P63及TβR-Ⅱ蛋白在食管鳞状细胞癌及其癌前病变中的表达及意义

目的 通过对食管鳞状细胞癌癌前病变及其癌组织标本中P63及转化生长因子受体Ⅱ型(T13R-Ⅱ)蛋白表达的研究,探讨两者表达与食管鳞状细胞癌的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测P63及TβR-Ⅱ蛋白在正常食管黏膜鳞状上皮和轻、中、重度非典型增生鳞状上皮以及鳞状细胞癌组织共162例中的表达.结果 在食管正常鳞状上皮、非典型增生鳞状上皮及其癌组织中P63蛋白表达的阳性率呈递增趋势(P<0.01),TβR-Ⅱ蛋白表达的阳性率则呈递减趋势(P<0.01).P63和TβR-Ⅱ蛋白的表达与性别无关(均P>0.05),但与癌组织分化程度、浸润深度和淋巴结转移均显著相关(均P<0.05).Spearman等级相关分析结果显示P63和TβR-Ⅱ蛋白的表达与食管鳞状上皮各级病变呈负相关(rs=-0.498,P<0.05).结论 P63和TβR-Ⅱ蛋白的异常表达可能与食管鳞状细胞癌癌变及其生物学行为密切相关,联合检测二者表达可作为判断食管鳞状细胞癌发生、发展和预测转移潜能的生物学指标.     

食管鳞状细胞癌组织中Stathmin蛋白及mRNA的表达

目的：检测食管鳞状细胞癌组织中Stathmin蛋白及mRNA的表达。方法：应用免疫组化SP法和原位杂交技术检测40例食管鳞状细胞癌组织和40例正常食管黏膜组织中Stathmin蛋白及mRNA的表达,并分析二者与食管鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系。结果：①正常食管黏膜组织中Stathmin蛋白和mRNA的阳性表达率均为12.5%,食管鳞状细胞癌组织中Stathmin蛋白和mRNA的阳性表达率均为80.0%,2组间相比,差异均有统计学意义（蛋白：χ2=21.806,P〈0.001;mRNA：χ2=20.485,P〈0.001）。②伴有淋巴结转移组的食管鳞状细胞癌组织中Stathmin蛋白和mRNA阳性表达率高于无淋巴结转移组（P均=0.005）;随着浸润深度的增加,Stathmin蛋白和mRNA的阳性表达率逐渐增高（P均=0.010）。结论：食管鳞状细胞癌组织中Stathmin蛋白及mRNA异常表达可能与食管鳞状细胞癌的发生发展及浸润转移有关。     

食管鳞状细胞癌中SEL1L蛋白的表达

目的探讨SEL1L蛋白在食管鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法收集90例手术切除的食管鳞状细胞癌标本,同时取35例距癌灶边缘5cm以上切缘的正常黏膜、印例癌旁黏膜及20例内窥镜活检的食管鳞状上皮不典型增生标本。应用免疫组化S-P法检测癌组织、正常组织、癌旁黏膜及不典型增生组织中SEL1L蛋白的表达。结果SEL1L蛋白在食管鳞状细胞癌的表达阳性率为87．8％,在食管鳞状上皮不典型增生中的表达阳性率为90．0％,分别较食管正常组织（14．3％）和癌旁黏膜（13．3％）高（P〈0．01）。SEL1L蛋白表达与食管癌各临床病理参数之间无明显相关性（P〉0．05）。结论SEL1L蛋白过表达可能是食管鳞状细胞癌发生的早期表现,SEL1L蛋白的检测可作为识别食管癌高风险患者的生物标记物。     

Fas、Fas配体、Fas相关死亡结构域蛋白、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8和突变型P53蛋白在食管鳞癌患者中的表达

