MicroRNAs对血管新生作用的研究进展

微小RNA(miRNAs)主要通过非完全匹配的方式结合靶mRNA 3’-UTR区域使mRNA降解、抑制或激活,以调控体内超过30％的基因表达,在细胞的生长、分化和凋亡中广泛发挥作用.血管新生是心脏血管重构的必要环节.在microRNAs家族中,miR-210、miR-424等可促进血管新生；血管内皮细胞特异性miR-126不仅在维持血管内皮完整性以及炎症反应中作用独特,而且在调节血管新生过程中也有显著作用；miR-221、miR-222、miR-92a及miR-24则具有抗血管新生的属性.因此,进一步研究microRNAs对血管新生的作用,探讨血管新生治疗的新途径对于心肌缺血后血管新生以及血管性疾病的防治具有重要意义.     

长链非编码RNA调控血管新生的研究进展

血管新生与许多疾病密切相关,对疾病的发展及预后起到至关重要的作用.lncRNA是血管新生重要的调控分子,通过调控血管内皮细胞表型转变、血管内皮生长因子及miRNA的表达,参与缺血性脑卒中、肿瘤、动脉粥样硬化等疾病的病理恢复过程.文中综述了lncRNA的生物学功能及其在血管生成和血管疾病中的表达变化、调控作用的相关研究,...     

miR-144/451基因簇调控网络的生物信息学分析

目的生物信息学方法是预测miRNA二级结构及miRNA靶基因的有用工具。miRNA、转录因子和靶基因之间的调控网络参与多种生理、病理活动的分子机制。文中用生物信息学方法预测mir-144/451基因簇的调控网络结构。方法运用多个在线数据库,研究miR-144/451基因簇的上游转录因子及下游靶基因间的多个反馈和前反馈环路,对参与miR-144/451基因簇调控环路的基因进行功能聚类分析,绘制miR-144/451基因簇的核心调控网络图。结果 miR-144/451基因簇与其上游转录因子GATA1有17个共调控的靶基因,与生物体蛋白磷酸化、性腺发育、上皮细胞分化、葡萄糖代谢等生化学过程密切相关,并参与胰岛素信号通路、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路、自然杀伤细胞介导的细胞毒作用、Toll样受体信号通路、ErbB信号通路及黄体酮调节卵细胞成熟等体内重要生理过程。结论对miR-144/451基因簇调控网络的生物信息学分析有助于理解其在细胞发育、细胞周期调控和肿瘤发生过程中的作用机制,为后续实验提供了理论依据。     

微RNA-155与Th1/Th17异常相关性疾病关系的研究进展

微RNA(miRNA/miR)-155为一种多功能miRNA,参与到感染、免疫、炎症、肿瘤等多种病理生理过程中。miR-155可通过作用于靶基因对免疫细胞产生强大的调控作用,参与到多种免疫相关性疾病的发生、发展中。在银屑病、特应性皮炎、扁平苔藓、硬化性苔藓等多种免疫相关性疾病中均存在miR-155表达异常,并且伴随着辅助性T细胞(Th)1/Th17细胞的分化异常,提示miR-155表达异常与Th1/Th17细胞分化相关,因此miR-155表达异常的研究,对于揭示Th1/Th17细胞分化异常的机制,Th1/Th17异常相关性疾病的发生机制及治疗具有重要意义。     

miR-23a研究进展

微RNA(miRNA)是一类内源性长约22个核苷酸的非编码RNA分子,进化中具有高度保守性,在转录后水平调控基因的表达从而在生物过程中发挥重要的作用。miR-23a是miRNA中的一员,近期研究表明,miR-23a广泛调控机体各种生理和病理过程。miR-23a在细胞分化中起重要作用,参与骨骼肌的形成、造血细胞分化、少突细胞分化等过程。miR-23a在肝炎、牙周炎等慢性炎症反应中升高,并且与炎性细胞因子白细胞介素6的表达和分泌密切相关。miR-23a可以促进心肌细胞肥大,对心力衰竭和冠状动脉粥样硬化性心脏病等在诊断和治疗上均有很大的潜能。miR-23a在多种肿瘤中起到致癌基因作用,但是也会在个别肿瘤中出现抑癌基因作用。     

