婴幼儿化脓性脑膜炎病原菌分布及耐药性临床分析

目的了解郑州地区婴幼儿化脓性脑膜炎病原菌及药敏试验,为临床合理用药提供依据。方法对2008-01-2010-12我院收治的化脓性脑膜炎患儿进行脑脊液涂片及培养,按照《全国临床检验技术操作规程》进行细菌分离及鉴定,用K-B纸片扩散法进行药物敏感试验。结果 110株病原菌以革兰氏阳性球菌为主,共69株（62.73%）,革兰氏阴性杆菌共41株（37.27%）,革兰氏阳性球菌中凝固酶阴性葡萄球菌检出率下降,而革兰氏阴性杆菌中以大肠埃希菌为主的则逐步增加。结论郑州地区婴幼儿化脓性脑膜炎病原菌以大肠埃希菌和凝固酶阴性的葡萄球菌为主。临床医师应对化脓性脑膜炎的患儿及早进行病原学检测及药物敏感实验,结合临床表现,参考细菌药敏结果合理使用抗生素。     

核苷酸结合寡聚结构域受体1作为先天免疫识别受体在血管平滑肌细胞 激活中的作用★

目的：核苷酸结合的寡聚结构域受体1 是新近发现的先天免疫细胞内模式识别受体。实验通过观察细菌细胞壁粘肽对血管平滑肌中细胞内核苷酸结合的寡聚结构域受体1激活和表达的影响，探讨核苷酸结合的寡聚结构域受体1介导的先天免疫信号通路在血管平滑肌激活中的作用。 方法：实验于2006-06/2007-03在大连医科大学附属二院中心实验室完成。①实验材料：人冠状动脉血管平滑肌细胞购自Cambrex公司。②实验过程：体外培养人冠状动脉血管平滑肌细胞，用核苷酸结合的寡聚结构域受体1激动剂细菌细胞壁粘肽（10 mg/L）刺激0，3，6和24 h。③实验评估：用实时定量反转录-聚合酶链反应检测平滑肌细胞中核苷酸结合的寡聚结构域受体1 mRNA的表达，用酶联免疫吸附法检测细胞培养物上清液中白细胞介素8和肿瘤坏死因子α的浓度。 结果：①血管平滑肌细胞在静息状态下表达低水平的核苷酸结合的寡聚结构域受体1。细菌细胞壁粘肽刺激能够引起血管平滑肌细胞中核苷酸结合的寡聚结构域受体1 mRNA表达上调(从0.164±0.005增加到0.231±0.027，P < 0.05)。②酶联免疫吸附法显示细胞培养物上清液中白细胞介素8和肿瘤坏死因子α的浓度也显著增加[白细胞介素8从（0.12±0.01）μg/L 增加到（2.31±0.11）μg/L，肿瘤坏死因子α从（4.22±0.50）ng/L 增加到（143.11±12.58）ng/L，P < 0.01]。 结论：推测血管平滑肌细胞中的核苷酸结合的寡聚结构域受体1介导的先天免疫信号通路被激活，参与了动脉粥样硬化的发生和发展。     

亚低温延长脑梗死治疗时间窗及其机制

目的观察局部亚低温能否延长脑梗死治疗时间窗,并探讨局部亚低温对脑缺血保护作用的机制。方法用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组,常温缺血组和亚低温缺血组,两个缺血组各分为5个亚组:分别缺血2、3、6、8、12h再灌注4h后处死,其中亚低温组于缺血后30min实施病灶侧脑亚低温并持续至再灌注期。处死大鼠前进行神经功能缺陷评分;用TTC染色及计算机图像分析技术,观察脑梗死体积;TUNEL法观察神经细胞凋亡情况;免疫组织化学法及原位杂交法检测核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)p65及其mRNA的表达,并进行定量分析。结果亚低温组各组的脑梗死体积分别为(57·39±37·62)mm3、(74·09±61·00)mm3、(81·26±25·46)mm3、(87·43±54·81)mm3和(111·10±43·67)mm3,与常温组比较,脑梗死体积分别减少了63%、55%、56%、70%和63%;神经功能缺陷评分亚低温组明显低于相应时间点常温组(P<0·05orP<0·01);亚低温组半暗带NF-κBp65表达明显下降,凋亡的神经细胞明显减少(P<0·05或P<0·01)。结论局部亚低温有可能延长脑梗死溶栓治疗时间窗;其机制可能为亚低温抑制NF-κB激活,进而抑制神经元凋亡,缩小脑梗死体积,促进脑缺血后神经功能恢复。     

