H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用

目的探讨H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用。方法观察正常对照组、COPD模型组及松弛素治疗组大鼠肺组织的病理变化,比较各组大鼠支气管壁及平滑肌厚度,检测基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达水平及MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值。结果与正常对照组大鼠相比,COPD模型组大鼠肺支气管壁及平滑肌厚度显著增厚,且松弛素治疗组大鼠肺支气管壁厚度及平滑肌厚度与COPD模型组大鼠相比显著降低(P0.05)。COPD模型组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达水平均高于正常对照组(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与正常对照组相比,呈现明显升高趋势(P0.05);而对比COPD模型组大鼠,松弛素治疗组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达有所降低(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与COPD模型组相比均降低(P0.05)。结论松弛素能抑制大鼠肺组织结构病理变化,抑制COPD气道平滑肌的增殖。     

烟雾暴露大鼠肺血管重塑及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的关系

目的 探讨烟雾暴露对大鼠肺血管过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)表达的影响及其在肺血管重塑中的作用.方法 雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、烟雾暴露6周组、烟雾暴露12周组,建立大鼠烟雾暴露模型.HE染色观察各组大鼠肺组织形态学改变,测量肺血管管壁厚度与血管外径的比值(WT％)及管壁面积与血管总面积的比值(WA％);免疫组织化学染色检测肺血管PPAR-γ的表达量,并分析各指标的相关性.结果 ①烟雾暴露6周组WT％及WA％[(45.61±2.43)％及(59.69±12.59)％]与烟雾暴露12周组[(54.23±6.22)％及(76.26±8.36)％]均高于对照组[(32.89±7.65)％及(33.05±14.84)％],差异均有统计学意义(P值均＜0.05);烟雾暴露12周组WT％及WA％高于烟雾暴露6周组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05);②烟雾暴露6周组与烟雾暴露12周组PPARγ蛋白表达[(0.48±0.08),(0.37±0.07)]均低于对照组(0.51±0.07),差异均有统计学意义(P值均＜0.05);烟雾暴露12周组PPAR-γ蛋白表达低于烟雾暴露6周组,差异有统计学意义(P＜0.05);③肺血管PPAR-γ与WT％及WA％呈负相关(r值分别为-0.715和-0.683,P值均＜0.05).结论 烟雾暴露可下调大鼠肺血管PPAR-γ的表达,参与肺血管重塑.     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠气道重塑及MMP-9、TIMP-1的影响

目的 观察咳喘宁对支气管哮喘大鼠气道形态学和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的影响.方法 40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、咳喘宁高、低剂量组（27 和13.5 g生药/kg体重）、桂龙咳喘宁胶囊对照组（0.41 g/kg体重）,每组8只.除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型,各治疗组均从第1次哮喘激发开始（造模第3周）至处死前每天灌胃给药,激发并给药4 w后处死大鼠,取肺组织HE染色,彩色图像分析仪测量支气管管壁厚度、平滑肌厚度,采用ELISA双抗体夹心法测定肺组织MMP-9、TIMP-1含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度、肺组织MMP-9、TIMP-1含量及二者比值明显增加（P＜0.01）;与模型组比较,各治疗组均可显著降低支气管管壁和平滑肌厚度（P＜0.01）,降低肺组织MMP-9、TIMP-1含量以及二者比值（P＜0.05或P＜0.01）;且咳喘宁高、低剂量组优于桂龙咳喘宁胶囊组（P＜0.05或P＜0.01）.结论咳喘宁可通过降低肺组织MMP-9和TIMP-1含量,调节二者比值,抑制支气管哮喘大鼠气道壁增厚和平滑肌增生肥大,从而抑制支气管哮喘大鼠气道重塑.     

