上皮剪接调节蛋白与肿瘤细胞上皮-间质转化

上皮-间质转化（EMT）是具有极性的上皮细胞向间质细胞转化的过程,在机体正常发育和肿瘤细胞的侵袭及转移过程中具有重要作用。近年来,大量的实验数据表明上皮剪接调节蛋白（epithelial splicing regulatory proteins,ESRPs）具有抑制肿瘤EMT的作用,是肿瘤恶性转化的一种负向调控因子,受TGF-β-Smad信号通路的调节。ESRPs通过选择性剪接作用在转录后水平直接或者间接地调控FGFR2、Rac1b、E-钙黏蛋白及ZEBs等EMT相关因子的表达,抑制上皮细胞向间质细胞转换。本文综述了ESRPs的分子结构特征及其抑制肿瘤细胞EMT机制的研究进展,并对其在临床上作为恶性肿瘤诊断标志物的可能性进行了讨论。     

波形蛋白与恶性肿瘤侵袭转移关系的研究进展

波形蛋白是参与细胞骨架调节生理和病理变化有关的中间丝蛋白家族成员,主要在间质细胞中表达。长期以来,波形蛋白主要作为间质细胞标志物而被研究,对其生物学功能及与肿瘤关系的研究较少。近年来的研究显示,波形蛋白不仅与维持细胞完整性相关,还和细胞的黏附性、运动性、血管生成及自身免疫密切相关。此外,在多种上皮细胞来源的肿瘤中存在波形蛋白异常表达,涉及肿瘤的侵袭、转移及预后。本文旨在综述波形蛋白生物学功能与肿瘤侵袭转移的相关研究进展。     

EMT促肾间质纤维化机制及干预药物

肾间质纤维化(RIF)是各种慢性肾脏疾病的主要病理特征,其中上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在RIF中发挥重要作用.EMT是指在特定的生理或病理条件下,不能移动的上皮细胞转化为间质细胞的生物学过程,包括上皮细胞极性消失和黏附性降低,其特异性蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、角蛋白、紧密连接蛋白(ZO-1)表达量下调,同时间质细胞标志物波形蛋白(Vimentin)和纤连蛋白(FN)表达增加,并伴有平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)和成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP1)的表达及肌动蛋白重组[1].     

皮肤中的上皮间质转化

上皮间质转化(EMT)是指上皮细胞转变成具有间充质特性细胞的过程,其最早在胚胎发育过程中被发现,出生后在创伤修复、肿瘤转移、组织纤维化等生物过程中发挥作用.现就与皮肤EMT相关的研究综述如下. 一、EMT特征及发生机制 在EMT过程中细胞失去上皮细胞表型获得间充质细胞表型.上皮细胞标志物E-钙黏蛋白、β-连环蛋白、闭锁蛋白、胞质紧密黏连蛋白1、桥粒芯蛋白等表达下调,而间充质细胞标志物波形蛋白、N-钙黏蛋白、成纤维细胞特异性蛋白-1、纤维连接蛋白等表达上调[1].发生EMT的细胞失去顶-底极性及细胞间紧密的连接,分泌基质金属蛋白酶(MMP)降解基底膜和细胞外基质,获得较强的浸润和迁移能力,同时分泌更多的细胞外基质,如胶原蛋白、纤维蛋白等[2]. 引起EMT发生的因素繁多,EMT发生机制也非常复杂,目前对于转化生长因子β(TGF-β)信号通路诱导细胞发生EMT的机制研究相对透彻,对其他机制也有一些相关研究.     

