转录后水平的基因沉默--RNA干涉

RNA干涉（RNAinterference,RNAi)是1998年首次在秀丽线虫中发现并证明属于转录后水平的基因沉默（PTGS）机制，它利用双链RNA（dsRNA)特异性地降解相应序列的mRNA成为siRNA，从而特异性地阻断相应基因的表达，广泛存在于从真菌到植物。从无脊椎动物到哺乳动物的各种生物中，本文介绍了基因沉默的机理，RNA干涉的分子机制及技术应用等方面的进展。RNA干涉在后基因组时代的基因功能研究和药物开发中将具有广阔的发展前景。     

RNA干涉：沉默基因的机制及应用研究新进展

RNA干涉（RNAinterference,RNAi)是一种由双链RNA（double-strandedRNA,dsRNA）始动的序列特异性基因沉默机制，广泛存在于各种生物，乃至人类；对RNAi分子机制及生物学意义研究不断深入，已发现了许多参与RNAi的基因和蛋白质（酶类），并证明了RNAi与细胞分化及生物发育密切相关。同时RNAi也是一种研究基因表达调控和基因功能强有力的工具，本就RNAi的分子机制，生物学意义及其应用研究方面的新进展做一介绍。     

特定序列的siRNA可通过TLR7引起Ⅰ型干扰素反应

RNA干扰（RNA interievence，RNAi）是双链RNA介导的转录后基因沉默现象。在无脊椎动物中，直接给予长的双链RNA（double—strand RNA，dsRNA）就可以引起RNAi现象，但是在哺乳动物中，长链dsRNA可以引起机体的防御性免疫反应，导致Ⅰ型干扰素的大量产生。2001年，人们发现应用短的dsRNA（即siRNA），就可以在哺乳动物细胞中引起有效的基因沉默现象，并且siRNA不会被免疫系统识别，即不具有免疫刺激性。     

RNA干扰

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是几近年发现的基因表达调节新机制，双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）以调节子的身份降解目的mRNA，从而调节目的基因的表达。这一发现使人们重新认识了RNA在基因信息流控制过程中的重要性。RNAi的发生机制除了研究最多的转录后基因沉默外，还发现与翻译水平调节和基因组甲基化等事件有关。RNAi被应用于生命科学的很多方面：在基因功能研究中它已成为倍受青睐的基因敲下的工具，而且它正促使新一轮基因组范围内基因功能研究运动的蓬勃开展；在癌症、病毒疾病以及代谢失调症等重大疾病的治疗方面，RNAi正显示出巨大的临床应用潜力，犹如给医药界带来了新鲜空气一样令人振奋。     

什么是RNA干扰技术？

RNA干扰（RNA interference，简称RNAi），是近年来被《Science》杂志连续几年评为世界十大科技成果之一。RNAi是短分子的RNA，它可以降解同源RNA，可以封闭相关基因的表达，使基因出现沉默现象，因此可以调控特定基因，被用于多种遗传病、多种病毒和肿瘤的抑制，其应用前景非常广阔，值得进行广泛的研究和应用。     

RNAi及其应用

RNAi（RNA interfeFence，RNAi）指将与内源性mRNA互补的dsRNA（double-strandedRNA，dsRNA）导入细胞后，引起该mRNA特异性的降解，导致mRNA编码的基因不能表达，发生基因沉默。RNAi存在于许多的生物体内，如线虫、果蝇、蛇、斑马鱼、青蛙、老鼠和人等。在自然界中，RNAi有很重要的生物学作用，它既能保护基因对抗由转座子和重复序列引起的不稳定性，也可以对抗病毒等外源性物质的侵入。最近，基因分析证明RNAi在内源基因调控方面也有重要作用。     

基因免疫

<正>基因免疫是近年来快速发展的一种新型免疫方法。它的基本步骤是把一段基因质,即可能转译成蛋白抗原的DNA或RNA序列直接注入体内,让体内的细胞来表达抗原,从而致敏机体的免疫系统。这是一个非常简单的方法,但它的名称仍存在一些混乱,国际卫生组织已经正式命名这种方法为核酸免疫法（nucleic acid vaccination）。由于大多数研究迄今是用DNA质粒进行,DNA疫苗（vaccine）是最常见诸于学术文献的名称,同时也有一部分学者坚持应该称做遗传免疫（genetic immunization）,但如此有可能会造成社会大众误认为这是一种可遗传携带的免疫效果。结合中文的特点,本文试将其译为基因免疫,希望能抛砖引玉,最终有一个大家都接受的科学命名。     

RNAi的机制及在医学研究中的应用

RNAi干扰即一些小双链RNA可高效、特异地阻断体内特定基因的表达,导致特异mRNA降解,从而引起生物体内特异基因的沉默,使细胞表现出某种基因表型的缺失。近年来,RNAi这种技术作为一种简单有效的代替基因敲除的遗传工具在医学研究中得到了广泛的应用并有望成为攻克病毒、肿瘤等疾病的有效手段。     