吸烟对致敏大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的 通过观察吸烟对致敏大鼠肺组织基质相关因子基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metallopmteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨吸烟在支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、致敏组和吸烟致敏组,每组8只.后两组用卵白蛋白(OVA)致敏并长期(8周)吸人激发,制备哮喘模型,在激发第3周开始,吸烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟.采用免疫组织化学法检测大鼠气道上皮细胞MMP-9、TIMP-1的蛋白表达,同时测量支气管壁的厚度,并用逆转录-聚合酶链反应法检测各组肺组织的MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA含量.结果 ①吸烟致敏组气道壁厚度[(23.28±2.38)μm2/μm]明显高于致敏组[(20.06±2.94)/μm2/μm]和对照组[(11.64±2.42)μm2/μm](P值均＜0.05),致敏组高于对照组(P＜0.05),②吸烟致敏组肺组织中MMP-9 mRNA表达(0.49±0.02)和气道上皮细胞MMP-9蛋白含量(32.78±2.60)均明显高于致敏组(0.41±0.04,23.05±2.11)和对照组(0.23±0.03,15.88±1.69)(P值均＜0.01),致敏组高于对照组(P值均＜0.01),③吸烟致敏组肺组织中TIMP-1mRNA表达(0.53±0.02)和气道上皮细胞TIMP-1蛋白含量(34.54±2.90)均高于致敏组(0.37±0.05,21.25±2.28)和对照组(0.235=0.04,15.78±1.97)(P值均＜0.01),致敏组高于对照组(P值均＜0.01);④肺组织MMP-9/TIMP-1 mRNA比值:吸烟致敏组(0.91±0.05)低于致敏组(1.12±0.06)和对照组(1.03±0.09)(P值均＜0.01).致敏组高于对照组(P＜0.01),⑤气道上皮细胞MMP-9/TIMP-1蛋白含量比值:吸烟致敏组(0.94±0.03)低于致敏组(1.09±0.07)和对照组(1.01±0.06)(P＜0.05,P＜0.01),致敏组高于对照组(P＜0.01).结论 吸烟可使致敏大鼠肺组织MMP-9和TIMP-1过度表达,比例失调,加重气道重塑.     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症反应的抑制作用

目的探讨血管紧张素(Ang)Ⅱ受体拮抗剂(氯沙坦)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症反应的抑制作用。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,氯沙坦低、中、高剂量组(5、10、20 mg/kg)。模型组及氯沙坦组均采用反复烟熏联合气管内两次滴入脂多糖(LPS)复制COPD大鼠模型。对大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞进行分类并计数,苏木素-伊红(HE)染色检测肺组织病理形态,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ、IL-4、IL-6、IL-10、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP抑制剂(TIMP)-1含量,Western印迹检测Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)信号通路激活情况。结果与正常组比较,模型组肺泡断裂,大量炎性细胞浸润,白细胞总数、中性粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞数目均显著提高,IL-4、IL-10及TIMP-1含量显著降低,IL-1β、IFN-γ、IL-6及MMP-9含量显著升高,JAK2及p-STAT3表达量显著上调(均P0.01);与模型组比较,氯沙坦低、中、高剂量组肺泡结构完整,少量炎性细胞浸润,白细胞总数、中性粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞数目均显著降低,IL-4、IL-10及TIMP-1含量显著升高,IL-1β、IFN-γ、IL-6及MMP-9含量显著降低,p-STAT3表达量显著下调,氯沙坦中、高剂量组JAK2表达量显著下调(均P0.01)。结论氯沙坦可能通过阻断JAK2/STAT3信号通路抑制COPD大鼠炎症。     

白细胞介素-10对急性心肌梗死后细胞外基质重构影响的实验研究

目的 观察白细胞介素-10(IL-10)对大鼠急性心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶(MMP)-2、9,金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1表达及胶原代谢的作用,探讨其对急性心肌梗死后心肌基质重构的影响.方法 18只大鼠随机分为假手术组、MI/AAV2转染组作为对照和MI/AAV2-IL-10转染组,每组6只.结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死动物模型,同时应用基因重组2型腺相关病毒(AAV-2)携带IL-10基因转染心肌组织.RT-PCR和ELISA观察心肌IL-10 mRNA和蛋白的表达.逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法、明胶酶谱、免疫组化检测转染后心肌组织表达MMP-2、9,TIMP-1,Ⅰ、Ⅲ型胶原水平的变化.结果 心肌梗死5 d后,MI/AAV2-IL-10组检测到IL-10 mRNA和蛋白的表达;MI/AAV2组较假手术组心肌MMP-2、9,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达明显升高;而MI/AAV2-IL-10组较MI/AAV2组梗死心肌各部位MMP-2、9表达减少,TIMP-1表达升高,其中,梗死边缘区的MMP-2表达降低14.6%(P＜0.01),MMP-9降低24.7%(P＜0.01),TIMP-1升高73.1%(P＜0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原表达分别下降了47.6%(P＜0.01)、23.6%(P＜0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原比值下降.结论 IL-10通过对MMP/TIMP的作用,改善大鼠急性心肌梗死后心肌胶原沉积和组织重构.     

