脾虚湿盛肝郁证溃疡性结肠炎大鼠模型的建立与评价

目的:建立并评价符合中医证候特点的脾虚温盛肝郁证溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型.方法:45只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)组、病证结合组、模型组.正常对照组正常饲养,DSS组定量灌胃10％DSS溶液,病证结合组采用环境、饮食、情绪干预造模,模型组采用DSS...     

肝郁脾虚证动物模型评价方法

总结近年来肝郁脾虚证动物模型的评价标准,从宏观表征、行为学实验、肝郁和脾虚的客观指标等方面总结肝郁脾虚动物模型的评价方法,为评价肝郁脾虚证动物模型提供理论指导。     

老年肝郁失眠证候大鼠模型的建立和评价

目的:建立并评价复合型老年肝郁失眠证候大鼠模型。方法:Wistar大鼠随机分为环境对照组,单因素模型组(睡眠剥夺组),复合型模型组,复合型模型+舒郁安神方35 g.kg-1.d-1治疗组。采用D-半乳糖腹腔注射60 mg.kg-1.d-1大鼠6周致亚急性衰老模型,然后采用夹尾刺激法致肝郁,每次刺激30 min,1日2次,持续1周,最后放入自制睡眠剥夺箱中进行快速眼动睡眠(REMS)剥夺48 h,制作老年肝郁失眠证候大鼠复合型模型。观测大鼠体征、脑部自由基水平及血浆6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。结果:与环境对照组、单因素模型组、舒郁安神方组比较,老年肝郁失眠证候复合型模型组大鼠丙二醛(MDA)、TXB2含量均显著升高(P<0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)活性、6-keto-PGF1a含量及6-keto-PGF1a/TXB2均显著降低(P<0.01)。结论:老年肝郁失眠证候大鼠模型具有临床证候病理特征,是可行、可靠的复合型动物模型。     

冠心病气虚血瘀证大鼠模型的建立

应用疲劳跑步运动复合左冠状动脉前降支高位结扎的方法建立冠心病气虚血瘀证病证结合大鼠模型。该实验选用Wistar雄性大鼠,随机分为假手术组(JSS)、单纯结扎冠脉组(DZ)、疲劳跑步运动复合结扎冠脉组(PZ)。DZ组进行单纯冠脉结扎;PZ组利用小动物跑台进行为期2周的跑步运动造成疲劳模型,在此基础上进行冠脉结扎,术后以1次/2 d的频率维持28 d的力竭跑步;于术后28~31 d观察大鼠宏观体征,分别采集大鼠超声心动检测指标、呼吸幅度对大鼠冠心病气虚血瘀证的主症进行评价;采集空场实验相关指标、力竭运动时间、足底图像色彩饱和度对兼症进行评价;采集舌面色彩饱和度对舌象进行评价;采集脉搏搏动幅度对脉象进行评价。同时对血液流变学、凝血功能等指标进行检测。结果显示,术后第28天开始,PZ组大鼠主症、兼症、舌象、脉象均符合冠心病气虚血瘀证证候表现,结合相关病理性检测结果证明以疲劳跑步运动复合左冠状动脉前降支高位结扎的方法在大鼠体内可以成功建立冠心病气虚血瘀证病证结合模型。     

