单倍体相同供受者HLA—DNA配型及临床意义

以人类组织相容性抗原（ＨＬＡ）的ＤＱβ片段ｃＤＮＡ作为探针，用４种限制性内切酶（ＭＳＰＩ、ＥｃｏＲ Ｉ、Ｔａｑ Ｉ和Ｐｓｔ Ｉ）对６对单倍体相同的活体肾移植供受者进行ＤＮＡ配型。结果发现ＨＬＡ－ＤＮＡ分型比血清学配型更高频率地表现其特异性，４种酶中ＥｃｏＲＩ的分型尤与肾移植存活率相关。混合淋巴细胞培养结果也与ＥｃｏＲＩ分型相近。     

骨髓移植供受者HLA—DRB的单链构型多态性配型

用ＰＣＲ和单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法检查供受的ＨＬＡ－ＤＲＢ－１基因座的多态性的一致性，以此做ＤＲＢ的基因配型。１６例同胞供受对的ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型，有６对相合（６／１６），１０对不合（１０／１６）。此基因配型结果与其它配型结果比较，说明ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型在区分同胞供受对Ⅱ类抗原多态性上有较高的灵敏度，同时表现此类配型在应用于骨髓移植前检查同胞供的意义     

骨髓移植供受者HLA－DRB的单链构型多态性配型

用ＰＣＲ和单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法检查供受者的ＨＬＡ－ＤＲＢ－１基因座的多态性的一致性，以此做ＤＲＢ的基因配型。１６例同胞供受者对的ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型，有６对相合（６／１６），１０对不合（１０／１６）。此基因配型结果与其它配型结果比较，说明ＤＲＢ－１的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ配型在区分同胞供受者对的Ⅱ类抗原多态性上有较高的灵敏度，同时表明此类配型在应用于骨髓移植前检查同胞供者的意义。     

造血干细胞移植供受者HLA基因配型结果分析

目的 分析HLA基因配型结果 与患者成活率的关系.方法 采用准确、简便的DNA提取方法 和PCR-SSP基因分型方法 .结果 对179例临床标本进行基因水平的研究发现,HLA PCR-SSP基因分型方法 具有良好的稳定性、可靠性和特异性.配型后的15例造血干细胞移植病人,全部移植成活,现无病存活12人.结论 HLA基因分型方法 准确、特异、重复性好.经HLA基因配型后患者造血干细胞移植成活率高.     

造血干细胞移植供受者HLA基因配型结果分析

目的分析HIA基因配型结果与患者成活率的关系。方法采用准确、简便的DNA提取方法和PCR—SSP基因分型方法。结果对179例临床标本进行基因水平的研究发现，HLAPCR—SSP基因分型方法具有良好的稳定性、可靠性和特异性。配型后的15例造血干细胞移植病人．全部移植成活．现无病存活12人。结论HIJA基因分型方法准确、特异、重复性好。经HLA基因配型后患者造血于细胞移植成活率高。     

骨髓移植供受者MLR与HLA—D基因配型相关性分析

用血清学、混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）和基因配型法分析了骨髓移植供受ＨＬ－ＩＩ类抗原的匹配程序。结果ＨＬＡ－ＤＲ血清型相合的８５对供受中仅有３１对基因配型相合；ＤＲ血清不合的８对中有７对ＤＲβ１基因不合。说明基因配型较血清配型有较高的不匹配率和灵敏度。混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）的配对刺激指数（ＲＲＩ）〉１５％时大部分供受对的ＨＬＡ－Ｉ类基因配型是不合的，而ＲＲＩ〈１５％时则涌步定地反映供受对     

活体亲属肾移植患者HLA配型配合率的分析

目的研究亲属肾移植供受者人白细胞抗原(HLA)配合率,为临床选择良好的供受者HLA配型提供参考。方法收集本院2006年1月至2008年5月106例亲属肾移植患者进行HLA配合率分析。结果 (1)父母供肾组:42例大于或等于HLA抗原半相合。(2)子女供肾组:2例HLA抗原半相合。(3)兄弟姐妹间供肾组:26例HLA完全相合9例,13例为半相合,其余为低于半相合。(4)其他亲属供肾组:HLA抗原配合呈多样性。(5)夫妻间供肾组:HLA配合率均小于或等于3个抗原。结论父母、子女及兄弟姐妹间的肾移植供受者HLA配合率高于其他亲属。     

