用分子杂交技术分析不同种株利什曼原虫动基体DNA同源性

用~(32)P和生物素标记利什曼原虫动基体DNA(k-DNA),以Southern 杂交法分析了杜氏利什曼原虫四川人分离株(四川人株),四川犬分离株(四川犬株)及蜥蜴利什曼原虫k-DNA微环同源性。结果表明,形态上不能区别的利什曼原虫k-DNA 微环同源程度有种和株水平的差异。用电镜观察四川人株和四川犬株k-DNA 网,测得两者微环周长相同。     

杜氏利什曼原虫39KD抗原基因同源性分析

目的：确定杜氏利什曼原虫39KD抗原基因的基因分析与同源性。方法：以杜氏利什曼原虫39KD抗原基因为探针,与不同种株的利什曼原虫进行Southem杂交,确定不同种株的利什曼原虫该基因的变化,并将该基因序列测定后,进行DNA序列数据库检索,分析其同源性,并进行数据库登记。结果：杜氏利什曼原虫不同地域株及婴儿利什曼原虫基因组中均含有该基因,并且无明显定位变化,整个基因在DNA数据库中无完全DNA同源序列,在GenBanK中的序列号为3280。结论：该抗原基因是利什曼原虫保守基因。     

光敏生物素标记k-DNA打点杂交鉴定利什曼原虫种株

用光敏生物素标记利什曼原虫动基体DNA(k-DNA),以打点杂交鉴定利什曼原虫。结果表明,在前鞭毛体数为10~4～10~5时,此法能显示出利什曼原虫不同的种和株间有明显的区别,并且发现采自国内黑热病流行病学特征不同的地区的虫株间k-DNA 在同源程度上存在差异,但用传统分类法则无法加以鉴别。此法为快速、简便地鉴定利什曼原虫及诊断黑热病提供了新的途径。     

利用SSU rRNA分子探讨中国利什曼原虫分子系统发育学

目的利用SSU rRNA分子探讨中国利什曼原虫基因多态性及其分子系统发育学。方法采用PCR法获得中国不同地区利什曼原虫SSU rDNA,通过Clustal X软件比对序列碱基,构建贝叶斯进化树。结果中国不同地区流行利什曼原虫分属于不同的支序,在中国除了有杜氏利什曼原虫外,还有热带利什曼原虫和一支在国际上还没有定种的未定种存在。结论在中国有未定种利什曼原虫存在。     

具有T辅助活性的抗原特异性T细胞杂交瘤

本文报道应用利什曼原虫抗原免疫CBA/T6小鼠,7天后取免疫小鼠的淋巴结经在体外抗原再刺激下培养一周后,分离得致敏的T淋巴母细胞,与T胸腺瘤株BW5147进行细胞杂交,获得几株具有利什曼原虫抗原特异性T辅助活性的T细胞杂交瘤。4B_(11)、4C_7和5D_7株表现两个亲代细胞的表面抗原特征Thy 1,1和Thy1,2。在B细胞抗半抗原斑点形成细胞应答过程中,T细胞杂交瘤的辅助活性仅接受利什曼原虫抗原的刺激信号,不应答其     

利什曼原虫无鞭体超微结构研究(貉虫株的进一步研究)

我们对利什曼原虫特别是对从貉分离的利什曼原虫无鞭体进行了超微结构的研究,并与文献资料进行对比,初步认为与杜氏利什曼原虫群相似,并首次报道在其胞浆中发现的“包函体”样结构。     

黑热病2例报告

黑热病（Kala-azar）又称内脏利什曼病（Visceral Loishmaniasis）,是由杜氏利什曼原虫（Leishmania domorani）引起,经白蛉传播的慢性地方性传染病。该病主要流行于长江以北地区,云南为非流行区,2005年6月和2008年7月我们发现了2例黑热病,现报告如下。     

小儿黑热病——附6例报告

黑热病是由黑热病原虫——杜氏利什曼原虫引起的、严重危害儿童健康的慢性传染病。主要流行于长江以北（16个省市），四川省为非流行区，但少数县有黑热病散发。现将我院（1956～1987年）收治的6例小儿黑热病临床资料分析如下：     