目的检测分析Fas、Fas配体（FasL）、Fas相关死亡结构域蛋白（FADD）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）和突变型P53蛋白质在食管鳞癌中的表达,探讨这5种细胞凋亡相关蛋白质与食管鳞癌发生发展的关系。方法构建包含116例食管鳞癌患者的癌组织及相应癌旁正常食管鳞状上皮组织的组织芯片。应用免疫组织化学方法,检测鳞癌与鳞状上皮组织中Fas、FasL、FADD、caspase8和突变型P53蛋白质的表达,分析其表达差异与临床病理特征及预后的相关性。结果Fas在鳞癌组织中较正常鳞状上皮表达下降（阳性率分别为41．4％和95．7％,P〈0．001）。FasL、FADD在鳞癌组织（阳性率分别为76．7％和50％）较正常鳞状上皮（阳性率分别为39．7％和7．8％）表达上调（均P〈0．01）。caspase8在正常鳞状上皮表层细胞呈阳性表达,而在鳞癌组织中全部阴性。突变型P53蛋白质在正常鳞状上皮不表达,在鳞癌组织中呈弥漫表达（阳性率37．1％）。FADD阳性者无病生存率较低（P=0．0028）;而Fas、FasL、caspase8和突变型P53蛋白质的表达均与无病生存率无明显关系（均P〉0．05）。结论Fas、FasL、FADD、caspase8和突变型P53蛋白质与食管鳞癌发生发展密切相关,是食管鳞癌发生发展的重要标志物;其中FADD可作为食管鳞癌的预后相关标志物。     

p53蛋白和ki-67蛋白在食管鳞癌、癌前病变的表达及其临床意义

目的探讨食管鳞癌、癌前病变、正常黏膜p53蛋白和ki-67蛋白的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测35例食管鳞癌、18例轻度不典型增生、11例重度不典型增生、18例食管正常上皮p53蛋白和ki-67蛋白的表达。结果正常黏膜及轻度不典型增生与重度不典型增生、食管鳞癌p53阳性率比较差别有统计学意义（P〈0．01），正常黏膜与轻度不典型增生之间、重度不典型增生与食管鳞癌p53阳性率比较差别无统计学意义（P〉0．05），p53表达与鳞癌分级及淋巴结转移无关（P〉0．05）。正常黏膜与轻度不典型增生、轻度不典型增生与食管鳞癌ki-67阳性检出率比较有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）、轻度不典型增生与重度不典型增生ki-67阳性检出率比较无统计学意义（P〉0．05），重度不典型增生与食管鳞癌、中-高分化鳞癌与低分化鳞癌ki-67高表达率比较有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05），ki-67表达与淋巴结转移无关（P〉0．05）。p53与ki-67表达呈正相关（P〈0．01）。结论p53基因的缺失或突变在食管鳞癌的早期阶段；联合检测P53与ki-67作为筛选癌前高危个体可能更有意义。     

CDC25A、Smad3在食管鳞癌中的表达及其相互关系

目的探讨CDC25A、Smad3在食管鳞癌组织中表达的意义及CDC25A蛋白与Smad3蛋白、细胞增殖指数、细胞凋亡率的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测CDC25A蛋白在52例食管鳞状细胞癌、24例正常黏膜中的表达。用流式细胞术检测其中30例食管鳞癌、5例正常黏膜的细胞凋亡率、增殖指数及CDC25A蛋白、Smad3蛋白的表达。结果CDC25A在癌组织中的阳性表达率为50％，明显高于正常黏膜（P〈0．05），CDC25A在高分化和中低分化组、浸润至纤维膜和未浸润至纤维膜组、有淋巴结转移和无淋巴结转移组中的差异显著（P〈0．05）。Smad3蛋白在癌组织中的表达低于正常黏膜（P〈0．05）。Smad3蛋白与CDC25A蛋白的表达呈负相关（r=-0．482，P=0．007）。核膜CDC25A蛋白阳性者的增殖指数高于核膜CDC25A蛋白阴性者（P〈0．05）；细胞质CDC25A蛋白表达阳性者的凋亡率低于细胞质CDC25A蛋白表达阴性者，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Smad3蛋白的下调可能与食管癌中CDC25A蛋白含量升高有关；细胞核中的CDC25A蛋白可能具有促增殖作用；CDC25A蛋白可能参与了食管癌的发生、发展。     

mTOR及Akt蛋白在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的 研究雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、Akt蛋白在食管鳞状细胞癌（ESCC）及周围正常黏膜组织中差异表达状况,探讨两者间相互关系及在ESCC中的作用.方法 利用免疫组织化学染色技术研究mTOR与Akt蛋白在94例正常食管黏膜组织及ESCC石蜡包埋组织中的表达情况,分析其临床病理意义.结果 与相应正常食管黏膜组织相比,ESCC组织中mTOR和Akt蛋白表达明显上调.在正常食管黏膜组织及ESCC组织中,mTOR蛋白的阳性率分别是28.6%和52.1%,差别具有统计学意义（（χ2=10.175,P〈0.05）;Akt的阳性率分别为20.2%及42.6%,差别具有统计学意义（（χ2=10.148,P〈0.05）.结论 食管鳞状细胞癌与mTOR及Akt蛋白的表达有密切相关性.     

