缺血预处理大鼠自体肝移植后剩余肝细胞的凋亡和增殖

背景:肝脏缺血再灌注损伤后肝细胞受到增殖和凋亡的双重调控.肝大部切除后,余肝经历缺血再灌注损伤,其肝再生受到明显抑制,缺血预处理可减轻此损伤,促进肝再生,其机制是否也与这有关,目前未见相关报道.目的:探讨缺血预处理对大鼠自体肝移植后余肝肝细胞凋亡和增殖的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/2007-07在中南大学湘雅医学院实验动物中心完成.材料:雄性SD大鼠144只,随机分为3组:单纯肝叶切除组、自体肝移植组、缺血预处理组,48只/组.方法:单纯肝叶切除组大鼠只行肝左、中叶切除,不阻断肝右、尾叶血流.自体肝移植组大鼠结扎切断肝后与食管腹段之间的静脉交通支,游离liberate尾状叶,游离第一肝门、肝上及肝下下腔静脉后,阻断并经门静脉持续低温灌注保存液,同时进行无血肝切除(切除肝左、中叶),肝脏在体持续低温灌洗15 min.解除肝门阻断,完全恢复肝脏血流.快速复温肝脏表面,并冲洗腹腔,缝合关腹.缺血预处理组大鼠在门静脉灌注前先阻断肝右、尾叶血流10 min,然后开放血流10 min,余步骤同自体肝移植组.各组大鼠分别于肝叶切除后0,1,3,6,12,24,48,72 h时取材.主要观察指标:生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶及天冬氨酸氨基转移酶的水平,流式细胞仪检测肝细胞凋亡指数,通过Ki-67抗原的表达检测肝细胞增殖情况.结果:与自体肝移植组比较,除肝叶切除后0 h 外,其余各时间点单纯肝叶切除组、缺血预处理组血清丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶水平均明显降低(P < 0.05).各组在肝叶切除后0 h(即正常肝组织)基本不存在凋亡细胞;单纯肝叶切除组肝大部切除后余肝肝细胞凋亡指数稍有升高;自体肝移植组复灌注后肝细胞凋亡指数急剧升高,约在12 h达到高峰,而后逐渐下降;与自体肝移植组比较,缺血预处理组肝细胞凋亡指数明显降低(P < 0.05).各组Ki-67表达率在肝叶切除后均明显升高,约在24 h达高峰,而后逐渐下降.与单纯肝叶切除组比较,自体肝移植组Ki-67表达率明显降低(P < 0.05);与自体肝移植组比较,缺血预处理组Ki-67表达率明显增高(P < 0.05).结论:缺血预处理可减轻自体肝移植后肝缺血再灌注损伤所致肝细胞凋亡,促进肝细胞增殖,这可能是其促进肝再生的机制之一.     

肝移植后缺血再灌注损伤大鼠诱导细胞凋亡中的一氧化氮

背景:由诱生型一氧化氮合酶产生的一氧化氮,是肝脏缺血再灌注损伤中病理生理学改变的一个重要因素.目的:探讨一氧化氮在肝移植缺血再灌注诱导的肝细胞早期凋亡的影响以及相关基因caspase-3的表达情况.方法:受体鼠72只随机数字表法均分成移植组、精氨酸组及L-硝基精氨酸甲酯组,均建立原位肝移植模型,后2组大鼠在开放血流前5 min于股静脉注射可升高血清一氧化氮水平的精氨酸或一氧化氮抑制剂L-硝基精氨酸甲酯.移植造模后剩余的24只大鼠设为假手术组.结果与结论:血清谷草转氨酶活件比较,精氨酸组<移植组移植组>L-硝基精氨酸甲酯组;早期凋亡的高峰期为再灌注后3h,肝细胞的活细胞数比例及肝组织中caspase-3的表达,精氨酸组<移植组相似文献   

