HPLC-Q-TOF-MS技术在预知子配方颗粒指纹图谱建立和化学成分归属中的应用

目的 建立预知子配方颗粒的HPLC指纹图谱，并使用Q-TOF-MS技术鉴定共有峰成分。方法 采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×50 mm，2.7 mm），以乙腈-0.05%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长210 nm，柱温30℃，流速0.5 mL·min^-1。采用相似度分析软件对指纹图谱进行分析。以标准物质和文献数据为参照，使用Q-TOF-MS负离子检测模式对特征峰进行质谱分析并指认。结果 建立了预知子配方颗粒的HPLC指纹图谱，以4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸峰为参照峰，标定了14个共有峰，样品间相似度范围为0.943~0.994，样品与对照指纹图谱相似度范围为0.976~0.988。使用Q-TOF-MS对共有峰进行了指认，确定了8个峰成分，分别为新绿原酸、绿原酸、木通苯乙醇苷B、3，4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、川续断皂苷Ⅵ、α-常春藤皂苷。结论 该方法灵敏、准确、可靠，可用于预知子配方颗粒的质量评价。     

槲寄生中黄酮类成分指纹图谱的建立及高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素的定量检测

目的 建立槲寄生黄酮类成分的特征指纹图谱，同时测定槲寄生中高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素的含量，结合化学计量法分析，为其质量控制提供参考。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL·min^-1，检测波长为285 nm，柱温30℃。建立14批槲寄生药材的黄酮类成分指纹图谱，结合化学计量学软件进行聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）。在同一色谱条件下，经方法学验证，HPLC法同时测定14批槲寄生药材中高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素。结果 建立了槲寄生药材黄酮类成分的指纹图谱，标定了7个共有特征峰，指认了其中2个峰：峰4 （高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷）、峰6（高圣草素）；其中12批槲寄生药材相似度达到0.9以上，聚类分析将14批样品分为2类；PCA分析共得到2个主成分，主成分1主要反映了特征峰2～7的信息，主成分2主要反映特征峰1的信息，峰4与峰6的峰面积较大，且对第1主成分的贡献也较大；PLS-DA结果表明，3个共有特征峰的变量重要性投影（VIP）值＞1，依次为峰7、峰6、峰4。高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、高圣草素2个指标成分在一定质量浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率分别为103.17%、101.47%，RSD分别为2.0%、0.7%，方法学考察结果均符合相关要求，14批样品中2种成分总质量分数为2.32～5.17 mg·g^-1。结论 建立的方法准确、简便、重现性好，可为槲寄生药材的质量控制提供参考。     

基于HPLC-ELSD指纹图谱与化学计量学相结合的舒眠胶囊质量评价

目的 建立舒眠胶囊HPLC-ELSD指纹图谱与化学计量学相结合，全面、系统评价舒眠胶囊质量的方法。方法 采用ACE Excel AR C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5.0 μm），流动相为乙腈-水，梯度洗脱，柱温30℃，流速为1.0 mL·min^-1，ELSD漂移管温度50℃，N₂流速为3.0 mL·min^-1。用HPLC-ELSD对15批次舒眠胶囊进行分析，建立指纹图谱共有模式，采用聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA）等化学计量学方法进行区分与比较，寻找导致不同批次间差异的主要标志性成分。结果 共确定了16个共有峰，归属了10个共有峰的药材来源，通过对照品比对指认了4个共有峰归属，分别为柴胡皂苷a、芍药内酯苷、芍药苷、槲皮苷，样品相似度均>0.90，CA将样品分为3类，PCA筛选出不同批次间差异的主要标记物，分别为3（芍药苷），14，15号峰。结论 本研究建立的HPLC-ELSD指纹图谱与HPLC-DAD指纹图谱相结合能对舒眠胶囊产品一致性、稳定性进行全面有效评价，可用于舒眠胶囊的质量综合评价。     

畲药食凉茶HPLC特征图谱和4种成分含量测定

目的 采用HPLC建立畲药食凉茶的特征图谱,并同时测定4种成分的含量。方法 以芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山柰素为对照品;采用Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,柱温30 ℃;乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1;检测波长360 nm。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对结果进行分析。结果 建立了食凉茶的特征图谱,确定5个共有峰。芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山柰素的线性范围分别为4.525~452.8 μg·mL^-1（r=0.999 9）,8.096~809.6 μg·mL^-1（r=1.000 0）,0.654~85.15 μg·mL^-1（r=1.000 0）,2.048~ 136.6 μg·mL^-1 （r=1.000 0）;平均加样回收率分别为100.51%（n=6,RSD=0.43%）,100.19%（n=6,RSD=0.88%）,99.98%（n=6,RSD=0.77%）,100.26%（n=6,RSD=0.69%）。结论 所建立的特征图谱相关性强,可结合4种成分含量测定全面控制畲药食凉茶的质量,为其规范使用提供科学依据。     

