用药提供科学依据,并为开展其他酒精性相关疾病的研究提供思路和借鉴。方法 采用一次性灌胃给予56%（V/V）红星二锅头酒（12 mL·kg^-1）建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,120只雄性ICR小鼠按体质量随机分成空白组、模型组、水飞蓟宾组、葛花组、枳椇子组、葛花-枳椇子1∶1组、葛花-枳椇子1∶2组、葛花-枳椇子2∶1组,每组15只。各给药组按10 mL·kg^-1预防性灌胃相应药物3 d,除空白组外,其余各组小鼠按12 mL·kg^-1分别灌胃给予二锅头酒,于酒后12 h处死小鼠,并观察药物对小鼠肝功能、抗氧化应激能力的影响;苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏病理变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）/核因子E₂相关因子2（Nrf2）/抗氧化响应元件（ARE）信号通路相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测相关各指标mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）水平,肝组织中丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）含量显著升高（P<0.01）;谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性显著降低（P<0.01）,Keap1 mRNA及蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）,Nrf2 mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,葛花-枳椇子2∶1组小鼠ALT、AST和ALP水平显著减低（P<0.01）,肝脏组织中MDA、ROS水平均显著减低（P<0.01）,GSH、SOD水平均显著升高（P<0.01）;肝脏脂肪变损伤均减轻,显著上调Nrf2 mRNA及蛋白表达（P<0.01）,显著下调Keap1 mRNA及蛋白表达（P<0.01）。结论 葛花、枳椇子及其配伍组合对小鼠急性酒精性肝损伤有一定的预防作用,其机制可能与调控肝脏内Keap1/Nrf2/ARE信号通路,恢复并上调由乙醇所破坏的肝脏氧化平衡有关,从而有效遏制酒精性肝病的发展。     

基于“方证对应”理论探讨主动脉弓缩窄致心力衰竭大鼠模型的中医证型与代谢标志物

目的 观察3种中药注射液对主动脉弓缩窄（TAC）致心力衰竭大鼠模型的疗效差异，基于“方证对应”理论探讨模型的中医证型，从代谢角度揭示方证的生物学基础。方法 对大鼠进行TAC术，造模成功将其后分为模型组、丹红注射液组（6.0 mL·kg^-1）、参麦注射液组（6.0 mL·kg^-1）、参附注射液组（6.0 mL·kg^-1）和曲美他嗪组（10 mg·kg^-1），另设立假手术组作对照。药物干预15 d后，对各组进行超声心动图、血清氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）与心肌组织病理染色检测，对比疗效以遴选有效注射液；运用比色法检测有效注射液干预后的血清糖脂代谢指标，利用超高效液相色谱-质谱法观察心肌组织代谢产物与关联代谢通路。结果 与假手术组比较，模型组左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（FS）显著下降（P<0.01），左室舒张末期内径（LVIDd）、左室收缩末期内径（LVIDs）和NT-proBNP水平显著上升（P<0.01）。与模型组比较，丹红注射液组LVEF和FS显著上升（P<0.01），LVIDd、LVIDs、NT-proBNP水平明显下降（P<0.05，P<0.01）；参附注射液组的NT-proBNP水平明显下降（P<0.05）；参麦注射液组的LVIDd明显上升（P<0.05），NT-proBNP水平显著上升（P<0.01）；曲美他嗪组LVEF和FS显著上升（P<0.01），LVIDs和NT-proBNP水平明显下降（P<0.05，P<0.01）。丹红注射液组与曲美他嗪组的血清葡萄糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平明显回调（P<0.05，P<0.01）；丹红注射液组的9种心肌产物回调，涉及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢，乙醛酸和二羧酸酯代谢，甘油磷脂代谢；曲美他嗪组的10种心肌产物回调，涉及甘油磷脂代谢。结论 丹红注射液对TAC致心力衰竭模型的疗效显著且优于参附注射液与参麦注射液，推测该模型与心血瘀阻证密切关联；丹红注射液干预模型的生物学机制涉及调节糖脂代谢、氨基酸代谢、丁酸代谢紊乱。     