4种冠心病气虚血瘀证大鼠模型建立方法的比较

对单纯结扎冠状动脉、控制饮食复合结扎冠状动脉、疲劳跑步复合结扎冠状动脉、控制饮食+疲劳跑步双因素复合结扎冠状动脉4种方法建立的冠心病气虚血瘀证病证结合大鼠模型进行比较。该实验选用Wistar雄性大鼠,随机分为假手术组(SHAM)、单纯结扎冠脉组(L)、控制饮食复合结扎冠状动脉组(DL)、疲劳跑步复合结扎冠状动脉组(EL)、控制饮食+疲劳跑步双因素复合结扎冠脉组(DEL)。L组进行单纯冠脉结扎;DL组通过2周控制饮食造成脾胃气虚为主的全身气虚大鼠模型,在此基础上结扎冠脉,术后继续控制饮食;EL组通过2周跑台运动造成大鼠全身气虚模型,在此基础上进行冠脉结扎,术后以1次/2 d的频率维持力竭跑步;DEL组通过2周控制饮食、跑台运动造成大鼠全身气虚模型,在此基础上进行冠脉结扎,术后继续控制饮食并以1次/2 d的频率维持力竭跑步;于术后4周观察大鼠宏观体征,分别采集大鼠超声心动检测指标、呼吸幅度对大鼠冠心病气虚血瘀证的主症进行评价;采集空场实验相关指标、力竭运动时间、足底图像色彩饱和度对兼症进行评价;采集舌面色彩饱和度对舌象进行评价;采集脉搏搏动幅度对脉象进行评价。同时对脑钠肽、内皮素等指标进行检测。结果显示术后4周,通过疲劳运动复合结扎冠脉方法建立的模型与其他3种方法建立的模型比较与临床病因学基础以及与中医相关理论体系的联系更密切,在完整体现中医证候的特征方面具有一定的优势,更符合临床实际发病的原因与特征,是一种条件可控、重复性好的冠心病气虚血瘀证病证结合大鼠模型。     

咳嗽变异性哮喘肝郁肺虚病证结合动物模型的建立和评价

目的:探索CVA肝郁肺虚病证结合大鼠动物模型的构建方法。方法:模拟中医病因,以幼龄大鼠肺虚、阴液亏虚,烟熏致肺虚,长期激怒致肝郁犯肺建立肝郁肺虚中医证候模型;模拟西医病因病理,卵蛋白氢氧化铝致敏,辣椒素激发,建立西医大鼠CVA模型。观察大鼠一般状态、自发活动情况、咳嗽反应、肺支气管病理组织形态、支气管肺泡灌洗液(BALF)嗜酸性粒细胞计数。结果:肝郁肺虚模型组大鼠体重增长缓慢(P0.01),自发活动增多(P0.01),咳嗽次数增加(P0.01);支气管管腔狭窄,黏膜增厚,肺泡腔增大,黏液分泌增多,大量嗜酸性粒细胞浸润(P0.01);与模型组比较,肝肺同治组各项观测指标均有明显改善(P0.01)。结论:模拟传统中医病因、西医病因病理建立CVA动物模型;以整体观念、微观验证综合评价中医CVA动物模型;以方测证,肝肺同治反证CVA动物模型。多因素复合作用可成功复制CVA大鼠病证结合动物模型。     

溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型的实验研究

目的:探索制作溃疡性结肠炎(UC)肝郁大鼠模型的最佳方法。方法:采用免疫法及束缚法的复合因素制作 UC肝郁大鼠模型,对其进行整体状态、病理形态学以及髓过氧化物酶(MPO)活力效果观察与评价。结果:肉眼可见肠管 黏膜溃疡及糜烂面;镜下见溃疡及急慢性炎症表现;MPO活力明显增强(P<0．01)。结论:UC肝郁大鼠模型制作成功。     

中医肝郁证候动物模型研究的必要性

在建立中医肝郁证证侯动物模型时,应对欲复制模型的证型进行深入研究,必须大力开展临床研究及文献整理研究,肝郁证是个文化概念,因此研究肝郁证实质时,针对目前文献检索到得制备方法种种不足之处,认为中医证候动物模型研制的不可行性,提出分析,开展多角度、多层次的思考,从中医病因病机出发,从人与动物的相似性出发,论证中医肝郁证候动物模型制备的可行性及必要性。     