DAPK和P53在食管鳞癌中的表达和相关性

目的：探讨食管鳞癌死亡相关蛋白激酶（DAPK）、P53蛋白表达的变化及其与食管鳞癌临床病理因素的关系。方法：应用组织芯片免疫组化法检测104例食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜DAPK和P53蛋白的表达。结果：食管鳞癌DAPK的阳性表达率明显低于癌旁正常黏膜,P53的阳性表达率明显高于癌旁正常黏膜（P＜0.05）;食管鳞癌DAPK表达与浸润深度和淋巴结转移有关,P53表达与分化程度和淋巴结转移有关（P＜0.05）;食管鳞癌DAPK和P53的表达呈负相关（r=-0.349,P＜0.05）。结论：食管鳞癌DAPK和P53蛋白表达呈负相关可能与食管鳞癌的发生发展密切相关。     

核因子-κB、过氧化物酶体增殖活化物受体-γ在Barrett食管、食管腺癌中表达增高

目的:研究NF-κB、PPAR-γ在Barrett食管及食管腺癌中的表达,探讨Barrett食管及食管腺癌的发病机制。方法:采用免疫组化染色检测正常食管上皮、Barrett食管黏膜及食管腺癌标本中NF-κB、PPAR-γ的蛋白表达情况。结果:NF-κB蛋白阳性染色位于细胞质,PPAR-γ蛋白阳性染色位于细胞核,NF-κB蛋白和PPAR-γ蛋白在正常鳞状上皮中均几乎不表达,在BE中呈轻中度表达,表达于杯状细胞及浅层腺体上皮,但在食管腺癌中广泛呈中强表达,与正常食管及BE比较,差异均有显著性(P<0.01),且在正常食管粘膜、BE及食管腺癌中的表达呈现逐渐升高的趋势。食管腺癌细胞分化程度和肿瘤病理学分期与NF-κB表达相关(P<0.05);癌细胞分化程度与PPAR-γ的表达相关(P<0.05)。结论:NF-κB与PPAR-γ在BE及食管腺癌中表达升高,说明两者的表达上调在BE及食管腺癌的发生发展中起了重要作用。     

CD44v6和E-cadherin对食管鳞状细胞癌浸润转移的影响

目的研究CD44v6和E-cadherin在食管鳞状细胞癌中的表达及其与食管鳞状细胞癌浸润转移的关系。方法选取91例食管鳞状细胞癌组织和10例正常食管组织石蜡标本,应用免疫组化方法检测CD44v6和E-cadherin的表达。结果 （1）CD44v6在食管鳞状细胞癌中阳性表达率高于正常食管组织（P〈0.05）;E-cadherin在食管鳞状细胞癌中阳性表达率低于正常食管组织（P〈0.05）。（2）CD44v6的高表达和E-cad-herin的低表达与食管鳞状细胞癌的浸润程度,淋巴结转移和临床分期呈正相关（P〈0.05）;而与肿瘤的分化程度和肿瘤的长度无明显相关性。（3）CD44v6和E-cadherin在食管鳞状细胞癌中的表达呈负相关（r=-0.545,P〈0.01）。结论 CD44v6和E-cadherin在食管鳞状细胞癌组织中的表达与浸润程度,淋巴转移和临床分期密切相关。     

