自体骨髓间充质于细胞移植对心肌梗死后兔Ryanodine受体及其稳定蛋白表达的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死后兔ryanodine受体(RyR2)及其稳定蛋白(FKBP12.6)表达的影响,探讨MSCs移植治疗缺血性心力衰竭的机制.方法 采用结扎冠状动脉前降支的方法制备新西兰白兔缺血性心力衰竭动物模型.利用密度梯度离心法和贴壁法获得MSCs,经5-氮胞苷诱导后,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记.移植后4 w,实时荧光定量RT-PCR法检测梗死边缘区RyR2和FKBP12.6 mRNA表达.采用超声观察术前及术后左心室射血分数(LVEF)的变化.结果 与对照组比较,AMI组梗死边缘区心肌RyR2和FK-BP12.6 mRNA下降(P＜0.05).与AMI组比较,MSCs组梗死边缘区心肌RyR2和FKBP12.6 mRNA增加(P＜0.05).结论 MSCs移植使RyR2和FKBP12.6表达增加是治疗缺血性心力衰竭的机制之一.     

自体骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后兔Ryanodine受体及其稳定蛋白表达的影响

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死后兔ryanodine受体(RyR2)及其稳定蛋白(FKBP12.6)表达的影响,探讨MSCs移植治疗缺血性心力衰竭的机制。方法采用结扎冠状动脉前降支的方法制备新西兰白兔缺血性心力衰竭动物模型。利用密度梯度离心法和贴壁法获得MSCs,经5-氮胞苷诱导后,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记。移植后4 w,实时荧光定量RT-PCR法检测梗死边缘区RyR2和FKBP12.6 mRNA表达。采用超声观察术前及术后左心室射血分数(LVEF)的变化。结果与对照组比较,AMI组梗死边缘区心肌RyR2和FK-BP12.6 mRNA下降(P<0.05)。与AMI组比较,MSCs组梗死边缘区心肌RyR2和FKBP12.6 mRNA增加(P<0.05)。结论 MSCs移植使RyR2和FKBP12.6表达增加是治疗缺血性心力衰竭的机制之一。     

FKBP12.6与心血管疾病和神经退行性疾病研究进展

心血管疾病和神经退行性疾病是困扰人类健康的重要疾病,尤其是对老年人群.他克莫司结合蛋白( FKBP)12. 6是一种内质网钙离子释放通道兰尼碱受体( RyR)结合蛋白,在介导心血管疾病和神经退行性疾病的发生、发展中发挥重要作用,本文主要对FKBP12. 6与心血管疾病和神经退行性疾病研究进展进行综述.     

FKBP12.6与RyR2的关系及其在心脏疾病中的意义

FKBP12.6从RyR2解离导致通道构象及功能改变。Ca2 从SR漏出使SR的Ca2 负荷减少,Ca2 瞬变减少,舒缩时RyR2耦联障碍,最终引起心肌功能异常。而且RyR2对CICR敏感性提高导致心肌迟后去极诱发心律失常。通过过表达或增加FKBP12.6对RyR2亲和力可以改善通道缺陷,从而使心脏功能及心律失常得到改善。     

FK506结合蛋白12.6基因转染对心力衰竭心室肌细胞钙通道和钠-钙交换器电流的影响

目的探讨钙释放通道稳定蛋白FK506结合蛋白12.6(FKBP12.6)基因转染对心力衰竭(简称心衰)心室肌细胞钙通道(ICaL)和钠-钙交换电流(INCX)的影响。方法用携带FKBP12.6基因的重组腺病毒Ad.FKBP12.6-GFP感染分离的心衰心室肌细胞,通过免疫荧光及激光共聚焦技术检测转基因的表达;采用全细胞膜片钳技术记录ICaL和INCX。结果①心衰心室肌细胞的FKBP12.6蛋白表达显著下调,Ad.FKBP12.6-GFP感染细胞的FK-BP12.6蛋白表达水平显著高于Ad.GFP感染细胞;②Ad.GFP组心室肌细胞的ICaL密度峰值较正常对照组显著降低(6.81±0.83pA/pFvs11.43±1.14pA/pF,P<0.01),而FKBP12.6基因转染细胞电流密度峰值较Ad.GFP组显著升高(9.60±1.09pA/pFvs6.81±0.83pA/pF,P<0.01);③Ad.GFP组心室肌细胞的INCX较正常对照组明显升高(P<0.01),FKBP12.6基因转染使心衰心室肌细胞的INCX显著降低(P<0.05)。结论FKBP12.6基因转染显著升高心衰心室肌细胞ICaL,并显著降低INCX,从而逆转心衰时上述离子通道电流的改变。     

