肿瘤细胞的去恶化问题

对肿瘤细胞的去恶化进行深入研究,具有重大的理论与实际意义。在根治肿瘤的研究中,最根本的问题是要弄清楚肿瘤的发病机理,即由正常细胞恶化成肿瘤细胞的规律性。去恶化的研究不仅有助于阐明肿瘤的发病机理,更重要的是,可为当前的肿瘤防治工作,提供重要线索。目前临床所用治疗恶性肿瘤的手段主要有三种:外科手术、放射治疗和药物治疗。近年来,由于治疗方法的不断改进,以及三种疗法的综合应用,在治疗不少恶性肿瘤中,取得了较好的疗效,但由于某些肿瘤的早期诊断和准确定位方面的困难,往往限制了外     

恶性肿瘤细胞诱导分化

细胞癌变是分化领域中一个特殊问题,肿瘤细胞可看作是正常细胞分化机制失控,成为不衰老的永生细胞,丧失分化细胞正常生理功能,形态趋于一致,表现出某些未分化细胞的特征(有人称之为"去分化").国内外文献中常有"肿瘤逆转"、"逆向转化"(reversion transformation)、"脱癌"(decarcinogenesis)、"去恶化"(de-malignancy)、"正常化"(normalization)、"表型逆转"(phenotypic reversion)等称谓,其含义与诱导分化基本一致.     

细胞转化与癌基因的分离

体外培养条件下的正常细胞,转化细胞与肿瘤细胞在形态结构、生理功能上有许多不同表现。其中最突出的特点是转化细胞和肿瘤细胞都获得了无限增殖的能力(ImmortalitY)但转化细胞往往表现具有不死性,染色体改变等特性,而没有致瘤能力。肿瘤细胞或恶性转化细胞除了具有不死性以外,还可在裸鼠或新生小鼠体内形成肿瘤。细胞又如何从正常状态转变成具有恶性表型的肿瘤细胞,这个问题是多年来人们所探讨的重要课题之一。目前的研究认为,基因突变或基因表达异常是细胞恶性变的主要原因。近几年来,人们     

cAMP、DBcAMP及DMSO诱导人肺腺癌AGZY—83a细胞分化的显微及超微结构研究

诱导恶性肿瘤细胞分化的研究,对解决肿瘤的发病机理、去恶化和治疗等问题具有重要的理论和实际意义。以往的报道多局限于 cAMP 类药物对上皮起源的恶性肿瘤,DMSO 对间叶组织恶性肿瘤或维生素 A 酸类化合物对人早幼粒细胞性白血病细胞的诱导分化研究,而 DMSO对上皮起源的恶性肿瘤细胞的诱导分化研究,尤其是不同类药物对同一细胞株的诱     

腺病毒介导的HSV-TK/GCV自杀基因治疗前列腺癌的体外实验

目的 以恶性肿瘤无限增殖特性为靶点,应用人端粒酶逆转录酶启动子（hTERT）和小鼠巨细胞病毒启动子（CMV）调控携带HSV-TK基因的减毒非增殖型腺病毒,通过体外实验观察HSV-TK/GCV自杀基因疗法对前列腺癌细胞LNCaP,PC-3和人正常成纤维细胞MRC 5的治疗效果,对其抗肿瘤机制进行初步探讨。方法 将腺病毒转染细胞后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况,通过细胞病理效应（CPE）、细胞活力实验（MTT）和电泳法检测Ad-hTERT-HSV/TK选择性杀伤肿瘤细胞。结果 Ad-hTERT-EGFP仅能转染肿瘤细胞,而Ad-CMV-EGFP对正常和肿瘤细胞都能转染。细胞病理效应（CPE）发现Ad-hTERT-HSV/TK对肿瘤细胞具有很强的杀伤能力,而对正常细胞无明显杀伤作用。细胞活力实验（MTT）量化地反映出Ad-hTERT-HSV/TK选择性杀伤肿瘤细胞。电泳法检测到,在表达HSV/TK的肿瘤细胞出现细胞凋亡。结论 本实验利用由hTERT启动子调控EGFP报告基因的腺病毒,证明了腺病毒的转染效果及重组病毒Ad-hTERT-HSV/TK具有选择性肿瘤细胞杀伤能力。     

