HIF-1α结合活性及蛋白含量的表达变化在缺氧性肺动脉高压大鼠中的作用和意义

目的 研究HIF-1α结合活性及蛋白含量的表达变化在缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠中的作用和意义.方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)和缺氧3、7、14天和21天组(H3、H7、H14和H21组),每组8只,常压缺氧复制HPH大鼠模型.测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;EMSA法检测HIF-1α结合活性的变化,免疫组化、Western blot检测HIF-1α蛋白质表达.结果 (1)缺氧7天后,mPAP开始上升,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).缺氧14天达高水平并维持于此水平.缺氧14天后出现肺血管重塑,RVHI改变.(2)EMSA发现对照组HIF-1α结合活性水平较低,3天组迅速升高,14天组达到高峰.(3)Westem blot发现,HIF-1α蛋白在对照组有一定的表达,缺氧3天组蛋白质明显升高,缺氧7天达高峰,此后保持高水平;免疫组化示HIF-1α蛋白在肺小血管表达不明显,缺氧3天明显升高(0.194±0.017,P＜0.05),7天达到高峰,随后缺氧14天和21天组水平下降.结论 HIF-1a的结合活性及蛋白含量在HPH大鼠均可见明显增高,HIF-1α在大鼠HPH的发病机制中发挥作用.     

MAPK和P13K调节缺氧诱导因子2α对慢眭阻塞性肺疾病的作用

目的探讨缺氧诱导因子2a（HIF-2α）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）,磷酸肌醇3-激酶（P13K）的表达变化在缺氧性肺动脉高压（HPH）中的作用和意义。方法选择COPD患者（24例）和非COPD对照组（28例）患者为研究对象,行HE染色检测两组患者肺小动脉形态学改变,应用免疫组化检测肺小动脉壁内P-AKT、P-ERK、P-JNK、P-P38表达水平,应用原位杂交和免疫组化检测肺小动脉壁内HIF-2α的表达水平。结果COPD患者管壁面积与管总面积比值及肺小血管中膜厚度均较对照组增高（P〈0．01）。COPD患者肺小血管壁P-ERK以及P-AKT和HIF-2α基因表达水平较对照组患者肺血管壁内增强,而P-JNK、P-P38表达水平较对照无明显变化。结论MAPK信号通路和磷酸肌醇3-激酶（P13K）信号通路以及HIF-2α可能参与了COPD患者HPH的发生。     

以HIF-1α为靶点的抗肿瘤药的研究现状

缺氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor-1,HIF-1）是在缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子,它能够与靶基因结合,通过转录以及转录后的调控,使机体对缺氧、缺血产生适应性反应.HIF-1是由α和β亚基组成的异二聚体,α亚基表达受低氧诱导,是HIF-1稳定性和活性的决定基因,对于肿瘤组织的生长具有重要意义,因此,以HIF-1α为靶点的抗肿瘤药的研究,对于肿瘤的治疗具有深远的影响.     

HIF-1α在新生儿缺血缺氧性脑病中的研究进展

新生儿缺血缺氧性脑病(NHIE)是指由于围产期多种不良因素引起患儿大脑部分或完全缺氧以及脑血流减少所导致的脑损伤疾病。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是调节细胞适应缺氧环境的转录因子。在NHIE中,HIF-1α的表达对神经功能具有双向调节作用,主要与大脑缺血缺氧时间和程度有关。本文综述HIF-1α调控下游基因在NHIE中的具体机制。     

金雀异黄素抑制缺氧人视网膜色素上皮细胞VEGF表达机制的初步研究

目的:进一步明确金雀异黄素(Gen)抑制缺氧人视网膜色素上皮细胞(RPE)血管内皮生长因子(VEGF)表达的机制。方法:以体外正常情况为对照,建立人RPE缺氧模型并经不同浓度Gen干预后,通过RT-PCR检测VEGF及其转录调节因子c-fos、c-jun、缺氧诱导因子(HIF)-1α、HIF-2α、HIF-3αmRNA的表达水平,了解Gen是否通过对VEGF的转录因子活性调节而影响VEGF的表达。结果:缺氧能使人RPE细胞的VEGF、c-fos、c-jun及HIF-2α、HIF-3αmRNA水平增高,对HIF-1α无影响;Gen能抑制缺氧诱导的VEGF表达;在所检测的VEGF转录因子中,Gen只对HIF-2α的转录有抑制作用。结论:Gen抑制VEGF表达的作用部分是通过抑制其转录调节因子HIF-2α转录实现的。     