基于转录组学的补骨脂酚致小鼠肝损伤种属差异

目的 探究补骨脂酚在Institute of Cancer Research（ICR）小鼠和昆明（KM）小鼠不同种属之间的肝毒性应答差异。方法 通过急性毒性和亚急性毒性动物实验证实补骨脂酚致小鼠肝毒性的客观表现,运用转录组学比较正常ICR小鼠和KM小鼠2种不同种属小鼠间的差异基因富集通路,在此基础上采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）验证相关通路上关键基因的mRNA表达证实补骨脂酚致肝损伤的种属差异。结果 补骨脂酚亚急性毒性实验,与正常组比较,ICR小鼠血清碱性磷酸酶（ALP）,5′-核苷酸酶（5′-NT）含量均有不同程度升高,差异无统计学意义,KM小鼠无明显变化;病理结果显示ICR小鼠以肝细胞肥大为主要病理特征,KM小鼠主要表现为肝细胞脂肪变性。补骨脂酚急性毒性实验,给药3 d,KM小鼠出现竖毛,精神萎靡,濒死,ICR小鼠无明显毒性表现。与正常组比较,KM小鼠（400 mg·kg^-1）血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）显著升高（P<0.01）,肝脏总活性氧（SOD）酶活力显著降低（P<0.01）;ICR小鼠（400 mg·kg^-1）血清5′-NT,胆碱酯酶（CHE）含量显著升高（P<0.01）。ICR小鼠肝脑比增加20.34%,KM小鼠增加29.14%（P<0.01）。ICR小鼠肝脏病理主要表现为肝细胞肥大,KM小鼠以局灶性炎症为主,伴肝细胞肥大、肝细胞脂肪变性。转录组学京都基因和基因组数据库（KEGG）通路和Reactome通路富集分析,发现ICR小鼠和KM小鼠不同种属间差异基因表达主要涉及氧化磷酸化、胆汁分泌、胆汁酸及胆汁酸盐合成和代谢通路。与正常组比较,细胞色素P450家族成员7A1（CYP7A1）在各给药组均显著上调（P<0.01）,多耐药相关蛋白（MRP2）在KM小鼠各给药组均显著降低（P<0.01）,在ICR小鼠各给药组显著升高（P<0.01）;胆汁酸盐输出泵（BSEP）在ICR小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组明显降低（P<0.05）;SHP1在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组高表达,法尼醇X受体（FXR）在ICR小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）;SOD1,过氧化氢酶（CAT）,核转录因子E₂相关因子2（NFR2）在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）,CAT在KM小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）;谷胱甘肽巯基转移酶1（GSTA1）,谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著增强（P<0.01）,SOD1,CAT,NRF2,GSTA1在ICR小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著升高（P<0.01）,CAT,NRF2在ICR小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著升高（P<0.01）。结论 随着补骨脂酚给药剂量增加,KM小鼠氧化应激所致肝损伤逐渐加重;ICR小鼠表现出更强的抗氧化能力。通过比较2种小鼠对补骨脂酚的毒性应答反应,关于研究补骨脂酚所致小鼠肝脏肝毒性机制,ICR小鼠更适合研究胆汁分泌及胆汁酸代谢相关的机制,KM小鼠更易受氧化应激的影响而发生肝损伤。     