SB203580对烟雾暴露的哮喘大鼠的影响

目的 建立烟雾暴露的支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型,观察p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对其的治疗作用.方法 将Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、哮喘组、烟雾暴露的哮喘组及SB203580干预组.动物肺功能仪测定大鼠呼气阻力、吸气阻力及肺顺应性,观察肺组织病理学改变,通过ELISA检测大鼠肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的表达.结果 与烟雾暴露的哮喘组相比,SB203580干预组大鼠的气道阻力显著下降,肺顺应性显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05);气道炎症明显减轻;肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的含量显著下降,差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 p38 MAPK抑制剂SB203580可以改善烟雾暴露的哮喘大鼠的气道炎症,减轻其支气管收缩反应.     

幼年特发性关节炎患儿基质金属蛋白酶及细胞因子的改变及意义

目的 探讨幼年特发性关节炎(JIA)多关节型患儿血清及关节液基质金属蛋白酶(MMP)-I、MMP-3、金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1、白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α,转化生长因子(TGF)-β水平的变化及临床意义.方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测32例多关节型JIA患儿及28例对照组(外伤性关节炎患儿)血清及关节液中MMP-1、MMP-3、TIMP-1、IL-1、TNF-α、TGF-β的水平.同时检测血白细胞计数、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)及类风湿因子(RF)水平.统计学方法采用两个独立样本的t检验及Pearson直线相关分析.结果 ①JIA组血清MMP-1、MMP-3、IL-1、TNF-α水平分别为(158±67) ng/ml、(212±89) ng/ml、(39±19) pg/ml、(26±10) pg/ml,明显高于对照组(P均＜0.05),MMP-3/TIMP-1为0.86±0.32,亦较对照组升高(P＜0.05),TIMP-1、TGF-β水平分别为(248±88)、(17±9)ng/ml,明显低于对照组(P均＜0.05);血清MMP-3、MMP-3/TlMP-1与白细胞计数、CRP、ESR呈正相关(P均＜0.05).②JIA组关节液MMP-1、MMP-3、IL-1、TNF-α水平分别为(216±78) ng/ml、(766±291) ng/ml、(56±21) pg/ml、(36±14) pg/ml,明显高于对照组(P均＜0.05),MMP-3/TIMP-1为2.68±0.89,亦较对照组明显升高(P＜0.05),TIMP-1、TGF-β水平分别为(286±88)、(12±4) ng/ml,明显低于对照组(P均＜0.05).③JIA组关节液MMP-1、MMP-3、TIMP-1、IL-1、TNF-α水平明显高于其血清水平(P均＜0.05),TGF-β水平则明显低于其血清水平(P＜0.05).结论 血清及关节液中MMP-1、MMP-3、IL-1、TNF-α水平升高,TIMP-1永平降低,参与了JIA多关节型的发病过程,TGF-β水平降低,在其发病中可能起保护作用.血清MMP-3/ⅡMP-1比值与JIA炎性指标呈正相关,有助于判断病情活动性.     

