VP—16诱导PC—3细胞凋亡和bcl—2及kc—myc基因表达的研究

目的 研究ＶＰ－１６诱导ＰＣ－３细胞凋亡和癌基因ｂｌｃ－２及Ｃ－ｍｙｃ表达的关系。方法 用末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＣＭ）研究ＰＣ－３细胞凋亡,以免疫组化方法研究ｂｃｌ－２及Ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。结果 ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ检测表明,ＰＣ－３细胞的凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和作用时间延长而升高;免疫组化结果显示：ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因表达的阳性百分率随ＶＰ－１６作用浓度增加和作用     

8-Br-cAMP对人肺癌H69细胞N-myc,c-fos表达的影响

为探索肺癌治疗的新途径,用１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ的８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ体外培育人肺癌Ｈ６９细胞,应用ＮＲＡ斑点印迹进行研究。结果显示：用８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理的实验组Ｎ－ｍｙｃ,ｃ－ｆｏｓ的表达较未加８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ的对照组表达水平下降。提示８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可下调Ｈ６９细胞Ｎ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ基因表达。     

IFN—α及其联合GM—CSF对CML患者骨髓细胞凋亡相关基因？…

目的：探讨ＩＦＮ－α及ＩＦＮ－α联合ＧＭ－ＣＳＦ调节慢性期慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ－ＣＰ）患者骨髓单个核细胞（ＭＮＣｓ）ｂｃｒ－ａｂｌ,ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因表达的影响。方法：淋巴细胞分离液离心富集１４例ＣＭＬ－ＣＰ患者骨髓ＭＮＣｓ,经干扰素－α（ＩＦＮ－α）及ＩＦＮ－α联合粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）培养２４ｈ后,采用相对定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及扩增片段光密     

动脉粥样硬化对平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达之影响

目的：究动脉粥样硬化对ＳＭＣ凋亡及凋亡相关基因表达的影响,探讨凋亡的分子机制及晚期ＡＳ斑块破裂之原因。方法：采用高维生素Ｄ３＋高脂肪高胆固醇饲料喂养法建立大鼠ＡＳ的模型;运用ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳法鉴定基因组ＤＮＡ的断裂情况,使用ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测Ｐ５３,ｃ－ｍｙｃ及ｂｃｌ－２基因的表达活性。结果：ａ．ＡＳ斑块中ＳＭＣ的ＤＮＡ片断在电泳呈特征性梯状分布,ｂ．ＡＳ斑块中Ｐ５３及Ｃ－ｍｙｃ基因     

慢性粒细胞白血病反义核酸基因治疗的实验研究

目的单独应用ｂｃｒ－ａｂｌ反义硫代磷酸寡聚脱氧核糖核酸（ＡＳＰＯ）或ｃ－ｍｙｂＡＳＰＯ作用于慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）细胞的研究已有报道，但抑制的不彻底性是个主要问题。由于ＣＭＬ的发生是多癌基因协同作用及相互影响的结果，为进一步提高ＡＳ－ＰＯ对ＣＭＬ细胞的作用效果，用互补于两种类型（ｂ２ａ２及ｂ３ａ２）的ｂｃｒ－ａｂｌ基因融合位点两侧各１３个核苷酸的ＡＳＰＯ（ｂ２ＡＳＰＯ和ｂ３ＡＳＰＯ）及ｃ－ｍｙｂ基因起始密码子２－７互补的ＡＳＰＯ（ｍＡＳＰＯ）联合作用于Ｋ５６２细胞株和原代ＣＭＬ细胞。方法硫代磷酸寡核基酸（ＰＳ－ＯＤＮ）的合成由３９２－０５型ＤＮＡ－ＲＮＡ合成仪自动合成，经ＯＰＣ柱纯化；细胞与ＰＳ－ＯＤＮ共培养后２４，４８，９６，１２０ｈ倒置显微镜下活体观察，０．４％台盼蓝拒染法进行死活细胞计数；ＣＦＵ－Ｋ５６２、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ采用０．８％甲基纤维素半固体培养法；采用两对引物ＲＴ－ＰＣＲ半定量法检测细胞ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ表达；通过流式细胞仪检测及电镜观察细胞凋亡情况。结果（１）ＡＳＰＯ能够特异性抑制ｂｃｒ－ａｂｌ基因表达；经ＲＴ－ＰＣＲ的检测发现１０μｍｏｌＡＳＰＯ作用４８ｈ，两种反义     

小儿急性淋巴细胞白血病bcl—2和c—myc转录水平表达及其意义

采用原位分子杂交方法，检测了５４例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平，并与患儿临床表现进行对比分析，结果表明：小儿ＡＬＬｂｃｌ－２ＭＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达与非白血病对照组比较普遍增高，呈显著性差异（Ｐ〈０．０１）；ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平呈明显相关（ｒ＝０．８０４８，Ｐ〈０．０１）；两者的表达水平表明复发病例明显高于初诊病     