连翘酯苷A对化疗模型小鼠胃肠动力障碍的改善作用

目的 观察连翘酯苷A对化疗小鼠胃肠动力障碍的影响，并探讨其调节胃肠动力的作用机制。方法 将60只KM小鼠随机分为正常组、模型组、甲氧氯普胺组（5 mg·kg^-1）及连翘酯苷A低、中、高剂量组（30，60，120 mg·kg^-1），每组10只，雌雄各半。各组分别灌胃给药，灌胃容积均为10 mL·kg^-1，每日1次，连续4 d。灌胃第1天1 h后，除正常组腹腔注射等量生理盐水外，其余各组均腹腔注射顺铂2 mg·kg^-1，连续4 d。观察连翘酯苷A对模型小鼠胃排空和小肠推进的影响；采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清中胃泌素（GAS），生长抑素（SS），胃动素（MTL），血管活性肠肽（VIP）水平，检测胃窦和回肠组织中乙酰胆碱酯酶（AChE）和总一氧化氮合酶（tNOS）的活性；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胃窦和回肠组织AChE和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组小鼠胃残留率和小肠推进率均显著升高（P<0.01），血清MTL，GAS，SS，VIP含量均明显降低（P<0.05，P<0.01），回肠组织匀浆中AChE活性显著降低（P<0.01），胃窦和回肠组织中tNOS活性均明显升高（P<0.05，P<0.01），胃窦和回肠组织中AChE蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），iNOS蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）；与模型组比较，不同剂量连翘酯苷A可以不同程度地降低小鼠胃残留率和小肠推进率，升高血清MTL，GAS，SS，VIP含量，升高胃窦和回肠组织中AChE活性及蛋白表达水平，降低胃窦和回肠组织中tNOS活性和iNOS蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）。结论 连翘酯苷A对顺铂所致的小鼠胃排空延缓和小肠推进亢进具有显著改善作用，其改善化疗所致胃肠功能障碍的机制与调节胃肠道AChE与NOS活性以及调节胃肠激素水平有关。     

三仁汤对肝纤维化模型大鼠血清炎症因子及血小板衍生生长因子的影响※

目的 观察三仁汤对肝纤维化模型大鼠血清中炎症因子及血小板衍生生长因子的影响。方法 将48只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组（给药剂量为1.0×10^-4 g·kg^-1）以及三仁汤低、中、高剂量组（给药剂量分别为4.1 g·kg^-1、8.2 g·kg^-1、16.4 g·kg^-1）,每组8只。除空白组外,其他组均采用每周前2 d以1.6 mL·kg^-1的0.5%二甲基亚硝胺腹腔注射来建立大鼠肝纤维化模型,在造模的同时,除空白组及模型组给予生理盐水灌胃外,其他组分别予相应药物灌胃给药干预,持续时间为4 w。HE染色、Masson染色观察肝脏病理改变情况,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、PDGF-BB水平。结果 与模型组比较,秋水仙碱组与三仁汤低、中、高剂量组肝脏炎症浸润呈现不同程度减少,肝细胞结构形态相对正常,肝细胞变性坏死减轻,肝纤维结缔组织减少,胶原纤维组织缩小。与模型组比较,三仁汤中、低剂量组及秋水仙碱组大鼠的肝重显著升高（P<0.001或P<0.01）;秋水仙碱组及三仁汤中、低剂量组大鼠的肝体比显著升高（P<0.001或P<0.01或P<0.05）;秋水仙碱组以及三仁汤低、中剂量组的IL-1β水平明显降低（P<0.05）;秋水仙碱组以及三仁汤低、中、高剂量组的IL-6水平显著降低（P<0.05）;三仁汤高剂量组的IL-10水平显著升高（P<0.05）;三仁汤低剂量组的TNF-α水平显著降低（P<0.01）;秋水仙碱组以及三仁汤低、中、高剂量组的PDGF-BB水平亦显著降低（P<0.001或P<0.01）。结论 三仁汤可改善肝脏纤维化程度,其机制可能与调节炎症因子及血小板衍生生长因子水平有关。     