畲药降脂轻身茶的HPLC特征图谱及4个成分含量测定

目的 采用HPLC建立畲药降脂轻身茶的特征图谱,并同时测定4种成分的含量。方法 以绿原酸、芦丁、异槲皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷为对照品;采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液,线性梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长为360 nm,柱温为40℃。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对结果进行分析。结果 绿原酸、芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O芸香糖苷分别在0.072 6~0.726,0.076 3~0.763,0.071~0.71,0.113 1~1.131 μg内呈良好的线性关系,相关系数均≥ 0.999 6;平均加样回收率分别为96.15%,95.62%,95.28%,95.76%。结论 所建立的特征图谱相关性强,可结合4种成分含量测定全面控制畲药降脂轻身茶的质量。     

指纹图谱结合多成分含量测定的猪苓配方颗粒质量评价

目的 建立猪苓配方颗粒质量评价方法,综合评价不同厂家产品质量均一性和稳定性。方法 采用HPLC以Shim-pack GIST C₁₈-AQ （4.6 mm×150 mm,3 μm）为色谱柱,乙腈-水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^–1,检测波长为350 nm （0~3 min）和250 nm （3~35 min）,柱温30℃,构建不同厂家猪苓配方颗粒指纹图谱,指认共有峰,并进行相似度评价、聚类分析;采用相同HPLC测定4种活性成分含量,对16批样品进行质量分析和评价。结果 猪苓配方颗粒指纹图谱共标定14个共有峰,指认出其中6个成分,分别为2号峰（尿苷）、4号峰（鸟苷）、6号峰（腺苷）、12号峰（猪苓酮B）、13号峰（猪苓酮A）、14号峰（猪苓酮C）;16批样品指纹图谱相似度为0.609~0.982;聚类分析将全部样品分为2大类;鸟苷、腺苷、猪苓酮B、猪苓酮A在各自质量浓度范围内线性关系良好,r均≥0.999 7;仪器精密度、重复性、稳定性试验的RSD均<3％;平均加样回收率分别为98.22%,99.32%,99.56%,99.15%,RSD均<3%（n=6）。16批样品中,鸟苷、腺苷、猪苓酮B、猪苓酮A含量分别为6.326~28.006,13.392~44.058,10.324~30.335,9.270~26.964 μg·g^–1。结论 不同厂家样品存在较大的质量差异,本研究建立的指纹图谱结合多指标性成分含量测定方法可全面、准确评价猪苓配方颗粒内在质量,为整体提升该药品质量提供依据。     

金沙藤对照提取物的质量控制研究

目的 建立基于多指标含量测定及特征图谱的金沙藤Lygodii Herba对照提取物的质量控制方法。方法 采用Waterssymmetry shield^TM RP18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈为流动相A、0.4%磷酸为流动相B,梯度洗脱（0～40 min：90%～75% B,40～45 min：75%～60% B,45 ～ 50 min ： 60%～ 10% B ）,柱温30℃,体积流量为1 mL·min^-1,检测波长为354 nm;测定3批次金沙藤对照提取物中咖啡酸、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷和紫云英苷的含量;建立特征图谱方法,并对3批次提取物特征峰进行指认;同时考察引湿性和水分含量。结果 咖啡酸、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷和紫云英苷各化合物在检测质量浓度范围内线性关系良好（r＞0.999 9）,进样精密度RSD在0.2%～0.3%,重复性RSD在0.4%～0.5%,4种成分的加样回收率在92.5%～101.0%,样品溶液中各成分在48 h内稳定性良好。3批次对照提取物中,咖啡酸质量分数为0.50%～0.64%,异槲皮苷质量分数为0.14%～0.21%,山柰酚-3-O-芸香糖苷质量分数为0.11%～0.36%,紫云英苷质量分数为0.66%～0.80%。通过建立的提取物HPLC特征图谱,确定了4个共有特征峰,并根据对照品对色谱峰进行确认,3批次提取物质量差异较小。金沙藤对照提取物水分含量为1.4%～2.3%,具引湿性。结论 建立的多指标含量测定方法和特征图谱方法简便、快速、准确性高、重复性好,可用于金沙藤对照提取物的质量控制。     