烟雾暴露对大鼠肺血管壁碱性成纤维细胞生长因子及基质金属蛋白酶12表达的影响

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及基质金属蛋白酶12(matrix metalloproteinase-12,MMP-12)在烟雾暴露大鼠肺血管壁上的表达情况,并探讨它们在肺血管重塑中的作用.方法 40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组(C组)、烟雾暴露1月组(S1m组)、烟雾暴露2月组(S2m组)、烟雾暴露3月组(S3m组),每组10只,建立烟雾暴露大鼠模型.HE染色观察肺动脉组织形态学改变并测量各组大鼠肺血管管壁厚度占血管外径的百分比(WT％)及管壁面积占血管总面积的百分比(WA％);VG染色观察胶原纤维增生情况;免疫组织化学染色检测bFGF和MMP-12在肺血管壁的表达,用平均灰度值反映蛋白表达量,并分别分析bFGF与WT％、WA％的相关性,MMP-12与WT％、WA％的相关性,以及bFGF与MMP-12的相关性.结果 ①随着烟雾暴露时间的延长,WT％、WA％值逐渐增高,各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05)②随着烟雾暴露时间的延长,bFGF、MMP 12蛋白表达的阳性率增加,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).③bFGF与WT％(r=-0.748,P＜0.05)、WA％(r=-0.834,P＜0.05)呈正相关,MMP-12与WT％(r=-0.565,P＜0.05)、WA％(r=0.504,P＜0.05)呈正相关,bFGF与MMP-12呈正相关(r=0.738,P ＜0.05).结论 烟雾暴露可以上调肺血管壁bFGF、MMP-12蛋白的表达,这可能在烟雾暴露大鼠所致肺血管重塑的发生机制中发挥一定作用.     

白介素-17、转化生长因子-β1在烟雾暴露大鼠肺组织中的表达及与肺血管重塑的关系

目的观察烟雾暴露大鼠肺组织中IL-17表达及对肺血管重塑的影响,并探讨其作用机制。方法将72只健康SD雄性大鼠随机分为对照组、烟雾暴露组和烟雾暴露+药物干预组,每组各24只。分别在造模成功后8周、12周取组织行苏木精-伊红染色和Masson染色,观察大鼠肺血管重塑的程度,并采用免疫组化法检测大鼠肺组织中IL-17、Smad3的表达及肺动脉中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,采用ELISA法检测大鼠血清中IL-17水平。结果与同期对照组相比,烟雾暴露组8周、12周大鼠肺血管管壁面积/血管总面积比值(WA%)及管壁厚度和血管直径的比值(WT%)都明显增大(P0.05);血清IL-17水平,肺组织中IL-17、Smad3及肺动脉中TGF-β1表达量明显增加(P0.05);且烟雾暴露组12周时,上述指标水平均明显高于8周的大鼠(P0.05)。烟雾暴露+药物干预组除TGF-β1水平外,其余上述指标水平均高于同期对照组,但低于同期烟雾暴露组。烟雾暴露组肺动脉中TGF-β1表达水平与WA%、WT%以及肺组织IL-17、Smad3表达水平均呈正相关(P0.01)。结论烟雾暴露后大鼠肺组织及血清中IL-17表达增高,IL-17可能参与了肺血管重塑过程,而TGF-β/Smad信号转导途径可能是调节血管重塑工程的关键之一。     

大黄甘草汤对急性坏死性胰腺炎大鼠并发的肺损伤的影响

目的 观察大黄甘草汤对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠并发肺损伤的治疗效果,探讨其作用机制.方法 90只Wistar大鼠按完全随机法分为假手术组、ANP组和大黄甘草汤治疗(治疗)组,每组30只.采用逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠方法制备ANP模型.治疗组在制模后给予大黄甘草汤(0.25 g/ml)0.6 ml/100 g体重灌胃,1次/12 h;假手术组与ANP组予等量生理盐水灌胃.术后6、12、24 h分批处死大鼠,取胰腺及肺组织行病理学检查并评分;测血清及肺组织IL-6、IL-10、TNF-α水平;免疫组化法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)的表达量.结果 制模后12 h,假手术组、ANP组和治疗组的血IL-6水平分别为(14.4±4.0)pg/ml、(171.4±41.3)pg/ml、(156.9±34.7)pg/ml,IL-10水平为(13.7±4.5)pg/ml、(120.5±23.7)pg/ml、(148.3±44.4)pg/ml,TNF-α水平为(22.4±4.7)pg/ml、(261.3±51.4)pg/ml、(235.3±45.9)pg/ml;肺组织IL-6水平为(257.3±55.9)pg/g、(2578.3±403.0)pg/g、(2370.0±491.0)pg/g,IL-10水平为(80.8±20.8)Pg/g、(642.0±107.3)pg/g、(695.3±151.7)Pg/g,TNF-α水平为(207.6±98.6)pg/g、(1769.1±635.6)Pg/g、(1401.1±450.5)pg/g;胰腺病理评分为0、7.0±1.3、6.3±1.0;肺脏病理评分为0、6.3±1.4、5.6±1.0;肺组织TLR4表达量为0.09 ±0.03、0.59±0.09、0.52±0.08.ANP组和治疗组的上述指标均显著高于假手术组(P值均＜0.01);除IL-10外,治疗组的指标又显著低于ANP组(P值均＜0.05).肺组织病理学损伤与胰腺组织损伤呈正相关(r=0.807,P＜0.01),与TLR4表达水平亦呈正相关(r=0.519,P＜0.01).结论 大黄甘草汤可快速改善ANP并发的肺损伤,其机制可能与抑制TLR4的表达、降低IL-6和TNF-α、升高IL-10水平有关.     