骨髓移植供受者MLR与HLA－D基因配型相关性分析

用血清学、混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）和基因配型法分析了骨髓移植供受者ＨＬＡ－ＩＩ类抗原的匹配程度。结果ＨＬＡ－ＤＲ血清型相合的８５对供受者中仅有３１对基因配型相合；ＤＲ血清不合的８对中有７对ＤＲβ＿１基因不合。说明基因配型较血清配型有较高的不匹配率和灵敏度。混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）的配对刺激指数（ＲＲＩ）＞１５％时大部分供受者对的ＨＬＡ－ＩＩ类基因配型是不合的，而ＲＲＩ＜１５％时则不能肯定地反映供受者对ＩＩ类基因的相容性。     

造血干细胞移植供受者HLA配型结果分析

人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)是人类最强的同种抗原,是主要组织相容性抗原之一.近年来其结构和功能的研究,不仅给免疫学基础研究带来了突破性的进展,而且使器官移植成为一项有效的治疗手段.     

肾移植供受者HLA抗原频率的比较

目的比较移植供者和受者HLA抗原频率,分析HLA抗原在两者间相配合的概率。方法对1131例移植受者和1101供者进行HLA抗原频率分析,HLA分型采用美国OneLambda公司和德国BIOTEST公司试剂,Ⅰ类采用血清学方法,Ⅱ采用分子生物学PCR—SSP方法。结果在1131例受者和1101例供者中A抗原频率高的有A2、A24、A11、A30、A33,抗原频率分别为0．5305、0．3094、0．3784、0．1194、0．1176和0．5259、0．2761、0．2788、0．1353、0．1208。B抗原频率高的有B7、B13、B35、B60、B61、B46、B51、B62,抗原频率分别为0．1565、0．21839、0．1335、0．1874、0．1017、0．1370、0．1256、0．1264和0．1462、0．2225、0．9810、0．1717、0．1035、0．1580、0．1517、0．1771。DR抗原频率高的有DR15、DR4、DR12、DR7、DR9,抗原频率分别为0．2779、0．2237、0．2387、0．2095、0．2467和0．3124、0．1880、0．2116、0．25158、0．2343。DQ抗原频率高的有DQ5、DQ6、DQ7,抗原频率分别为0．2210、0．2396、0．3664和0．2362、0．3261、0．4015。结论了解肾移植供受者HLA抗原的常见型和稀有型的频率,有利于提高HLA配型的配合率。     

HLA－DPB_1等位基因与特发性血小板减少性紫癜的相关性研究

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）结合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对５３例正常人和５５例慢性特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者进行ＨＬＡ－ＤＰＢ＿１等位基因分型。结果显示，对照组无一例有ＤＰＢ＿１１３０１等位基因，ＩＴＰ组６例存在ＤＰＢ＿１１３０１等位基因（ＲＲ＝１４．０２，Ｐ＜０．０５），此外，ＤＰＢ＿１０２０１＋０２０２所对应的ＤＰ＿（ｗ２）抗原纯合子在ＩＴＰ组明显多于对照组（ＲＲ＝３．９４，Ｐ＜０．０１），而ＤＰ＿（ｗ２）杂合子明显少于对照组（Ｐ＜０．０２５），提示ＤＰＢ＿１１３０１等位基因及ＤＰ＿（ｗ２）抗原纯合子可能与ＩＴＰ的易感性有关，而ＤＰ＿（ｗ２）抗原杂合子可能具有保护作用。     

肾移植供-受者HLA抗原配合率的研究

目的研究HLA抗原在肾移植供受者间的配合程度．方法采用微量淋巴细胞毒试验或分子生物学方法。分析915例肾移植供、受者的HLA配型情况．结果915例供受者的HLA抗原相配合程度为：在A抗原中,A1有11例（1．20％）、A2有280例（30．60％）、A3有8例（0．87％）、A11有138例（15．08％）、A24有108例（11．80％）、A26有5例（0．55％）、A19有90例（9．84％）及A28有3例（0．33％）．在B抗原中,B40有97例（10．60％）、B13有75例（8．20％）、B5有47例（5．14％）、B46有43例（4．70％）、B35有21例（2．30％）、B17有14例（1．53％）、B22有15例（1．64％）、B27有7例（0．77％）、B15有37例（4．04％）、B7有5例（O．55％）、B21有1例（0．11％）、B48有6例（0．66％）、B8有1例（0．11％）、B16有2例（0．22％）。在DR抗原中,DR1有2例（0．22％）、DR2有119例（13．01％）、DR17（3）有8例（0．87％）、DR4有42例（4．59％）、DR5有115例（12．57％）、DR6有31例（3．39％）、DR7有49例（5．36％）、DR8有16例（1．75％）、DR9有80例（8．74％）、DRl0有2例（0．22％）。结论了解HLA抗原频率与肾移植供受者HLA抗原配合率的关系,有助于提高肾移植供受者的HLA配合率。     