基于消肿定痛功效的三七粉质量标志物研究＊

目的 探究三七粉发挥消肿定痛功效的质量标志物。方法 首先，采用小鼠醋酸扭体实验，将ICR小鼠随机分成模型对照组、阳性对照阿司匹林组（0.12 g·kg^-1）、三七粉低（1.1 g·kg^-1）、中（2.2 g·kg^-1）、高（4.4 g·kg^-1）剂量组、三七总皂苷低（0.25 g·kg^-1）、中（0.5 g·kg^-1）、高（1.0 g·kg^-1）剂量组，连续给药3天每日1次，第3天给药1 h后腹腔注射1%醋酸溶液，记录15 min内扭体次数。进一步采用LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7炎症模型，探讨三七粉中的三七总皂苷及14个代表性单体成分对细胞上清液中NO、TNF-α和IL-6的含量影响。结果 实验表明，与模型组比较，三七粉及三七总皂苷中、高剂量组均能显著减少扭体反应次数（P<0.05，P<0.01）；三七总皂苷及14个化合物均能显著降低细胞上清液中NO、TNF-α、IL-6含量（P<0.05）。结论 三七粉具有良好的抗炎、镇痛作用，其发挥消肿定痛的药效物质基础可能为三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷F2、人参皂苷Rk1、槲皮素、三七素。     

肥胖与抑郁共病小鼠模型建立及在雷公藤红素药效药理研究中的应用

目的 拟建立一种基于神经炎症的肥胖合并抑郁（COM）小鼠模型，并观察雷公藤红素对COM小鼠的药效作用及初步药理机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为正常组（Chow）、肥胖组（DIO）、肥胖抑郁共病组（COM），COM组采用高脂饮食喂养和潮湿垫料慢性应激12周，建立小鼠肥胖抑郁共病模型。C57BL/6J小鼠随机分为Chow组、COM组、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）敲低组，TNF-α敲低组通过脑立体定位在杏仁核注射TNF-α shRNA腺相关病毒，下调杏仁核中TNF-α表达量。C57BL/6J小鼠随机分为Chow组、DIO组、肥胖+雷公藤红素低剂量组（DIO-0.5 mg·kg^-1）、肥胖+雷公藤红素高剂量组（DIO-1.0 mg·kg^-1）、COM组、共病+雷公藤红素低剂量组（COM-0.5 mg·kg^-1）、共病+红素高剂量组（COM-1.0 mg·kg^-1）。记录体质量、进食量、葡萄糖耐量、白/棕脂率、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高/低密度脂蛋白胆固醇（HDL-C、LDL-C）含量，评估各组小鼠肥胖程度；强迫游泳实验（FST）、悬尾实验（TST）和旷场实验，评估各组小鼠抑郁程度；免疫荧光检测小鼠各个脑神经核团神经肽Y、色氨酸羟化酶2（TPH2）、脑源性神经营养因子（BDNF）等蛋白表达含量；相关性分析检测各组小鼠肥胖和抑郁指标相关性。结果 与Chow和DIO组比较，COM小鼠表现为肥胖和抑郁；肥胖表现为体质量和食物摄入明显增加（P<0.05，P<0.01），中央杏仁核中NPY表达明显增加；抑郁表现为FST和TST中的不动时间显著增加（P<0.01）、中缝背核（DRN）和杏仁核基底外侧核（BLA）中TPH2阳性5-羟色胺能神经元数量明显减少。COM小鼠BLA中TNF-α蛋白的下调能减少FST和TST中的不动时间（P<0.05，P<0.01），明显增加BLA中TPH2/BDNF阳性神经元，肥胖表现没有显著变化。在DIO小鼠中，0.5 mg·kg^-1雷公藤红素给药9 d显著降低葡糖糖耐量60 min血糖（P<0.01）、摄食量（P<0.05）；而COM小鼠中，1.0 mg·kg^-1雷公藤红素需给药14 d以显著降低葡糖糖耐量30 min血糖（P<0.01）、摄食量（P<0.05）和悬尾不动时间（P<0.01），以及能使BLA和DRN中TPH2-BDNF双标细胞数量增加，TMEM119染色的细胞体面积显著减少。结论 在能量环境双重压迫条件下可以成功建立肥胖合并抑郁的小鼠模型；雷公藤红素能有效干预肥胖-抑郁共病，其机制可能与抑制中枢神经炎症有关。     