结构重构相关因子对无结构性心脏病房颤患者左房结构重构程度的预测

目的:探讨无结构性心脏病房颤患者的左房或右房基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）血清水平与心房结构重构的关系。方法: 通过ELISA方法检测42例无结构性心脏病房颤患者及17例阵发性室上速或预激综合征患者左房和右房中血清的MMP-9、TIMP-1、TGF-β1和bFGF水平,并使用超声心动图测量左心房长径。分析血清中上述细胞因子的水平与房颤左房结构重构程度的关系。结果: 房颤组左房内径(36±7) mm显著高于对照组(31±4) mm（P<0.01）;房颤组左房血清MMP-9为(3037±804) ng/L,明显高于对照组(2439±663) ng/L（P<0.01）和右房(2635±9308) ng/L（P<0.05）,但右房血清MMP-9与对照组相比未见显著性差异;与对照组相比,房颤组TIMP-1明显降低（P<0.05）,TGF-β1明显升高（P<0.01）,bFGF无显著性差异;MMP-9/TIMP-1与左房内径呈正相关。结论: MMP-9、TIMP-1和TGF-β1与房颤相关,并可提示房颤的结构重构程度。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂在重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期的变化

目的探讨基质金属蛋白酶母（MMP-9）及其抑制剂-1（TIMP-1）在重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）的变化及其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测35例健康者（对照组）、40例COPD稳定期和急性加重期患者的血清MMP-9和T1MP-1水平,并分析其与肺功能的关系。结果稳定期COPD组MMP-9高于对照组,但两组MMP-9比较差异无统计学意义（P〉0．05）,TIMP-1、MMP-9／TIMP-1均高于对照组（P均〈0．05）;AECOPD组的血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1均高于对照组（分别为P〈0．01,P〈0．05,P〈0．05）;与稳定期比较,AECOPD组MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1升高（均P〈0．05）;AECOPD组血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1与FEV。％占正常预计值均呈负相关（P均〈0．05）,与稳定期组比较,AECOPD组FEV1、FEV1％占正常预计值有明显下降（P均〈0．05）。结论AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9／TIMP-1比值增加,均与FEV,％占正常预计值呈负相关;MMP-9／TIMP-1比例失衡,可能是导致重度AECOPD肺功能下降的机制之一。     

Secondhand tobacco smoke and severity in wheezing children: Nasal oxidant stress and inflammation

