人精液的冻贮研究

目的 研究在Ｔ－Ｇ型冷冻保护剂（Ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｍｅｄｉｕｍ,ＣＰＭ）作用下,速缓冻贮法对人精子结构和功能的影响。方法 随机双盲对照,将４５份正常精液随机分组,加与不加ＣＰＭ,以速缓冷冻法分别进行冻贮,冻贮前后分别进行常规分析、低渗肿胀试验、穿卵试验、超微结构观察及精子染色体分析。结果 未加ＣＰＭ组冻贮后的精液未见有精子复苏,经冷冻保存的精子质量明显降低,缓冻法对精子的影响显著小     

影响猕猴体外受精与胚胎移植成功率的因素分析

将电刺激采集的精液用两种方法优选后进行精子获能处理,然后与超排获得的成熟卵母细胞进行体外受精。受精卵用不同培养体系进行体外发育培养,并对发育到8细胞的11枚胚胎进行冷冻保存,将其中3枚胚胎解冻后移植给一只受体猕猴。结果表明: 上浮法和percoll法都是有效的精子优选法,对受精率的影响差异不显著; 咖啡因和dbcAMP在精子体外获能过程中缺一不可; 理想的受精密度应在2×105精子/ml左右; 在超促排卵后采集的卵母细胞进一步成熟过程中,添加血清和激素会取得更好的结果; 胚胎的发育过程中,血清和氨基酸都是必需的。冷冻保存后的解冻存活率虽然很高,但可能受受体猕猴数量或其他多种因素的影响,移植后并未受孕。     

精子形态与精液其他参数的关系及对体外受精结局的影响

目的 了解精子形态在体外受精(in vitro fertilization,IVF)中的作用.方法 回顾性调查在本生殖中心接受常规IVF治疗者共397个周期的精子正常形态率,397个周期按精于正常形态率不同分为A组(≤5%)、B组(5%14%),按IVF 临床结局分为临床妊娠、未妊娠及未移植组,分析其与精液其他参数的关系以及对IVF结局的影响.结果 精子正常形态率与精液其他参数如精子密度、活率及前向运动精子百分率(PMS)望显著的正相关(r分别为0.188、0.197、0.190,P<0.01),精子正常形态率、精子密度、活率及PMS与受精率均呈显著的正相关关系(r分别为0.237、0.171、0.155、0.187,P<0.01).A、B组及C组间受精率差异存在统计学意义(P<0.05),未移植组的精子正常形态率为(15.53±7.54)%,明显低于临床妊娠组的(20.05±9.51)%(P<0.05),但临床妊娠组与未妊娠组(19.06±9.14)%之间差异无统计学意义(P>0.05).在继发不孕患者中,A组年龄[(41.4±14.1)岁]明显大于B组[(35.4±6.4)岁]和C组[(34.7±4.6)岁](P<0.05,P<0.01).结论 精子形态对IVF受精率和结局有影响,精子正常形态率可能是预测IVF结果更好的参数;随着年龄的增长,精子正常形态率下降.     

细管冷冻人精液在人工授精上的应用

人类精子的冷冻贮存及人工授精，对某些男生不育症的治疗有一定价值，在人类优生及计划生育方面也有重要意义，但目前国内多采用安瓶法或颗粒法，本采用国产塑料细管和自制冷冻盘冷冻精液配用凯苏氏输精器，复温后直接授精，应用临床14例AID第一周期11人，妊娠4人，第二周期3人。妊娠3人，总妊娠7人，妊娠率为50％，均未发生出血、感染和其它不良反应，细管冷冻人精液人工授精，操作简单，安全、节省精液，克服了安瓶、颗粒容易污染、磨损、剥落、破裂，不易标记，冷冻不匀、占用空间较大，损失较多，使用时不易吸取完全等缺点，作还对20支细管和20支安瓶进行了比较，安瓶法平均活动率为66．75％，存活率为59．50％，细管的平均活动率为74．25％存活率为80．50％，细管法比安瓶活动率提高11．75％，存活率提高35．29％。人类精子的l冷冻贮存及人工授精，对某些男性不育症的治疗有一定价值，在人类优生及计划生育方面也有重要意义，但目前国内多采用安瓶法(ampoul)和颗粒法(Penef)。我所自1989年1月至1990年1月，采用塑料细营法(Plasticsfraws)冷冻精液配用凯苏氏输精器，复温后直接授精，使用方便。共做14例，17周期，妊娠7例，报告如下。     

种公牛冷冻精液的贮存与解冻使用

冷冻精液的贮存。制冻好的精液，放在盛有液氮的液氮罐内贮存。贮存时间，可再经常添加液氮，不使盛装冻精颗粒的提漏暴露在液氮面外，冻精可至少贮存一年以上。但要避免冻精与空气接触。以免影响精子活力和受胎率。因此，开启液氮罐取存冻精时，动作越快越好操作要利索、稳妥。     