我国首次发现大沙土鼠携带利什曼原虫的报告

1.本文复习了以往的文献,自1954年——1958年在我省主要黑热病流行区检查6.006支犬,发现32支有犬利什曼病,阳率为5.3‰,同时检查24种野生动物4,122支(包括家鼠727支),结果均为阴性.2.这次在酒泉市,玉门市,镜铁山及敦煌等地检查喜马拉旱?,喇嘛仓鼠,大沙土鼠及子午沙土鼠等10种动物300多支,结果在92支大沙土鼠中16支耳朵增厚,结节,脱屑或溃疡等皮肤症状,其中有九支查见了利什曼原虫.3.在发现利什曼原虫的黑山湖及附近地区,发现了有蒙古白蛉,司氏白蛉,在河西其他地区如张掖,敦煌曾发现中华白蛉,还在敦煌发现硕大白蛉,关于大沙土鼠利什曼原虫可能是司氏白蛉传播的.4.黑山湖及其附近地区系半荒漠景观,有苏构杞及盐爪爪生长适于沙土鼠的生长,该地属于大陆性干燥的沙漠性气候,气温较低,年较差及日较差均大.5.对大沙土鼠的生态习性进行了初步的观察,喜棲居在富有苏构杞及盐爪爪等植物的沙丘上,对其食性,活动范围及时间加以简单的描述.6.从大沙土鼠发现利什曼原虫的意义,原虫的种型及自然疫源地存在的问题,加以初步的讨论,并提出今后工作的建议.     

深圳市1例黑热病病例实验室检测与分子鉴定

目的 对深圳市1例输入性黑热病病例进行实验室检测和分子溯源分析以确定感染虫株。方法 收集2023年3月15日深圳市确诊1例黑热病病例的骨髓穿刺液和血液进行实验室检测。对患者骨髓穿刺液涂片姬姆萨染色后进行显微镜检查,对血液样品采用内脏利什曼原虫快速诊断试剂（rk39）进行血清抗体检查,并提取全血DNA,PCR扩增内转录间隔区Ⅰ(internal transcribed spacer-1, ITS-1)序列并测序比对,同时基于ITS-1序列构建系统进化树。结果 对患者骨髓涂片显微镜检查查见大量利什曼原虫无鞭毛体,确诊为黑热病,患者血液采用rk39快速诊断试剂检测结果呈阳性,PCR扩增出ITS-1基因产物序列与预期大小一致,经NCBI数据库中比对,与婴儿利什曼原虫ITS-1基因序列相似度为100%,确定感染虫株为婴儿利什曼原虫。对扩增的ITS-1序列进行系统发育树构建发现与婴儿利什曼原虫聚到一个分支,且与所选的参比序列中的KC347299距离较近。结论 深圳市1例黑热病病例是由婴儿利什曼原虫引起的,黑热病在我国仍时有发生,应加强非疫区医务人员诊断技术,积极配合使用新的诊断技术进行辅助诊断,同...     

新疆皮肤利什曼病病原体SSU rDNA多变区PCR扩增及克隆

目的 鉴定新疆皮肤利什曼病病原体，方法 用利什曼原虫属特异引物Ｒ２２２和Ｒ３３３，从皮肤利什曼病患者皮肤病变组织，婴儿利什曼原虫和热带利什曼原虫基因组ＤＮＡ中扩增出一特异ＳＳＵｒＤＮＡ多变区片段，将其克隆到ｐＧＥＭ－ＴＥａｓｙＶｅｃｔｏｒ上，并筛选和鉴定出重组质粒。结果 以ＥｃｏＲＩ酶切，ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实获得的重组质粒包含ＳＳＵｒＤＮＡ多变区片段。结论 皮肤利什曼病病原体，婴儿     

抗杜氏利什曼原虫单克隆抗体识别抗原分子的检测

本文报道用SDS-PAGE、Western blot和ELISA方法,对杜氏利什曼原虫新疆株前鞭毛体中McAbs识别的抗原成分进行了检测。我们制备的抗杜氏利什曼原虫新疆株McAbs(A-9、A-11、C-11、E-12和H-10)共识别7条特异性抗原区带,抗原分子量分别为77000、74000、59000、54000、48000、43000和41000。     

内蒙古额济纳旗大沙鼠和蜥蜴体内的利什曼原虫及其媒介的调查研究

现场调查结果表明:内蒙古额济纳旗大沙鼠和蜥蜴均自然感染了利什曼原虫;感染原虫的大沙鼠耳组织无溃疡;该原虫虫体比其它利什曼原虫大,对小鼠不致病。但能在黑线仓鼠睾丸的塞氏细胞内繁殖;蒙古白蛉和安氏白蛉是大沙鼠利什曼原虫的主要传播媒介,微小白蛉新疆亚种为蜥蜴利什曼原虫的媒介;未发现当地居民有皮肤利什曼病,提示大沙鼠利什曼原虫对人类无致病作用。     