上皮-间质转化在肿瘤侵袭转移中作用的研究进展

上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指具有极性的上皮细胞转化成具有活动能力的间质细胞的过程,在胚胎发生与器官发育、肿瘤形成和转移以及组织纤维化等生理病理过程中均有表现。EMT的发生涉及多种信号转导通路,与诱导因子、转录因子及微环境等有关。研究表明,EMT参与肿瘤的发生与发展,在促进肿瘤侵袭转移中发挥了重要作用。文中综合目前研究进展,就EMT在肿瘤侵袭转移中的作用及其分子机制作一综述。     

TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变

目的 检测转化生长因子（TGF-β1）能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变（epithelial-mesenchymal transition,EMT）及其相应的信号转导机制.方法 在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞（RLE-6TN）中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad 2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察.结果 加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad 2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失.结论 TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关.     

miR⁃939对非小细胞肺癌侵袭能力及上皮细胞⁃间充质转化过程的影响

目的：探索miR?939对非小细胞肺癌的侵袭能力及上皮细胞?间充质转化过程（epithelial?mesenchymal transition,EMT）的影响。方法：实时聚合酶链反应（qRT?PCR）检测miR?939在非小细胞肺癌组织中的表达。Transwell侵袭实验分析miR?939对细胞侵袭能力的影响。通过Western blot检测EMT相关标志物的表达水平。结果：与癌旁组织相比,miR?939在NSCLC组织中的表达水平明显升高,且与TNM分期和淋巴结转移密切相关;同时,与正常肺上皮细胞相比,miR?939在NSCLC细胞系中的表达也显著升高。下调miR?939表达后,细胞侵袭能力明显降低（P <0.05）。另外,miR?939下调后可使EMT相关标志物E?cadherin升高,Vimentin降低。结论：miR?939可能作为不良因子,促进非小细胞肺癌侵袭转移,从而影响肿瘤发展。     

靶向沉默Notch-1基因抑制滋养细胞上皮间质转化的机制研究

目的探讨靶向沉默Notch-1基因对滋养细胞JEG-3上皮-间质转化(EMT)过程和侵袭能力的影响及相关机制。方法设计合成Notch-1-si RNA干扰片段,稳定转染JEG-3细胞。采用Transwell小室侵袭实验检测滋养细胞侵袭能力的变化。采用Western blot检测转染后各组细胞Notch-1蛋白、E-cadherin、vimentin蛋白的表达和EMT转录调节子slug,snail,twist的表达水平变化。结果转染Notch-1-si RNA后,滋养细胞JEG-3中Notch-1蛋白的相对表达量明显下降;滋养细胞JEG-3的侵袭能力明显降低;JEG-3细胞中上皮细胞标志物E-cadherin表达显著升高,而间质细胞标志物vimentin表达显著下降;EMT转录调节因子slug、snail和twist的表达显著下降。结论靶向沉默Notch-1基因能够影响滋养细胞的浸润;Notch-1通过调节滋养细胞EMT过程降低其侵袭能力。     

上皮间质转化在乳腺癌中的研究进展

上皮间质转化（epithelial - mesenchymal transition,EMT）是上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,是一种重要的病理生理现象。EMT 的发生涉及多种信号转导通路,与诱导因子、转录因子等有关。而乳腺癌的发生、发展受多个因素影响和多个信号传导途径调控,近年研究发现 EMT 在乳腺癌的原位浸润和远处转移中发挥重要作用。本文就 EMT 与乳腺癌涉及的信号通路、浸袭转移及耐药的最新研究进展作一综述。     

外泌体对上皮-间质转化调控作用的研究进展

外泌体是一种具有生物活性的膜性囊泡,既可在细胞间传递活性物质,还可通过调控细胞间的信息传递参与细胞活动。 上皮-间质转化（EMT）是上皮细胞获得间充质细胞特性的过程,在众多疾病中发挥了重要作用。研究表明,外泌体在EMT的发 生发展过程中具有双向作用。一方面,外泌体可促进细胞发生EMT,赋予肿瘤细胞侵袭和转移能力,促进血管新生和加快肿瘤 生长;另一方面,外泌体亦可抑制EMT,发挥减弱肿瘤细胞侵袭能力,抑制心、肝、肾纤维化,改善心肌梗死等作用。外泌体可能 是通过携带EMT相关蛋白或miRNA,调控EMT相关信号通路发挥双向调节作用。     