三因素析因设计分析黄芪有效部位的交互关系

目的:采用2×2×2析因设计分析黄芪有效部位(黄芪黄酮、黄芪多糖、黄芪皂苷)干预失血性贫血模型小鼠的效应机制及其交互关系。方法:将108只小鼠随机分为9组,每组12只。除正常组外,各组小鼠分别于第1,4,7天进行眶静脉放血,放血量为0.5 mL·20 g-1,正常组、模型组ig给予蒸馏水10 mL·kg-1,其余各给药组分别按照0.166,0.445,0.611,0.069,0.235,0.514,0.680 g·kg-1剂量ig黄芪有效部位药物。运用析因设计方差分析方法对外周血红蛋白(Hb)浓度、红细胞(RBC)计数、红细胞压积(Hct)、造血因子等指标进行方差分析。结果:模型组与正常组比较,外周血Hb,RBC,Hct,血清、肾组织促红细胞生成素(EPO),血清特异转录因子(GATA-1),骨髓干细胞因子(SCF)等指标差异均有统计学意义(P<0.05)。黄酮、多糖、皂苷对外周血象作用显著(P<0.05),黄酮与皂苷合用、多糖与皂苷合用效果均优于单一用药;黄酮、多糖对血清EPO浓度,多糖、皂苷对肾组织EPO浓度有影响,以多糖与皂苷的配伍组合效果最佳;黄酮、多糖对血清GATA-1浓度、骨髓SCF浓度有影响,以黄酮作用效果最好。结论:多糖与皂苷配伍是改善失血性贫血小鼠外周血象,提升血清及肾组织EPO浓度的最佳配伍组合;黄酮增加骨髓SCF、血清GATA-1浓度作用最佳。     

补肾解毒活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能影响的比较研究

目的:比较补肾解毒活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠造血功能的影响及其作用机制的不同特点.方法:昆明种小鼠80只,随机分为4组,正常对照组、模型组、补肾解毒活血组(20.55 g·kg -1·d-1)和益气补血组(17.47 g·kg-1·d-1).采用CTX 100 mg·kg-1 ip,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型.各组于造模完成后次日开始ig连续10d.分别于造模前及造模后1,3,5,7,10,14 d动态检测外周血象;于末次给药次日后进行骨髓有核细胞计数(BMNC)及粒-单核系集落形成单位( CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、和红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落计数.结果:补肾解毒活血方和益气补血方均可明显升高模型小鼠的WBC,PLT,BMNC,可促进造血祖细胞(HPC)增殖,CFU-GM,CFU-E,BFU-E集落数均显著高于模型组(P＜0.01);补肾解毒活血方对血小板的恢复优于益气补血方.结论:补肾解毒活血方和益气补血方均可促进骨髓造血祖细胞集落生成,具有减轻和改善化疗后骨髓抑制的效果,而前者尤可减轻血小板减少、促进其恢复;其作用机制可能在骨髓细胞分化过程或造血微环境等途径上有不同.     

基于FGF23-Klotho轴探讨肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠骨骼的保护作用

目的 观察肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠FGF23-Klotho轴的影响，并探讨其对骨骼的保护的可能机制。方法 30只db/db小鼠随机分为模型组（20 mL分为模^-1）、肾元颗粒组（6.0 g粒组模^-1）和厄贝沙坦组（30 mg坦组模^-1），10只同窝野生（wild type, WT）小鼠作为空白组（20 mL为空白^-1），各组小鼠给药容量均为（20 mL给药容^-1）。连续灌胃12周后，采用生化检测仪检测血钙、血磷含量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组血清成纤维化生长因子23 （Fibroblast growth factor 23，FGF23）含量，以及骨骼钙盐含量、骨骼碱性磷酸酶（ALP）活性；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测骨骼骨保护素（osteoprotegerin，OPG）蛋白表达水平；免疫荧光双标检测肾脏Klotho和成纤维化生长因子受体1（Fibroblast growth factor receptor 1，FGFR1）蛋白，并于激光共聚焦下观察拍照。结果 与正常组比，模型组小鼠血钙减少，血磷含量升高（P <0.05），小鼠血FGF23含量显著升高（P < 0.05），小鼠骨骼中钙盐含量减少，ALP活性降低（P < 0.05），小鼠骨骼OPG蛋白表达减少（P < 0.05），小鼠肾脏Klotho和FGFR1免疫荧光双标阳性细胞数显著减少（P < 0.05）；与模型组比，肾元颗粒组小鼠血钙升高，血磷减低（P < 0.05），血FGF23含量降低（P < 0.05），骨骼钙盐含量升高，骨骼ALP活性升高（P < 0.05），骨骼OPG蛋白表达量增加（P < 0.05），肾脏免疫荧光双标阳性细胞数增多（P < 0.05）。结论 肾元颗粒能改善db/db糖尿病肾病小鼠骨质的流失，而其作用机制可能与FGF23-Klotho轴平衡恢复有关。     