PEAR1基因多态性与缺血性脑卒中复发易感性的关系研究

目的 分析血小板内皮聚集受体1(PEAR1)基因多态性与缺血性脑卒中复发的相关性,为防治缺血性脑卒中复发提供依据。方法 选取该院神经内科门急诊和住院确诊为急性缺血性脑卒中的150例患者作为研究对象,根据是否为脑卒中复发分为初发脑卒中组(127例)和复发脑卒中组(23例)。应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法分析PEAR1基因rs12041331位点单核苷酸多态性,并测序验证基因型。结果 初发脑卒中组和复发脑卒中组PEAR1基因rs12041331G>A位点GG、GA、AA基因型和G、A等位基因频率比较,差异有统计学意义(P<0.05);复发脑卒中组的年龄较初发脑卒中组高,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,年龄、PEAR1基因rs12041331位点AA基因型与缺血性脑卒中复发有关,是缺血性脑卒中复发的危险因素(P<0.05)。结论 PEAR1基因rs12041331G>A位点多态性与缺血性脑卒中复发相关。PEAR1基因纯合突变可能是缺血性脑卒中复发的危险因素,PEAR1基因可能是缺血性脑卒中复发风险预...     

载脂蛋白E和脂肪结合蛋白-2基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨载脂蛋白E(Apo-E)基因、脂肪酸结合蛋白-2(FABP-2)基因Ala54Thr的多态性与2型糖尿病肾病(DN)的相关性.方法对65例2型糖尿病(DM)患者与30例健康对照者进行血清生化指标检测,并采用多聚酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术,观察Apo-E、FABP-2 Ala54Thr基因多态性,研究其与DN的关系.结果正常对照组与糖尿病组的Apo-E、FABP-2等位基因和基因型频率存在差异(P<0.01).DM3组的Apo-E2等位基因频率、FABP-2 Thr/Thr基因型频率高于正常对照组(P<0.01).携ε2等位基因的DM患者胰岛素抵抗的稳态模式评估指数(HOMA)、甘油三酯(TG)水平高于携ε3、ε4者,胰岛素敏感指数(ISI)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)则低于两者,但无统计学意义.携FABP-2 Thr/Thr基因型患者的尿微量白蛋白(UAER)明显高于携Ala/Ala,Ala/Thr基因型者(P<0.05).Apo-E2与FABP-2 Thr/Thr基因型共显的患者,85.7%出现在DM3组.结论 Apo-E、FABP-2 Ala54Thr基因多态性与DN的发生有关,当Apo-E2与FABP-2 Thr/Thr基因型共显时,可能会加重DN的病情.Apo-E2等位基因与FABP-2 Thr/Thr基因型是预测DN发生和发展有用的指标.     

长疗程他克莫司治疗特发性膜性肾病的疗效与安全性

目的：观察长疗程他克莫司联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病的疗效和安全性。方法选择常州第一人民医院2012年3月至2015年5月经肾穿刺活检确诊为特发性膜性肾病的患者54例,随机分为短疗程组27例和长疗程组27例,短疗程组给予激素联合他克莫司治疗12个月,长疗程组治疗24个月,观察两组的疗效、安全性及复发等情况。结果5例患者因发生严重不良反应退出研究。短疗程组24例,6例获得完全缓解,12例部分缓解,6例无效;治疗结束后6例复发。长疗程组25例,10例获得完全缓解,13例获得部分缓解,2例无效;治疗结束后2例复发。结论长疗程他克莫司联合小剂量激素可有效治疗特发性膜性肾病,缓解率更高,且复发率低。     

外周血白细胞HLA—B27的表达及临床意义

目的 观察非强直性脊椎炎与强直性兴椎炎（AS）病人外周血白细胞HLA－B27的表达，探讨各类白细胞HLA－B27表达对AS诊断价值。方法 用流式细胞术检测了20例AS和32例非AS患者外周血白细胞HLA－B27的表达。结果 对照组各群细胞HLA－B27表达量（以平均荧光强度表示）依次为单核细胞（65.33)、T淋巴细胞（52.55）、淋巴细胞（49.46）和粒细胞（17.02）。AS组各群细胞HLA－B27表达均显著高于对照组（P＜0.01），依次为单核细胞（337.51）、淋巴细胞（227.38）、T淋巴细胞（268.08）和粒细胞（98.47）。对照组与AS组淋巴细胞和T洒巴细胞HLA－B27的表达未见交叉。结论 检测淋巴细胞和T淋巴细胞HLA－B27的表达能最好地区别AS与非AS患者。     