Ryanodine受体在心血管疾病中的研究进展

Ryanodine受体（RyR）作为肌浆网/内质网的钙释放通道,在心肌兴奋－收缩偶联过程中具有重要作用。目前已有研究结果表明,RyR结构、功能的变化与某些心血管疾病密切相关,并证实某些药物可以作用于RyR,从而达到治疗的目的。     

日本血吸虫FKBP12基因的原核克隆表达及表达产物的纯化

目的　扩增、原核克隆和表达日本血吸虫 (Sj) FKBP12基因全长 c DNA,并进行表达产物的纯化。方法　从成虫 RNA中 RT- PCR扩增 Sj FKBP12基因完整的编码阅读框后 ,将其克隆入p GEX- 4 T- 1原核表达载体中 ,IPTG诱导高表达后用亲和层析柱对表达产物进行纯化。结果　将 SjFKBP12基因成功克隆入 p GEX- 4 T- 1表达载体中 ;诱导表达并成功纯化出重组 FKBP12蛋白。结论　成功克隆了 Sj FKBP12基因 ,并表达和纯化得到了 FKBP12蛋白 ,为研究 FKBP12的功能及其进行疫苗等研究奠定了基础。     

横纹肌肌浆网Ca2+释放通道的调节

横纹肌细胞内Ca2+转运的中心环节是肌浆网Ca2+释放通道(RyR)。RyR是565 kDa蛋白分子组成的四聚体,其位于胞浆的部分可与离子、小分子和蛋白相结合,并有磷酸化、氧化与亚硝基化位点,跨肌浆网膜部分形成Ca2+通道。在心肌与骨骼肌,因离子、小分子与蛋白-蛋白的相互作用,以及蛋白修饰等调节机制的差别,使得经细胞膜L-型Ca2+通道介导的RyR开放机制并不相同,对RyR通道关闭的调节也不相同。但是,心肌与骨骼肌中的Calstabins在RyR的多个结构域上存在结合位点,从而通过影响RyR结构域的相互作用,便可调节其空间构象而改变RyR通道的功能。因此,基因突变改变RyR的空间构象可导致遗传性心肌病与肌病,药物JTV519则通过稳定RyR的空间构象而防治心律失常,对抗骨骼肌疲劳。     

RYR2、FKBP12.6及CaMK-Ⅱ在COPD患者肺组织中的表达研究

目的探讨兰尼碱(RYR2)、FK506结合蛋白12.6(FKBP12.6)及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK-Ⅱ)在COPD患者肺组织中的表达及意义。方法回顾性分析2012年11月至2017年4月宁夏回族自治区人民医院心胸外科肺癌手术后患者30例,根据入院肺功能、超声心动图检查结果,将患者分为3组:慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺动脉高压(PH)组、COPD组、非COPD且非PH患者对照组,取手术切除后距癌变区>5 cm的组织。测量3组肺血管组织石蜡切片中肺小动脉面积。用免疫组织化学法分别观察RYR2、FKBP12.6及CaMK-Ⅱ表达,并做相关性分析。结果(1)与对照组比较,COPD合并PH组、COPD组平滑肌面积占血管总面积百分比(WA%)、肺动脉收缩压(PASP)均增高(F=24.115、9.421,P值均<0.05),COPD合并PH组WA%和PASP高于COPD组。(2)与对照组比较,COPD合并PH组、COPD组RYR2、FKBP12.6及CaMK-Ⅱ的表达IOD均增高(F=9.219、6.143、11.337,P值均<0.05),COPD合并PH组RYR2、FKBP12.6及CaMK-Ⅱ的表达IOD高于COPD组。(3)相关性分析提示COPD合并PH组、COPD组RYR2的IOD值与WA%呈正相关(r=0.547、0.771,P值均<0.01),COPD合并PH组RYR2的IOD值与PASP呈正相关(r=0.773,P<0.01)。COPD合并PH组、COPD组FKBP12.6的IOD值与WA%呈正相关(r=0.796、0.810,P值均<0.01),COPD合并PH组FKBP12.6的IOD值与PASP呈正相关(r=0.729,P<0.01)。COPD合并PH组、COPD组CaMK-Ⅱ的IOD值与WA%呈正相关(r=0.879、0.504,P值均<0.01),COPD合并PH组CaMK-Ⅱ的IOD值与PASP呈正相关(r=0.748,P<0.01)。结论FKBP12.6和CaMK-Ⅱ可能在COPD相关的肺动脉增殖中起一定作用。     