粒状头样2(GRHL2)与肿瘤

粒状头样2(GRHL2)作为果蝇GRH(grainyhead)基因在哺乳动物中的同源基因之一,不仅参与调控胚胎发育、表皮屏障形成、表皮损伤修复以及中枢神经系统的发育等诸多生命活动过程,而且在乳腺癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌等多种肿瘤的发生发展中发挥着重要作用。GRHL2在肝癌、乳腺癌、口腔鳞状细胞癌等肿瘤中表达升高,促进肿瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡;而在上皮-间质转化(EMT)相关的乳腺癌中则下调表达,促进EMT的发生。GRHL2在肿瘤细胞中作用机制复杂而多样,既包括死亡受体相关的凋亡作用,人端粒反转录酶(hTERT)的活化,也涉及到EMT的发生、失巢凋亡敏感性增加。随着对GRHL2研究的深入,将有望为恶性肿瘤的临床诊断和治疗开辟新的方向。     

结直肠癌中肿瘤微环境对上皮细胞间质转化的调控机制研究

上皮细胞间质转化(EMT)是指上皮细胞在一定条件下获得间质细胞表型的过程。研究表明,EMT是结直肠癌发生、发展中的关键步骤之一。肿瘤微环境在恶性肿瘤进展过程中扮演着重要角色。肿瘤微环境中的细胞因子、组织缺氧状况、肿瘤干细胞及相关的信号通路都可能参与EMT的过程。该文将上述相关因素在结直肠癌EMT启动和发展过程中的调控机制进行综述。     

上皮间质转化与肿瘤干细胞在肿瘤转移中的作用

上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的主要特征是上皮表型的缺失及间质特性的获得。EMT在胚胎发育、创伤愈合及组织重建等生理过程中发挥重要作用,也参与组织纤维化及恶性肿瘤发生发展等病理过程。EMT在促使肿瘤细胞侵袭并转移至远端组织的同时,也使得转移的肿瘤细胞具有自我更新能力等干细胞样特性,有助于形成肿瘤宏观转移灶并产生多重耐药性。多种转录因子、信号转导通路、microRNAs及细胞微环境等参与并调控此过程。阐明EMT与肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)在肿瘤转移中的作用机制,将为肿瘤转移与复发的靶向治疗提供新思路。     

卵巢上皮性癌发生上皮-间质转化的机制研究

卵巢上皮性癌（EOC）患者的病死率长期位居妇科恶性肿瘤之首,这与其极高的侵袭和转移力、耐药性以及复发率等一系列生物学行为密切相关。研究发现EOC的上述特性又与上皮-间质转化（EMT）密切相关。EMT即上皮细胞失去原有上皮细胞的极性、形态、排列方式,重新获得间质细胞的细胞骨架、形态,同时细胞的移动表型发生很大变化。深入研究和探讨诱导EOC发生EMT的机制,有助于寻找EOC治疗的新途径,阻断或干扰EMT的发生可能成为EOC治疗的新靶向。文章就EOC发生上皮-间质转化的机制研究进行综述。     

Type 2 epithelial mesenchymal transition in vivo: truth or pitfalls?

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is a process by which fully differentiated epithelial cells undergo a phenotypic conversion and assume a mesenchymal cell phenotype, including elongated morphology, enhanced migratory and invasiveness capacity, and greatly increased production of extracellular matrix (ECM) components. The EMTs associated with wound healing, tissue regeneration, and organ fibrosis are termed as type 2 EMT. Over the past two decades, emerging evidence suggested that injured epithelial cells, via type 2 EMT, may serve as important sources of fibroblasts and contribute to organ fibrosis, such as kidney, liver, lung and eyes. There is perhaps no doubt that adult epithelial cells can undergo EMT in vitro in response to transforming growth factor (TGF)-β1 and other inflammatory or pro-fibrotic stimuli. However, whether type 2 EMT really occurs in vivo, whethers it is actually a source of functional and activated interstitial fibroblasts and whether it contributes to tissue fibrosis have already been the subjects of heated debate. In this review, we will describe the main features of EMT, the major findings of type 2 EMT in vitro, the evidences for and against type 2 EMT in vivo and discuss the heterogeneity and pitfalls of the techniques used to detect EMT during fibrotic diseases. We suggest that in order to ascertain the existence of type 2 EMT in vivo, different proper phenotype markers of epithelial and mesenchymal cells should be jointly used and cell lineage tracking techniques should be standardized and avoid false positives. Finally, we believe that if EMT really occurs and contributes to tissue fibrosis, efforts should be made to block or reverse EMT to attenuate fibrotic process.