急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的建立及评价

目的：通过比较采用腹腔注射脂多糖（LPS）、结扎冠状动脉及两者不同组合方式建立急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的可行性。方法：将225只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、单纯结扎冠脉组、先注射LPS(5 mg·kg)组（结扎冠脉前24 h注射LPS）、后注射LPS(5 mg·kg)组（结扎冠脉后10 min注射LPS）。各组分别于造模后3、24、72 h进行各项指标的检测,对模型的建立进行综合评价。观察各组大鼠的一般状态与中医证候宏观评价指标舌象、脉象,采用心电图、超声心动图评价心功能,伊文思蓝/2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测定心肌缺血、梗死面积,生化法或酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌钙蛋白T(cTnT)含量及白细胞介素（IL）-1β、IL-6的变化,血细胞分析仪测定白细胞数,检测凝血四项、血小板聚集率、血液流变学等凝血评价指标,苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织。结果：造模3 h后,与假手术组比较,单纯结扎冠脉组大鼠舌面R、G、B值显著下降（P<0.01）,舌下络脉色泽显著变紫（P...     

原发性失眠肝郁证量化诊断方法学研究

目的 探讨建立原发性失眠肝郁证量化诊断的方法.方法 选择原发性失眠患者1173例,随机分为训练样本组924例(肝郁证685例,非肝郁证239例)和验证样本组249例(肝郁证194例,非肝郁证55例).在流行病学调查的基础上,将肝郁证辨证标准及临床常见症状作为候选相关因素,采用单因素分析和二元Logistic逐步回归法选定相关因素;应用条件概率换算方法对相关因素进行赋分;应用最大似然判别法确定量化诊断阈值;并对建立的肝郁证量化诊断标准进行回顾性和前瞻性检验,分别计算其敏感度、特异度、准确度及Youden指数.结果 原发性失眠肝郁证量化标准的相关因素具体包括入睡困难、精神抑郁、烦躁易怒、善太息、胸闷、胸胁作胀或痛、口燥咽干、口苦、脉弦、呕吐或嗳气、忧思善虑、呼吸不畅和兴趣索然等13项,分别赋分3～9分;原发性失眠肝郁证量化诊断阈值为25分;量化诊断标准回顾性和前瞻性检验的敏感度、特异度、准确度和Youden指数分别为83.5％、86.6％、84.3％、0.701和84.5％、85.5％、84.7％、0.700. 结论 以症状出现频次为基础建立原发性失眠证候量化标准是一种可行的方法.     

复合多因素法对血瘀型肝纤维化大鼠模型的建立和评价

目的：本研究在中医学辨证思维指导下,根据血瘀证理论探索和改良造模方法,采用多因素复合法建立血瘀型肝纤维化病证结合大鼠模型。方法：通过二甲基亚硝胺、小牛血清白蛋白和去甲肾上腺素注射液联合注射,外加乙醇灌胃及高脂低蛋白饲料喂养,多因素联合构建血瘀型肝纤维化大鼠模型。造模结束观察大鼠的死亡率,评价中医血瘀证证候,进行证候等级评分,观察肝脏病理学大体形态,检测肝功能改变,采用免疫组化法观察I 型和III 型胶原、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）3种胶原蛋白的表达情况、放射酶免法血清学检测大鼠肝纤维化4项——HA、P3NP、LN、C IV的含量。将以上结果与传统四氯化碳（CCl4）单因素造模法进行比较。结果：血瘀证组：①大鼠的死亡率为20%;②大鼠出现瘀斑、舌紫暗、便溏等典型的中医血瘀证证候,血瘀证证候等级评分高;③病理学大体形态观察发现肝脏出现表面暗白、密布灰白结节、质硬脆等纤维样变化;④血清学肝功能检测发现模型大鼠的ALT和AST,以及TBIL、DBIL及IBIL的含量均显著增加;⑤肝脏I型和III型胶原、α-SMA 3种胶原蛋白的表达水平显著增高;⑥大鼠的血清肝纤维化4项—— HA、P3NP、LN、C IV的含量均显著增加。与CCl4模型组相比,多因素复合法所致血瘀证模型组以上各项结果（除了死亡率及肝功能外）更为明显,结果有统计学差异（P<0.05）。结论：多因素复合造模方法能有效地改善CCl4 造模法的高死亡率缺点;模型动物同时具备了疾病与证候双重特征,既符合中医血瘀证证候的基本特点,又与西医肝纤维化病理特征相一致。     