微RNA-181b在成人急性白血病中的研究进展

急性白血病是造血干细胞恶性克隆性疾病,微RNA(miRNA)在其发生、发展过程中有重要的基因调控作用。miR-181b在急性白血病和其他多种恶性实体肿瘤中表达上调,具有癌基因作用,不仅参与肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等调控,同时还与药物敏感性及预后密切相关。因此,miR-181b的表达改变可作为预测疾病进展及预后的重要生物学指标。     

microRNA在结直肠癌转移中作用机制的研究进展

 肿瘤细胞转移是由多种因子参与的复杂生物学行为,microRNA(miRNA)作为其中的重要因子,参与转移过程中的调控。结直肠癌患者中,转移引起的并发症是其主要死因。miRNA在结直肠癌转移中作用的研究目前尚处于起步阶段,目前已知其参与抗凋亡、上皮细胞间质化、瘤细胞增值侵袭及新生血管生成等步骤的调控,发挥促进或抑制结直肠癌细胞转移效应。本文就近年miRNA在结直肠癌的转移各通路中的作用与机制的研究进展进行综述,旨在就miRNA在临床诊断治疗的科研提供依据与思路。     

微RNA与缺血性脑卒中的研究进展

微RNA(miRNA)是一类小型非编码RNA,与靶信使RNA的3'端非翻译区结合后,介导转录后基因调控,几乎参与所有生命活动和多种疾病的发生发展过程。缺血性脑卒中的发生通常伴随miRNAs表达谱异常,miRNA参与缺血性脑卒中的一系列病理生理过程,miRNA不仅在缺血性脑卒中急性期发挥重要作用,而且能调控卒中后神经和血管新生,深入研究miRNA在缺血性脑卒中作用机制的靶点可为缺血性脑卒中的诊断、治疗及预后提供新的策略。     

microRNA在癫痫调控中的作用研究进展

microRNA （miRNA）在调控癫痫的发生、发展过程中发挥着重要作用,广泛参与调控神经细胞的凋亡、突触联系重建、神经胶质纤维细胞增生、炎症反应等.本文对近年来miRNA参与癫痫发生、发展的可能分子机制进行综述.     

浅谈microRNA与甲状腺癌的关系

微RNA(miRNA)属于一类小型非编码的信使RNA,它是各种生物过程包括癌变的有力监管机构,同时miRNA是一个重要的甲状腺癌诊断工具。miRNA和它们的靶基因不仅有助于诊断甲状腺癌,其对甲状腺癌治疗及预后还有良好的预示作用。随着对miRNA的逐渐认识,miRNA的表达失调在甲状腺癌的进展中起着举足轻重的作用。miRNA在甲状腺癌发生、发展与侵袭、转移过程中都起着关键作用,按其作用可分为促癌miRNA(miR-221、miR-222、miR-146b等)和抑癌miRNA(miR-199a、miR-204等)两类。因此,miRNA调控甲状腺癌侵袭及转移的具体过程还需要更多、更详细的研究。     