HLA组织相容性对1例心脏移植存活的影响

急、慢性排斥反应是心脏移植术后最常见的并发症,是术后移植心脏功能丧失、危及患者生命的主要原因.通过联合应用免疫抑制剂来抗排斥反应,取得了较好效果,但也带来感染,肝、肾功能损害,骨髓抑制等严重并发症.为了解决这一难题,笔者在心脏移植术前对供、受者人类白细胞抗原(HLA)组织相容性进行检测并选择与受者组织相容性好的供心,效果良好,现报告如下.     

高HDL-C个体CETP基因15外显子错义突变(442D∶G)的检测及临床意义

目的　证实胆固醇酯转移蛋白 (CETP)基因 15外显子错义突变 (4 42D∶G)是导致高α脂蛋白血症的重要因素之一。方法　建立检测CETP基因 15外显子错义突变 (4 42D∶G)的聚合酶链反应 限制性内切酶酶切片断长度多态性分析 (PCR RFLP)方法 ,检测 5 0例高α脂蛋白血症 (HDL C≥ 1.7mmol/L)个体CETP基因 15外显子 44 2D∶G错义突变的阳性率。结果　 5 0例高α脂蛋白血症患者中 ,发现杂合子 15例 ,纯合子 1例 ;对照组 70例 ,仅 1例杂合子 ,差异有显著性 (u <0 .0 5 )。结论　CETP基因 15外显子错义突变是导致高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)的重要因素之一。     

高HDL-C个体CETP基因15外显子错义突变(442D∶G)的检测及临床意义

目的证实胆固醇酯转移蛋白(CETP)基因15外显子错义突变(442D∶G)是导致高α脂蛋白血症的重要因素之一.方法建立检测CETP基因15外显子错义突变(442D∶G)的聚合酶链反应-限制性内切酶酶切片断长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,检测50例高α脂蛋白血症(HDL-C≥1.7 mmol/L)个体CETP基因15外显子442D∶G错义突变的阳性率.结果 50例高α脂蛋白血症患者中,发现杂合子15例,纯合子1例;对照组70例,仅1例杂合子,差异有显著性(u<0.05).结论 CETP基因15外显子错义突变是导致高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的重要因素之一.     

供者KIR和受者HLA遗传背景与血缘关系全相合造血干细胞移植预后的关系

目的探索供者抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like re- ceptor,KIR)和受者HLA遗传背景与血缘关系全相合造血干细胞移植(HSCT)预后的关系。方法采用反向序列特异性寡核苷酸探针(RSSOP)和(或)序列特异性引物PCR(PCR-SSP)分型技术检测HLA 基因型,采用PCR-SSP技术检测供者KIR基因型。对59例接受血缘关系HLA-ABDR全相合、非去除 T细胞HSCT的恶性血液病患者病例资料进行回顾性分析。结果Ⅱ-Ⅳ级急性移植物抗宿主病 (aGVHD)发生率在KIR-HLA相容组患者为32％,非相容组患者为78％,两者差异有统计学意义(P= 0．026);Ⅱ-Ⅳ级aGVHD在Bw4相容组患者为24％,Bw4非相容组患者为61％,差异亦有统计学意义(P=0．018)。真菌感染发生率在Bw4相容组患者为14％,Bw4非相容组患者为44％,前者显著低于后者(P=0．028)。髓系疾病中,真菌感染发生率在Bw4相容组与Bw4非相容组患者分别为12％和 80％,前者明显低于后者(P=0．002);C2相容组患者总生存(Overall survival,OS)率显著高于C2非相容组患者(P=0．01)。结论供者KIR和受者HLA遗传背景与血缘HIA全相合HSCT预后与 aGVHD发生率、OS率和真菌感染发生率均有相关关系。供者KIR与受者HLA相容时,受者aGVHD 发生率下降。选择Bw4相容的供者有助于减轻患者aGVHD及真菌感染发生率,选择C2相容的供者有助于提高患者OS率。研究结果为遗传学指标指导下供者优化选择提供分子依据,为临床制定治疗方案提供参考。