肌浆网/内质网钙调控在心血管疾病中的研究进展

肌浆网/内质网(SR/ER)是细胞内重要的钙储库及调控系统,主要通过Ca2+释放通道雷尼丁受体(RyR)和1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R),以及Ca2+摄取蛋白肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA)和基质交感分子1(STIM1)等调节钙信号,维持细胞内钙稳态。研究发现,SR/ER钙平衡对细胞正常生理功能的发挥和信息传递非常重要,SR/ER钙稳态失调与缺血性心脏病、心肌肥厚、高血压及心力衰竭等心血管疾病的发生发展密切相关。本文就SR/ER钙调控在心血管疾病中的研究进展作一概述,重点阐述SR/ER钙离子通道和相关调控蛋白对细胞内钙信号的调节机制,以期为临床心血管疾病的治疗提供重要策略和潜在靶点。     

整合素的作用及其应用:心血管疾病治疗新靶点

整合素家族受体是细胞表面重要的黏附分子,在细胞和微环境之间的相互作用中发挥着重要作用.整合素与多种人类疾病密切相关,如心血管疾病、血栓症、炎症、癌症等.是重要的药物靶点.本文主要论述整合素在心血管疾病中的研究进展.     

雷诺定受体2在抑郁大鼠心房颤动中的作用

目的研究雷诺定受体2(ryanodine receptor2,RyR2)在抑郁大鼠心房颤动(简称房颤)中的作用,以及RyR2拮抗剂丹曲林的干预作用。方法将70只雄性SD大鼠按照完全随机设计方法分为4组:正常对照组(CTL组,n=15),丹曲林组(DAN组,n=15),抑郁组(CUMS组,n=20),抑郁加丹曲林组(C+D组,n=20)。DAN组和C+D组中丹曲林给药方式为腹腔注射4周;CUMS组和C+D组给予慢性温和不可预见刺激建立抑郁模型。用糖水消耗实验和强迫游泳进行行为学评价;利用Langendorff装置进行心脏电生理研究,记录心房组织有效不应期(ERP)、90%动作电位时程(APD_(90))、ERP/APD_(90),并用Burst程序刺激心房,诱发房颤;采用western blot方法对心房RyR2、磷酸化(P)-RyR2(2808)的表达进行定量检测。结果(1)与CTL组相比,CUMS组行为学评价分下降、糖水偏好百分比降低、强迫游泳静止时间延长;C+D组各指标都有所改善。CTL组与DAN组之间无差异(P0.05)。(2)CUMS组的ERP、APD_(90)和ERP/APD_(90)均小于CTL组与C+D组(P0.05),CTL组与DAN组之间无差异(P0.05)。(3)CUMS组房颤诱发率(100%)明显高于CTL组(0%)、Dan组(0%)和C+D组(40%)。(4)各组之间,RyR2的表达量无差异(P0.05),而CUMS组P-RyR2(2808)较其他三组显著增加(P均0.05)。结论肌浆网上的RyR2受体功能异常可能是抑郁大鼠易于诱发房颤的重要原因,而丹曲林对功能异常RyR2受体有治疗作用。     

