输血传播病毒在各型肝病中感染状况及基因分析

在临床病毒性肝炎患者中，约10％～20％病例无法用已经建立的肝炎的实验室诊断方法进行病原学分型，人们将其统称为非甲～庚型肝炎。1997年．Nishizawa等应用代表性差异分析法（Representational difference analysis，RDA技术），从1名非甲～庚型输血后肝炎患者血清中获得1个新的病毒克隆，随后Okamoto等测定了该病毒的全基因序列，将其命名为输血传播病毒（Transfusion tramitted virus，TTV）。随后许多国家开展了相关的研究工作。国内的研究表明，中国人群中存     

输血传播病毒在原发性肝癌患者中的感染状况研究

目的 了解新型肝炎病毒输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）在原发性肝癌（ＰＬＣ）患者中的感染状况。方法 在ＴＴＶ长的ＯＲＦ保守区设计引物，建立巢式聚合酴链反应（ＰＣＲ）技术，检测了１５１例原发性肝癌患者血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 １５１例原发性肝癌患者中有２８例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性，阳性率为１８．５％；而同时检测１２５例正常人血清只３例ＴＴＶ阳性，阳性率     

部分人群中输血传播病毒的检测

目的 了解部分人群是否有输血传播病毒（ＴＴＶ，Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ Ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ Ｖｉｒｕｓ）感染。方法 利用半套式ＰＣＲ方法对慢性乙肝患者，慢性丙肝患者，血液透析者，健康人群中ＴＴＶ的感染状况进行了筛选。结果 ２４０例慢性乙肝患者中发现２例ＴＴＶ阳性，１００例慢性丙肝患者中发现４例ＴＴＶ阳性。２０例血液透析者和１００例健康人群中都未发现ＴＴＶ感染。结论 慢性丙肝患者比慢性乙肝患者有较     

非甲-非庚型肝炎患者血清中输血传播病毒的检测

目的 了解非甲－非庚型肝炎患者血清中输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ,ＴＴＶ）的感染情况及临床特点。方法 用半巢式聚合酶链反应方法检测２０例非甲－非庚型肝炎患者血清中ＴＴＶ－ＤＮＡ,特异性引物位于ＴＴＶ基因组的ＯＲＦ１保守区。结果 ２０例非甲－非庚型肝炎患者中,有５例存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ感染者病程有轻有重,表现为急性无黄疸性肝炎、急性黄疸性肝炎及轻度慢性肝     

重型病毒性肝炎经输血传播病毒感染状况调查及其临床意义

目的：调查重型病毒性肝炎经输血传播病毒的感染状况。方法：设计ＴＴＶ基因的特异性引物,采用巢式ＰＣＲ法对３７例重型肝炎进行血清中ＴＴＶ ＤＮＡ的检测,并对ＴＴＶ ＤＮＡ阳性病例进行临床资料分析。结果：３７例重型肝炎中９例血清ＴＴＶ ＤＮＡ阳性（２４．３％）,其中７例重叠感染ＨＢＶ,１例重叠感染ＨＣＶ,１例为单纯ＴＴＶ感染,９例中急性重型肝炎,亚急性重型肝炎１例,亚急性重型肝炎６例,慢性重型肝炎２例;     

部分人群中输血传播病毒的检测

目的　了解部分人群是否有输血传播病毒 (TTV ,TransfusionTransmittedVirus)感染。方法　利用半套式PCR方法对慢性乙肝患者、慢性丙肝患者、血液透析者、健康人群中TTV的感染状况进行了筛选。结果　 2 40例慢性乙肝患者中发现 2例TTV阳性 ,10 0例慢性丙肝患者中发现 4例TTV阳性。 2 0例血液透析者和 10 0例健康人群中都未发现TTV感染。结论　慢性丙肝患者比慢性乙肝患者有较高的感染率 ,在血液透析者和健康人群中没有发现TTV感染者。     

杭州地区健康献血员输血传播病毒的检测及部分阳性标本的核苷酸序列分析

目的：了解杭州地区健康献血员中输血传播病毒（TTV）的感染情况和病毒基因组片段的变异性。方法：用酚－氯仿法从献血员的血清标本中提取DNA，半套式聚合聚合链反应检测TTV，部分阳性标本的扩增片段T－1克隆后测序。结果：203例献血员血清标本中TTV DNA的阳性率为15．3％，部分阳性标本扩增产物与报道的TTV TA278株的核苷酸和氨基酸序列比较，其同源性分别为63．51％－67．12％和59．46％－66．22％，结论：杭州地区献血员中TTV的携带率比较高。献血员感染的TTV可能是一种新的基因型。     

孕产妇输血传播病毒感染状况调查分析

1997年日本学者Nishizawa等报道[1] ,发现一种可能于输血后肝炎相关的新型病毒 ,命名为输血传播病毒 (transfusiontransmittedvirus ,TTV)。国内有人报道[2 ,3 ] ,在不同人群中普遍存在着TTV感染 ,包括一般人群、献血员、静脉毒瘾者、各型肝炎患者、血液透析者等。为了解孕产妇这一特殊人群的感染率及其在母婴间是否存在着相关传播关系 ,我们对 2 0 4例健康孕产妇的静脉血、乳汁及其新生儿脐带血标本进行TTV检测 ,现报道如下。1　资料与方法1.1　资料　选用 2 0 0 1年 1月～ 12月来我院附属医院妇产科门诊行产前检查及住院的肝、肾功能…     