大鼠脂肪肝肝郁脾虚证的模型

目的:建立适宜于抗脂肪肝肝郁脾虚证中药复方活性发现、药效评价、新药研发及中医方-证对应的病证结合动物模型。方法:根据中医病因病机的演变规律和现代临床病理机制的研究,建立适宜于脂肪肝肝郁脾虚证模型评价的证候积分表,并选择联苯双酯滴丸和三七脂肝丸作为模型反证药物,模型组大鼠每天按分组给予不同配比的高脂低蛋白饲料和不同浓度的乙醇,每周2次腹腔注射猪血清,联苯双酯滴丸组按8.1 mg·kg~(-1)给药,三七脂肝丸组按2.7 g·kg~(-1)给药,连续给药14 d。实验期间,观察大鼠的一般情况、体重、日食量、日水量,并进行中医证候积分,实验结束后,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,并对肝组织进行病理学检查。结果:与正常组比较,模型组大鼠的体重、日食量、日饮水量增加缓慢,指标ALT,AST,γ-GT,TC,TG,LDL-C水平显著升高,HDL-C水平降低,病理学检查可见脂肪肝大鼠肝脏脂肪变性、脂肪粒,且行为学观察发现,大鼠出现的主证、次证均符合肝郁脾虚证的证候表现,表明3个模型组均造模成功,其中,模型1组有3只大鼠死亡,模型2组有1只大鼠死亡。反证药物组可不同程度改善上述病变表现。结论:脂肪肝肝郁脾虚证动物模型具有死亡率低、耗时短,可用于抗脂肪肝(肝郁脾虚证)中药复方活性发现、药效评价和临床方证相关性研究与机制探讨。     

围绝经期失眠症肾虚肝郁证量化诊断方法学研究

目的探讨建立围绝经期失眠症(MI)肾虚肝郁证量化诊断的方法。方法纳入MI患者838例,随机分为训练样本组(肾虚肝郁证397例,非肾虚肝郁证261例)和验证样本组(肾虚肝郁证108例,非肾虚肝郁证72例)。在流行病学调查的基础上,将肾虚肝郁证辨证标准及临床常见症状作为候选相关因素,采用单因素分析和二元Logistic回归法选定相关因素。应用条件概率换算方法对相关因素进行赋分,并应用最大似然判别法确定量化诊断阈值。分别以训练样本组及验证样本组患者对建立的肾虚肝郁证量化诊断标准进行回顾性和前瞻性检验,计算其敏感度、特异度、准确度及Youden指数。结果从44项候选因素中选出17项相关因素。MI肾虚肝郁证量化诊断阈值为36分。训练样本组回顾性检验的敏感度、特异度、准确度和Youden指数分别为89.9%、90.8%、90.3%、80.7%,验证样本组前瞻性检验分别为90.7%、88.9%、90.0%、79.6%。结论以症状出现频次为基础建立MI肾虚肝郁证候量化标准,经检验其具有较好的判别效果和临床实用性。     

养血疏肝汤治疗肝郁化火型失眠临床研究

目的:观察养血疏肝汤治疗肝郁化火型失眠的临床疗效。方法:将147例肝郁化火型失眠患者随机分为观察组75例和对照组71例。对照组在常规生活心理干预的基础上给予艾司唑仑,观察组在常规生活心理干预的基础上给予养血疏肝汤。观察两组患者的临床疗效,比较两组患者治疗前后血清相关激素[皮质醇(cortisol,COR)、生长激素(growth hormone,GH)、三碘甲状腺激素(three iodine thyroid hormone,T3)、四碘甲状腺激素(four iodine thyroid hormone,T4)]及生活质量评分变化情况。结果:观察组有效率为90.67%,对照组有效率为70.42%,两组患者临床疗效比较,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后COR、GH、T3、T4、TRH、TSH较治疗前明显下降,且观察组优于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后心理领域、生理领域、社会关系领域、环境领域4个维度得分均明显上升,且观察组上升幅度均大于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:养血疏肝汤治疗肝郁化火型失眠疗效显著,可显著提高患者生活质量,其作用机制可能与调节丘脑-垂体-肾上腺轴/甲状腺轴有关。     