食管黏膜上皮癌变过程中与细胞骨架蛋白tensin同源的磷酸酯酶基因的表达及意义

目的探讨与细胞骨架蛋白tensin同源的磷酸酯酶基因(PTEN)在食管黏膜上皮癌变过程中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测20例正常食管黏膜、20例食管上皮非典型增生、24例原位癌、44例食管鳞癌组织中PTEN表达情况,并探讨PTEN与食管鳞癌病理分级的关系。结果正常食管黏膜、非典型增生、原位癌及食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为100%、85.00%、70.83%和45.45%,原位癌、食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性率低于正常食管黏膜(P<0.05),食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性率低于原位癌和食管上皮非典型增生组织(P<0.05)。高分化、中分化及低分化食管鳞癌组织中在患者中PTEN蛋白阳性表达率分别为75.00%(15/20)、21.43%(3/14)、20.00%(2/10),高分化食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率显著高于中分化和低分化食管鳞癌组织中(P<0.05),中分化和低分化食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率无明显差异(P>0.05)。结论PTEN表达降低可能与食管鳞状上皮癌变有关,并可能在食管癌早期形成与发展中起有重要的作用。     

食管鳞癌张力蛋白同源物磷酸脂酶基因蛋白及基质金属蛋白酶-7的表达和临床意义

目的探讨张力蛋白同源物磷酸脂酶基因（PTEN）蛋白及基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系。方法应用免疫组织化学法检测61例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及60例正常食管黏膜组织中PTEN蛋白及MMP-7蛋白的表达。结果食管鳞癌组织中PTEN蛋白与MMP-7蛋白的表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0．01）;在食管上皮癌变过程中PTEN蛋白在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次降低,分别为93．3％（56／60）、73．3％（22／30）、54．1％（33／61）,纽间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;而MMP-7蛋白在癌组织及癌旁不典型增生组织表达率显著高于正常黏膜组织,分别为42．6％（26／61）、33．3％（10／30）、18．3％（11／60）,组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;PTEN蛋白与MMP-7的表达呈负相关（P〈0．01）。结论PTEN蛋白和MMP-7在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,PTEN蛋白及MMP-7的联合检测有望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一。     

食管鳞癌中Survivin和Smac/Diablo的表达及意义

目的:探讨Survivin和Smac/Diablo在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌的病例和相对应的30例病理确定为正常组织及30例癌旁组织进行Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白半定量免疫组化分析。结果:Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为81.25%,10.0%,3.33%,有显著性差异(χ2=72.983,P<0.01)。Smac/Diablo在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为61.25%,76.67%,93.33%,有显著性差异(χ2=11.518,P<0.01)。Survivin和Smac/Diablo表达与患者的年龄、性别、分化程度、浸润深度等均无明显关系(P>0.05)。但与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。在Smac阳性组中的表达率为23.21%(13/56),在Smac/Diablo阴性组中的表达率为16.67%(9/54),两者间有统计学差异(P<0.05),两者关联性较强,呈负相关。Survivin阳性率与淋巴结转移呈低度正相关(r=0.329,P<0.05),Smac/Diablo阳性率与淋巴结转移呈负相关(r=-0.733,P<0.05)。结论:Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白表达与食管癌的病理分期,淋巴结转移都有着密切的关系,Smac/Diablo在食管鳞癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能在食管鳞癌细胞凋亡信号传导网络中发挥重要作用。     

COX-2在Barrett食管中的表达及意义

目的：探讨环氧合酶-2（COX-2）在Barrett食管（BE）中的表达及意义。方法：用免疫组织化学二步法染色检测COX-2在BE、慢性食管炎及正常食管黏膜中的表达。结果：免疫组织化学染色显示COX-2主要在表层上皮细胞及化生的腺上皮细胞胞浆中表达,COX-2在BE和慢性食管炎中的表达较正常食管黏膜显著增高（P〈0.005）,而在前两组组织中的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：COX-2可能参与慢性食管炎和BE的发生发展过程,并有可能促进BE向食管腺癌发展。     

食管黏膜上皮癌变过程中hMLH1的表达及意义

目的探讨hMLH1在食管黏膜上皮癌变过程中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测正常食管黏膜上皮及食管不同病变组织中hMLH1表达情况,并分析其与临床病理参数的相关性。结果食管鳞癌组织中hMLH1蛋白阳性表达率(14.29%)显著低于正常食管黏膜(95.00%)、非典型增生(71.43%)和原位癌(68.00%),组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。hMLH1阳性表达率与肿瘤的分化程度密切相关(P<0.001)。结论hMLH1蛋白异常表达与食管鳞状上皮癌变有关,并可能为一种早期事件。     

