慢性乙型肝炎患者唾液中HBV DNA含量检测及意义

[目的]建立乙型肝炎患者唾液中HBV DNA含量的检测方法，探讨唾液传播在该病传播流行中的意义。[方法]唾液的取样：自然留取唾液1 ml，取500 μl定量检测，采用Trizol方法裂解唾液中DNA，氯仿-异丙醇方法进行分离和提取。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV血清学标志物，用荧光定量聚合酶链反应PCR法检测HBV DNA，对30例慢性HBV感染者唾液和血液标本进行检测与分析。[结果]30例慢性HBV感染者唾液和血液HBV DNA阳性率分别为50％和87．7％，平均HBV DNA含量（数量级）分别为4．56＋0．44和6．08＋1．14copies／ml，后者显著高于前者（P〈0.05）。血清乙肝5项模式与唾液中HBV DNA含量无明显相关性（χ^2=l.286 ，P〉0．05），而与血液中HBV DNA含量关系密切（χ^2=6．9，P〈0．05）。[结论]乙型肝炎患者唾液中含有一定数量的乙肝病毒，经唾液传播在HBV的流行中可能具有重要意义。     

慢性乙型肝炎病毒感染者唾液HBVDNA检测及其意义

目的　探讨慢性乙型肝炎病毒 (HBV)感染者唾液HBVDNA检测的流行病学意义及诊断价值。方法　用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测HBV血清学标志物。用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)法检测HBVDNA。对 114例慢性HBV感染者唾液和血液标本进行检测与分析。结果　 114例慢性HBV感染者唾液和血液HBVDNA阳性率分别为 2 8.1%和 4 7.4 % ,阳性者平均HBVDNA含量分别为 6 .37± 0 .95和 8.18± 1.5 4 (拷贝数 /ml的对数 ) ,后者均显著高于前者。唾液HBVDNA含量与血液含量高度正相关 (r =0 .918)。血液HBVDNA阳性者的唾液阳性率为 5 9.1% (32 / 5 4 )。血液HBVDNA阴性者唾液阳性率 0 .0 0 % (0 / 6 0 )。血液HBsAg(+)、HBeAg(+)者的唾液HBVDNA阳性率为 10 0 % (2 0 / 2 0 )。血液HBsAg(+)、HBeAg(- )者的唾液HBVDNA阳性率为 15 .1% (11/ 73)。结论　慢性HBV感染者尤其是HBeAg阳性者和血液HBVDNA阳性者的唾液含有HBV ,可能有一定传染性     

乙型肝炎病毒感染产妇乳汁HBV DNA定量检测的意义

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染产妇乳汁HBV DNA定量检测的意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术检测HBV感染产妇乳汁HBV DNA。结果142例HBV感染产妇乳汁HBVDNA定量阴性90例,HBVDNA小于1．00×10^3copy／mL,阳性52例,HBV DNA大于1．00×10^3copy／mL（36．6％）,其定量范围1．21×10^3～5．19×10^3copy／mL,平均为1．56×10^4copy／mL。结论HBV感染产妇乳汁HBV DNA定量检测意义不大,不能作为判断是否可以母乳喂养的依据。     

阜阳市慢性乙型肝炎病毒感染者HBV基因型调查

目的了解阜阳市慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV基因型分布状况。方法选择165例HBVDNA阳性的慢性HBV感染者,采用型特异性聚合酶链反应(PCR)检测HBV基因型。结果 165例慢性HBV感染者中HBV基因型B型46例(27.9%)、B/C混合型29例(17.6%)、C型90例(54.5%),未发现其他基因型。结论阜阳市慢性HBV感染者基因型为B、B/C和C型,其中基因C型是主要流行株。     