胆汁中总胆汁酸盐/磷脂比例与大鼠移植肝胆道相对热缺血损伤的相关性

背景:据报道,供肝的热缺血、冷保存时间过长都可导致移植肝产生"毒性胆汁",并进而损伤胆道,然而胆道相对热缺血是否也会引起胆汁成分改变,目前尚无相关报道.目的:建立大鼠自体原位肝移植胆道相对热缺血损伤模型,观察胆道相对热缺血对大鼠移植肝分泌的胆汁中总胆汁酸盐、磷脂浓度的影响及与胆道损伤的相关性.方法:选用SD大鼠32只建立大鼠自体原位肝移植胆道相对热缺血损伤模型.按随机数字表法分为4组(n=8):Ⅰ组为假手术组,只游离肝脏,不进行肝脏冷灌注;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的胆道相对热缺血时间分别为0,30,60 min,即分别在门静脉开放后0,30和60 min时开放肝动脉.采用循环酶法测定术后胆汁中总胆盐浓度,酶比色法测定磷脂浓度.取肝门部胆管,光镜观察其组织学形态,透射电镜观察胆道上皮细胞的超微结构变化,原位末端标记法检测上皮细胞凋亡情况.分析总胆汁酸盐磷脂比例与胆道损伤的相关性.结果及结论:死亡1只,进入结果分析31只.肝移植胆道相对热缺血可以引起移植肝分泌的胆汁成分改变,表现为总胆汁酸盐/磷脂比例升高,胆汁毒性增加,这种改变与相对热缺血时间呈正相关,相对热缺血时间越长,胆汁成分改变越明显;而且与胆道损伤的病理学改变呈密切正相关,说明胆汁成分改变是相对热缺血导致胆道损伤的重要机制之一.     

缺血预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨缺血预处理(ischemic preconditioniong,IP)对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用wistar大鼠原位肝移植动物模型,供肝冷保存时间150min,无肝期14min左右。80只大鼠,配成40对,配对大鼠随机分配到对照组和实验组(IP组),每组20对。对照组获取供肝前仅以4℃肝素生理盐水灌注,后获取供肝并放入4℃生理盐水中保存;IP组获取供肝前先夹闭门静脉及肝动脉,使供肝缺血10 min,再松开血管夹,恢复供肝血供10min,然后以与对照组相同的方法灌注、获取及保存供肝。各组受体的一半(n=10)用于肝移植术后采集标本:另一半(n=10)用于观察肝移植术后生存期。结果IP组大鼠肝移植术后一周生存率、胆汁分泌量高于对照组,血清AST、ALT、LDH、肝组织细胞凋亡及TNF-α低于对照组。结论缺血预处理能降低移植肝组织中TNF-α水平,减少细胞凋亡,从而减轻移植肝的缺血再灌注损伤,改善移植肝功能。     

NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景:在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活.而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道.目的:探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用.方法:采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组:不接受任何处理;自体移植组:行自体原位肝移植;低氧预适应组:移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90 min,然后行自体原位肝移植.分别于移植后 1,6,24 h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏 NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化.结果与结论:与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低(P < 0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高(P < 0.05).与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高 (P <0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高(P < 0.05),p-JNK蛋白的表达明显降低(P < 0.05).透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态.提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注.     

肝移植后缺血再灌注损伤大鼠诱导细胞凋亡中的一氧化氮

背景：由诱生型一氧化氮合酶产生的一氧化氮,是肝脏缺血再灌注损伤中病理生理学改变的一个重要因素。目的：探讨一氧化氮在肝移植缺血再灌注诱导的肝细胞早期凋亡的影响以及相关基因caspase-3的表达情况。方法：受体鼠72只随机数字表法均分成移植组、精氨酸组及L-硝基精氨酸甲酯组,均建立原位肝移植模型,后2组大鼠在开放血流前5min于股静脉注射可升高血清一氧化氮水平的精氨酸或一氧化氮抑制剂L-硝基精氨酸甲酯。移植造模后剩余的24只大鼠设为假手术组。结果与结论：血清谷草转氨酶活性比较,精氨酸组〈移植组〈L-硝基精氨酸甲酯组,组间比较差异有显著性意义（P〈0.01）;血清一氧化氮浓度,精氨酸组〉移植组〉L-硝基精氨酸甲酯组;早期凋亡的高峰期为再灌注后3h,肝细胞的活细胞数比例及肝组织中caspase-3的表达,精氨酸组〈移植组〈L-硝基精氨酸甲酯组。说明,一氧化氮对大鼠对肝移植缺血再灌注后肝细胞早期凋亡具有保护作用,且该作用可能主要通过下调caspase-3基因的表达。     

供肝的不同灌注方法在大鼠肝移植中的应用

目的:探讨大鼠肝移植时供肝的不同灌注方法对大鼠的影响.方法:80只大鼠随机分为供、受体两组(各40只),供体组再随机均分为经腹主动脉灌注组(A组)和经门静脉灌注组(B组)以获取供肝,应用改良二袖套法进行大鼠原位肝移植.检测两组供肝切取时间,热缺血时间,术后第1、4、7、10天的肝功能,术后一般情况及生存率等.结果:A组和B组的供肝切取时间分别为(30.0±3.0)min和(27.0±3.0)min,热缺血时间分别为(2.0±0.5)min和(1.0±0.5)min;A组术后第1天的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素等均较B组高,而术后第7天的结果却相反.结论:对于非肝动脉化的大鼠肝移植手术供肝采用经门静脉灌注的方法操作较简单,供肝切取时间较短,热缺血时间短,术后早期肝功能的损害较小,但恢复速度相对较慢.     

