人脑脊液载脂蛋白AⅠ、B100、CⅡ、CⅢ及E的测定

用载脂蛋白研究室建立的人血清载脂蛋白单向免疫扩散测定法,对人脑脊液载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅡ、CⅢ及E的含量进行了测定。结果表明,人脑脊液不含apoB100、CⅡ,含极微量的apoCⅢ,微量apo AI(1.00±0.54mg/dl,n=7,相当于正常人血清含量121.3±21.5mg/dl的0.8％)及相对较多量的apoE(0.69±0.16mg/dl,n=16,相当于正常人血清含量3.10±0.56mg/dl的22.2％)。并对所得结果进行了讨论。     

血清LSA测定在恶性肿瘤临床诊断中的初步应用

本文根据Svennerholm和蒋谷人等的方法略加改良,测定了蚌埠地区113例正常人,71例恶性肿瘤患者和82例非肿瘤疾病患者血清脂质结合唾液酸(LSA)的含量。正常值为12.4mg/dl(SD=±3.6mg/dl),71例不同肿瘤患者的平均值为28.2mg/dl(SD=±9.7mg/dl),阳性率为88.7％,82例非肿瘤疾病患者的平均值为16.82mg/dl(SD=±5.4mg/dl),假阳性率为17％。方法的灵敏度,重复性(平均CV=3.6％)和回收率(平均回收率=101.4％)测定结果是满意的。本研究的初步结果表明,血清LSA测定对肺癌、白血病、胃癌和食管癌具有一定的临床诊断价值。     

人血清载脂蛋白AⅡ免疫圆周扩散测定法研究

本文介绍人血清载脂蛋白AⅡ(apoAⅡ)免疫圆周扩散法。用纯化的人apoAⅡ免疫山羊制备抗血清。琼脂糖抗apoAⅡ抗体凝胶板,每孔加待测或稀释参考标准血清5μl,25℃扩散48小时,测量免疫反应沉淀环直径。结果:最小检测量58ng,测定范围17.3～69.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为1.5～4.6％和5.6％,样品回收率为96.6±4.3％。用本法测得我国成都地区成人apoAⅡ含量为:男26.7±4.4mg/dl(n=45),女26.6±4.6mg/dl(n=31)。     

单向免疫扩散法测定人血清Apo AⅡ水平

我们在国内初次建立了测定人血清载脂蛋白AⅡ的单向免疫扩散法,该法具有简便、精确、重复性好的优点。批内变异4.1％,批间变异6.7％。20～59岁正常血脂的男性Apo AⅡ水平为35.5±6.4mg/dl;20～49岁正常血脂的女性Apo AⅡ水平为34.2±4.6mg/dl。Apo AⅡ水平与HDL-ch,HDL_3-ch正相关,而与HDL_2-ch无相关。     

人血清载脂蛋白E酶联免疫测定法的研究

本文报道一种简便、灵敏、特异的人血清载脂蛋白E(apoE)的双抗体夹心酶联免疫测定法。采用羊抗人apoE—IgG 包被的聚苯乙烯板及过碘酸钠法交联的辣根过氧化物酶—羊抗人 apoE IgG交联物。载脂蛋白CⅠ、CⅡ、CⅢ、AⅠ、B及人血清白蛋白不干扰测定。最低检测量为 11ng,测定范围0.45～29mg/dl,板内及板间重复的CV分别为7.4％和6.7～14.9％;回收率为108±5.5％(n=8);测得成都地区血脂正常的成年人血清apoE含量为3.57±1.24mg/dl(n=42)。     

人血清载脂蛋白AI免疫圆周扩散测定法的研究

介绍一种人血清apoAⅠ免疫圆周扩散测定法。用纯化人apoAⅠ免疫山羊制备抗血清。制成0.8％琼?糖抗体凝胶板,点样5μl,25℃扩散48h测量结果。方法简便可靠,特异性、重复性好,无需特殊仪器。最小检测量125ng, 测定范围27.5～220.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为2.2～4.8％和6.3％,样品回收率98.9～110.0％,测得血脂正常的成年人血清apoAⅠ含量为男120.8±17.6mg/dl(n=40),女123.6±15.9mg/dl(n=19)。     