人精子冷冻前后穿卵试验的对比研究

对12名健康生育男性精液冷冻前后精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验(SPA)变化进行了对比研究。献精者精子密度为124±38.8×10~6/ml,冷冻前精子活动率为75.6％±9.0％,冷冻后精子活动率为62.9％±11.9％,冷冻后精子活动率较冷冻前明显下降(t=4.18,P<0.01)。SPA值冷冻前为36.9％±11.8％,冷冻后为26.7％±9.7％,冷冻后SPA值较冷冻前显著降低(t=9.09,P<0.01)。冷冻后SPA值下降与精子活动率的降低无相关性(r=0.062,P>0.05)。     

精液预处理与体外受精结果观察

资料与方法 一、一般资料：选择2002年3月～2005年6月准备IVF—ET的患者共95例，年龄24-39岁。IVF—ET治疗周期前安排取精，做精液预处理试验，随后进行IVF—ET治疗。     

不同精液参数对体外受精结局的影响及预测价值

目的 探讨促排卵前常规精液检查以及优化处理后的各项精液参数对常规体外受精(IVF)结局的影响及预测价值.方法 回顾性分析13563不孕不育病例的临床资料,包括患者的各项常规IVF治疗周期数据,以及取卵日次日的常规IVF受精结局.将804例受精率<50%的患者纳入低受精率组,12759受精率≥50%的患者纳入正常受精率组.采用logistic回归模型分析不同精液参数对受精结局的影响,并利用受试者工作特征(ROC)曲线分析不同精液参数对常规IVF结局的预测价值.结果 低受精率组常规精液检查和优化处理后的各项精液参数均低于正常受精率组(P<0.05).Logistic回归分析结果显示,常规精液检查中的正常形态精子百分率以及正常形态前向运动精子总数、优化处理后的活动精子百分率是IVF受精结局的影响因素(P<0.05).ROC曲线分析结果显示,常规精液检查中正常形态精子百分率及正常形态前向运动精子总数、优化处理后的活动精子百分率预测受精结局的曲线下面积分别为0.603、0.635、0.625,灵敏度分别为73.25%、81.35%、81.41%,特异度分别为74.31%、84.25%及85.03%.结论 常规精液检查中正常形态前向运动精子总数和优化处理后的活动精子百分率对常规IVF受精结局具有预测价值.     

不液化精液体外处理的初步研究

①目的探讨体外处理不液化精液的方法。②方法随机选取不液化精液标本１５份，分别应用α－淀粉酶、淋巴细胞分离液（Ｆｉｃｏｌ液）及牛血清白蛋白（ＢＳＡ）处理标本并设置对照组，观察精子活动率、前向运动精子百分数和精子穿透力的变化。③结果经Ｆｉｃｏｌ液及ＢＳＡ处理后的精液精子活动率、前向运动精子百分数和精子穿透力较未处理组有显著提高（ｔ＝６．０９～２９．６６，Ｐ均＜０．０１）；经α－淀粉酶处理后的精液，前向运动精子百分数和精子穿透力较未处理组明显增高（ｔ＝６．０２～９．６７，Ｐ均＜０．０１）。④结论用Ｆｉｃｏｌ液及ＢＳＡ处理不液化精液，可以得到高质量的精子，有望在临床治疗精液不液化不育症方面推广应用     

体外受精与胚胎移植研究进展

作者综述我院自１９９０年建立体外受精与胚胎移植技术应用于治疗不育的研究。目前本技术已处于国内领先地位，技术的改进着重于如下几方面：①改进治疗周期超排卵方案，提高卵子受精率；②改良选择性减胎术，达到准确、简便、安全，减少多胎妊娠；③应用体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）技术为卵巢早衰患者及遗传病夫妇提供赠卵、赠胚胎治疗的方法；④建立第２代ＩＶＦ－ＥＴ技术，应用卵母细胞单精显微注射技术（ＩＣＳＩ）治疗严重男性因素与不明原因不育，同时展望人工辅助破‘壳’（ａｓｉｓｔｅｄｈａｔｃｈｉｎｇ）和提高子宫内膜对胚胎的接受性及提高种植率和妊娠率，利用显微注射操作技术发展种植前的诊断。     

ICSI在常规体外受精失败后卵子再受精中的应用

目的探讨卵细胞浆内单精子注射（ICSI）技术在常规体外受精失败后卵子再受精中的有效性。方法在12个体外受精失败周期中应用ICSI对未受精的MⅡ期卵子进行再受精,将获得的优质胚胎冷冻保存,选择适当时机复温后移植,移植前均行胚胎辅助孵化。结果106个未受精的成熟卵子接受ICSI,注射后92个卵子存活。其中75个卵子正常受精,受精率为70.8%（75/106）;12个卵子出现三原核或单原核。69个正常受精卵发生分裂,卵裂率为92.0%（69/75）。最后获得优质胚胎58个,冻融后共移植胚胎38个,其中1个周期的7个冻融胚胎均破碎而未移植,其余11个周期均有可供移植的胚胎。1例孕3月时流产,1例单胎临床妊娠分娩出正常婴儿,临床妊娠率为18.2%。结论ICSI使常规体外受精失败的卵子再受精,配合胚胎冻融及辅助孵化技术实现临床妊娠,具有一定的应用价值。     