洋常春藤皂甙的杀利什曼原虫活性

洋常春藤Hedera helix叶据报道有抗蠕虫,抗真菌和灭螺活性。本文旨在研究它的杀利什曼原虫作用。从洋常春藤叶分离出(a)一个含60％的皂甙复合物的提取物,定名为CS60。(b)三个双糖链皂甙(Oidesrnosides):常春藤皂甙B、c和D(皂甙K_(10))。(c)它们相应的单糖链皂甙(monodesmosides)α-,β-和δ-常春藤皂甙。(d)常春藤甙元。这些化合物杀利什曼原虫活性的评价是在体外用分别从狗和人体内分离的2株利什曼原虫的无鞭毛虫来进行的,以N-甲基葡萄糖胺锑酸盐为对照。结果表明,CS60和双糖链皂甙对原鞭毛     

不同品系的小鼠对杜氏利什曼原虫感染的敏感性观察

本实验观察了8株近交小鼠及1株远交小鼠对杜氏利什曼原虫急性感染的敏感性。结果表明,615、C_(57)BL及SMMC/C×615三株小鼠在每鼠腹腔接种利杜体3×10~6、9×10~6及2×10~7后均可达到全部或接近全部感染成功,而且感染度也较高,接种量加大感染度亦加重,属于敏感株小鼠。其余6株小鼠则不易感染成功(SMMC/B、SMMC/C、ICR/JCI及昆明株)或仅有低度的感染(SMMC/A、SMMC/D),故属于不敏感株小鼠。鼠株对杜氏利什曼原虫的敏感性似与宿主的基因控制关系密切。     

小鼠对杜氏利什曼原虫中国株易感性及受染小鼠免疫反应的观察

作者用杜氏利什曼原虫中国株感染BALB/c、DBA/1、ICR和615四个品系小鼠,发现此四品系小鼠对该病原体的易感性和受染后的免疫反应各不相同,各品系小鼠受染后分别呈现自愈、潜伏和发病状态,与人群对杜氏利什曼原虫感染的易感性和免疫反应类型相似。     

新疆喀什地区利什曼原虫人群感染率调查

目的了解现阶段新疆喀什地区人群利什曼原虫感染现状,为制定防治规划提供依据。比较PCR和ELISA检测利什曼原虫无症状感染的效能。方法选取2009年9月新疆喀什地区黑热病流行严重的1县3乡四个调查点,在当地疾病预防控制中心的帮助下,采集黑热病患者及其家属和邻居的血液样品,分别编号,每份血样分抗凝血和非抗凝血。采用ELISA方法检测血清中利什曼原虫特异性抗体;用两组PCR引物RV1、RV2和K13A、K13B检测血样中利什曼原虫特异DNA片段。结果PCR法阳性检出率为82．67％,ELISA法阳性检出率为69．33％。结论现阶段新疆喀什地区黑热病感染率仍然颇高,尤其表现在与患者密切接触的的患者家属和邻居;PCR是检测无症状感染较敏感的方法。     

我国黑热病流行病学特征及其防治对策

黑热病 (Kala-azar) ,亦称内脏利什曼病 (Vis-ceral leishmaniasis) ,系利什曼原虫所引起的一种寄生虫病 ,给人体健康带来严重危害。在解放前 ,黑热病在我国流行十分猖獗 ,危害严重。新中国成立后 ,党和政府将黑热病列为重点消灭的五大寄生虫病之一 ,在各流行区 ,采取综合防治措施 ,开展了大规模的防治工作。至 1 95 8年 ,我国大部分流行区已基本消灭了黑热病。 70～ 80年代在苏、皖、鲁、豫、冀南、鄂北及陕西关中等广大平原地区仅出现少数皮肤型黑热病患者以及为数很少且病程较长的成年病人 ,未见新感染的病人 ,媒介中华白蛉数量也很少 ,…     

抗杜氏利什曼原虫杂交瘤单克隆抗体——针对中国株No.3抗体的检定分析

作者成功地获得8株分泌抗杜氏利什曼原虫中国株的单克隆抗体的杂交瘤。对其中5D11杂交瘤作了进一步检定分析,用5D11上清液对利什曼原虫不同种、株、期5种抗原进行ELISA实验,显示具有期特异性与一定程度种特异性。该单克隆抗体属IgG1亚类。用聚丙烯酰胺盘状电泳分析5D11杂交瘤腹水有一特异的明显区带,经进一步实验证明此区带即IgG1。初步定出在小鼠腹水电泳谱中IgG1的位置。     

内蒙古额济纳旗荒漠内黑热病宿主和人群皮肤带虫的调查

1972年的调查表明,额济纳旗是内蒙古的一个黑热病流行区,硕大白蛉吴氏亚种为本病的传播媒介,检查鼠类1025只,未查见利什曼原虫感染,动物宿主不明。1979～1982年,以该旗苏古淖尔公社策克南北两地约100平方公里面积的范围