低剂量睾酮对心衰雄性大鼠血清白介素-10水平的影响

目的:观察低剂量十一酸睾酮(TU)对心肌梗死后慢性心力衰竭(HF)雄性大鼠血清白介素-10(IL-10)水平的影响。方法:对120只健康雄性SD大鼠随机行冠状动脉结扎(n=105)或假手术(PS,n=15)。6周后将存活的44只模型鼠随机分为2组:心力衰竭+TU治疗组(HF+TU组,n=22)给予TU 5 mg/kg.2周肌肉注射;心力衰竭组(HF组,n=22),给予安慰剂。用药12周后测定血清睾酮(T)及IL-10浓度。结果:HF组雄鼠血清T水平明显低于PS组(153.91±77.45 vs 475.28±161.37 ng/d1,P<0.05),HF+TU组T浓度与PS组无显著性差异(415.50±59.22 vs 475.28±161.37 ng/dl,P>0.05)。HF组较PS组血清IL-10浓度明显下降(4.90±1.32 vs 7.30±2.14 pg/ml,P<0.05)。HF+TU组较HF组血清IL-10浓度显著升高(6.55±2.11 vs4.90±1.32 pg/m1,P<0.05)。HF+TU组与PS组血清IL-10浓度无显著性差异(6.55±2.11 vs 7.30±2.14 pg/m1,P>0.05)。结论:低剂量睾酮可提高心肌梗死后慢性心衰雄性大鼠血清IL-10水平。     

人血清中视黄醇结合蛋白的激光散射比浊测定及临床应用

本文介绍了血清视黄醇结合蛋白(RBP)的激光散射比浊测定法。此法操作简单、快速、且能自动化。视黄醇结合蛋白浓度在9.0～146.0mg/L之间呈线性;批内CV9.1％;批间CV11.6％;回收率为97.5～109.0％。测定41名健康成人正常参考值为47.6±9.0mg/L(X±SD)。肝脏损害患者血清RBP为18.6±11.0mg/L,明显低于正常人。而肾脏损害患血清RBP为244.5±15.2mg/L,明显高于正常人。     

人血清载脂蛋白E火箭电泳测定法

本文报道一种简便、灵敏、特异的人血清载脂蛋白E(apoE)的火箭免疫电泳测定法。本法用自制的羊抗人apoE血清及1.5％的琼脂糖凝胶制成抗体凝胶板,血清apoE含量在1.1～8.9mg/dl范围内,在一定条件下电泳,其火箭峰高与抗原浓度成比例。最低检测量为5.5ng,板内及板间变异系数分别为2.6％和5.2％;回收率为94.0±3.9％(n=6);用此法测得成都地区血脂正常的成年人血清apoE的含量为4.7±1.2mg/dl(n=50)。     

定标方式对C-反应蛋白测定结果的影响

目的:比较不同定标方式对血清C-反应蛋白测定的影响。方法:分别采取六点和两点定标方式,用免疫透射比浊法检测6组不同浓度C-反应蛋白标准血清各30次。结果:两点定标6组测定结果分别为:(0.08±0.09)mg/dl,(0.81±0.11)mg/dl,(3.92±0.13)mg/dl,(7.50±0.12)mg/dl,(12.70±0.12)mg/dl,(27.69±0.03)mg/dl;六点定标的结果为:(0.02±0.12)mg/dl,(0.89±0.13)mg/dl,(3.88±0.11)mg/dl,(7.47±0.12)mg/dl,(12.18±0.13)mg/dl,(25.00±0.20)mg/dl。结论:两种定标方式对血清中C-反应蛋白的免疫透射比浊法的测定结果有显著性的影响。     

人血清载脂蛋白A-I的分离、纯化及其测定

用超离心法制备人血清高密度脂蛋白(HDL);甲醇/氯仿脱脂;经Sephadex G-150层析及DEAE-纤维素(DE-52)离子交换得纯化载脂蛋白A-I(Apo A-I),免疫新西兰兔,获得效价为1:32的特异性抗人Apo A-I抗血清。用本室建立的单向火箭免疫电泳法测定了158名健康中年人与9名老人的血清Apo A—I含量,结果发现:β-脂蛋白<5g/L,总胆固醇<2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为2.06±0.16g/L和2.07±0.15g/L;而β脂蛋白≥5g/L,总胆固醇≥2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为1.75±0.15g/L和1.82±0.1g/L,由此可见,血脂正常的男性和女性的Apo A—I含量均显著高于血脂高的男性和女性。80岁以上老年人的血清Apo A-I含量为2.1±0.1g/L,也在正常范围。与文献报道比较,我国人的血清Apo A-I含量高于外国人,这与我国人HDL水平较外国人高一致。     

大鼠血清ApoA-I、LDL的分离和纯化

用沉淀法分离大鼠血清高密度脂蛋白(HDL),SephadexG—200层析纯化;将脱脂的HDL(ApoHDL)通过SephadexG—200柱层析得到单一的载脂蛋白A-I(ApoA-1)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)测定该ApoA-Ⅰ的表观分子量为27000道尔顿,其免疫学特征及化学组成分析结果与文献报道一致。同时用超速离心法分离制备出纯化的大鼠血清低密度脂蛋白(LDL)。     