乙肝病毒携带产妇乳汁中乙肝病毒携带情况分析

目的 :分析乙型肝炎病毒携带产妇乳汁中乙肝病毒 (HBV)携带情况以及探讨母乳喂养的安全性问题。方法 :随机抽取 6 2例孕期检测有一项以上乙肝血清学指标 (HBVM)阳性且肝功能正常产妇及 10例乙肝标志物阴性的健康产妇作对照 ,采用PCR技术检测其初乳中的HBV -DNA ,并与血清乙肝标志物的检测结果进行比较。结果 :6 2例HBVM阳性产妇中有 35例检出HBV -DNA(5 6 5 % ) ,而对照组中无一例阳性。HBeAg阳性组产妇初乳排毒率明显高于HBeAg阴性组 ,有显著性差异(P <0 0 1)。结论 :对乙肝标志物阳性产妇 ,除对新生儿加强免疫外 ,还应检测其乳汁中的HBV -DNA。若乳汁中HBV -DNA阳性 ,则不以母乳喂养为好     

输血传播病毒与人类肝病关系的研究

目的了解各类肝病患者TT病毒的感染率，分析TT病毒与已知肝炎病毒的交叉感染情况，探讨TT病毒与肝硬化、肝癌的关系以及是否是非甲-非戊型肝炎患者的主要致病因子。方法采用微板双探针核酸杂交酶免疫方法对TTV基因扩增产物进行定性检测。结果东营地区不同人群TTV阳性率分别为，甲肝患者37．5％（6／16），乙肝患者40．00％（18／45），丙肝患者44．44％（24／54），戊肝患者31．25％（10／32），不明原因转氨酶升高患者25．93％（7／27）。肝硬化患者47．06％（24／51），肝癌患者31．91％（15／41）。结论东营地区TT病毒存在与已知病毒性肝炎的合并感染。并且血源性传播肝炎的TT病毒感染率明显高于健康志愿人群，是已知肝炎病毒的辅助因子，并可能是肝硬化潜在的致病因子。     

PCR 法检测 HBV DNA 及其与乙肝病毒标志物关系

目的：了解乙型肝炎患者血清中乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的检出情况，探讨其与乙肝病毒标志物的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２５６例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝病毒五项标志物，即ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ。结果：ＨＢＶＤＮＡ的检出率在肝炎患者各临床类型之间无明显差异，而在乙肝病毒五项标志物不同组合存在状态之间有差异，以伴有ＨＢｅＡｇ（＋）的组合形式即ＨＢｓＡｇ（＋），抗 ＨＢｃ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）者、ＨＢＶＤＮＡ检出率最高（９４３４％），乙肝病毒五项标志物中出现抗体及其五项全阴者仍有ＨＢＶＤＮＡ检出。结论：ＨＢｅＡｇ确是ＨＢＶ活动性复制的重要标志，但仅靠乙肝病毒五项标志物的检测来判定ＨＢＶ的复制是不够准确的，同时用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ能更准确反映体内ＨＢＶ复制情况。     

孕妇单纯疱疹病毒感染与母婴传播

目的：前瞻性观察妊娠各期单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）垂直传播。方法：用ＥＬＩＳＡ法检测孕妇外周血及相应脐血ＨＳＶＩｇＭ抗体；用ＰＣＲ技术检测宫颈分泌物，异常生育孕妇外周血及相应流产物ＨＳＶＤＮＡ。结果：妊娠早、中、晚各期及脐血ＨＳＶＩｇＭ阳性率分别为１１．９７％、６．３８％、０、８．２０％，ＩｇＭ阳性母亲无垂直传播。宫颈ＨＳＶＤＮＡ阳性率为２．０５％，经宫颈传播率为６６．６７％。异常生育孕妇外周血及相应流产物ＨＳＶＤＮＡ阳性率为２．０２％，２．６１％，经血传播率为５０．００％。感染组死胎畸形及先天感染发生的相对危险度分别为非感染组的６．６倍和２．２倍。二组婴儿体检与智测值无明显差异。结论：ＨＳＶ经宫颈传播大于经血传播，剖宫产不能阻断垂直传播。     

孕妇及新生儿巨细胞病毒感染的分子生物学诊断

目的 :建立套式聚合酶链反应 ( n PCR)检测人巨细胞病毒 ( HCMV)。方法 :建立套式 PCR检测 HCMV DNA,同时结合病毒分离检测临床标本。结果 :在 2 3例新生儿肝炎综合征患儿中 ,10例病毒分离及套式 PCR均阳性 ;1例病毒分离阴性 ,但套式 PCR阳性。对 58例妊娠早期孕妇血标本进行检测 ,套式 PCR阳性率为 9% ,病毒分离阳性率则为 7%。结论 :套式 PCR是一种临床检测HCMV的快速有效手段。     