8—氯腺苷对Molt—4细胞的生长抑制和凋亡诱导作用细胞

目的：研究８－氯腺苷（８－Ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ,８－Ｃｌ－Ａｄｏ）对人Ｔ淋巴母细胞白血病细胞株Ｍｏｌｔ－４的生长和凋亡的作用,以及对相关基因和ＣＲＥＢ结合活性的影响。方法：Ｐ以不同浓度８－Ｃｌ－Ａｄｏ处理体外培养的Ｍｏｌｔ－４细胞,采用ＭＴＴ法测定药舶半数抑制浓度（ＩＣ５０）,用光学显微镜、流工细胞仪和琼脂糖电泳分析细胞凋亡,分别用斑点杂交法和免疫组化法观察ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２的表达情     

8—Br—cAMP对人白血病HL—60细胞生长,分化及有关基因表达的影响

观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对ＨＬ－６０细胞生长，分化及其相关基因的调节。方法组化化学、原位杂交和完整细胞ＲＮＡ斑点印迹结果８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ作用２４ｈ，ＨＬ－６０细胞ｃ－ｆｏｓ癌基因和ｐ＾２１ｗａｆｌ抑癌基因表达明显升高，ｃ－ｍｙｃ癌基因表达明显降低；８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ作用４８ｈ，ＨＬ－６０细胞生长、增殖明显受抑制，并向中性粒细胞方向分化。结论８－Ｂ可调整ＨＬ－６０细胞生长，分化及相关癌基因和抑癌基因     

鼻咽癌不同组织类型中bcl-2及c-myc的表达

目的 检测鼻咽癌不同组织类型中ｂｃｌ－２及ｃ－ｍｙｃ的表达,探讨其与鼻咽癌组织分化的关系。方法 按１９９１年,ＷＨＯ鼻咽癌组织分类标准,随机选取低分化鳞状细胞癌（ＰＤＳＣ）２７例、分化型非角化性癌（ＤＮＫＣ）３５例及未分化型非角化必副产品（ＵＮＫＣ）３８例活检存档标本,用免疫组化方法检测鼻咽癌细胞中ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 ｂｃｌ－２在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的阳性率分别为８５．２％、８０％及８４．２％;ｃ－ｍｙｃ在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的阳必表达率８１．５％、７６．５％及７８．９％,其中包括细胞核或细胞浆染色阳性。ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的表达差异无统计学意义（Ｐ〉０．０５）。结论 鼻咽癌不同组织类型中ｂｃｌ－２及ｃ－ｍｙｃ的表达无显著性差异,提示ｂｃｌ     

食管鳞癌组织中增殖细胞核抗原和bcl-2蛋白的表达及意义

目的　研究ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－２ 蛋白在食管鳞状细胞癌（ＥＳＣ） 中的表达及其意义。方法　应用免疫组化（ＬＳＡＢ）的方法,检测了６５ 例食管鳞癌和５３ 例癌旁鳞状上皮组织中ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－ ２ 蛋白的表达情况,探讨其与ＥＳＣ病理组织学分级、临床分期、淋巴结转移和预后的关系。结果　６５ 例ＥＳＣ 中ＰＣＮＡ 指数为３９－９３ ±１２－４５ ,明显高于５３ 例癌旁鳞状上皮组织中的ＰＣＮＡ指数８－３８±３－２０（Ｐ＜０－００１） ,ＰＣＮＡ 和ｂｃｌ－２ 蛋白的表达均与ＥＳＣ的分化程度呈负相关（ Ｐ＜ ０－０５）,且ｂｃｌ－ ２ 的表达与术后生存期呈负相关（Ｐ＜ ０－０５）。结论　ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－ ２ 蛋白均可能有促进ＥＳＣ肿瘤细胞增殖的作用,并影响ＥＳＣ的生物学行为。     

8—Br—cAMP和^60Co照射诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相 …

应用８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ和＾６０Ｃｏ照射体外诱导Ｈｅｌａ细胞凋亡。探讨ｂｘＬ－２,ｗｐ５３,ｍｐ５３,ｃ－ｍｙｃｉＮｏｓ的基因表达和ｉＮｏｓ,Ｆａｓ蛋白表达之间的关系、为探讨无毒性８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对宫颈癌治疗的新途径 提供依据。采用ＴＵＮＥＬ法和Ｆｅｕｌｇｅｎ法进行细胞凋亡实验;采用本实验室创新的完整细胞原位ＲＮＡ斑点印迹技术检测Ｆａｓ和ｉＮｏｓ蛋白,应用高速薄层色谱扫描仪对斑点印迹信号进行定量测     

c—myb和bcl—2蛋白在C6脑胶质瘤中的表达及其意义

为探讨ｃ－ｍｙｂ和ｂｃｌ－２基因在Ｃ６脑胶质瘤细胞中的表达及其作用,作者采用ｃ－ｍｙｂ反义硫代寡核苷酸（ＡＯＮ）进行裸鼠的体内试验。在裸鼠接种Ｃ６脑胶质瘤细胞株后１０天,随机将动物分成正义治疗组（ｃ－ｍｙｂＳＯＮ组）,反义治疗组（ｃ－ｍｙｂＡＯＮ组）和对照组,每组１２只。分别于治疗后第４、８、１２、１６天各处死动物３只,切取脑胶质瘤标本,用Ｓ－Ｐ免疫组化法观察ｃ－ｍｙｂ和ｂｃｌ－２蛋白的表达情况。     