载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体结合脂质后抗炎性能的变化

目的 探讨载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白抗炎能力.方法 应用脂多糖诱导构建内毒素血症小鼠模型,选取3种半胱氨酸突变体[A-I(S52C)、A-I(K107C)、A-I(R173C)]及野生型载脂蛋白A-I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)构建重组高密度脂蛋白(rHDL52、rHDL107、rHDL173、rHDLwt)注射小鼠作为干预组(每组10只小鼠),以脂多糖组(9只小鼠)、生理盐水组(5只小鼠)作为对照.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测4种重组高密度脂蛋白干预后对肿瘤坏死因子(TNF)α,白细胞介素(IL)1β和IL-6的影响.病理检测各组小鼠肺组织.结果 小鼠注射后24 h,rHDL52组血清中TNF-α和IL-1β明显低于rHDLwt组[(39.66±2.44)pg/ml比(135.28±12.84)pg/ml;(66.83 ±6.24)pg/ml比(82.00±8.19)pg/ml,均P＜0.05].常规病理分析显示,rHDL52比rHDL107、rHDL173及rHDLwt更能够降低炎症细胞的浸润,保护肺器官免受损伤.结论 rHDL52拥有较野生型载脂蛋白更强的抗炎能力.     

男性患者声带息肉形成与血清载脂蛋白A-I相关性研究

目的：探讨男性患者声带息肉的形成与血清中载脂蛋白A-I（ApoA-I）的相关性。方法选取2010年1月-2012年12月期间住院诊断为声带息肉的男性患者为病例组,根据研究对象既往吸烟史将病例组分为吸烟者与不吸烟者。选取同期体检的男性正常人为对照组,测定血清中ApoA-I并进行统计学分析。结果男性声带息肉患者血清中ApoA-I值较对照组降低,差别有统计学意义（P＜0．05）;吸烟和不吸烟者中男性声带息肉患者ApoA-I值均较对照组降低,差别有统计学意义（P＜0．05）。经Logistic回归分析提示ApoA-I与声带息肉呈负相关。结论男性声带息肉患者血清中ApoA-I下降,ApoA-I有抑制声带息肉形成的作用。     

载脂蛋白A-I多态性研究

用DEAE-52离子交换层析分离到载脂蛋白的A-I(apo A-I)的多态性。方法简便快速,制备量大。SDS-PAGE证实为纯apoA-I,分子量约28000。此多态性中apoA-I_1apoA-I_2、apoA-I_3是卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)的激活剂,apoA-I4则是LCAT的抑制剂。对其中的apoA-I_2进行氨基酸组成分析,发现不含半胱和异亮氨酸。apoA-I多态性的免疫电泳结果表明,各多态性与apoA-I_2抗体有免疫沉淀反应,说明多态性抗原部位相同。     

用BA-ELISA法测定载脂蛋白A-I

介绍一种高灵敏度的裁脂蛋白A-I(Apo A-I)的测定方法——生物素-亲和素酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。本法的工作范围为0.25～4ng Apo A-I,灵敏度约0.1ngAp0 A-I,较已报道的放射免疫法(RIA)和ELISA高3～5倍以上。热处理或加入变性剂均不影响人血清Apo A-I的免疫测定结果。组内和组间变异系数分别为4.55和8.04。经本法测定77名正常成年人血清Apo A-I为1.34±0.23g/L((?)±SD),而且正常成年人血清ApoA-I浓度与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的浓度呈高度相关(r=0.83,p<0.001)。     

4种方法检测血浆载脂蛋白A-I结果的比较

用脱脂RID、不脱脂RID、EIA、ITA 4种方法对60例正常人、79例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者和39例冠心病(CHD)患者同时进行了血浆脂蛋白(apo)A-Ⅰ水平的测定。结果显示,正常人中apoA-Ⅰ水平脱脂RID法与不脱脂RID、EIA、ITA有极密切相关,r值分别为0.8091、0.6430、0.6281;脱脂RID法所测正常人血浆apoA-Ⅰ水平为152.58±18.51 mg/dl,非常显著高于其它3种方法,且脱脂RID法所测apoA-Ⅰ水平在三组间有极显著差异。表明脱脂RID法检测血浆apoA-Ⅰ水平对诊断糖尿病心血管并发症、冠心病有特异性。     

Transthyretin-derived amyloidosis: Probably a common cause of lumbar spinal stenosis

Background. Senile systemic amyloidosis (SSA) derived from wild-type transthyretin is a fairly common condition of old individuals, particularly men. The main presentation is by cardiac involvement, which can lead to severe restrictive cardiomyopathy. SSA is, however, a systemic disease, and amyloid deposits may appear in many other tissues but are thought to be without clinical symptoms outside the heart. Amyloid is a very common finding in cartilage and ligaments of elderly subjects, and transthyretin has been demonstrated in some deposits. Lumbar spinal stenosis is also a condition of usually elderly individuals in whom narrowing of the lumbar spinal canal leads to compression of nerves to the lower limbs.