硫杂脯氨酸对肝癌细胞膜表面电荷的调控研究

对肿瘤细胞表面膜的调控研究是目前肿瘤细胞逆转研究中的一种新的探索,硫杂脯氨酸是继cAMP之后的又一种逆转类药物,对肿瘤细胞表面膜有一定的调控作用。我们通过对膜表面电荷的研究,看到硫杂脯氨酸能使肝癌细胞表面膜电荷含量向正常细胞的状态转化。关于肿瘤细胞和正常细胞表面电荷的比较研究,发现大多数肿瘤细胞比其同     

DNA甲基转移酶在肿瘤发生预后治疗中的作用

DNA甲基转移酶(DNMT)在多种肿瘤细胞中呈表达上调,异常表达的DNMT通过催化肿瘤抑制基因启动子区域CpG岛甲基化,引起抑癌基因甲基化失活,从而促进正常细胞向肿瘤细胞转化.研究表明,DNMT在消化道肿瘤、乳腺癌、肺癌等肿瘤细胞中呈表达丰度异常,且与肿瘤的发生呈明显相关性,并影响肿瘤预后.药物及靶向干扰可抑制DNMT的活性,可使甲基化的基因去甲基化复活,进而抑制肿瘤细胞生长,促进细胞凋亡.     

肝癌的诱导分化治疗进展

导分化(induction of differentiation)是指恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导剂作用下,向正常或接近正常细胞方向分化逆转的现象.诱导分化作为恶性肿瘤的一种新型治疗方法,基本特点在于不杀伤肿瘤细胞,而是诱导肿瘤细胞分化为正常或接近正常细胞.     

肿瘤癌变机理的研究进展

肿瘤是在各种致癌因素作用下,机体局部组织细胞质变成肿瘤细胞,而后增生形成的新生物。正常细胞如何转变成肿瘤细胞,这是一个涉及分子遗传学的复杂理论问题。人们长期对此问题进行研究,并对细胞癌变机制提出了众多的理论学说,但到目前为止,仍然没能得到彻底解决。本文在文献复习的基础上,对目前几个主要理论作一简要综述。一、体细胞突变学说虽然决定细胞遗传特性的大分子直到30年代才知道是DNA,但在此以前人们就已知道肯定存在这一类因子。早在1929年Boveri就已提出肿瘤是由于体细胞突变的假说。以后随着分子遗传     

在小鼠NK细胞对正常及肿瘤细胞的裂解效应中干扰素对靶细胞的保护作用

激活的NK 细胞可裂解多种靶细胞,除肿瘤细胞外尚有原代巨噬细胞、纤维母细胞及胸腺细胞。目前认为NK 细胞在机体肿瘤监视中起一定作用,因此推测存在某种使正常细胞不被杀伤的机制。Trinchieri和Santoli 曾证明人的靶细胞经干扰素处理后,可对NK 细胞的裂解作用产生抵抗力,其中正常的人纤维母细胞所得到的保护远较肿瘤细胞有效得多。因此提出干扰素对正常细胞的保护作用可能是NK 细胞在体内选择性裂解肿瘤细胞的机制之一。为搞清此问题,     

肿瘤代谢研究新进展

与正常细胞相比，肿瘤细胞因其基因或者表观遗传的改变，导致许多代谢通路发生紊乱。正常细胞发生恶化过程中，不仅糖代谢通路发生异常，线粒体生物合成、氨基酸代谢、脂代谢等其他代谢通路也会发生变化。这些代谢变化对肿瘤的发生发展以及临床靶向治疗具有重要的意义。     

肿瘤逆转研究进展

早在70年代,人们在研究植物冠瘿瘤、动物畸胎瘤时发现,这些肿瘤细胞在条件合适时可分化形成正常细胞。此外,还注意到这种现象:起源于组织内单个细胞转化的肿瘤,其周围同源组织中的绝大部分细胞能抗御这种转化或恶变过程;某些肿瘤可发生自发退化现象。近年来,随着分子生物学、细胞遗传学等技术的飞速发展,肿瘤逆转研究已从初期概念逐渐深入到逆转规律性的探索,利用细胞生长、增殖、分化及恶变的内在规律,采用各种手段,诱导肿瘤细胞向正常方向分化,消     

