慢性牙周炎龈下菌斑和唾液微生物群落分析

目的:运用DGGE技术检测慢性牙周炎龈下菌斑和唾液微生物群落结构,分析其菌群之间的关系。方法:选取34名慢性牙周炎志愿者,分别采集龈下菌斑和唾液样本,采用PCR扩增细菌16Sr RNA V3区后,运用DGGE技术分析各组样本微生物群落结构。通过数字化软件Im age J将DGGE凝胶图谱转成数字信息,对所得矩阵进行主成分分析(Princ ipal ComponentAnalysis,PCA)、聚类分析(C luster Analysis)和偏最小二乘法(Partial Least Squares,PLS)分析。结果:DGGE图谱显示:龈下菌斑DGGE条带数目为11～28,,平均19;唾液DGGE条带数目为11～24,平均17;PCA结果显示:龈下菌斑与唾液比较有明显的差异;聚类分析显示:龈下菌斑、唾液形成5个明显聚类群,在同一聚类群中相似度高,在不同聚类群中相似度低,表示龈下菌斑与唾液菌群之间有显著差异;PLS结果显示:慢性牙周炎龈下菌斑与唾液菌群有显著差异。结论:DGGE是一种能直观显示微生物群落的指纹技术。通过该技术能检测牙周、唾液微生物群落的结构和组成,本结果显示,慢性牙周炎龈下菌斑与唾液微生物群落结构有明显差异。     

悬突对牙周状态及龈下菌斑的影响

目的：从微生态学角度探讨悬突引起牙周炎的机制，揭示悬突对牙周组织的危害性。方法：检测568个有悬突牙及568个对照牙的G1和PD，采集龈下菌斑以刚果红染色，测其龋下菌群的细菌组成。结果：悬突牙组的GI、PD明显高于对照组，其螺旋体、杆菌及球菌较对照牙组有显著性差异。结论：悬突改变牙周微生态环境，使龋下菌群细菌组成发生变化；临床治疗中要加强悬突的防治。     

慢性牙周炎患者的龈下微生物与吸烟状况

目的　评价慢性牙周炎患者的吸烟状况与龈下牙周致病微生物的百分比。方法　 112例慢性牙周炎患者 ,根据吸烟状况分为 :①重度吸烟组 >10支 /天 (n =32 ) ;②轻度吸烟组≤ 10支 /天 (n =18) ;③戒烟者组 (n =2 4 ) ;④非吸烟组 (n =38)。观察者口内每个象限 ,选取探诊最深的 1或 2个位点 ,纸捻法取龈下菌斑 ,厌氧培养 ;并测量该位点的探诊深度 (ProbeDepth ,PD)、附着丧失 (AttachmentLoss,AL)和探诊后出血 (Bleedingofprobe ,BOP)。结果　①取样位点临床指标的均值为PD :6 .3mm、AL :6 .5mm及BOP :89% ,各组间无显著性差异。②组间菌落形成单位和龈下微生物伴放线放线杆菌 (Actinobacillusactinomycetemcomitans,A .a)、牙龈卟啉单胞菌 (Porphyromanasgingivalis,P .g)、中间普氏菌 (Prevotellaintermedia ,P .i)、核梭杆菌 (Fusobacteriumnucleatum ,F .n)和微消化球菌(Peptostreptococcusmicros,P .m)的百分比均无差异。③方差分析显示仅轻度吸烟组福赛类杆菌 (Bacteroidesforsythus,B .f)的百分比略高于其它组 (P <0 .0 4 )。结论　慢性牙周炎患者 ,探诊深度和附着丧失相似的位点 ,吸烟组、戒烟组和非吸烟组的龈下牙周致病微生物百分比 (B .f除外 )无显著差异。     

慢性牙周炎龈下菌斑中五种牙周可疑致病微生物的分布

目的研究五种牙周可疑致病微生物在慢性牙周炎患者龈下菌斑的分布。方法选择27例慢性牙周炎患者,每位患者选取牙周袋最深的两个位点作为观察位点,采集龈下微生物样本,采用多重聚合酶链反应和反杂交的方法对伴放线菌嗜血菌、牙龈卟啉单胞菌、福赛斯坦纳菌、中间普雷沃菌和齿垢密螺旋体五种微生物进行半定量检测。结果在所检测的54个位点中,牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌、福赛斯坦纳菌和齿垢密螺旋体均有较高的检出率,分别为98.15%、92.59%、100%和98.15%;伴放线菌嗜血菌检出率较低,为20.37%。牙龈卟啉单胞菌和福赛斯坦纳菌的检出量明显高于其他三种微生物,其差异有统计学意义（P<0.05）。结论慢性牙周炎患者多存在牙龈卟啉单胞菌、福赛斯坦纳菌、中间普雷沃菌和齿垢密螺旋体的同时感染,且牙龈卟啉单胞菌和福赛斯坦纳菌的感染量较高。     