诱导缺氧诱导因子1表达的相关因素

缺氧诱导因子1(HIF-1)是重要的氧平衡调节转录因子,在哺乳动物中,HIF-1的分布和作用十分广泛,目前已确定的H1F-1的靶基因有130多种[1],涉及细胞能量代谢、离子代谢、血管形成、红细胞生成、细胞凋亡和增生、细胞黏附及炎症等多个方面,在胚胎发育、缺血缺氧性疾病及肿瘤的发生发展中起着举足轻重的作用.     

缺氧诱导因子-1调控转录及相关转录抑制剂的研究进展

细胞低氧适应性反应可通过转录调节蛋白--缺氧诱导因子-1（HIF-1）和p300/CBP辅激动因子对低氧应答基因的转录激活介导。HIF-1是药学上重要的靶点,设计以HIF-1α/p300复合物为靶点的小分子转录抑制剂,可用于心脑血管疾病或肿瘤的治疗。本文就HIF-1α与p300的相互作用,以及氧依赖的特殊氨基酸羟化对HIF-1α蛋白稳定性和转录激活调控的研究进展作一综述。     

心肌慢性缺氧适应的研究进展

慢性缺氧相关性心血管疾病在临床上十分常见。心肌细胞在慢性缺氧时通过调控自身基因表达,改变代谢方式,增强自我维持能力,促进心肌的慢性缺氧适应。其中转录调节因子缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)发挥着中心性的调控作用。同时慢性缺氧也导致心肌损害,引起心脏功能受损。因此,研究心肌慢性缺氧适应的确切机制并加以利用,将可能为防治慢性缺氧性心肌损伤提供新的治疗策略。     

缺氧诱导因子-1调控卵泡发育的研究进展

缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是一类介导缺氧适应性反应的转录因子,参与调节多种缺氧反应相关基因及其作用通路.卵泡发育的不同阶段及排卵过程通常处于缺氧的状态,HIF-1通过血管内皮细胞生长因子、促红细胞生成素、葡萄糖转运蛋白和糖酵解酶等靶基因,参与卵泡的发育调节.本文...     

缺氧诱导因子1α与宫颈癌关系的研究进展

缺氧诱导因子1(HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子,是一种重要的缺氧应答调控因子,其生物学效应由HIF-1亚基实现的。HIF-1在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管形成、细胞增殖与凋亡等很多方面都起着重要作用。本文就HIF-1的生物学特性,HIF-1在宫颈癌发生中的作用和其对预后的影响等研究进展进行综述。     

缺氧诱导因子1与子痫前期相关性研究进展

缺氧诱导因子1(HIF-1)是近年发现的调控细胞低氧适应性变化的重要转录因子。它通过调控其靶基因的转录,使机体产生一系列缺氧适应反应。新近研究发现,HIF-1及其相关因子与子痫前期的病理生理过程有着密切的关系。研究HIF-1及其相关因子在子痫前期疾病发生、发展中的作用,对了解子痫前期的发病原因及该病的预防、预测和治疗具有十分重要的意义。     

小泛素蛋白样修饰蛋白1在大鼠低氧性肺动脉高压发病中的作用

目的探讨大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)形成过程中小泛素蛋白样修饰蛋白1(SUMO-1)在肺内表达的动态变化规律及在HPH发病机制中的作用。方法40只Wistar大鼠随机分为常氧对照组、低氧3d组、低氧7d组、低氧14d组及低氧21d组,每组8只。常压间断低氧暴露复制HPH大鼠模型。检测各组大鼠的平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标[管壁面积/管总面积(WA%)];原位杂交、RT-PCR检测肺内SUMO-1 mRNA表达,免疫组化、Western blot检测其蛋白表达水平。结果低氧7d至21d,大鼠肺小动脉开始出现明显血管重塑并逐渐加重,低氧7d时WA%和mPAP显著高于对照组;低氧14d时WA%、mPAP较7d时进一步增加,RVHI显著高于对照组;低氧21d时WA%、RVHI较14d时进一步增加。SUMO-1 mRNA和蛋白在对照组肺小动脉壁呈弱阳性表达;低氧3d后显著增高;低氧14d达高峰;低氧21d后mRNA表达减弱但仍然高于对照组,蛋白表达继续保持高水平。SUMO-1 mRNA和蛋白表达与mPAP、WA%、RVHI均呈正相关(P均0.01)。结论慢性低氧诱导肺内SUMO-1表达增加在HPH的发病过程中发挥一定的作用。     