基质细胞衍生因子-1诱导神经干细胞靶向性迁移的实验研究

目的 观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对神经干细胞(NSCs)迁移的影响.方法 由胚胎大鼠脑组织获取NSCs并进行传代培养和分化鉴定,使用流式细胞术检测NSCs纯度及SDF-1特异性受体CXCR4的表达情况,之后利用Blind-Well小室体外迁移体系观察不同浓度的SDF-1(0 ng/L、1 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL和1000 ng/mL)对NSCs迁移数量的影响,并使用μ-载片观察SDF-1对NSCs迁移距离的影响.结果成功分离培养得到了能够在体外不断分裂增殖、具有多向分化潜能的NSCs,连续传3代后绝大部分细胞nestin表达阳性,nestin和CXCR4的共表达率达到80%左右.细胞趋化实验结果表明,SDF-1对NSCs有较强的趋化作用,随着SDF-1浓度的升高,发生迁移的细胞数量也随之增加,并于SDF-1浓度为500ng/mL时达到最高峰[(256.79±38.27)个细胞/每高倍视野].在μ-载片细胞生长通道两侧的SDF-1浓度梯度(500ng/mL→0ng/mL)作用下,由细胞克隆球迁出的细胞呈不对称分布,通常有更多的迁出细胞分布于趋化因子浓度较高的一侧,且该侧细胞的最大迁移距离也比对侧远.结论 SDF-1与其特异性受体CXCR4相巨作用能够诱导NSCs发生靶向性迁移.     

当归含药血清通过调控miR-129表达对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用

目的 探讨当归含药血清通过调控微小RNA-129(MicroRNA-129,miR-129)表达对阿尔茨海默病PC12细胞的保护作用。方法 分别以1.5 g/kg当归药液及等量生理盐水对SD(Sprague Dawley)大鼠灌胃处理,配制成10%含药血清及正常血清培养液; 将PC12细胞分为空白组、模型组、药物组、药物+Control小干扰RNA(Small interference RNA,siRNA)组、药物+miR-129 siRNA组,除空白组外,其余各组均用30 μL的Aβ_25-35溶液诱导细胞损伤24 h构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)细胞模型,空白组及模型组用空白血清培养液培养,其余各组用10%含药血清培养液培养,培养48 h后收集各组细胞观察细胞形态学; 实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测其中miR-129表达水平,采用甲基噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测各组细胞的增殖抑制率; 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡及周期情况; 蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测细胞凋亡相关因子蛋白的表达水平; 酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunoSorbent assay,ELISA)试剂盒检测乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(T-superoxide dismutase,T-SOD)水平。结果 与空白组比较,模型组PC12细胞贴壁功能受损,miR-129、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白水平、S期及G2/M期细胞数目、T-SOD水平降低(P<0.05),细胞抑制率、凋亡率、半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax),G0/G1期细胞数目、LDH,MDA水平升高(P<0.05); 与模型组比较,药物组细胞贴壁功能改善,miR-129,Bcl-2蛋白水平、S期及G2/M期细胞数目、T-SOD水平升高(P<0.05),细胞抑制率、凋亡率、Caspase-3,Bax,G0/G1期细胞数目、LDH,MDA水平下降(P<0.05); 与药物组、药物+Control siRNA组比较,细胞贴壁功能受损,miR-129,Bcl-2蛋白水平、S期及G2/M期细胞数目、T-SOD水平降低(P<0.05),细胞抑制率、凋亡率、Caspase-3,Bax,G0/G1期细胞数目、LDH,MDA水平升高(P<0.05)。结论 当归含药血清对于阿尔茨海默病细胞模型具有一定的保护作用,其机制可能与上调miR-129表达有一定关系。     