体外受精胚胎移植中超声对卵泡的监测

应用实时扇形超声监测了23例体外受精病例经hMG/hCG促排卵的卵巢滤泡。用hCG前直径≥15mm的滤泡平均数为2.6个/人,各周期最大滤泡平均直径为18.5±2.6mm。卵抽吸日直径>15mm的滤泡平均数为3.2个/人;各周期最大滤泡平均直径为21±2.7mm。19例按方案完成者共回收卵101个,中间和成熟型占90.1％;受精率70.3％;化学妊娠3例;临床妊娠1例,于1988年6月7日分娩一男婴。     

体外受精-胚胎移植中胚胎碎片对临床妊娠率影响

目的 探讨体外受精-胚胎移植（IVF-ET）中胚胎碎片对临床妊娠率及种植率的影响。方法 观察246例行IVF-ET或卵母细胞浆内单精子注射病人胚胎碎片与临床妊娠率的关系。结果 与正常和轻度碎片的胚胎相比，严重碎片（〉50％）胚胎的临床妊娠率和种植率均明显降低（Х^2=10．112、9．510，P〈0．05），多胎妊娠率差异无显著性。结论 提高胚胎质量，减少移植胚胎数量，有助于提高IVF-ET的成功率。     

卵泡液中LIF对体外受精-胚胎移植的影响

①目的探讨体外受精妇女卵泡液中白血病抑制因子（LIF）水平对其体外受精-胚胎移植的影响。②方法应用双抗体酶联免疫吸附法（ELISA），检测45例体外受精妇女排卵时卵泡液中LIF的水平，分析其与取卵数、卵子受精率、早期胚胎的质量以及移植结局的关系。③结果卵泡液中LIF的浓度与卵子的受精率以及胚胎的质量呈正相关（r=0．613、0．591，P〈0．05）；妊娠组卵泡液中LIF的浓度与未妊娠组比较，差异无显著意义（t=0．630，P〉0．05）。④结论卵泡液中LIF水平影响卵子成熟、早期胚胎的质量。     

IVF-ET后早期自然流产病人宫腔镜检查结果分析

目的分析实施体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后早期自然流产病人宫腔镜检查结果。方法回顾我院2004年1月—2007年12月间实施IVF-ET后早期自然流产行宫腔镜检查病人84例的临床资料,分析宫腔镜检查结果,对发现的宫腔病变进行治疗,观察再次移植后的妊娠结局。结果 84例中58例(69.05%)存在宫腔病变,其中宫腔粘连32例(38.10%),子宫内膜息肉12例(14.29%),子宫内膜炎10例(11.90%),黏膜下子宫肌瘤3例(3.57%),部分性子宫纵隔1例(1.19%)。58例病人经治疗后于1年内进行再次IVF-ET,22例(37.93%)获得临床妊娠,宫外孕2例(3.45%);早孕自然流产1例(4.55%),分娩21例(95.45%)。结论在IVF-ET中出现早期自然流产时应将宫腔镜检查列为首选干预措施,对宫腔异常病人治疗后可以改善妊娠结局。     

盐酸异丙嗪体外杀精子作用的实验研究

３０例健康育龄男性精液的体外杀精试验显示：盐酸异丙嗪具有快速强力杀精作用,当药物浓度在１８６ｍｍｏ·Ｌ－１（０６ｍｇ／ｍｌ）以上时,在１０ｓ内死亡;在００７５～１２４ｍｍｏｌ·Ｌ－１（０．２５～０．４ｍｇ／ｍｌ）浓度范围内,其杀精作用随药物浓度增加和作用时间延长而增强。当浓度为０３１ｍｍｏｌ·Ｌ－１（０．１ｍｇ／ｍｌ）作用时间为３０ｍｉｎ时,杀精作用可接近或达到１００％;而浓度为１２ｍｍｏｌ．Ｌ－１（０．４ｍｇ／ｍｌ）时,５ｍｉｎ内即可杀灭全部精子     

应用抗p30血清检验人类精斑的研究

作者用自制的抗P30血清做琼脂双向扩散试验,检验人类精斑,并采用随机抽样和盲法试验与精子检出法进行比较。结果表明,用抗P30血清确证精斑的敏感性和准确性均高于精子检出法,且不受精液中有无精子的影响,也不受阴道液和唾液的干扰,并能正确区别人类与动物精斑,是目前确证人类精斑的最好方法。     

布舍瑞林(Buserelin)在体外受精中应用及对排卵前卵泡液类固醇的影响

从外周血及卵泡液中的激素水平评估两种不同超排卵方案在体外受精与胚胎移植中的作用。采用枸橼酸氯(?)酚胺(枸檬酸克罗米芬,clomiPhen citrate,CC)、人更年期促性腺激素(HMG)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)进行联合(CHh)超排卵13例,采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)的制剂布舍瑞林(buserelin)结合HMG/hCG(BHh)者11例。过早LH峰发生率CHh组为3/13,BHh组为0/11。BHh组妊娠4例,CHh组1例。卵泡液中黄体酮(P)及雌二醇(E_2)浓度,P/E_2 比值BHh组均低于CHh组。P/E_2比值在一定范围内对卵子受精有利。