慢性乙型肝炎病毒感染者检测血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的临床意义

目的观察慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者血清中HBV共价闭合环状DNA（covalently closed circular DNA,cccDNA）的分布特点及其与不同疾病状态的关系。方法2008年1月-12月收治慢性HBV感染者120例,男79例,女41例;年龄15~52岁,平均35岁。其中慢性HBV携带者21例,HBeAg阳性者38例,HBeAg阴性者35例,非活动性HBsAg携带者26例。采用巢式PCR法检测血清中HBV cccDNA。结果120例慢性HBV感染者血清中HBVcccDNA阳性总检出率为43.3%;慢性HBV携带者、HBeAg阳性者、HBeAg阴性和非活动性HBsAg携带者cccDNA阳性检出率分别为76.2%、64.7%、34.3%和0,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。血清高HBV DNA定量组HBV cccDNA阳性检出率高于低HBV DNA定量组（P〈0.05）。结论HBVcccDNA检出率与外周血HBV复制指标HBeAg、HBV DNA有显著的相关性,并与不同疾病状态相关。     

HBsAg及HBV DNA定量检测在慢性乙型肝炎患者不同病程阶段中的应用价值

目的研究慢性乙型肝炎(简称乙肝)患者病程进展中HBsAg及HBV DNA定量水平变化及其相关性,比较其在慢性乙肝不同病程阶段的水平。方法收集2015年1月至2016年12月于该院就诊的302例慢性HBV感染患者血清,分为轻、中及重型慢性乙肝组。采用化学发光法定量检测HBsAg水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清HBV DNA水平。多组间比较采用非参数Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Mann-Whitney U检验,采用Spearman检验进行数据间的相关性分析。结果轻、中、重型慢性乙肝组HBsAg定量水平中位数分别为2 583.96、6 998.34、3 669.91U/mL,3组比较差异有统计学意义(Z=15.50,P0.05);轻型慢性乙肝组与中型慢性乙肝组HBsAg定量水平比较,差异有统计学意义(Z=-3.89,P0.05);中型慢性乙肝组与重型慢性乙肝组HBsAg定量水平比较,差异有统计学意义(Z=-2.32,P0.05);轻型慢性乙肝组与重型慢性乙肝组HBsAg定量水平比较,差异无有统计学意义(Z=-1.22,P0.05)。轻、中、重型慢性乙肝组HBV DNA定量水平中位数分别为246 500、2 840 000、894 000log copy/mL,3组比较差异有统计学意义(Z=9.33,P0.05);轻型慢性乙肝组与中型慢性乙肝组HBV DNA定量水平比较,差异有统计学意义(Z=-2.96,P0.05);其他两两比较,HBV DNA定量水平差异无统计学意义(P0.05)。HBsAg与HBV DNA在轻型慢性乙肝组、中型慢性乙肝组、重型慢性乙肝组患者中均呈正相关(r=0.68、0.60、0.66,P0.05)。结论 HBsAg及HBV DNA在慢性HBV感染患者不同病程阶段均呈正相关,可作为预测慢性乙肝病程进展的血清学标志物。     

慢性乙型肝炎与非慢性乙型肝炎胆囊组织中乙型肝炎病毒DNA的检测

目的 探讨慢性乙型肝炎(HB)与非慢性HB患者的胆囊组织中HB病毒的感染情况。方法 应用PCR技术对慢性HB、非慢性HB的石蜡包埋胆囊标本进行乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测，结果HBV DNA阳性率分别为58．8％(20/34)、17．1％(6／35)。在HBV DNA阳性病例中胆石症检出率分别为60％(12／20)、16．6％(1／6)。结论 胆囊组织中确实含有HBV感染。慢性HB感染率高，而且慢性HB与胆石症发病率有关。     

慢性乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床意义

近年来,随着核酸及核酸类似物、聚乙二醇干扰素α等抗病毒药物的问世,使得慢性乙型肝炎临床抗病毒治疗取得了明显发展,同时对乙型病毒肝炎的实验室检测也提出了新的要求,促进了实验室诊断技术的发展.本研究着重讨论临床抗病毒治疗中乙型肝炎病毒DNA定量检测的应用和重要性,指出HBV DNA的定量检测病毒学应答对于判定抗病毒疗效、调整临床抗病毒治疗方案、停药后随访及预测预后等有重要意义.     