RNA干涉

RNAi(RNA interference)即RNA干涉，是最初在线虫Caenorhabditis elegans中发现的在双链RNA(dsRNA)的介导下特异性降解相应序列的mRNA的现象，属于转录后基因沉默(PTGS)机制，广泛存在于从真菌到植物，从果蝇等无脊椎动物到鼠等哺乳动物的多种生物中。RNAi是自然存在的生物抵抗病毒入侵、抑制转座子活动的一种防御性机制，对于生物体的基因调控和生长发育可能也有着重要的作用。由于其存在的广泛性以及抑制基因表达的特异性和高效性，RNAi已经在短短的几年时间里成为功能基因组研究中的有力工具。     

siRNA和microRNA用于抗病毒的研究进展

1999 年,Hamilton 和 Baulcombe[1]首次提出了小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA)的概念,发现植物中自然发生的 siRNA 能引起转录后的基因沉默现象.2001 年,Elbashir 等[2]发现合成的 siRNA 能够引起不同哺乳动物细胞系的基因沉默现象.这...     

miR-211微RNA高表达与口腔癌预后不良的相关性

据Chang KW[J Dent Res，2008，87（11）：1063—1068]报道，miR-211高表达可能与口腔癌的发展和患者预后不良相关。微RNA（miRNA）是一种在基因沉默中发挥作用的非编码RNA，可能参与肿瘤发生。miR-211定位于染色体15q13，这是在癌症中经常发生变化的基因座。但miR-211的致癌作用尚未阐明。为此，台湾台北国立阳明大学口腔医学院的Chang KW及其同事研究了miR-211在口腔癌中的致病作用。     

自身免疫笥甲状腺疾病遗传易感基因的新认识

自身免疫性甲状腺疾病（AITD）与遗传因素密切相关，已发现AITD和HLA－Ⅱ等位基因、杀伤性T淋巴细胞相关抗原4基因（CTLA－4）等多种免疫调节基因有着广泛的联系。而D连锁基因位点（GD1－3）的确立，为AITD遗传易感基因的研究提供了新的前景。     

RNA干涉

RNAi(RNA interference)即 RNA干涉 ,是最初在线虫 Caenorhabditis elegans中发现的在双链 RNA(ds RNA)的介导下特异性降解相应序列的 m RNA的现象 ,属于转录后基因沉默 (PTGS)机制 ,广泛存在于从真菌到植物 ,从果蝇等无脊椎动物到鼠等哺乳动物的多种生物中。RNAi是自然存在的生物抵抗病毒入侵、抑制转座子活动的一种防御性机制 ,对于生物体的基因调控和生长发育可能也有着重要的作用。由于其存在的广泛性以及抑制基因表达的特异性和高效性 ,RNAi已经在短短的几年时间里成为功能基因组研究中的有力工具     

沉默hHBrk1基因对肺癌细胞增殖及迁移能力的影响

目的：研究玉米Brick1的人类同源基因hHBrk1（human homology of Brick1）对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响。方法：用质粒介导的siRNA（small interfering RNA）技术建立hHBrk1基因表达沉默的肺癌细胞模型；用细胞生长曲线、克隆形成率实验及流式细胞术分别比较不同处理的95D细胞增殖及细胞周期的变化；用Transwell细胞侵袭实验系统研究hHBrk1表达沉默对肺癌细胞迁移能力的影响。结果：成功筛选出hHBrk1基因表达抑制的细胞模型；hHBrk1表达沉默细胞增殖能力和细胞周期与对照组相比无明显改变，但hHBrk1表达沉默细胞迁移能力明显减弱。结论：hHBrk1可能参与调控肺癌细胞迁移能力。     

云南滇南地区不同民族地中海贫血基因遗传差异性研究

目的 了解云南滇南地区有贫血症状的5个民族的常见地中海贫血的基因遗传差异性。方法 收集2017年9月至2019年5月于云南省滇南中心医院精准医疗诊断中心行地贫基因检测的有贫血症状的5个民族的患者189例，其中汉族有93例，彝族52例，壮族18例，傣族5例，哈尼族21例，比较其地贫基因型分布及遗传差异性。结果 不同民族年龄比较差异无统计学意义（P>0.05）。α-地贫发生率（14.28%）高于β-地贫（12.17%）。缺失型α-地贫24例，非缺失型α-地贫3例，缺失型α-地贫发生率在不同民族两两之间比较差异无统计学意义（P1>0.005）；发生率由大到小依次为：傣族、壮族、彝族、汉族、哈尼族，基因型分布：αα/--SEA>αα/-α3.7>αα/-α4.2=--SEA/-α3.7。缺失型β-地贫发生率在不同民族之间差异无统计学意义（P>0.05），发生率由大到小依次为：傣族、壮族、彝族、汉族、哈尼族，基因型以52A>T最常见。非缺失型α-地贫共3例，其中傣族出现1例RNA剪接突变427T>C；汉族出现2例错义突变369C>G。结论 在云南滇...     

一种高效表达小干扰RNA载体的构建研究

目的：用mir30前体骨架来构建高效表达小干扰RNA载体。方法：通过基因合成的方法，将mir30前体骨架进行全长基因合成，并在合成的mir30前体骨架中引入合适的酶切位点用于外源发夹DNA的克隆，然后将之克隆到含U6启动子的表达载体中。将针对绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）的小干扰RNA克隆到以上表达载体中，通过转染及Western blot来检测新的小干扰RNA表达载体的基因沉默效率。结果：同目前常用的含polⅢ的小干扰RNA表达载体相比较，用mir30前体骨架表达针对GFP的小干扰RNA的表达载体可以明显抑制GFP的表达。结论：用mir30前体骨架构建的小干扰RNA表达载体可高效表达外源小干扰RNA。