Ca^2＋／CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ对神经肽Y诱导心肌细胞内钙重分布的作用

背景神经肽Y(NPY)是中枢神经及末梢神经重要的调节剂,作用广泛,包括调节心脏及血管正常的生理活动,并参与许多心血管疾病的发生发展.研究表明,急性的NPY 刺激可促进心肌细胞钙活动,对心肌产生正性肌力作用.而持续NPY刺激对心肌钙活动的影响及其机制,目前还未见报道.目的 观察NPY刺激对大鼠心肌细胞胞浆钙和肌浆网(SR)内钙分布的影响,以及Ca2 /CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)在其中的作用.方法 用100 nmol/L NPY刺激Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞24 h,CaMKⅡ特异性抑制剂KN-93干预.应用荧光染料Fluo-4 AM负载胞浆钙;Fluo-5N AM负载肌浆网内游离钙离子,所有钙影像均由激光共聚焦显微镜记录.应用Western-blot法和免疫荧光法检测Ca2 -ATP酶(SERCA2a)和ryanodine受体(RyR2)两种蛋白的分布及蛋白量的变化.结果 经100 nmol/L NPY刺激24 h后,与对照组相比,心肌细胞胞浆游离钙浓度明显升高(65.3±6.2 VS50.7±4.1,P<0.05),心肌细胞肌浆网内游离钙含量明显低于对照组(67.6±8.3 VS 85.5±6.0,P<0.05),而KN-93可抑制上述效应;NPY可增加SERCA2a和RyR2的蛋白表达(SERCA2a:2.4±0.7 VS对照组:1.4±0.3;RyRz:2.3±0.4 vs对照组:1.2士0.4),KN-93可抑制上述作用.结论 CaMK Ⅱ通过影响SERCA2a和RyR2,调控SR的钙转运,进而介导NPY刺激下的细胞内钙重分布效应.     

前列环素和血栓素A_2与心血管疾病相关性及药物治疗新进展

前列环素和血栓素A2是心血管系统的主要前列腺素代谢产物.前列环素和血栓素A2之间的动态平衡在维持血管自稳态上起着重要作用.而前列环素和血栓素A2的失衡会导致心血管调节功能的紊乱,从而产生一系列病理过程.因此,重新认识前列环素和血栓素A2代谢与心血管疾病的关系特别是不同药物治疗措施对其影响具有重要的临床意义.     

肠道菌群和心血管疾病的免疫调节

心血管疾病是人类健康的第一杀手,发病率和死亡率逐年增加。数万亿微生物寄居于人类肠道,在心血管疾病及其相关的代谢、免疫反应中发挥着至关重要的作用。先天性和适应性免疫机制都参与了心血管疾病的发生发展,菌群组分和代谢产物可调节巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞的分化及功能,并通过循环系统影响机体免疫稳态。本文将通过肠道菌群及其代谢产物与免疫系统的相互作用,讨论肠道菌群与心血管疾病发展之间潜在的免疫机制,为预防和治疗心血管疾病提供新思路。     

粒细胞集落刺激因子动员骨髓源干细胞治疗心血管疾病的研究

利用细胞因子动员自体骨髓源干细胞(BMDCs)进入外周血,并迁移到心肌梗死部位,再生修复受损的心脏是干细胞治疗的新策略.粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是已广泛应用于放、化疗病人动员干/祖细胞支持造血功能恢复的细胞因子.近来研究发现G-CSF还具有心脏保护作用,能动员BMDCs迁移到心肌梗死部位,修复受损的心脏.本文综述G-CSF治疗心血管疾病的基础和临床研究进展.     