Results. We questioned whether lumbar spinal stenosis sometimes could be a manifestation of undiagnosed SSA. In this first report we have studied the presence of amyloid in material obtained at surgery for spinal stenosis in 26 patients. Amyloid was found in 25 subjects. Transthyretin was demonstrated immunohistochemically in 5 out of 15 studied resected tissues. Four of the positive materials were analyzed with Western blot revealing both full-length transthyretin (TTR) and C-terminal TTR fragments, typically seen in SSA.

Conclusion. We conclude that lumbar spinal stenosis quite frequently may be a consequence of SSA and that further studies are warranted.     

The relationship between serum amyloid A and apolipoprotein A-I in high-density lipoprotein isolated from patients with coronary heart disease

Background Alteration in the protein composition of high-density lipoprotein （HDL） has been proposed as a mechanism for the development of coronary heart disease （CHD）.In HDL,an increase in serum amyloid A protein （SAA） accompanying the decrease in apolipoprotein A-I （apoA-I） has been found during the acute inflammation period.However,whether this phenomenon persists in CHD patients,a disease related to inflammation,is unknown.The purpose of the present study was to explore the relationship between SAA and apoA-I in HDL isolated from CHD patients.Methods Overall,98 patients with confirmed stable CHD and 90 control subjects matched for age and gender were enrolled in this case-control study.Potassium bromide （KBr） density gradient ultracentrifugation was used to isolate HDL from plasma.The levels of SAA and apoA-I in the HDL samples were detected by enzyme-linked immunosorbent assay kits.Pearson＇s correlation and general linear models were used in the analysis.Results Compared with controls,patients with CHD had a significant decrease in the amount of apoA-I （（14.21±8.44） μg/ml vs.（10.95±5.95） μg/ml,P =0.003） in HDL and a significant increase in the amount of log SAA （1.21±0.46 vs.1.51±0.55,P 〈0.00001）.Differences were independent of age,body mass index （BMI）,HDL cholesterol （HDL-C）,and other factors.An independently and statistically significant positive correlation between log SAA and apoA-I in HDL was observed only in the CHD group （β =2.0,P =0.026）.In the general linear model,changes in Iog（SAA）,age,age2,gender,BMI and HDL-C could explain a statistically significant 43% of the variance in apoA-I.Conclusions This study provides direct evidence for the first time that there was an independent positive correlation between log SAA and apoA-I in the HDL of CHD patients,indicating the alteration of protein composition in HDL.However,the question of whether this alteration in HDL is associated with impairment of HDL functions requires further research.     

载脂蛋白B与载脂蛋白A-I比值与糖尿病合并冠心病关系的研究

目的 评估血清载脂蛋白Apo B/Apo A-I在预测糖尿病患者冠心病方面的效果。方法 共2300例接受冠状动脉造影的患者入选此项研究。根据糖尿病诊断标准分为糖尿病组和非糖尿病组,同时建立冠心病（coronary artery disease, CAD）和非冠心病亚组。CAD诊断以冠状动脉造影为金标准。抽取研究对象空腹血行相关血脂指标检测并进行分析与统计。结果 在非糖尿病组中,根据几种主要心血管危险因素如年龄,性别,高血压,吸烟,三酰甘油(triglyceride, TG),总胆固醇(total cholesterol, TC)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)调整后,模型中的高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL),载脂蛋白A-I（Apo A-I）和载脂蛋白B（Apo B）/ Apo A-I在ROC曲线下的区域分别为0.707,0.703和0.710。在糖尿病组,HDL,Apo A-I和ApoB/Apo A-I的AUC分别为0.684,0.693,0.701。在预测CAD方面均具有统计学意义（P<0.001）。HDL,Apo A-I,Apo B/Apo A-I与冠状动脉病变的数量增加显著相关。非糖尿病组中Apo B/Apo A-I的相关系数最高,为0.176（P<0.001）,糖尿病组中Apo A-I的相关系数最高,为-0.239（P<0.001）ApoB/Apo A-I的系数为0.138（P=0.002）。结论 糖尿病人群中Apo B/Apo A-I可以独立于其他血脂指标对冠心病及冠状动脉病变数量有良好的预测价值。