台湾林檎叶提取物不同极性部位抑菌活性高通量筛选及其谱效相关性分析

目的 实现台湾林檎叶醇提物不同极性部位抑菌活性快速、高效筛选和评价,研究不同极性部位HPLC指纹图谱与抑菌作用谱效关系,以期明确台湾林檎叶抑菌物质基础。方法 采用HPLC建立台湾林檎叶醇提物不同极性部位指纹图谱,采用金黄色葡萄球菌刃天青高通量抑菌筛选模型,对台湾林檎叶醇提物不同极性部位样品进行抑菌活性评价,计算不同浓度各极性部位的抑菌率,筛选台湾林檎叶抑菌活性部位。运用最小二乘拟合法来建立各极性部位共有峰与抑菌活性间的谱效分析,寻找对抗金黄色葡萄球菌作用贡献较大的成分;采用UPLC-Q-TOF/MS²技术对高贡献度的共有峰进行识别分析。结果 在台湾林檎叶醇提物不同极性部位指纹图谱中共确定15个共有峰,不同极性部位抑菌活性为乙酸乙酯部位>正丁醇部位/二氯甲烷部位>石油醚部位>萃余液。共有峰8、峰9、峰10、峰15等显示有较高的抑菌活性贡献度,分别鉴定为槲皮素-7-O-葡萄糖苷、异槲皮苷、根皮苷和白杨素。结论 台湾林檎叶抑菌活性部位为乙酸乙酯部位,谱效分析提示槲皮素-7-O-葡萄糖苷、异槲皮苷、根皮苷和白杨素4个成分为抑菌活性成分,是否存在其他微量抑菌活性成分还有待进一步研究。     

基于指纹图谱结合化学模式识别及多成分定量的千斤拔质量评价研究

目的 建立千斤拔Moghania RadixHPLC指纹图谱及多成分定量方法，为其质量控制提供参考。方法 采用XBridge^®C₁₈色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）为固定相，以乙腈-0.1%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量1.0mL·min-1，检测波长260nm，柱温30℃；对24批千斤拔（编号为S1～S24，其中S2～S9为采集的新鲜全株植物，实验室低温干燥而得，其余样品为市场购买药材或饮片）构建指纹图谱，同时测定相关成分的含量，并结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法进行全面评价。结果 24批不同来源千斤拔指纹图谱共标定11个共有峰，指认出染料木苷、6″-O-丙二酰基染料木苷、染料木素。相似度计算结果表明，各批次相似度在0.707～0.981；聚类分析将24批千斤拔分为2类，S2～S5、S6、S8、S9号样品（均为新鲜全株植物）聚为一类，其他17份样品聚为一类；经主成分分析，主成分1～4是影响样品质量评价的主要因子，选取前4个主因子对不同产地的千斤拔进行评分，24批样品的综合得分在5.34～-3.61，说明各批次质量差异相对较大；样品中综合得分最高是S4，各饮片样品的综合得分较低。24批样品中染料木苷、6″-O-丙二酰基染料木苷、染料木素质量分数分别为0.10～0.57、0.11～2.85、0.15～0.71mg·g^-1，不同批次之间3个成分质量分数差异较大，批次之间3个成分含量总体呈现出二低一高的趋势，建议使用3个成分总和作为质量控制指标。结论 建立的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠，可为千斤拔的质量评价提供依据。     

辐照灭菌对覆盆子品质的影响

目的 研究⁶⁰Co-γ辐照对覆盆子灭菌效果及主要成分的影响。方法 覆盆子经0、6、10、15、30　kGy剂量⁶⁰Co-γ辐照后,采用微生物计数法测定辐照前后覆盆子微生物水平;采用高分辨质谱法对覆盆子成分进行分析,对辐照前后覆盆子样品进行成分比较分析,鞣花酸及山柰酚3-O-芸香糖苷定量结果分析,指纹图谱相似度评价3个方面,考察辐照对覆盆子成分的影响。结果 不同剂量辐照处理后覆盆子微生物检查结果均符合要求;覆盆子辐照前后20个主要成分聚类分析和主成分分析提示差异无统计学意义;鞣花酸及山柰酚3-O-芸香糖苷含量差异均无统计学意义;辐照前后指纹图谱相似度均在0.995~1.000。结论 ⁶⁰Co-γ辐照可有效控制覆盆子微生物水平,对覆盆子主要成分无显著影响,研究结果为辐照在覆盆子灭菌工艺中的应用提供依据。     