硫化氢增加肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α的表达

背景:硫化氢气体是一种新型气体信号分子,在生理浓度下具有抑制Ca2+内流、开放KATP通道功能,氧化还原等明确特定的作用。目的:观察硫化氢对大鼠肝脏缺血再灌注损伤胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB及肿瘤坏死因子α表达水平的影响方法:70只SD大鼠随机等分为假手术组、缺血20min组,缺血20min+灌注2,4h组、硫氢化钠+缺血20min组、硫氢化钠+缺血20min再灌注2,4h组。除假手术组外,其余各组大鼠通过Pringle法建立大鼠全肝缺血再灌注模型,在术前5d中每天及术中向硫氢化钠+缺血20min组、硫氢化钠+缺血20min再灌注2,4h组,大鼠腹腔注射56μmol/kg硫氢化钠。结果与结论:肝脏缺血大鼠肝组织中胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB和肿瘤坏死因子α表达明显下降(P<0.05),与缺血组比较,大鼠再灌注和腹腔注射硫化氢均能增加大鼠肝组织中胰岛素样生长因子Ⅰ、硫化氢、核转录因子κB和肿瘤坏死因子α的表达(P<0.05)。提示全肝缺血再灌注后可造成肝脏损伤,硫化氢增加肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α的表达,肝脏损伤具有保护作用。     

NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景：在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活。而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道。目的：探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用。方法：采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组：不接受任何处理;自体移植组：行自体原位肝移植;低氧预适应组：移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90min,然后行自体原位肝移植。分别于移植后1,6,24h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化。结果与结论：与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低（P〈0.05）;与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高（P〈0.05）。与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高（P〈0.05）;与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高（P〈0.05）,p-JNK蛋白的表达明显降低（P〈0.05）。透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态。提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注。     

缺血预处理减轻大鼠减体积肝移植损伤并促进肝再生

背景:近年来,肝移植技术迅速发展,如何预防缺血再灌注损伤并有效保护肝再生成为研究的热点.缺血预处理是保护肝缺血损伤的有效方法,但其确切机制尚存争议.目的:研究缺血预处理在大鼠减体积肝移植肝损伤和肝再生中的作用及机制.方法:动物随机分为3组,肝移植组建立大鼠减体积肝移植模型.缺血预处理+肝移植组在供肝灌注前阻断第1肝门行缺血预处理10 min,再灌注15 min.假手术组在开腹后游离肝周韧带,然后关腹.分别于术后0.5,2,6,24 h取材.通过血清谷丙转氨酶水平和移植肝组织病理检查评估肝损伤.半定量免疫组织化学和western blot法测定氧化还原蛋白1表达水平,检测移植肝细胞增殖细胞核抗原评估肝再生情况.结果与结论:与肝移植组相比,缺血预处理+肝移植组术后6,24 h受体血清谷丙转氨酶明显降低(P<0.05;P<0.01).病理学分析显示肝移植组术后24 h可见到门脉周围大量炎细胞浸润,肝窦扩张明显,肝组织损伤较重;而缺血预处理+肝移植组则损伤较轻.半定量免疫组织化学显示缺血预处理+肝移植组移植肝中Ref-1蛋白表达明显增加,这一结果同样在westernblot检测中得到验证:缺血预处理+肝移植组移植肝术后24 h Ref-1蛋白表达较肝移植组明显增强(P<0.05).同时,术后2,6和24 h缺血预处理+肝移植组增殖细胞核抗原阳性细胞数较肝移植组明显增加(P<0.05).结果提示缺血预处理可减轻大鼠减体积肝移植术后早期移植物肝损伤并促进肝再生,这与Ref-1蛋白高表达密切相关.     

The Rho Variant-Du

A simplified test for the D^u factor employing a reagent containing 25 per cent serum albumin, the "stick" technic to introduce cells and forceful cen-trifugation has been given an extensive trial in a routine blood bank operation. A routine preliminary test with anti-D gave 5,051 negative reactions among 26,753 bloods tested. The D^u tube test was then performed on the former with an anti-CDE reagent in parallel with the indirect antiglobulin test done with anti-D. All bloods positive by one or both tests were tested further for D antigens by an anti-D elution technic; they were also tested for Rh-Hr factors.
Among the 126 bloods positive by elution for the D^ufactor, 122 and 126 were positive respectively by the antiglobulin and the D^u tube tests. The two tests were in agreement on all eight of the type ccD^uee bloods found in the study. The D^utube test, as done with anti-CDE, gave no false negative reactions. It is, thus, concluded that bloods which are negative with this test will be type ccddee and can be labeled "Rh negative tested for D^u. Serological factors which might account for sensitivity of the D^u tube test's being the equal of the antiglobulin test are considered, as are the probabilities of the existence of D variants so weak that they could not be detected by either test.     