慢性HBV感染者肝组织HBV cccDNA的定量检测

目的建立一种肝活检组织中HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）的定量检测方法。方法待检肝组织标本共21份，来源于江苏省人民医院肝脏手术患者，包括19份慢性HBV感染，其中HBeAg（＋）标本10份，HBeAg（-）标本9份，4份非HBV感染为阴性对照组，取HBVDNA阳性的患者外周血作为rcDNA组。检测方法的主要步骤为肝组织经蛋白酶K和细胞裂解缓冲液消化后，用液相抽提法提取核酸，将提取的核酸溶液分为2等份。1份用特异性降解单链DNA的核酸酶加以消化，纯化后使用跨缺口引物和SYBR GreenⅠ荧光染料进行实时荧光定量PCR分析；另1等份则用以定量检测肝细胞看家基因（β-Globin）作为样本细胞参数。检测结果的特异性主要通过PCR反应产物的序列分析及rcDNA组结果的对照进行证实，HBeAg（＋）组和HBeAg（-）组cccDNA水平的差异通过两样本t检验进行分析。结果PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析显示扩增产物的碱基数为350bp左右，DNA测序分析提示产物与目的片段的序列符合率为99％以上，且以rcDNA为对照的结果均为阴性，排除最有可能造成假阳性的rcDNA对结果的干扰。本方法对10mg HBeAg（＋）肝组织标本的cccDNA的检测阳性率为100％。血清HBeAg（＋）的肝组织样本的平均HBV cccDNA水平高于HBeAb（＋）的肝组织标本（P〈0．05）。结论通过上述三种途径证实了本文所建立方法的特异性。应用SYBR GreenⅠ荧光染料和β-Globin作为样本细胞参数所建立的实时荧光定量PCR方法检测肝细胞内HBV cccDNA，具有较高的特异性、敏感性，且成本较低的特点。     

PCR在检测HBV DNA中的应用

ＰＣＲ在检测ＨＢＶＤＮＡ中的应用汤继光，黄立东，范友谊，李玉强，杨爱民，徐云，周光炎目前，国内文献报道用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，大多集中在方法学上［１，２］。我们用ＰＣＲ技术和酶联免疫试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测了６１２...     

HBV DNA与PreS1以及ALT联合检测乙型肝炎的临床意义

目的分析HBVDNA与PreS1以及ALT在乙型肝炎患者血清中的检测情况,分析其相互关系,评价其联合检测的价值。方法采用荧光定量PCR法检测HBVDNA,同时用ELISA方法检测PreS1蛋白、动力学方法检测ALT,并分析其相互关系。结果HBeAg阳性组中HBVDNA、PreS1检出率分别为97．1％、94．3％（x^2=0．17,P〉0．05）。HBsAg＋、抗HBe＋和抗HBc＋组中HBVDNA、PreS1的检出率分别为47．4％、73．7％,表明部分HBeAg阴性、抗HBe＋患者仍有病毒复制。HBsAg＋、抗HBc＋组巾HBVDNA、PreS1的检出率分别为65．8％、89．5％,而ALT在这3组中的异常率差异无统计学意义（x^2分别为2．18、1．93、0．03,均P〉0．05）,说明血清ALT虽对肝细胞损害极为敏感但缺乏特异性。ALT异常组中HBVDNA和PreS1检出率分别为78．6％、86．3％,两者相关性较高（x^2=2．64,P〉0．05）,ALT正常组中HBVDNA和PreS1检出率差异有统计学意义（x^2=9．68,P〈0．01）。PreS1与HBVDNA检出率不一致,可能是PreS1和HBVDNA检测所表达的意义并不完全一致。结论HBVDNA、PreS1以及ALT在乙型肝炎患者血清中所表达的意义各有侧重,在实际工作中应联合检测,互相补充,这样对乙型肝炎患者的诊断与治疗会有更高的临床价值。     