Recent applications of flow-injection and sequential-injection analysis techniques to chemiluminescence determination of pharmaceuticals

A review is presented on the state of the art of the chemiluminescence analysis of pharmaceuticals by the two most relevant automated controlled-flow methodologies--flow-injection analysis (FIA) and sequential-injection analysis (SIA). The current chemiluminometric applications of FIA and SIA in pharmaceutical analysis are discussed with special emphasis on the analytical figures of merit and sample matrix characteristics. The review involving 211 references and covering papers published between 2001 and 2006 is divided into several sections according to the fundamental types of chemiluminescence systems employed.     

Strategies for evaluating the economic value of drugs in alcohol dependence treatment

Background

To assess existing health economic strategies, which are used to evaluate the economic value of drugs to treat alcohol dependence (AD) such as acamprosate, naltrexone and any other pharmaceuticals.

Methods

A systematic literature search on AD treatment economic evaluation studies was performed in multiple electronic bibliographic and economic databases.

Results

A total of seven studies were found that involved economic evaluations of pharmacotherapy treatment of AD. It was seen that all individual pharmacotherapy treatment programs including acamprosate, naltrexone and combined treatments have resulted in a net benefit or cost savings. However, the examined studies used different methods to estimate the costs, cost savings, and cost effectiveness of the treatments.

Conclusions

Pharmacotherapy treatment of AD produced marked economic benefits. However, the number of studies on the economic evaluation of pharmacotherapy for AD treatment is limited. The gaps in these studies have also been identified as necessitating more research.     

指纹图谱结合模式识别、一测多评的连翘质量评价

目的建立连翘药材的指纹图谱并结合模式识别、一测多评技术对其进行系统、全面的质量评价。方法采用HPLC测定10批次连翘样品的指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,通过相似度分析,结合聚类分析、主成分分析等模式识别技术对其进行定性评价。以连翘苷为内参物,建立连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘酯素与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评的定量评价;同时采用外标法测定10批连翘中4个成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果建立的指纹图谱共标定13个共有峰,并对其中4个进行了归属,分别是连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘酯素,10批次连翘样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.98,通过聚类分析及主成分分析将其分为3类。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间相关系数均>0.99,相对误差均<3%。结论本研究建立的分析方法直观、准确、简便、可行。指纹图谱结合模式识别、一测多评技术进行定性定量分析可以为连翘的质量控制提供科学依据。     

南京地区24家医院2003～2006年肠内营养和肠外营养制剂应用分析

目的:评价南京地区肠内营养(EN)制剂和肠外营养(PN)制剂的消费情况,了解临床营养支持治疗手段的发展趋势。方法:对南京地区24家医院2003～2006年EN制剂和PN制剂的销售金额进行回顾性分析。结果:PN制剂的应用比例虽连续4年下降,但仍占营养制剂总销售金额的80%以上;EN制剂应用大幅增长,2006年占营养制剂总销售金额的22%。结论:PN制剂的应用远大于EN制剂,但EN制剂的应用呈快速增长态势,符合营养治疗中优先应用EN的要求。     

A 3D-QSAR study of catechol-O-methyltransferase inhibitors using CoMFA and CoMSIA

应用CoMFA方法和CoMSIA方法研究儿茶酚转甲基酶抑制剂的三维定量构效关系@艾纯芝$Lab of Pharmaceutical Resource Discovery, Dalian Institute of Chemical Physics, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences!457 Zhongshan Road, Dalian 116023, Liaoning,China     

UHPLC特征图谱结合多组分含量评价首乌藤饮片的质量

目的 建立首乌藤的UHPLC特征图谱,测定2,3,5,4''-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚的含量。结合聚类分析法（CA）和主成分分析法（PCA）对首乌藤饮片的质量进行研究。方法 色谱柱：Shiseido C₁₈（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）;流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱;流速：0.3 mL·min^-1;柱温：30℃;检测波长：254 nm。运用SPSS 20.0软件进行PCA和CA分析。结果 特征图谱确立6个特征峰,40批首乌藤的相似度为0.655~0.998;2,3,5,4''-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素及大黄素甲醚含量分别为0.01~1.96,0.02~3.15和0.01~1.48 mg·g^-1。PCA和CA结果将首乌藤饮片分为3类,反映了不同批次首乌藤饮片的质量特征。结论 UHPLC特征图谱和多组分含量结合PCA和CA可以对首乌藤饮片的质量进行客观、有效的评价。     

A physiologically based pharmacokinetic model for methyl tert-butyl ether in humans: implementing sensitivity and variability analyses.