痰液miR-155检测作为诊断结核分枝杆菌感染标志物的研究

目的 分析结核分枝杆菌H37Rv感染诱导宿主巨噬细胞表达miRNA的变化,进而验证差异miRNA对结核分枝杆菌感染的临床诊断意义。方法 使用H37Rv菌株感染人巨噬细胞系THP-1细胞后,收集12 h、24 h和48 h细胞并提取总RNA,进行miRNA微阵列芯片分析;再将临床分离的120株不同个体来源的结核分枝杆菌菌株与THP-1细胞共培养,使用实时定量PCR (real time-PCR, rt-PCR)验证差异miRNA的表达水平;随后收集结核患者的痰液标本处理后,提取总RNA,进行实时荧光定量PCR检测痰液中的差异表达的miRNA水平。结果 H37Rv体外刺激THP-1细胞,使用miRNA微阵列芯片分析,结果显示：miR-155、miR-29b-1*、miR-150、miR-146a、miR-212和miR-483-5p 共计6个miRNAs水平在3个时间点升高均较为明显;将来自不同区域的120株结核菌株分别与THP-1细胞的共培养24 h,检测发现miR-155表达水平最高;以miRNA-155为检测靶标,对68例结核患者的痰液进行检测,灵敏度和特异度分别为94.1%和93.8%。其灵敏度高于痰涂片的22.1%和结核抗体的83.8% ,差异具有统计学意义（P<0.05）。但与ELISpot法的97.1%,差异无统计学意义（P>0.05）。在对痰涂片阳性结果与miRNA检测结果相关性分析中,发现miR-155其表达水平与痰涂片阳性等级呈正相关（R²=0.743, P<0.05）。结论 此研究提示miR-155能够作为活动性结核诊断的有效靶标,且对间接评估患者肺部荷菌量有重要意义。     

索拉非尼对肝癌患者血清中肿瘤相关 miRNAs 的影响

目的 探讨索拉非尼治疗前后对肝癌患者血清中肿瘤相关miRNA表达谱改变情况.方法 收集2011年10月～2012年9月在绍兴第二医院及浙江大学医学院附属第一医院接受治疗的6例肝癌患者的血清样本,采用miRNA表达谱芯片检测HCC患者经索拉非尼治疗前后血清中差异表达的miRNAs,并应用实时荧光定量PCR（RT-PCR）对筛选出的miRNAs进行验证.结果 索拉非尼治疗前后肝癌患者血清miRNA表达谱出现明显改变,16个miRNAs在索拉非尼治疗后肝癌患者血清中表达明显升高,10个miRNAs在索拉非尼治疗后肝癌患者血清中表达明显降低.治疗前肝癌患者血清miR-122相对表达值为（1.07±0.32）,治疗1个月后的miR-122相对表达值为（9.10±1.89）,差异有统计学意义（P＜0.05）,较治疗前表达水平显著上调.结论 索拉非尼治疗前后肝癌患者血清中表达谱发生明显变化,索拉非尼对肝癌相关miRNAs的调控可能是其治疗肿瘤的重要机制之一.     

坐骨神经缺损1周背根神经节组织中microRNA的表达变化

目的：研究大鼠坐骨神经缺损后背根神经节中microRNA（miRNA）的表达变化。方法：采用miRNA芯片检测神经缺损0 d（对照组）和7 d（实验组）背根神经节组织中miRNA的表达情况,应用Real time Taqman PCR对芯片结果进行验证。结果：实验组与对照组比较发生上调1.4倍和下调〉1%以上的miRNA分别有13个和5个,Real time TaqmanPCR检测的4个miRNA的表达变化与芯片一致（上调：miR-21,miR-221;下调：miR-500,miR-551b）。结论：大鼠坐骨神经缺损1周后背根神经节组织中miRNA的表达谱发生改变。     

精神分裂症患者血浆MicroRNA异常表达的对照研究

目的检测microRNA（miRNA或miR）在精神分裂症患者中的异常表达,探究miRNA能否作为精神分裂症的生物标记物。方法连续入组64例精神分裂症患者和64例配对正常对照,使用实时荧光定量RT—PCR技术检测病例组和对照组血浆10种miRNA（miR-30e、miR一34a、miR一181b、miR一195、miR一346、miR一432、miR一7、miR一132、miR一137andmiR一212）的相对表达水平。结果病例组血浆miR一30e、miR一18lb、miR一346、miR一34a和miR一7表达水平（2．99±1．59,2．29±0．77,4．24±1．51,9．94±1．52,11．08±2．24）较对照组（3．74±1．28,2．87±0．90,4．65±0．99,10．90±1．99,12．00±1．95）显著上调（P〈0．05—0．001）。ROC曲线分析显示,5种miRNA作为联合生物标记物对精神分裂症具有较高诊断价值（AUC为0．705,敏感度和特异度分别为34．5％和90．2％）;Logistic回归分析显示miR-181b具有最高相对危险度（OR=2．483）。结论miR一30e、miR一181b、miR一346、miR一34a和miR．7可能成为精神分裂症的联合生物标记物。     