当归补血汤不同剂型及配伍对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

 目的本实验通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异。旨在为中药颗粒剂的疗效提供实验室依据。方法本实验用高效液相色谱仪检测了当归补血汤不同制剂中阿魏酸、黄芪甲苷的含量差异;采用造血祖细胞培养术、外周血像计数法、ELISA等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中EPO,TPO,G-CSF的变化进行检测。结果当归补血汤煎剂、颗粒剂能通过平衡骨髓微环境中EPO,TPO,GM-CSF的表达;促进骨髓造血细胞从G_{0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像。结论当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒剂疗效较为突出。}     

三类传统方剂治疗5-氟尿嘧啶所致大鼠贫血的研究

目的:比较四物汤、四君子汤和八珍汤对贫血(血虚证)大鼠的治疗作用和可能机制,初步探索补血、补气和气血双补方剂对中医血虚证型的疗效差异与作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、八珍汤组、四物汤组和四君子汤组(2.3,3.0,1.2 g·m L-1),每组8只。除正常组外,其他4组按大鼠体重150 mg·kg-1尾静脉注射5-氟尿嘧啶(5-FU)造模,观察3种方剂对贫血大鼠的外观体征,脾指数和胸腺指数,血红细胞(RBC),血红蛋白(HGB),血小板(PLT),白细胞(WBC)数量,网织红细胞和骨髓象的影响,并应用RT-PCR技术检测肝肾中促红细胞生成素(EPO)mRNA含量。结果:与正常组比较,模型组脾指数和胸腺指数明显降低,RBC,HGB,PLT,WBC数量明显降低(P0.01),骨髓增殖能力降低,EPO mRNA的表达降低;与模型组比较,八珍汤与四物汤组明显改善贫血大鼠外观、提高脾指数和胸腺指数,升高RBC,HGB,PLT,WBC数量(P0.05,P0.01),提高骨髓增殖能力,并上调EPO mRNA的表达。结论:三方中,气血双补方剂(八珍汤)疗效最好,补血方剂(四物汤)疗效优于单纯补气(四君子汤)组,实验结果为补气、补血、气血双补治疗血虚疾病提供了实验依据,一定程度上说明了临床治疗贫血症(血虚证)辨证施治理论的合理性。     

地榆升白片对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的拮抗作用

目的:观察地榆升白片对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用.方法:Balb/C小鼠24只随机分为空白对照组、模型组、地榆升白片组.腹腔注射环磷酰胺100 mg· kg-1建立骨髓抑制模型,地榆升白片组按100 mg·kg-1灌胃,给药10d.观察地榆升白片对模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞数、骨髓中DNA含量的影响,流式细胞术检测骨髓中各时相细胞周期百分比.结果:模型组小鼠外周血白细胞数、血小板数、骨髓有核细胞数以及骨髓中DNA含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01);骨髓细胞周期中G0/G1期细胞百分比显著增高,G2/M期细胞百分比显著降低(P＜0.05或P＜0.01).地榆升白片可以显著增加模型小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数及骨髓中DNA含量,恢复骨髓中各期细胞百分比(P＜0.05或P＜0.01).结论:地榆升白片对环磷酰胺致骨髓抑制有显著的改善和恢复作用.     