     

miRNA-129-5p干扰技术对胆道闭锁小鼠胆道EMT作用机制的研究

目的 探讨miRNA129-5p在胆道闭锁上皮间质转化(EMT)中的作用机制.方法 构建胆道闭锁小鼠模型(实验组),取实验组胆道组织,构建TGF-β1诱导的胆管上皮EMT细胞模型,检测TGF-β1诱导刺激后胆道上皮细胞株EMT相关标志物表达水平,并检测miRNA-129-5p的表达变化.同时转染miRNA-129-5p的前体,比较转染前后TGF-β1刺激下胆道上皮细胞EMT相关标志物及细胞外基质的表达改变.结果 实验组小鼠肝脏肝外胆道呈EMT样改变,miRNA-129-5p在实验组小鼠中的表达水平下调(P＜0.05),过表达miRNA-129-5p可以抑制EMT的进程(P＜0.05).结论 miRNA-129-5p可能通过TGF-β1通路调控胆道上皮EMT的进程.     

DCLK1敲除对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 研究双皮质素样激酶1（doublecortin-like kinase 1,DCLK1）的敲除对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其潜在的作用机制。方法 使用CRISPR/Cas9基因编辑技术靶向敲除食管鳞癌细胞（Kyse450,Kyse70）的DCLK1基因。通过细胞划痕实验和Transwell实验评估DCLK1敲除对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响。Western blotting法检测DCLK1敲除细胞系中上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关转录因子的表达变化。通过癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atla,TCGA）数据库进一步分析食管鳞癌患者（n=95）中DCLK1表达和EMT相关转录因子之间的相关性。结果 CRISPR/Cas9基因编辑技术能够有效地敲除食管鳞癌细胞系DCLK1基因并影响其表达。DCLK1缺失显著抑制食管鳞癌细胞的体外迁移和侵袭能力（P<0.05）,并上调上皮标志物E-cadherin的表达,下调间质标志物如Vimentin、ZEB1、Slug和Snail的表达（P<0.05）。另外TCGA数据库分析显示食管鳞癌患者中DCLK1与EMT相关转录因子存在相关性。结论 DCLK1敲除可通过抑制EMT进程影响食管鳞癌细胞的迁移和侵袭。     

PF-5274857阻断香烟烟雾诱导的上皮-间质转化的作用

目的 探讨Smoothened（Smo）抑制剂PF-5274857在香烟烟雾(CS)诱导所致的上皮-间质转化（EMT）转变中的作用, 为口腔鳞状细胞癌的临床治疗和预防提供依据。方法 以支气管上皮细胞株Beas-2b建立体外CS诱导EMT模型,实验分为预防实验和治疗实验两部分进行。预防实验:用3 μmol/L PF-5274857预刺激Beas-2b细胞2 h后用CS溶液培养8 d;治疗实验:CS培养8 d后用3 μmol/L PF-52748573处理Beas-2b细胞4 d。通过Western blot、免疫荧光检测细胞蛋白中EMT标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的含量及位置变化,小室迁移实验测定治疗实验中细胞迁移能力改变。结果 PF-5274857预刺激2 h,间质标志物vimentin和α-SMA蛋白表达降低,上皮标志物E-cadherin表达升高。而已被CS诱导产生EMT改变的Beas-2b细胞经PF-5274857治疗4 d后部分恢复E-cadherin表达,并且vimentin和α-SMA蛋白表达降低,其升高的迁移能力也降低。 结论 PF-5274857可以预防和治疗由CS引起的Beas-2b细胞EMT。