马来酸曲美布汀对寒冷束缚应激大鼠结肠平滑肌细胞离子通道的作用

目的 探讨马来酸曲美布汀(TM)对寒冷束缚应激(CRS)大鼠结肠平滑肌细胞大电导钙激活的钾通道(BKCa)及雷诺定受体(RyR) mRNA和蛋白表达的影响.方法 24只Wistar大鼠均分为CRS组、CRS+TM组和对照组,CRS组大鼠每日按6 ml/kg予0.9％ NaCl溶液灌胃,CRS+TM组大鼠每日按6 ml/kg予15 g/L TM灌胃,置铁丝笼中,在4℃环境限制活动2h,连续5d.对照组大鼠按6 ml/kg予0.9％NaCl溶液灌胃1次,不予应激.观察各组大鼠排便量和粪便性状改变,分离结肠平滑肌组织进行RT-PCR和Western印迹分析测定BKCa以及RyR2通道mRNA和蛋白的表达.结果 CRS组大鼠排便颗粒中位数为6,对照组为1,CRS+ TM组为5,肉眼观察CRS组及CRS+ TM组大鼠粪便外观较对照组稀,含水量多.与对照组比较,CRS组及CRS+ TM组大鼠结肠组织无明显病理学改变.对照组与CRS组大鼠结肠平滑肌细胞BKCa和RyR2 mRNA表达无明显差异,CRS+TM组BKCa mRNA表达较对照组上调1.45倍,CRS+ TM组RyR2 mRNA较对照组上调1.32倍.与对照组相比,CRS组大鼠结肠平滑肌细胞BKCa和RyR2蛋白表达无明显差异,CRS+TM组BKCa蛋白较对照组表达上调1.39倍,未见RyR2蛋白表达条带.结论 TM对CRS大鼠结肠平滑肌收缩的影响可能是通过大鼠结肠平滑肌细胞BKCa通道mRNA、蛋白表达上调和RyR mRNA表达上调而起作用.     

肌球蛋白磷酸化靶向亚基家族与心血管疾病

肌球蛋白磷酸化靶向亚基(MYPT)家族包含5个成员,MYPT可通过其自身磷酸化影响肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)活性与细胞功能,调控Rho/ROCK通路和NO/cGMP/PKG通路,从而在心血管疾病的发生发展中发挥重要作用。现就MYPT家族成员的结构、与细胞功能及信号通路的关系及其在心血管疾病中的作用机制进行综述,为心血管疾病的研究和治疗提供理论基础。     

美托洛尔对心力衰竭大鼠心肌细胞肌浆网 Ca2+释放通道数量及其mRNA表达的影响

目的探讨美托洛尔（倍他乐克）对心力衰竭大鼠心肌细胞肌浆网（SR）钙离子释放通道（RyR2）数量及其mRNA表达的影响.方法通过结扎大鼠左侧冠状动脉建立慢性心力衰竭模型,用倍他乐克进行干预,对照观察血流动力学,[^3H]-ryanodine与左室心肌RyR2最大结合量（Bmax）,RyR2 mRNA表达的水平.结果与对照组（C组）相比,心力衰竭组（H组）左室舒张末压（LVEDP）值显著升高（P〈0.01）,射血分数（EF）值显著降低（P〈0.01）,倍他乐克组（B组）相对于H组LVEDP值显著降低（P〈0.01）,EF值显著升高（P〈0.01）;B组[3H]-ryanodine与RyR2最大结合量显著高于H组,H组[^3H]-ryanodine与RyR2最大结合量显著低于C组,H组RyR2 mRNA表达水平显著低于B组和C组.结论心力衰竭大鼠心肌细胞SR钙离子释放通道数量及RyR2基因表达减少,而倍他乐克则有增加心力衰竭心肌细胞SR钙离子释放通道数量及RyR2基因表达的作用.     

老年人肌少症与心血管疾病共病研究进展

随着人口老龄化到来,衰老相关性疾病已成为困扰各国政府的一个难题。心血管疾病作为代表性疾病,发病率逐年攀升。运动是心血管疾病防治的重要手段。老年人群运动能力及运动量的减低与心血管事件发生存在相关性。肌少症是一种以肌肉含量减少和(或)功能减退为表现的疾病,其与心血管疾病之间关系紧密。本文拟总结近年肌少症与心血管疾病的研究,从疾病的病理生理、相互作用、潜在机制、临床表现及诊断标准、治疗等多层面进行介绍,使上述疾病得到更为深入的理解。