常压低氧性肺动脉高压p53基因表达及意义的试验研究

目的研究常压低氧性肺动脉高压大鼠肺内p53基因的表达及探讨肺血管重建（PVR）的分子机制。方法20只雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧组,每组10只。采用常压间断低氧8h/d,连续21d的方法来建立常压低氧性肺动脉高压（HPH）模型。用右心导管法检测肺动脉平均压（mPAP）。测量右心室肥厚指数[R.（L＋S）-1]。测量肺血管管壁面积占血管总面积的百分比（MA%）、管壁厚度占血管外径的百分比（MT%）及管腔面积占血管总面积的百分比（VA%）等肺血管形态学指标。用免疫组化方法来检测p53基因在HPH大鼠肺组织表达。结果21d后,低氧组mPAP、R.（L＋S）-1、MT%、MA%及p53基因表达较对照组明显升高（P〈0.01或P〈0.05）,而VA%较对照组明显降低（P〈0.01）。结论HPH大鼠肺内突变型p53基因的表达明显增强,而可能相对抑制野生型p53基因蛋白的表达,导致细胞增殖被促进、细胞凋亡被抑制,从而导致PVR进展,引起肺动脉压力升高,以致发生HPH。     

氧疗对低氧性肺动脉高压大鼠血浆及肺匀浆中U-Ⅱ的影响

目的：研究低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠模型血浆和肺匀浆中尾加压素（U-Ⅱ水平的变化,以探讨氧疗在HPH中的作用及意义。方法：雄性Wistar大鼠30只,分为对照组,低氧（14d）组,氧疗（7d）组,每组10只,测定各组体循环平均压（mSAP）、肺动脉平均压（mPAP）、右心室肥大指数（RVHI）即右心室与左心室加室间隔重量之比率[RV/（LV＋S）],血浆及肺匀浆U-Ⅱ水平,光镜观察肺动脉结构改变。结果：与对照组相比,低氧组大鼠的mPAP、RV/（LV＋S）数值,血浆及肺匀浆U-Ⅱ水平均显著增高（P〈0.01）;光镜下,肺动脉平滑肌细胞增生,胶原纤维增多,管壁增厚,管腔狭窄。与低氧组相比,氧疗组大鼠的mPAP值,血浆及肺匀浆U-Ⅱ水平均显著降低（P〈0.01）,RV/（LV＋S）无显著差异性（P〉0.05）;光镜下,管腔狭窄有所缓解。结论：U-Ⅱ参与低氧性肺动脉高压的病理生理过程,氧疗可以降低血浆及肺匀浆U-Ⅱ水平并缓解缺氧引起的肺血管重构。     

低氧降低大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1.5通道表达的p38MAPK通路机制

目的 探讨低氧对肺细小动脉平滑肌细胞Kv1.5通道表达的影响及其与p38 MAPK通路的关系,明确低氧性肺动脉高压（HPH）的发病机制.方法 SPF级雄性SD大鼠,超净工作台内分离3～4级肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）.采用p38MAPK通路抑制剂SB203580和激活剂茴香霉素干预低氧过程.细胞传至3～6代后随机分为5组：正常对照组（N）,低氧组（H）,低氧＋ DMSO组（HD）,低氧＋SB203580组（HS）,低氧＋茴香霉素组（HA）,其中N组继续5％ CO2培养箱培养.其他组于低氧培养箱培养（5％ CO2,2％O2,PO2：25 ～ 35mmHg）,均培养60h.采用RT-PCR法测定PASMCs Kv1.5 mRNA含量,采用Western blot法测定PASMCs Kv1.5蛋白含量.结果 与N组相比,H组、HD组、HA组Kv1.5mRNA和蛋白表达均明显降低（P＜0.05）.较之H组和HD组,HS组Kv1.5 mRNA和蛋白表达明显上升,差异有统计学意义（P＜0.01）,H组和HD组间差异无统计学意义（P＞0.05）,与HS组相比,HA组Kv1.5mRNA和蛋白表达明显降低（P＜0.01）.结论 低氧通过激活p38 MAPK信号通路降低Kv1.5通道表达,这可能是（HPH）的发病机制.     

