一种防止和清除杂交瘤细胞真菌污染的有效方法

一种防止和清除杂交瘤细胞真菌污染的有效方法孙成群，孙荣芳，陶清晨，刘学礼（黑龙江省卫生防疫站病毒病防治研究所，哈尔滨１５００３６）使用含咪康唑（５μｇ／ｍｌ）的培养基挽救受真菌污染的杂交瘤细胞，用药后３ｄ，污染真菌消失．培养基中加人２．５旭／ｍｌ的咪...     

杂交瘤细胞中细菌污染的清除试验

本实验通过杂交瘤细胞和污染细菌对不同抗菌药物的耐受性和敏感性及对瘤细胞特异性抗体的检测等试验，筛选出氟哌酸和头孢唑淋钠两种对细胞毒性小、抗菌谱广、不影响杂交瘤细胞分泌特异性抗体、且可以根除对常规双抗有耐受性的细胞污染细菌，从而模索出消除细胞培养中细菌污染的可行方法。     

杂交瘤细胞中细菌污染的清除试验

本实验通过杂交瘤细胞和污染细菌对不同抗菌药物的耐受性和敏感性及对瘤细胞特异性抗体的检测等试验，筛选出氟哌酸和头孢唑淋钠两种对细胞毒性小、抗菌谱广、不影响杂交瘤细胞分泌特异性抗体、且可以根除对常规双抗有耐受性的细胞污染细菌，从而摸索出消除细菌培养中细菌污染的可行方法。     

检测杂交瘤细胞支原体感染的方法

支原体感染是使免疫学家、细胞生物学家和其他依赖细胞株进行研究工作的科学家深感头痛的问题。细胞株受到支原体感染后,生长停滞,大分子物质的合成,遗传的稳定性及对某些药物的敏感性等生物学活性均可发生改变。另外支原体主要存在于细胞表面,它还可能改变或“遮蔽”被感染的细     

杂交瘤细胞培养中支原体的检测与清除

在细胞培养中,支原体污染是常见令人困扰的问题。支原体是一种极小的微生物,直径仅为0.2～2微米,寄生于细胞生长液中,常附着于细胞膜表面,分泌丰富的腺苷磷酸化酶(adenosine phosphoylase)。此酶能将无毒的6-甲基嘌呤脱氧腺苷(6—     

几种防治组织培养中支原体污染方法的探索

本文报告了对几种防治组织培养中的支原体污染的方法的研究结果。试用各种滤器过滤血清和56℃灭活方法,以去除小牛血清中污染的支原体。采用半固体培基方法鉴定支原体结果证明,0.22u微孔滤膜和EKS蔡氏滤板可以去除小牛血清中污染的支原体。但G6玻璃滤器和0.3μ微孔滤膜过滤不能清除血清中的支原体,56℃加热30分钟,重复三次不能使血清中的支原体灭活。对于已经污染有支原体的传代细胞株,使用各种抗生素或在培养物中加入小鼠腹腔饲养细胞都不能去除支原体。但是将污染细胞接种于小鼠腹腔,经过一定时间再取腹水或实体瘤细胞培养,鉴定结果表明,通过小鼠腹腔内培养的NS-1细胞,不仅清除了污染的支原体,用于融合也获得满意效果。     

一种短期保存杂交瘤细胞的方法

用-70℃超低温冰箱保存杂交瘤细胞,可获得短期良好效果:六个月内试验的八株杂交瘤细胞均能成功复苏。八月后存活率开始下降,十一月时成功率明显减低,十五个月时只有个别杂交瘤细胞可存活。凡能复苏的杂交瘤细胞,均保留分泌单克隆抗体的特性,但部分的     

46株分泌单抗杂交瘤细胞株支原体污染的检测

４６株分泌单抗杂交瘤细胞株支原体污染的检测李秀华，郭玮，高光，范学祥，吕秀华，袁曾麟，尹红章，李德富（中国药品生物制品检定所，北京１０００５０）细胞培养物感染支原体是一个十分严重的问题，尤其是对有重要应用价值的杂交瘤细胞，往往造成细胞生长缓慢、胞浆颗...     

人-人杂交瘤细胞产生的一种改进方法

本文描述一种高效的人体细胞与细胞融合方法,作者的记录改进了几种早期的PEG为介质的融合方法,为了提高细胞-细胞杂交产量和降低PEG对细胞的毒性,作者采取了几个步骤。该法使用了含有高分子量的低浓度的PFG混合物供融合细胞形成单细胞层。至适的因子包括提高杂交作用的植物血凝素(PWM或PHA)。在含有5～15％DMSO和5μg/ml     

一种拯救长时间远距离转送淋巴细胞杂交瘤细胞的方法

我们采用了先用９６孔培养板培养，再经２４孔培养板扩大培养至小培养瓶的培养途径，结合饲养细胞的方法成功地拯救了转送时间长达１１ｄ的淋巴细胞杂交瘤细胞。同时发现，用本方法拯救杂交瘤细胞时，培养液是否与原先一致天关紧要。     

用滚环扩增技术检测污染细胞的5种支原体

目的 建立滚环扩增技术检测5种常见的细胞污染支原体(猪鼻支原体、发酵支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体)的方法.方法 使用细胞污染支原体16S-23SrRNA间隔区公共引物(SPS1,SPA2)扩增间隔区靶基因.设计每一种支原体特异性锁式探针,锁式探针与扩增的靶基因杂交结合形成环化单链分子,加入特异性引物在Corbett RotorGeneTM 6000扩增仪滚动扩增环化单链分子,观察结果.结果 滚环扩增技术能敏感和特异的检测上述5种支原体标准株,并能敏感的检测10个拷贝的靶基因.在62个细胞培养物样本的检测中,37个样本检测出一种支原体,14个样本检测出两种支原体,11个样本为支原体阴性.滚环扩增方法检测结果与支原体种特异性PCR检测结果一致.结论 滚环扩增作为一种新的扩增技术能敏感和特异的检测细胞污染支原体.     

杂交瘤细胞冻存方法的实验研究

<正> 杂交瘤和单克隆抗体技术虽已日趋完善,但仍有一些技术细节需进一步探索。本文报道杂交瘤细胞冻存方法研究的实验结果。 试验方法 选用本科自建的分泌嗜肺性军团病杆菌单克隆抗体(LDB-McAb)杂交瘤细胞系,经培养后放入离心管内,800×g离心7分钟,弃上清后,加入细胞冻存液,调整细胞浓度为2～5×10~6/ml,分装安瓿,1ml/支;装入自制的纱布袋中,作好标记。     

培养细胞污染支原体的PCR检测方法的建立及应用

在生物制剂的生产和研发领域,细胞培养扮演着极其重要的角色：用原代细胞或传代细胞制造疫苗;杂交瘤细胞制造单克隆抗体;基因工程或细胞生物学的研究等。然而支原体污染常常成为细胞培养的不速之客,严重影响着细胞及生物制剂的质量。污染细胞最常见的支原体包括：