白芍、赤芍及芍药苷、芍药内酯苷对综合放血法致血虚小鼠补血作用的比较研究

目的: 研究白芍、赤芍及其有效成分芍药苷、芍药内酯苷对血虚小鼠的补血作用. 方法: 采用综合放血法复制小鼠血虚模型,灌胃给予白芍水提物、赤芍水提物,检测小鼠外周血象,根据实验结果和白芍、赤芍水提物中芍药苷、芍药内酯苷的含量,进一步采用同一实验方法进行芍药苷、芍药内酯苷补血作用比较研究. 结果: 造模第7天,2 g·kg^-1白芍和2 g·kg^-1赤芍对红细胞和血红蛋白升高作用明显(P<0.01);造模第14天,2 g·kg^-1白芍对红细胞和血红蛋白升高明显(P<0.01),2 g·kg^-1赤芍作用不明显,同剂量组相比,红细胞数和血红蛋白含量差异不显著;造模第7天,120 mg·kg^-1芍药苷、120 mg·kg^-1芍药内酯苷对小鼠红细胞和血红蛋白升高作用明显(P<0.01),60 mg·kg^-1芍药内酯苷、30 mg·kg^-1芍药内酯苷对红细胞和血红蛋白有提升作用(P<0.05);造模第14天,120 mg·kg^-1芍药苷、芍药内酯苷对红细胞、血红蛋白有较好的提升作用,与同剂量组的芍药苷相比,120,30 mg·kg^-1芍药内酯苷的红细胞数升高明显,差异显著(P<0.05);30 mg·kg^-1芍药内酯苷组的血红蛋白含量明显升高,差异显著(P<0.05). 结论: 白芍的补血作用略优于赤芍;芍药内酯苷具有补血作用且补血作用优于芍药苷;白芍有较强的补血作用可能与白芍中含有的芍药内酯苷有关.     

消岩汤对Lewis肺癌小鼠化疗后骨髓抑制的影响

目的通过荷瘤动物实验,从外周血血细胞比例、免疫细胞亚型及细胞因子相关指标等方面研究消岩汤对骨髓抑制的影响。方法 Lewis肺癌细胞接种小鼠,荷瘤小鼠ip环磷酰胺(CTX)100 mg/(kg·d),连续3 d,制备荷瘤小鼠化疗后骨髓抑制模型。成模小鼠随机分为模型组、消岩汤组、吉粒芬组、消岩汤与吉粒芬联用组(联用组),每组10只,另取正常小鼠10只为对照组,消岩汤组ig消岩汤水煎液18.2 g/(kg·d),分2次给药,连用7 d,吉粒芬组sc吉粒芬12μg/kg,连用7 d,联用组为两药合用。观察各组小鼠一般血常规、外周血免疫细胞亚群、血清中白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)、促红细胞生成素(EPO)、粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)的变化。结果与对照组比较,模型组小鼠外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板数量(PLT)降低(P0.05),尤以WBC减少为主(P0.05);模型组CD3+CD8+T、CD4+CD8+T、CD4/CD8明显降低(P0.05);模型组小鼠血清中IL-3、IL-6水平明显降低(P0.05)。与模型组比较,消岩汤组和吉粒芬组WBC数值均增加(P0.05),消岩汤组、联用组CD3+CD8+T、CD4+CD8+T明显提高(P0.05),各组NK细胞比较无显著差异(P0.05),消岩汤组和联用组显著升高小鼠血清中IL-3、IL-6、EPO、GM-CSF水平,吉粒芬组显著升高IL-3、IL-6水平(P0.05)。与吉粒芬组比较,联用组小鼠外周血WBC增加更明显(P0.05),且RBC、PLT增加更显著(P0.05),Treg细胞明显减少(P0.05)。结论消岩汤能改善化疗后骨髓抑制小鼠的外周血象,以及T细胞亚群的免疫功能,改善化疗后骨髓抑制程度,且消岩汤与吉粒芬联用效果更佳,其机制可能与促进小鼠血清造血因子IL-3、IL-6、EPO、GM-CSF的生成,从而缓解化疗导致的骨髓抑制程度有关。     