靶向于癌症治疗的信号通路

癌细胞以存在多种遗传上的改变为特征,这些变异的累积驱动正常细胞向侵袭性癌症进展。在癌变过程中,正常细胞转变为肿瘤细胞至少必须四到六种基因突变[1]。近年来,大量遗传学研究以及基于新一代测序技术的全基因组测序研究丰富了我们     

极低频率电磁场对离体肿瘤细胞的诱导凋亡作用

目的 探讨极低频率电磁场对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。方法 将人成骨肉瘤细胞（MG63）、乳腺癌细胞（MCF7）和肝癌细胞（HepG2）接种到96孔板中,并置于磁场强度分别为10mT、20mT、40mT、60mT的磁场中进行干预,每天刺激2次,每次1h,作用3天,同时每种细胞设置正常条件下的对照组。3天后以MTT法检测细胞活性（OD值）,并采用流式细胞技术（Annexin V—FITC和PI双标）检测3种细胞的凋亡情况。结果 72h后以MTT法检测3种细胞的0D值,并于正常对照组进行比较,SPSS软件统计结果显示,磁场组的OD值较正常组低（P〈0．05）;流式细胞技术结果显示,磁场组肿瘤细胞凋亡细胞的阳性比例高于正常组,两组之间的差异有显著性统计学意义。结论 极低频率电磁场对肿瘤细胞有明显抑制作用,在一定程度上诱导肿瘤细胞的凋亡。     

53基因及CAR受体对ONYX-015肿瘤杀伤作用的影响

目的:利用肿瘤特异性增殖型腺病毒ONYX-015分别感染具有柯萨奇病毒和腺病毒联合受体(CAR)水平正常、p53正常或突变的,以及CAR水平低下、p53突变的肿瘤细胞株,研究ONYX 015对这些肿瘤细胞的特异性增殖及杀伤能力。方法:以正常的肝细胞株L02作为对照,用细胞病变效应(CPE)实验观察ONYX-015对细胞的选择性杀伤效应;病毒增殖实验检测野生型腺病毒(Ad5)、ONYX 015在多种肿瘤细胞中的增殖能力。结果:ONYX 015对正常的肝细胞L02无杀伤性,但能够有效地杀伤p53突变的肝癌细胞Hep3B、p53正常的肝癌细胞HepG2及肺癌细胞A549,不能杀伤p53突变的人乳腺癌细胞株MDA-MB 231。在CAR受体水平正常的癌细胞株Hep3B、HepG2和A549中,Ad5和ONYX-015均可增殖。在CAR受体水平低下、p53突变的人乳腺癌细胞株MDA-MB 231中,两种病毒均不增殖。结论:CAR受体对ONYX-015的增殖力起着至关重要的作用。在CAR受体水平正常的前提下,无论肿瘤细胞的p53基因正常与否,ONYX-015均可以有效增殖并杀伤细胞;相反,如果CAR受体水平低下,即使该种肿瘤细胞p53基因突变,ONYX-015在该细胞中的增殖力也会受到限制。ONYX-015不杀伤CAR受体及p53基因均正常的正常肝细胞。     