PCR检测HBV—DNA的意义

近年来,随着检测技术的进展,对乙肝血清学标志(HBV-Marker,HBV-M)临床意义认识已在逐渐深入和不断更新,我们应用聚合酶链式反应技术(PCR)和酶联免疫试验(ELISA)同时检测852例肝病患者HBV-DNA和HBV-M,以探讨两者的关     

乙型肝炎患者唾液中HBV-M与HBV-DNA的相关性研究

目的：探讨HBV感染者唾液中HBV—M与HBV—DNA的相关性，唾液是否是乙型肝炎传染的重要途径之一。方法：采用酶法对2005-2006年HBV感染患者，分别进行血清学和唾液的收集与检测，对HBV感染的患者血清型分成常见的10种类型，同时对所选乙肝感染的患者的唾液进行荧光定量PCR定量测定HBV—DNA。结果：急性感染组和慢性感染与携带者组HBV—DNA阳性率比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论：乙肝患者唾液中含有HBV—DNA，高病毒血症的患者唾液中含有大量HBV—DNA，唾液具有潜在传染性。可以解释，通过水平传染可能就是20％HBV感染者的感染源。唾液是乙肝一个重要的传播途径，要引起重视。     

乙型肝炎病毒前S1蛋白、前S2蛋白、乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎病毒标志物的检测及其意义

乙型肝炎病毒前S1蛋白（HBVpre S1-Ag）、前S2蛋白（HBVpreS2-Ag）和S抗原（HBsAg）三者共同构成乙型肝炎病毒（HBV）的衣壳蛋白，分别由病毒负链DNAS区中的前S1基因、前S2基因和S基因所编码，病毒DNA存在于病毒的Dane颗粒的核内部，乙型肝炎核心抗原（HBcAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）分别由负链DNAC区中的C基因和PreC基因所编码。PreS1含有肝细胞膜受体，在HBV感染肝细胞和机体免疫应答反应中起重要作用。笔者对乙型肝炎患者血清中几种指标进行检测，并对其结果加以分析探讨，现报道如下。     

慢性乙型肝炎产妇血液、初乳、满月乳HBV DNA载量分析

众所周知,母乳中含有丰富的营养成分和免疫物质,是婴儿的天然食品,然而,携带乙型肝炎病毒的产妇能否母乳喂养一直是个值得探讨的问题。PCR技术在中国已趋于成熟,HBV DNA成为乙肝病毒存在和复制的直接证据。若母乳有HBV DNA存在,建议避免母乳喂养,防止感染,这一观点已被大多数学者认可,且应用于临床。若母亲血液有HBV DNA存在而母乳中检测不到,是否可以母乳喂养目前尚未见这方面的报到。为此,作者对乙肝阳性产妇血液与初乳及满月乳HBV DNA载量进行了研究分析。     

肝癌患者HBV血清标志物与HBV DNA检测的临床意义

为了解肝癌患者乙型肝炎病毒血清标志物 (ＨＢＶＭ )与ＨＢＶＤＮＡ情况 ,我们对 6 8例肝癌患者进行了观察 ,现将结果报告如下。一、对象和方法1.对象　经确诊的肝癌患者 6 8例 ,男 6 1例 ,女 7例 ,年龄 2 8～ 83岁。2 .方法　所有病例均抽取静脉血 ,分离血清用酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)进行ＨＢＶＭ (ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｅ、抗 ＨＢｃ)检测 ,试剂由上海实业科华生物技术有限公司提供 ;ＨＢＶＤＮＡ用聚合酶链反应 (ＰＣＲ) ＥＬＩＳＡ法检测 ,试剂由上海浩源生物制品有限公司提供 ;所有操作步骤按说明书…