Methyl tert-butyl ether (MTBE) is added to gasoline to reduce carbon monoxide and ozone precursors from automobile emissions. The objectives of this study were to verify the ability of a physiologically based pharmacokinetic (PBPK) model to predict MTBE blood levels in humans and to investigate the effect of variability in the metabolism of MTBE and its influence on the predicted MTBE blood levels. The model structure for MTBE was flow-limited and had six essential compartments: lung, liver, rapidly perfused tissues, slowly perfused tissues, fat, and kidney. In this model, two pathways of metabolism are described to occur in the liver by Michaelis-Menten kinetics. Metabolic rate constants were measured in vitro using human liver microsomes and extrapolated to in vivo whole-body metabolism. Model predictions were compared with data on blood levels of MTBE taken from humans during and after a 1-h inhalation exposure to 1.7 ppm MTBE and after 4-h inhalation exposures to 4 or 40 ppm MTBE. The PBPK model accurately predicted MTBE pharmacokinetics at the high and low MTBE exposure concentrations for all time points. At the intermediate MTBE exposure concentration, however, the model underpredicted early time points while adequately predicting later time points. Results of the sensitivity analysis indicated that the influence of metabolic parameters on model output was dependent on MTBE exposure concentration. Subsequent variability analysis indicated that there was more variability in the actual measured MTBE blood levels than in the blood levels predicted by the PBPK model when using the range of metabolic parameters measured in vitro in human liver samples. By incorporating an understanding of the metabolic processes, this PBPK model can be used to predict blood levels of MTBE, which is important in determining target tissue dose estimates for risk assessment.     

社区获得性肺炎3种治疗方案的成本-效果分析

目的评价氨苄西林-舒巴坦组（A组）、头孢哌酮组（B组）、左氧氟沙星组（C组）三种方案对治疗社区获得性肺炎药物经济学成本与效果。方法采用回顾性研究方法，运用成本-效果分析法对三种治疗方案进行成本与效果分析。结果三种治疗方案中，A组、B组、C组总成本分别为1770．96元、1896．00元、1153．86元，治愈率分别为46．2％，61．5％，69．2％，每增加1个单位效果A组与B组比C组需多花成本分别为28．49元和52．45元。结论C组为治疗社区获得性肺炎的较佳治疗方案，通过成本-效果分析能优化治疗方案、指导合理用药，提高临床疗效。     

黄体酮的热特性分析

目的:观察黄体酮药物的热特性,并测定其纯度。方法:利用差示扫描量热法(DSC)和导数热重法(DTG)测定黄体酮的熔点、纯度及挥发性物质,在氮气氛下升温速率分别为1.5,10,20℃·min~(-1)。结果:用差示扫描量热法,升温速率为1.5℃·min~(-1),测定黄体酮的熔点为130℃,在程序控温下对其吸热峰进行分析,其纯度为99.8%,与高效液相色谱测定的结果(99.9%)一致。用导数热重法可准确测定其挥发性物质包括水分在内的变化,以及推测其降解历程。结论:该分析法简便、快捷,可测定黄体酮的晶型、水分及纯度,并为研究降解机理及开发新剂型提供参考。     

Determination of the antidepressant fluoxetine in human plasma by LC with UV detection

A selective and sensitive isocratic high-performance liquid chromatographic (HPLC) method was developed for the quantitative analysis of low concentrations of fluoxetine (FLX) in human plasma, with ultra-violet detection at 226 nm. A reversed-phase column, LiChrospher® 60 RP-Select B (125×3 mm i.d., 5 μm) (Merck), was used to resolve FLX and diazepam (DZP) (internal standard) from endogenous matrix interferences. FLX was isolated from plasma by liquid-liquid extraction. Two identical HPLC systems were used, both validated under the same study conditions. Each chromatographic separation was completed in 30 min and the results showed a mean relative recovery of 101 and 99.3% and an overall precision (RSD%) of 4.78 and 6.09 for each HPLC system. The standard curve was linear for FLX concentrations over the range of 5.00–50.0 ng ml⁻¹ (R=0.997 and 0.998).The limit of quantitation of FLX was 5 ng ml⁻¹ for both HPLC systems. The method described was applied to the analysis of plasma samples obtained from healthy subjects treated with one single oral dose of 40 mg of fluoxetine.