p53基因及CAR受体对ONYX-015肿瘤杀伤作用的影响

目的：利用肿瘤特异性增殖型腺病毒ONYX-015分别感染具有柯萨奇病毒和腺病毒联合受体（CAR）水平正常、p53正常或突变的,以及CAR水平低下、p53突变的肿瘤细胞株,研究ONYX-015对这些肿瘤细胞的特异性增殖及杀伤能力。方法：以正常的肝细胞株L02作为对照,用细胞病变效应（CPE）实验观察ONYX-015对细胞的选择性杀伤效应;病毒增殖实验检测野生型腺病毒（Ad5）、ONYX-015在多种肿瘤细胞中的增殖能力。结果：ONYX-015对正常的肝细胞L02无杀伤性,但能够有效地杀伤p53突变的肝癌细胞Hep3B、p53正常的肝癌细胞HepG2及肺癌细胞A549,不能杀伤p53突变的人乳腺癌细胞株MDA—MB-231。在CAR受体水平正常的癌细胞株Hep3B、HepG2和A549中,Ad5和ONYX-015均可增殖。在CAR受体水平低下、p53突变的人乳腺癌细胞株MDA—MB-231中,两种病毒均不增殖。结论：CAR受体对ONYX-015的增殖力起着至关重要的作用。在CAR受体水平正常的前提下,无论肿瘤细胞的p53基因正常与否,ONYX-015均可以有效增殖并杀伤细胞;相反,如果CAR受体水平低下,即使该种肿瘤细胞p53基因突变,ONYX-015在该细胞中的增殖力也会受到限制。ONYX-015不杀伤CAR受体及p53基因均正常的正常肝细胞。     

走进三维适形调强放疗

1什么是三维适形调强放疗？ 放疗是用放射线杀灭肿瘤细胞,在恶性肿瘤的治疗中起重要作用。放射线损伤肿瘤细胞的DNA,使肿瘤细胞不能分裂和生长而死亡。放疗对分裂活跃的细胞杀伤力最大。和正常细胞相比,肿瘤细胞对放疗敏感,是因为它们比正常细胞分裂得快,同时它们不能像正常细胞那样对DNA损伤进行有效的修复。     

14株肿瘤细胞P53基因突变的检测

目的：检测14株肿瘤细胞P53基因的突变情况。方法：根据P53基因5～8外显子之间的内含子序列设计引物,分别对人肺癌、脑胶质瘤、肝癌、胃癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、脉络膜恶性黑素瘤、视网膜成细胞瘤等9种肿瘤14株细胞的P53基因5、6、7、8的外显子进行PCR扩增反应。琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物;DNA测序,并与正常的DNA序列比较;抽提肿瘤细胞蛋白进行Western blotting检测P53蛋白的表达。结果：14株肿瘤细胞P53基因热变区5、6、7、8外显子的扩增产物经电泳鉴定与预期相同。DNA测序结果表明,14株肿瘤细胞中8株存在P53基因5～8外显子的突变,其中肺癌细胞H1299、肝癌细胞Hep3B、肝癌细胞SMMC7721、脉络膜恶性黑素瘤细胞OCM-1检测到以前未报道过的突变;突变主要发生在外显子的编码序列,多数为单个碱基替换导致的错义突变,也有部分表现为同义突变;2株正常细胞未检测到突变。Western blotting检测显示,有基因突变的8株肿瘤细胞中仅6株有P53蛋白表达;所有P53基因未突变的肿瘤细胞株和正常细胞株均未检测到P53蛋白。结论：检测的14株肿瘤细胞中有8株细胞P53基因热变区存在突变,其中4株检测到以前未报道过的突变;2株正常细胞未发现P53基因突变。     

肿瘤细胞代谢与肿瘤转移相互关系的研究进展

肿瘤细胞长期处于应激的微环境中,细胞内营养物质及能量的流通速率往往高于正常细胞,肿瘤细胞代谢以此为肿瘤转移提供生物合成原料和能量。在转移性肿瘤中也发现糖代谢异常活跃、脂肪酸过度累积等异于正常细胞的代谢反应。已有研究证实对肿瘤细胞代谢进行调节可影响肿瘤转移,部分成果已应用于临床治疗,靶向肿瘤细胞代谢是抗肿瘤转移的一个积极有效的方向。本文对目前肿瘤细胞代谢与肿瘤转移相互关系和调节机制的研究进展进行综述。     

端粒酶在肿瘤基因治疗方面的研究进展

端粒酶是肿瘤发生与发展的因素之一,是正常细胞不存在或活性较低的细胞成分.端粒酶的活性可能是细胞永生化或恶化的共同通道,是肿瘤细胞克隆繁衍,使恶性肿瘤得以发展的重要因素.因此,以端粒酶为月标的肿瘤基凶治疗,已成为当前肿瘤研究的新靶点,它比以往单纯针对某个癌基因为目标的肿瘤基因治疗具有更广阔的临床应用前景.