妊娠合并单纯疱疹病毒感染的研究进展

单纯疱疹病毒(HSV)可引起生殖系统感染,妊娠合并HSV感染可造成胎儿宫内感染,死胎和流产率增加。本文综述了妊娠合并HSV感染的发病机制、病理、免疫应答、临床特征、诊断和治疗的研究进展。     

原位PCR在检测肝组织TTV中的应用

目的　探索用原位PCR检测肝组织中的输血传播病毒 (TTV)。方法　用原位PCR与原位杂交检测32例肝组织中的TTV ,并比较两种方法的检测结果。结果　 32例标本中 ,经原位PCR检测 ,TTV阳性 2 3例 ,经原位杂交检测 ,TTV阳性 17例。原位PCR检测的阳性率 (71.9% )明显高于原位杂交 (5 3.1% ) ,P <0 .0 5。原位PCR在肝细胞核、内皮细胞核与肝细胞浆内检测到TTV ,而原位杂交只在肝细胞核与肝细胞浆内检测到TTV。结论　本实验结果表明原位PCR是一种新的检测TTV的有效方法。     

1型HIV感染多重PCR检测方法的建立及临床应用

目的建立检测人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的多重巢式PCR(nPCR)和多重反转录PCR(RT-PCR)方法。将其与已经上市的NASBA法试剂盒进行检测敏感性比较;探讨血浆RNA水平对PCR检测敏感性的影响;评价该方法用于我国HIV-1感染者诊断的价值。方法针对HIV-1的gag、pol和gp41区设计3套引物,建立检测HIV DNA的多重nPCR和检测HIVRNA的多重RT-PCR方法;分别以建立的PCR方法和NASBA法对119例HIV阳性患者进行检测,比较2者的检测敏感性;将患者分为不同的病毒载量组,比较PCR方法在各组患者中的检测敏感性差异;使用建立的PCR方法对10例可疑急性感染者进行检测;扩增HIV-1膜区C2-C3段,对nPCR检测阳性的43例DNA样本进行亚型鉴定。结果多重nPCR的检测敏感度为97.5%(116/119),多重RT-PCR的敏感度为78.2%(93/119),2者的特异度均为100%(50/50),多重nPCR和多重RT-PCR的阳性预测值分别为97.5%(116/119)和78.2%(93/119),阴性预测值均为100%(50/50),准确性分别为98.2%和84.6%。经比较,多重nPCR和多重RT-PCR的检测敏感度都高于NASBA法。在病毒载量<103copy/mL的患者,nPCR的检测敏感性高于RT-PCR,在病毒载量在(103～104)copy/mL的患者及病毒载量≥104copy/mL的患者,2者的敏感性比较相近,均接近100%;检测的10例可疑急性感染者中,有5例患者的nPCR和RT-PCR检测结果阳性,抗体在随访过程中阳转,证实为HIV急性感染者;检测的43例DNA样本分属于B’亚型(37例),AE亚型(5例)和BC亚型(1例)。结论本课题组建立的PCR检测方法可以对我国主要流行的B’、AE和BC亚型病毒株得到很好的扩增效果;nPCR的检测敏感性受血浆RNA水平的影响相对较小,RT-PCR的检测敏感性受血浆RNA水平的影响相对较大;PCR方法可以用于HIV急性感染者的早期诊断。     

体外基因扩增制备艾滋病毒核酸探针

作者利用DNA合成仪合成艾滋病毒ARV—2前病毒序列6 310～6 328,6 666～6 684及HT_LV-Ⅲ前病毒序列6339～6374,6385～6419两对寡核苷酸引物,应用体外基因扩增(Polymerase chainreaction,PCR),以pARV-2/7A质粒为模板扩增出两个DNA片段。~(32)P标记后,以pCP10(含HBV基因)、M56(含出血热汉坦株M片段cDNA)、人染色体DNA乙型脑炎病毒(JEV)为对照,经Southern杂交及斑点杂交,证明PCR扩增制备HIV核酸探针特异性强、敏感性高。     

用PCR和地高辛标记的核酸杂交技术检测女性下生殖道人乳头瘤病毒感染

应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction)和地高辛标记的HPVDNA的斑点及Southernblot杂交3种方法,同时检测了17例外阴和宫颈湿疣的标本.检测结果表明PCR结合地高辛标记的斑点杂交技术是目前检测女性下生殖道人乳头瘤病毒HPV感染较为敏感、特异、简便的分子生物学方法.因杂交中所使用的HPVDNA探针为非放射性标记的,弥补了³²P标记探针的缺点,可制成试剂盒在临床推广、应用.从而为临床对HPV感染的诊断提供一条有效的检测方法.     

多发性骨髓瘤患者Borna病病毒的检测

目的探讨Borna病病毒（BDV）感染与人类多发性骨髓瘤（MM）发病的关系。方法采用荧光定量套式逆转录聚合酶链式反应（FQ-nRT-PCR）检测了15例MM患者和20例健康对照组外周血单个核细胞（PBMCs）中BDVP24基因片段。结果15例MM患者与20例健康对照组PBMC均未检测到BDVP24基因片段。结论MM与BDV感染无明显相关性。