二甲双胍联合西格列汀治疗老年糖尿病的meta分析

目的 通过系统评价的方式评估二甲双胍联合西格列汀治疗老年2型糖尿病(T2DM)的疗效和安全性。方法 通过检索中文数据库如万方、中国知网、维普数据库以及外文数据库如PubMed、Cochrane library等各个数据库,自建库以来至2023年2月1日期间所发表的二甲双胍联合西格列汀治疗老年T2DM的所有RCT研究,对纳入文献进行偏倚风险评价及 Meta 分析。结果 最终纳入10项研究,共927例患者;试验组均使用二甲双胍联合西格列汀,对照组均使用二甲双胍治疗。纳入的10项研究中,有5项研究进行了安全性评价即不良反应情况;发现二甲双胍联合西格列汀治疗具有良好的安全性。Meta分析的研究结果表明,试验组的空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白明显低于对照组。结论 西格列汀联合二甲双胍适用于老年糖尿病的治疗,降糖效果好,安全性高。     

Further Observations on the Blood Factors RhA, RhB, RhC and RhD

The findings in 18 cases of individuals with Rh_o-positive blood who had antibodies in their serum resembling anti-Rh_o in specificity are briefly summarized. One interesting finding is the relatively high frequency of such individuals among Negroes, especially with the blood type Rh^d_o and Rh^abd_o. The significance of these findings is discussed.     

本科护生职业自我效能与护理非专业技术技能的相关性研究

目的 调查本科护生职业自我效能与护理非专业技术技能的现状,并分析其相关性。方法 于2019年5-6月采用整群抽样法对长沙市4所高校485名本科护生进行问卷调查,调查量表包括：一般资料、职业自我效能问卷、护理非专业技术技能量表。 结果 本组在校本科护生职业自我效能得分为(83.72±12.181)分;护理非专业技术技能得分为(144.00±14.17)分;职业自我效能与护理非专业技术技能呈正相关(r值为0.095～0.603,P＜0.05);多元回归分析显示,专业喜好程度,护理非专业技术技能是本科护生职业自我效能的影响因素,共解释总变异的25.6%(R₂^=0.256,F=28.428,P＜0.00)。结论 本科护生护理非专业技术技能、职业自我效能有待提高,专业喜爱程度和护理非专业技术技能是护生职业自我效能的重要影响因素。医学院校可以通过早期临床实践、开展临床技能进修课程,使用高仿真教学、VR教学、跨专业模拟活动等创新教学活动,提高护生的专业兴趣和护理非专业技术技能,从而提高护生职业自我效能。     

陇中损伤胶囊联合骨科机器人辅助下骶髂关节螺钉置入治疗骨盆后环骨折的疗效研究

目的：观察陇中损伤胶囊联合骨科机器人辅助下骶髂关节螺钉置入治疗骨盆后环骨折的疗效研究。方法：对 2021 年1 月至 2022 年 5 月采用外科治疗的 60例骨盆后环骨折病例进行回顾性分析,选取骨盆后环骨折患者60例,随机分为治疗组和对照组。对照组接受骨科机器人辅助下骶髂关节螺钉置入治疗,治疗组在该基础上,配合陇中损伤胶囊口服,1周作为一个疗程,2个疗程后从疼痛、肿胀程度、患者骨折愈合时间与住院时间4个指标评价临床疗效。结果：治疗组骨折愈合时间与住院时间均优于对照组(P<0.05);治疗组肿胀程度低于对照组(P<0.05);治疗组VAS评分低于对照(P<0.05)。结论：陇中损伤胶囊联合骨科机器人辅助下骶髂关节螺钉置入治疗骨盆后环骨折有很好的临床疗效,值得临床推广应用。     

The Expected "Bombay" Groups OhA1 and OhA2

An American family of English extraction is reported in which two Oh ("Bombay") members have transmitted A ₂ genes to their children thus demonstrating that the expression of the gene A ₂, like that of the gene B , can be suppressed in this phenotype. Another American family, of French extraction, shows with a high degree of probability that the expression of the gene A ₁ can be similarly suppressed.     

COPD相关性疲劳的研究进展

疲劳是COPD患者的第二大常见的症状,发生率高,干扰了患者正常的工作生活。本文综述了疲劳的概念和发病机制,以及COPD 患者疲劳症状的诱因和治疗方法,为医务人员加深对疲劳的了解,以采取有效的措施,缓解患者疲劳,提高其生活质量提供参考。