大鼠心肌肥厚过程中microRNAs的表达变化

目的:分析大鼠心肌肥厚过程中microRNAs(miRNAs)的表达变化。方法:通过肾上腹主动脉缩窄(abdominal aorticconstriction,AAC)的方法建立大鼠心肌肥厚模型。实时定量PCR检测大鼠肥厚心肌中miRNAs的表达变化。结果:大鼠AAC后1周,心重/体重比以及心肌肥厚标志分子心房钠尿肽、β-重链肌球蛋白的编码基因Nppa、myh7表达明显升高,表明心肌肥厚模型建立成功;对肥厚心肌的miRNAs表达检测表明,miR-199a表达显著升高,miR-1、miR-133、miR-181a及miR-499表达显著降低。AAC后4周,miR-21、miR-24和miR-214表达显著升高,miR-181a表达显著降低,miR-23a、miR-133、miR-145、miR-199a和miR-499表达无明显改变。结论:心肌肥厚后miRNAs表达发生改变,可能在心肌肥厚病理过程中发挥着重要的调节作用。     

非编码小RNA在肝癌发生中的作用及机制研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类约22个核苷酸组成的小分子非编码RNA,主要在转录后水平通过促进靶基因mRNA的降解或抑制其翻译过程而发挥负调控作用.miRNA不但参与生命活动的一些基本过程,如细胞分化、细胞增殖、细胞凋亡和细胞代谢等,而且与人类疾病,尤其与恶性肿瘤的发生发展密切相关,可作为一类新的癌基因及抑癌基因,在癌症的发生发展中起重要作用.近年,我们首次在肝癌染色体变异区内发现新的肝癌转移促进因子miR-151并阐明了其分子作用机制,即RhoGDIA是miR-151下游靶基因,介导了miR-151的促肝癌转移功能;miR-151与其宿主基因FAK协同作用,活化Rac,cdc42及Rho GTPase,进而促进肝癌细胞的迁移、侵袭与转移,为阻断肝癌转移提供了新的治疗靶点.研究发现多个用于肝癌诊断及转移、复发、预后预测的miRNA分子标志物,建立了肝癌诊断、转移、复发及预后的miRNA预测模型;鉴定miR-125b为肝癌侯选抑癌基因,主要通过抑制癌基因LIN28B发挥抑癌作用;发现miR-30d为肝癌转移促进基因,转移抑制基因GNAI2为其功能靶基因;另外,发现miRNA不仅与mRNA的3’非翻译区结合,而且能与基因家族的蛋白编码区结合从而调控基因表达,为研究miRNA在肿瘤中的调控机制提供了新的思路;采用实验方法论证了单个基因能同时被多个miRNA所调控,为建立miRNA与mRNA复杂的相互作用调控网络提供了良好的实验基础.     

miRNA-148/152家族成员在恶性肿瘤中的生物学功能研究进展

 microRNA（miRNA）是一类长度约19~25个核苷酸的非编码RNA。在肿瘤中，miRNA能够与靶基因的3'-非翻译区（3'-untranslated region，3'-UTR）完全或不完全配对结合，从而参与调控肿瘤的发生发展等多种生物学过程。microRNA-148/152（miR-148/152）家族成员包括miR-148a、miR-148b和miR-152。与正常组织相比，miR-148/152家族成员在多种恶性肿瘤中低表达，而在少数恶性肿瘤中高表达。近年来，越来越多的研究表明，miR-148/152家族成员在恶性肿瘤的发生发展中发挥极其重要的作用，在多数恶性肿瘤中，miR-148/152家族成员发挥抑癌作用，而在少数恶性肿瘤中，miR-148/152的高表达可能与临床预后不良相关。本文对miR-148/152家族成员在恶性肿瘤中的重要生物学功能和机制进行综述，以期为miRNA治疗靶点提供相关研究信息。     