慢性阻塞性肺疾病肺脾气虚证大鼠模型的建立及评价

目的 建立并评价慢性阻塞性肺疾病（COPD）肺脾气虚病证结合模型。方法 采用“香烟烟熏法+脂多糖（LPS）气管滴注联合番泻叶浸液灌胃”构建COPD肺脾气虚证大鼠模型。将40只SPF级SD雄性大鼠随机分成空白组、模型组、番泻叶低、中、高剂量病证结合模型组,共5组。除空白组外各组均每日烟熏,并于第1天、第14天气管内滴注LPS。番泻叶低、中、高剂量病证结合模型组在造模第28天予4 ℃不同剂量番泻叶浸液（5、10、20 g·kg^-1）灌胃3周,造模共49 d。采集宏观指标：一般情况（体质量、摄食量、粪便含水量、肛温）及行为学指标（抓力测试、鼠尾悬挂实验）。测定肺功能,肺组织病理,血清D-木糖、淀粉酶、胃泌素含量,肺泡灌洗液白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）水平,外周血T淋巴细胞亚群（CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）水平,计算胸腺指数、脾指数。结果 一般情况方面,番泻叶高剂量组大鼠死亡2只。与空白组比较,番泻叶中、高剂量组体质量、摄食量均显著降低（P<0.01）,粪便含水量显著升高（P<0.01）,番泻叶高剂量组肛温较空白组显著降低（P<0.01）。行为学指标方面,与空白组比较,各造模组大鼠抓力均显著降低（P<0.01）;番泻叶中、高剂量组静止不动时间明显增加（P<0.05,P<0.01）。肺功能方面,与空白组比较,各造模组大鼠第0.3秒用力呼气容积（FEV_0.3）、FEV_0.3/用力肺活量（FVC）均显著降低（P<0.01）。肺组织苏木素-伊红（HE）染色可见各造模组大鼠支气管壁增厚,杯状细胞增生,部分肺泡融合呈肺气肿改变。胃肠功能指标方面,与空白组比较,番泻叶中、高剂量组D-木糖、胃泌素、α-淀粉酶水平均显著降低（P<0.01）。免疫炎症指标方面,与空白组比较,番泻叶中、高剂量组脾、胸腺指数均显著减小（P<0.01）,各造模组大鼠外周血CD4⁺水平均显著降低（P<0.01）,CD4⁺/CD8⁺明显下降（P<0.05,P<0.01）,肺泡灌洗液IL-1β、IL-6显著升高（P<0.01）。结论 利用香烟烟熏加LPS气管滴注同时联合番泻叶灌胃能够成功建立COPD肺脾气虚病证结合模型。结合宏观及微观评价,推荐番泻叶浸液剂量10 g·kg^-1（番泻叶中剂量组）作为COPD肺脾气虚病证结合模型造模灌胃浓度。     

基于动物模型探讨抑郁症与中医阳虚证的关系

以注射糖皮质激素、雌激素、利血平和强迫游泳实验为基本依据,从动物模型的外观表征、生化机制等方面探讨抑郁症与中医阳虚证之间的关系。发现抑郁症与阳虚证之间存在诸多相似之处,许多补肝肾、助阳气的药物具有良好的抗抑郁作用。从而推测抑郁症的中医病机以肝肾阳虚为基础,利用抑郁症的动物模型、病理机制有助于中医肝肾阳虚证的证候本质研究。     

肝郁脾虚与肠易激综合征探析

脾胃升降相合有赖肝气疏泄正常。脾胃的运化功能与肝的疏泄、功能密切相关。精神紧张可改变肠道的消化间期动力(MMC),肝脾两脏生理上相互依存,病理上相互联系。