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??OBJECTIVE To study the blood enriching effect and mechanism of Jiuweiejiao ointment on mouse model of blood deficiency syndrome.METHODS Blood deficiency syndrome model was established with cyclophosphamide(CTX) and acetylphenylhydrazine(APH). Total of 60 ICR mice were divided into normal group, model group, Siwu granule group, Jiuweiejiao ointment high-dose, medium-dose and low-dose group (15.6, 7.8, 3.9 g??kg^-1). Each group mouse were treated with the respective drug through intragastrical administration once a day for consecutive 14 d. The levels of red blood cells (RBC), leukocytes (WBC), hemoglobin (HGB) level in blood of mice were detected by blood analyzer; the histopathological changes of bone marrow were determined by HE staining; the levels of erythropoietin (EPO), interleukin-3 (IL-3), tumor necrosis factor-?? (TNF-??), granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) and granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) in serum were measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method; the expression level of EPO protein in kidney tissue, G-CSF and GM-CSF protein in bone marrow tissue were detected by Western-blot method.RESULTS Compared with model group, Jiuweiejiao ointment could significantly increase the levels of RBC, WBC and HGB in blood of mice, markedly improve bone marrow hyperplasia, reduce the non-hematopoietic tissue and adipocytes, obviously repaire the hematopoietic tissue structure; significantly decrease the level of TNF-?? and increase the level of EPO, IL-3, G-CSF and GM-CSF in serum. In addition, Jiuweiejiao ointment could also obviously increase the expression of EPO protein in kidney tissue and G-CSF, GM-CSF protein in bone marrow tissue compared with that in model group.CONCLUSION Jiuweiejiao ointment has obvious blood enriching effects, which may be related with promoting the secretion of hematopoietic growth factors and reducing the inhibition of hematopoietic function by negative hematopoietic factor.     

三七总皂苷、红景天苷、黄芪有效组分对心肌梗死大鼠模型骨髓间充质干细胞动员作用研究

目的:探讨三七总皂苷、红景天苷、黄芪有效组分对心肌梗死大鼠模型骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)动员作用。方法:选取SPF级SD大鼠,参考Olivette方法建立急性心肌梗死模型,造模成功大鼠随机分为活血组、益气组、益气活血组、模型组和正常组,各组再随机按1,3,7,14,28 d时间点再进行分组。活血组8 mg·kg-1血塞通软胶囊、益气组5 mg·kg-1黄芪颗粒、益气活血组7 mg·kg-1诺迪康胶囊,模型组予生理盐水ig,正常组不给药,正常组和模型组以等量生理盐水ig,1次/d,共28 d。流式细胞仪检测不同时间点血液和骨髓中CD54,CD106,CD105,CD117阳性细胞百分数,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测不同时间点血液和骨髓中干细胞因子(SCF)变化。结果:模型组外周血和骨髓中CD105,CD117,SCF从1 d开始升高,14 d到高峰,其后外周血和骨髓中CD105,CD117,SCF含量降低;活血组、益气活血组、益气组外周血和骨髓中CD105,CD117,SCF含量上升优于模型组(P0.05)。活血组CD105,CD117,SCF上升优于益气活血组、益气组。模型组外周血和骨髓中CD54,CD106在1 d到高峰,其后逐渐降低,活血组外周血中的CD54,CD106降低明显较模型组相比(P0.05)。益气组与模型组相比变化不明显,但活血化瘀方药降低CD54,CD106最明显。结论:三七总皂苷、红景天疳、黄芪有效组分均有动员骨髓间充质干细胞作用,但活血化瘀方药动员效果明显。