Objectives: Prenatal and postnatal smoke exposures are associated with many lung diseases in children due to impaired lung function, increased inflammation, and oxidative stress. We aimed to determine the influence of secondhand tobacco smoke exposure on the levels of nasal glutathione, IL-8, IL-17, MMP-9, and TIMP-1, as well as serum surfactant protein-D (SP-D) in wheezy children. Methods: We enrolled 150 children with recurrent wheezing and recorded wheezing characteristics at enrollment. We measured the levels of serum cotinine, SP-D, nasal glutathione, IL-8, IL-17, MMP-9, and TIMP-1. Serum cotinine levels between 3 and 12 ng/mL, and above 12 ng/mL were defined as lower and higher level secondhand tobacco smoke exposure, respectively. The ANOVA test, Pearson's correlation analysis and multivariate analysis with a linear regression test were used for the statistical analysis. Results: Ninety-one children had been exposed to lower level secondhand tobacco smoke, while 24 children were exposed to higher level secondhand tobacco smoke. Thirty-five children were not exposed to cigarette smoke. Wheezing symptom scores were higher in exposed children (p = 0.03). Levels of other biomarkers showed no significant difference. Conclusions: Secondhand tobacco smoke exposure is associated with more severe respiratory symptoms in wheezing children. However, levels of nasal or serum inflammatory markers fail to explain this association, either because of different mechanical factors in the process or due to low levels of the biomarkers especially in nasal secretions.     

N-acetylcysteine prevents cigarette smoke induced small airways alterations in rats.

This study investigated the effect of cigarette smoke exposure and the potential protection N-acetylcysteine (NAC) in rat lungs. Forty-eight rats were exposed to cigarette smoke (CS) for 10 weeks, without (CS group) or with (CS+NAC group) oral intake of NAC 200 mg x rat(-1) x day(-1), or to fresh air (Control). All rat lungs were assessed in terms of lung function, ventilation distribution (nitrogen, helium and sulphur hexafluoride phase III slopes), and morphometry (airway wall thickening of small, medium and large bronchi). The small bronchi, defined as the airways with an internal perimeter <1,000 microm showed significantly thicker airway walls in the CS than in the Control group. By contrast, no airway wall thickening was observed in the CS+NAC group with respect to Control. Except for decreased lung volumes and compliance in CS and CS+NAC groups, which were entirely attributable to smaller body weight gain, lung function was indistinguishable from Control. Phase III slopes were significantly increased only in the CS group. In conclusion, smoke-induced alterations in the rat lungs were reflected in wall thickening of the small bronchi and increased ventilation maldistribution. These smoke-induced morphometric and ventilation distribution alterations were prevented by N-acetylcysteine.     

白介素17抗体减轻吸烟所致慢性阻塞性肺疾病模型小鼠的气道炎症

目的 研究白介素17(interhukin-17,IL-17)抗体在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型小鼠气道炎症中的作用.方法 C67/BL6雄性小鼠随机分为COPD组(8只)、COPD+IL-17抗体干预组(简称COPD+干预组,8只)和正常对照组(10只).对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数、染色和分类;用酶联免疫吸附试验检测小鼠肺组织匀浆IL-17水平,观察各组小鼠气道病理改变.结果 COPD组与COPD+干预组相比肺功能差异无统计学意义.COPD组、COPD+干预组小鼠与正常对照组相比BALF细胞总数显著增高[分别为(19.64±1.89)×104/ml,(15.47±2.99)×104/ml和(5.13±1.00)×104/ml,P＜0.01];COPD+干预组较COPD组细胞总数下降(P＜0.01);中性粒细胞比例[分别为(8.58+6.77)%,(22.98±8.46)%]及绝对值[(1.28±0.96)×104/ml,(4.53±1.73)×104/ml]显著下降(P值均＜0.01).肺组织HE染色病理评分COPD+干预组(73.25±18.58)较cOPD组(106.13±36.27)炎症有所减轻(P＜0.05).COPD+干预组小鼠肺组织匀浆中IL-17含量(0.084±0.041)pg/mg pro与COPD组(0.221±0.081)pg/mg pro相比显著降低(P＜0.01).结论 吸烟所致COPD小鼠模型中IL-17参与了中性粒细胞引起的气道炎症,抑制IL-17的表达,可以减少气道内中性粒细胞的数量,减轻气道炎症.     