缺氧诱导因子1α及其靶基因对脑缺氧缺血/再灌注损伤的调控作用

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是一种具有转录活性的核蛋白,能与靶基因结合并通过转录和转录后调控,产生相应的生物活性,使机体在缺血缺氧时产生适应性反应。近年研究发现,HIF-1α和其靶基因对脑组织缺氧缺血/再灌注损伤具有重要意义。     

内源性NO对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨内源性一氧化氮(NO)对低氧下离体肺动脉平滑肌细胞( PASMCs)增殖的影响.方法 原代培养Wistar大鼠PASMCs,分常氧组(21％O2,5％CO2)和低氧组(1％ O2,94％N2,5％ CO2)进行培养,分别应用非选择性一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NG-nitro-arginine methyl ester,L- NAME)进行干预,用细胞计数和四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖水平.结果 低氧下的肺动脉平滑肌细胞2天后明显增殖,与常氧组相比有显著性差异(P＜0.01),5天后细胞数达到峰值.L - NAME低氧干预组细胞增殖水平明显高于低氧组和常氧组(P＜0.01).结论 L-NAME抑制内源性NO的产生进而促进低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖.     

N端脑钠肽前体在新生儿缺氧性肺动脉高压心功能障碍中的诊断价值

目的观察新生儿缺氧性肺动脉高压（HPH）患儿血浆N端脑钠肽前体（NT—proBNP）的变化特点以及与HPH的相关性。方法围产期缺氧性新生儿根据生后第一天是否合并肺动脉高压分为HPH组与非HPH组。HPH组依据其生后第7天肺动脉压力（PASP）是否恢复正常分为HPH恢复正常组和HPH未恢复正常组。选择同期入院无围产期缺氧病史的新生儿为对照组。所有对象于生后第1天、第7天采集静脉血,测定其血浆NT—proBNP水平。结果生后第一天各组血浆NT．proBNP比较,HPH组与非HPH组NT-proBNP均高于对照组（P〈0．05）;中度及重度HPH组高于非HPH组和轻度HPH组（P〈0．05）;重度HPH组高于中度HPH组（P〈0．05）。生后第7天HPH恢复正常组及未恢复正常组血浆NT—proBNP与第一天比较,血浆NT-proBNP均低于第一天（P〈0．05）。生后第一天血浆NT—proBNP与PASP呈正相关（r=0．826,P=0．000）。结论血浆NT—proBNP水平与HPH患儿心功能状态及PASP高低密切相关,动态检测血浆NT-proBNP水平,可反映其疾病转归。     

间断性缺氧导致动脉粥样硬化的炎症通路研究进展

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（Obstructive Sleep Apnea Syndrome,OSAS）是一种与肥胖密切相关的全球性疾病,大量的研究表明OSAS是心脑卒中独立的危险因素,其核心的致病机制是间断性缺氧（Intermittent Hypoxia,IH）。本文阐述IH可能导致动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的炎症通路,探讨通路之间的相互联系,为后续研究IH的分子机制奠定基础,同时为临床治疗OSAS提供理论依据。     

低氧与骨肿瘤

生态环境中的氧含量及其他组成要素对调控干细胞和肿瘤细胞的行为起了至关重要的作用。低氧与正常发育、疾病进展以及实体肿瘤生长有关。低氧诱导因子（hypoxiainduciblefactors,HIFs）是细胞对低氧免疫应答的主要介质。本文着重对HIFs对骨肿瘤形成的作用做综述,并进一步对低氧、干细胞及其生态环境如何调控骨肿瘤的形成进行阐述。