卵巢癌患者血浆miRNA水平与顺铂化疗敏感性的相关性研究

目的探讨卵巢癌患者血浆miRNA分子标志物水平与铂类化疗敏感性的相关性。方法应用实时定量PCR方法检测48例卵巢癌患者化疗前后血浆中miRNA的表达,13例体检正常者为内参对照,观察卵巢癌患者铂类化疗药物的疗效及预后的关系。结果初检的11种miRNA中,仅有5种miRNA（miR-124,miR-145,miR-22,miR-106a,miR-142）能够在外周血中检测出。其中3种miRNA（miR-22,miR-106a,miR-142）在正常人和卵巢癌患者的外周血中表达水平比较差异有统计学意义（P＜0．01）。患者化疗后外周血中仅miR-22水平显著升高（约3．2倍）,且miR-22水平高者对化疗反应多数敏感,反之不敏感。患者外周血miR-22的表达水平与其预后呈正相关（P＜0．05）。结论血浆中miR-22,miR-106a,miR-142水平升高可能参与了卵巢癌的发生发展,化疗患者敏感者仅miR-22呈高表达,不敏感者miR-22呈低表达,提示其可作为预测化疗敏感性及预后的指标之一。     

尿液中miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p检测在前列腺癌中的诊断及临床意义

目的:建立尿液miRNA检测板,作为诊断前列腺癌（PC）的无创性生物标志物。方法:采用miRNAs芯片分析对照1组（6名）及PC1组（18例）中miRNAs表达,并进一步利用qRT-PCR对20名对照2组及59例PC2组（GS2 6组22例,GS2 7组19例,GS28组18例）尿液、血清标本进行差异基因的进一步验证。应用受试者工作特征（ROC）曲线分析组合诊断模型的准确真实性。结果:获得在PC1组中20个miRNAs差异表达谱,与对照1组相比,miRNA-24-3p及miRNA-222-3p显著表达下调（T=5.79、4.59,均P＜0.05）,用于PC诊断检测。在扩大样本量的PC患者尿液及血清样本中,根据GS分组的GS26、GS27及GS28组中,与对照2组相比,miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p表达水平也都显著下调（t=3.89,P＜0.05）,ROC分析联合诊断模型具有较高的准确度（曲线下面积为0.93,OR=1.37,95% CI:0.92~1.76,P＝0.02）。结论:在尿液、血清样本中建立了miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p组合模型,可作为诊断PC的无创性生物标志物。     

肺移植后闭塞性细支气管炎大鼠模型建立及其miRNA表达谱分析

目的 探索建立大鼠原位气管移植模拟肺移植后闭塞性细支气管炎（obliterative bronchiolitis,OB）的病理生理过程,为研究肺移植后OB中microRNA （miRNA）表达谱分析提供理想的动物模型.方法 通过近交系大鼠原位气管移植,建立模拟肺移植后发生OB的动物模型.模型成功后使用HE染色对气管移植模型进行评估;提取移植气管组织进行microarray芯片检测,同时应用实时定量RT-PCR（RT-qPCR）验证miRNAs芯片结果的可靠性.结果 成功建立了大鼠原位气管移植的模型26/30例（成功率为86.67％）;术后4周移植气管病理检查提示“移植气管炎症细胞浸润和纤维组织增生”,模型OB的发生率为100％.miRNA芯片筛选出移植气管OB组织中表达上调15个和下调14个;验证其中显著上调miR-146a、miR-155和显著下调miR-451结果与检测结果具有较好的一致性.结论 原位气管移植能够稳定形成模拟肺移植后OB的气道阻塞性病变,可适用于肺移植后OB的miRNA表达谱分析研究的动物模型.