持续吸入变应原引起支气管哮喘小鼠免疫耐受

目的探讨吸入变应原引起支气管哮喘(简称哮喘)过敏性气道炎症免疫耐受形成的机制。方法BALB/c小鼠60只,按随机数字表法分为实验组(50只)和空白对照组(10只),实验组小鼠先给予腹腔注射卵清白蛋白(OVA)1mg,每周1次,共3周。雾化吸入OVA每天1h(含OVA80μg),连续10d。依据吸入OVA时间分为A、B、C、D、E5组,每组10只。A组雾化吸入10d后处死。B、D组继续每天1次,每次1h,每周5次,分别吸入OVA4周及8周,然后每天1h,连续10d吸入OVA后处死。C组停止吸入OVA4周后再次吸入OVA,每天1h,连续10d后处死。E组每天1次,每次1h,每周5次,吸入OVA4周,停止雾化吸入OVA4周,然后每天1h,连续10d吸入OVA后处死。测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数,嗜酸粒细胞、淋巴细胞、CD4+、CD8+、CD4+IL-10+分类及BALF中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-10的含量。测定血清中IL-4、IFN-γ、IL-10、OVA、IgE、IgG1、IgG2a水平,并对各组小鼠肺组织病理学进行分析。结果空白对照组BALF中嗜酸粒细胞、B淋巴细胞、CD4+IL-10+细胞分别为0.010±0.000、2.1±1.9、4.9±1.5,A组分别为0.480±0.110、5.1±2.6、5.1±2.3,B组分别为0.120±0.020、8.9±3.6、10.4±3.6,C组分别为0.560±0.050、4.7±1.7、6.3±3.1,D组分别为0.070±0.030、10.1±2.9、12.7±4.5,E组分别为0.680±0.030、5.6±3.2、6.1±3.4,各组间比较差异有统计学意义(F值分别为36.46、31.89、167.89,P均<0.01)。B、D组BALF中CD4+IL-10+细胞数与A组比较差异有统计学意义(q=5.8、6.4,P均<0.05);空白对照组BALF中IL-4、IL-10水平分别为(21±3)pg/ml、(44±12)pg/ml,A组分别为(128±23)pg/ml、(68±18)pg/ml,B组分别为(54±12)pg/ml、(127±27)pg/ml,C组分别为(133±21)pg/ml、(78±17)pg/ml,D组分别为(8±18)pg/ml、(135±34)pg/ml,E组分别为(143±26)pg/ml、(76±15)pg/ml,组间比较差异有统计学意义(F分别为37.20、143.78,P均<0.01)。B、D两组BALF中IL-10水平与A组比较差异有统计学意义(q分别为7.8、9.6,P均<0.05)。结论持续吸入变应原可使小鼠气道炎症减轻,产生免疫耐受,调节T淋巴细胞产生的IL-10参与了耐受形成。     

基质金属蛋白酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型气道细胞外基质重塑中的作用

目的 研究基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制剂（TIMP－1）在大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型气道和肺组织中的表达及其在细胞外基质重塑中的作用。方法 采用熏香烟加气管注内毒素法,建立大鼠COPD模型,观察其气道重塑的病理改变、肺功能及血气变化;用生化法测定支气管肺组织羟脯氨酸含量;用免疫组化法观察MMP－9、MMP－2及TIMP－1的蛋白定位及表达;用逆转录－聚合酶链反应法测定MMP－9、MMP－2及TIMP－1mRNA表达;用SDS－PAGE明胶酶谱学测定支气管肺组织MMPs酶活性。结果 用熏香烟加气管注内毒素法建立的大鼠COPD模型,其病理形态学改变、肺功能及血气变化均与人类COPD的改变相似。COPD模型组支气管肺组织羟脯胺酸含理、支气管黏膜下成纤维细胞、淋巴细胞数和肺泡巨噬细胞数及以I型胶原为主的细胞外基质含量显著高于健康对照组（P值均＜0.001)。COPD模型组MMP－9、MMP－2及TIMP－1在气道上皮、成纤维细胞、肺泡巨噬细胞、血管内皮细胞及部分肺泡壁细胞表达均明显增强,支气管肺组织MMP－9、MMP－2及TIMP－1 mRNA表达亦显著增强,72000MMP－2及92000 MMP-9酶活性亦显著增高。结论 MMPs表达增强提示细胞外基质降解增加,支气管肺结构破坏增加。TIMP－1在抑制MMPs活性的同时,促进成纤维细胞增生及胶原等合成增多,是导致细胞外基质修复和重塑的重要机制之一。