口腔鳞癌细胞Fas/FasL的表达及对癌细胞凋亡的影响

目的:研究凋亡相关蛋白Fas、FasL在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及对癌细胞凋亡的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测10例正常口腔黏膜、38例不同分化程度口腔鳞癌组织Fas、FasL的表达;脱氧核糖核酸末端转移酶介导的原位末端标记(TUNEL)技术,检测鳞癌细胞的凋亡。结果:Fas在正常口腔黏膜中广泛表达,鳞癌组织表达明显下调(P<0.05);FasL在正常口腔黏膜不表达,鳞癌组织表达明显上调(P<0.01);Fas、FasL表达与口腔鳞癌分化程度无关;口腔鳞癌细胞Fas表达阴性组癌细胞凋亡指数(Apop-toticIndex,AI)明显低于Fas表达阳性组(P<0.01),Fas表达阳性组中,随Fas表达的下降,癌细胞AI逐步降低,各组间AI差异有显著性(P<0.01);口腔鳞癌细胞FasL表达阳性组癌细胞AI明显低于FasL表达阴性组(P<0.01);不同程度FasL表达间的癌细胞凋亡指数有差异。结论:口腔鳞癌细胞Fas、FasL的表达与癌细胞的凋亡及肿瘤的形成有密切关系。     

反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌中P38的表达特点

目的:观察反流性食管炎(RE)、Barrett食管(BE)、食管腺癌(EA)中食管上皮细胞的P38表达与细胞增殖凋亡的变化特点.方法:胃镜下取食管黏膜活检,免疫组化法和免疫印迹法测定RE组、BE组、EA组及正常对照组的P38和Ki-67的蛋白表达,TUNEL法测定细胞凋亡.结果:免疫组化法测定正常对照组、RE组、BE组、EA组的Ki-67表达率分别为10％、55％、60％、83.3％.TUNEL法测定正常对照组、RE组、BE组、EA组的细胞凋亡指数分别为(1.51±1.06)％、(8.12±1.55)％、(7.25±1.87)％、(3.63±1.70)％.免疫印迹法测定RE组、BE组的磷酸化P38蛋白吸光度比值分别为0.09±0.03、0.11±0.04,EA组和正常对照组无磷酸化P38蛋白表达.结论:与食管腺癌组相比,反流性食管炎、Barrett食管的细胞增殖率下降,细胞凋亡指数增加,伴随着磷酸化P38蛋白的表达增加,提示P38信号通路可能参与了反流性食管炎、Barrett食管发病过程中细胞增殖凋亡的调控.     

食管鳞癌中NF-κB及相关因子的表达及其意义

目的:探讨核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)及周期素D1(Cyclin D1)、C-Src基因、表皮生长因子受体(EGFR)在食管鳞癌中的变化特征及其生物学意义。方法:采用免疫组化S-P法检测食管鳞癌手术标本中NF-κB、Cyclin D1、C-Src、EGFR的蛋白表达情况并分析其特征。结果:NF-κB在正常上皮无表达,在癌组织中表达升高(P<0.01),但与食管癌的分化程度、浸润深度无明显关系(P>0.05),而与淋巴结转移有一定关系(P<0.01);Cyclin D1在正常鳞状上皮中有少量表达,在癌组织中高表达(P<0.05),表达强度与组织学分级及淋巴结转移均有一定关系(P<0.01);C-Src在正常上皮中有表达,在癌组织中表达增高(P<0.05),表达强度与分化程度、浸润深度、淋巴结转移均有明显关系(P<0.01);EGFR在正常上皮中有少量表达,在癌组织中高表达(P<0.01),且表达强度与分化程度及浸润深度、淋巴结转移亦均有一定关系(P<0.05~P<0.01)。在食管鳞癌中,NF-κB和Cyclin D1、C-Src、EGFR的蛋白表达均有相关关系(P<0.01)。结论:NF-κB可能参与食管鳞癌的发生及淋巴结转移,Cyclin D1、EGFR、C-Src可能参与食管鳞癌的发生及演进过程。NF-κB促进食管鳞癌发生、发展的分子机制与Cyclin D1、C-Src、EGFR的作用有关系。