H—2K^b cDNA的克隆及其在多种真核细胞中的表达

目的 克隆Ｈ－２Ｋ＾ｂｃＤＮＡ及研究其在多种真核细胞中的表达。 方法 ＲＴ－ＰＣＲ法扩增Ｈ－２Ｋ＾ｂｃＤＮＡ,克隆入双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ,ＰＡ３１７包装出重组病毒后,分别感染ＮＩＨ３Ｔ３、ＣＯＳ７及ＭＭ４５Ｔ．Ｌｉ,ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ分析目的基因表达,ＦＡＣＳ分析Ｈ－２Ｋ＾ｂ在细胞膜上的表达。结果 以双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ介导,分别建立了Ｈ－２Ｋ＾ｂ基因转导细胞：ＮＩＨ３Ｔ     

TGFβ1对胃腺癌细胞SGC—79001,Bcl—2表达的影响

研究转化生长因子β１对胃癌细胞Ｂｃｌ－２的表达的影响。方法：ＴＧＦβ１作用于人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１，４８Ｈ后收集细胞爬片。用抗Ｂｃｌ－２ｍＡｂ和免疫组织化学ＳＡＢＣ法及图像分析技术分析Ｂｃｌ－２。结果；ＴＧＦβ１作用的胃腺癌细胞Ｂｃｌ－２表达量１     

抗CD3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法，ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性，ＩＬ－２，ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：     

抗CD_3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法、ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法分别检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性、内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：抗ＣＤ３ＭｃＡｂ对ＨＰＢＭＣ有很强的丝裂原作用，该作用与其诱导浓度、时间及外源性ＩＬ－２的协同作用密切相关。ＣＤ３ＡＫ细胞可产生内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α，ＩＬ－２Ｒ表达及ＣＤ８＋细胞百分率显著增多。结论：ＣＤ３ＡＫ细胞具有很强的增殖能力，但需要外源性ＩＬ－２的协同作用，增殖细胞以ＣＤ８＋细胞为主。     

SMU1对正常人体外PBMNC功能效应的影响

目的：研究ＳＭＵ１（自制抗ＣＤ３）对正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）的体外功能效应,方法：（地）以ＳＭＵ１６种不同浓度、ＩＬ－２、ＭＣＤ３（丝裂性抗ＣＤ３）孵育ＰＢＭＮＣ,观察细胞密度和形态变化,ＭＴＴ法测定细胞增殖力;（２）分别用ＳＭＵ１０．５ｍｇ／Ｌｆ、５ｍｇ／Ｌ、ＩＬ－２２００ｋＵ／Ｌ培养ＰＢＭＮＣ３ｄ,ＥＬＩＳＡ法测定上清液ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１２、ＩＦＮ－α及Ｇ－ＣＳＦ水平。结     

急性白血病bcl—2和bax mRNA表达及其临床意义

目的：研究凋亡调控基因ｂｃｌ－２和ｂａｘ在急性白血病（ＡＬ）中的表达、相互关系和临床意义。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ技术检测３２例ＡＬ患儿ｂｃｌ－２和ｂａｘ ｍＲＮＡ水平及其比值。结果ＡＬ患者儿骨髓细胞中ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显高于对照组（Ｐ〈０．０１），ｂａｘ的表达明显降低（Ｐ〈０．０１）。治疗后，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达在完全缓解（ＣＲ）     

MVP和P—MVP方案治疗晚期非小细胞肺癌的效果

①目的 探讨ＭＶＰ和Ｐ－ＭＶＰ方案对晚期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的效果及免疫功 能的影响。②方法选择４２例晚期ＮＳＣＬＣ分别进行ＭＶＰ及Ｐ－ＭＶＰ方案各３周期的化疗、不良反应及免疫学指标、ＡgＮＯＲs变化。③结果ＭＶＰ组有效率４０．０％,Ｐ－ＭＶＰ组５４．５％,两组比较差异无显著性（χ＾２＝０．８９８,Ｐ＞０．０５）;ＮＳＣＬＣ病人的ＣＤ３,ＣＤ４,ＣＳ４/ＣＤ８均低于对照组（t＝２．０８２～３．２７     

Bcl—2和Bax蛋白表达与非小细胞肺癌临床病理特性的关系

探讨Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白表达与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）临床病理特征的关系。方法应用免疫组化ＳＰ法检测了３０例正常肺组织和６１例ＮＳＣＬＣ中Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的表达。结果ＮＳＣＬＣ组织中Ｂｃｌ－２蛋白表达率（５７．３８％）显著高于正常肺组织（１３．３３％）（Ｐ〈０．０１）,而ＮＳＣＬＣ组织中Ｂａｘ蛋白表达率（４５．９０％）显著低于正常肺组织（８０．００％）（Ｐ〈０．０１）,鳞癌和腺癌中Ｂｃｌ