抑郁症诊断筛查量表的编制及其效度检验

目的为了提高国内躯体疾病病人抑郁症的识别率,制定一个适合在中国使用的抑郁症诊断筛查量表并评估其效度。方法在《DSM-IV轴I障碍用临床定式检查病人版》(SCID)的“重性抑郁发作”基础上多次修订编制“抑郁症诊断筛查量表”。预试验由受过培训的精神科护士对二级综合医院的99例住院病人进行了评估。结果显示,评定员间针对有无重性抑郁发作的一致性极好(ICC=1.00);其中85例完成了盲法重测,重测一致性良好(ICC=0.91)。由受过培训的精神科护士采用筛查量表对分层、随机整群抽样的北京35家一级、8家二级和7家三级综合医院年龄≥15岁、病情允许且交流无明显困难的2877例顺序就诊的门诊病人和调查期间在院的2925例住院病人进行调查,每个病例的筛查时间为15～20min。对所有筛选阳性和随机选择的10%筛选阴性的病人共565例由不知道筛选结果的精神科医师进行SCID检查。结果护士使用的抑郁症筛查量表诊断为重性抑郁发作与精神科医师使用的金标准SCID诊断为重性抑郁障碍的准确度为96.8%,Kappa值0.87,敏感度98.6%,特异度96.6%,假阳性率3.4%,假阴性率1.4%。结论抑郁症筛查量表的敏感性和特异性高,信效度好,适合非精神科医师使用,可以在抑郁症流调和临床中使用以代替复杂的SCID检查。     

工娱治疗对慢性精神分裂症患者康复效果的对照研究

目的探讨工娱治疗对慢性精神分裂症患者康复效果的影响。方法选取符合《中国精神障碍分类与诊断标准(第3版)》(CCMD-3)慢性精神分裂症诊断标准的患者,共100例。采用随机数字表法分为研究组和对照组,各50例。两组均使用抗精神病药物,研究组辅以12周的工娱治疗。分别于治疗前后采用阴性症状量表(SANS)、护士用住院病人观察量表(NOSIE)及世界卫生组织生活质量表(WHOQOL-100)对两组进行评定。结果治疗后研究组SANS总分及各因子分均下降(P均0.01);NOSIE总分及消极因素分下降而积极因素分上升(P均0.01);生活质量表评定除心理领域、精神支柱外,其它各领域评分均明显提高(P均0.01);而对照组各项评分均无明显变化。结论工娱治疗对慢性精神分裂症有明显疗效,有利于改善精神分裂症患者的生活质量,有利于患者重返社会。     

喹硫平与利培酮对癫痫所致精神障碍疗效比较

目的探讨癫痫所致精神障碍患者应用喹硫平的临床疗效。方法选取84例符合《中国精神障碍分类与诊断标准(第3版)》(CCMD-3)癫痫所致精神障碍诊断标准的患者,采用随机数字表法分为对照组与观察组各42例。对照组接受利培酮治疗,从小剂量0.5mg/d开始,每隔2天增加药物的使用剂量,每次增加0.5mg/d,最大剂量不超过5mg/d。观察组则接受喹硫平治疗,从小剂量25mg/d开始,每隔2天增加药物的使用剂量,每次增加25mg/d,两周后增加剂量最高至400mg/d。此外,对于伴有锥体外系副反应的患者,可加用安坦;对于失眠、焦虑严重的患者,可加用苯二氮艹卓类药物治疗。于治疗前后采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评定临床疗效,采用副反应量表(TESS)评定不良反应。结果观察组总有效率为95.2%,高于对照组73.8%,差异有统计学意义(P0.05)。PANSS精神病理评分(17.7±4.8)、阳性评分(13.4±2.5)、阴性评分(27.1±5.9)和不良反应发生率11.9%均低于对照组(24.3±3.1)、(16.6±2.7)、(35.8±2.7)、35.7%,差异有统计学意义(P0.05)。结论喹硫平对癫痫所致精神障碍的疗效和安全性优于利培酮。