牙周炎龈下菌斑肽酶的椅旁快速检测

目的观察龈下菌斑肽酶活性与牙周临床指标的相关性,以探讨牙周炎活动性的监测方法。方法利用Periocheck椅旁快速检测60例成人牙周炎患者共72个位点龈下菌斑中牙龈卟啉菌、福塞氏类杆菌、齿垢密螺旋体来源的肽酶活性,与标准比色卡比较,区分阳性和阴性;在波长666nh下测吸光度值,定量反映肽酶活性。结果牙周炎位点肽酶活性(0.43±0.15)明显高于健康对照组(0.13±0.03),差异有显著性(P＜0.01);肽酶活性高低与探诊深度、附着丧失、牙龈指数呈正相关关系。结论Periocheck方法能够快速、简便、灵敏地检测龈下菌斑肽酶活性,反映牙周临床指标,可用于牙周炎活动性的监测。     

牙周致病菌在冠心病患者龈下菌斑中的分布

目的:分析牙周致病菌在冠心病患者龈下菌斑中的分布情况,及冠心病患者龈下菌斑中牙周致病菌的分布与慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)病变程度之间的关系。方法:收集44例患冠心病并伴有CP患者的龈下菌斑,采用Chelex-100法提取细菌DNA,以聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、伴放线菌嗜血菌(Haemophilus actinomycetemcomitans,Ha)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)、福赛斯坦纳菌(Tannerella forsythensis,Tf)五种牙周炎相关致病菌。结果:44例冠心病患者的龈下菌斑中各牙周致病菌的检出率分别为:Pg 19(43.18%)、Ha 9(20.45%)、Pi 27(61.36%)、Fn 38(86.36%)、Tf 41(93.18%);轻度CP患者1例,Fn 1例(100%);中度CP患9例,其中Pg6(66.67%)、Ha 2(22.22%)、Pi 7(77.78%)、Fn 9(100%)、Tf 8(88.89%);重度CP患者34例,其中Pg13(38.24%)、Ha 7(20.59%)、Pi 20(58.82%)、Fn 28(82.35%)、Tf 33(97%)。结论:Tf、Fn可能在冠心病的发生发展中起着重要作用,冠心病患者中CP的发病和进展可能有其特定的细菌学病因。     

牙周炎患者龈下菌斑菌群的高通量测序分析

目的利用高通量测序(high?throughput sequencing,HTS)分析广泛型侵袭性牙周炎(generalized ag?gressive periodontitis,GAgP)和重度慢性牙周炎(severe chronic periodontitis,SCP)龈下菌群的组成,利用生物信息学分析其多样性及功能,并观察牙周基础治疗前后龈下菌群的变化。方法选择2018年9月至2019年5月在昆明医科大学附属口腔医院牙周病科就诊的11例GAgP患者和14例SCP患者作为研究对象。在基线及牙周基础治疗后第6周采集龈下菌斑样本并提取DNA,进行MiSeq测序,采用QIIME(quantitative insights in mi?crobial ecology)、Mothur及SPSS等软件分析群落信息,并进行LEfSe差异分析(linear discriminant analysis Effect size,LEfSe)、Network网络分析,使用KEGG PATHWAY数据库(https://www.kegg.jp/kegg/pathway.html)对群落功能进行预测。结果基线时,GAgP和SCP患者的优势菌群相似,均包括拟杆菌门、卟啉单胞菌属和牙髓卟啉单胞菌等。治疗后第6周,GAgP和SCP患者菌群变化相似,由于牙周袋变浅,拟杆菌门、卟啉单胞菌属和牙髓卟啉单胞菌等革兰阴性菌相对丰度降低,变形菌门、放线菌属和空间罗氏菌等革兰阳性菌相对丰度增加;其中放线菌是GAgP治疗后龈下菌群中显著增加的生物标志物;链球菌属是联系牙周炎相关菌属和牙周健康相关菌属的重要菌属。群落功能预测表明基础治疗可降低GAgP和SCP患者群落中的氨基酸代谢、甲烷代谢和肽酶等功能。结论GAgP和SCP患者的龈下菌群相似,链球菌属作为早期定植菌,在龈下菌群由健康向失调转变的过程中可能发挥着促使菌斑生物膜形成及成熟的重要作用;牙周基础治疗可以改变GAgP和SCP患者龈下菌群的组成和结构,降低群落多样性,降低氨基酸代谢、甲烷代谢和肽酶等群落功能。     

不同程度颈动脉狭窄患者动脉粥样硬化斑块中牙周致病菌的分布研究

目的 检测不同程度颈动脉狭窄患者动脉粥样硬化斑块与龈下菌斑中的牙周致病菌分布。方法 选取需要进行颈动脉内膜剥脱术的患者50例,按照颈动脉狭窄程度分为重度狭窄组(36例)和完全闭塞组(14例)。收集术中分离的颈动脉粥样硬化斑块和龈下菌斑,采用16S rRNA PCR检测伴放线聚集杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,A.actinomycetemcomitans)、福赛坦纳菌(Tanerella forsythia,T.forsythia)、齿垢密螺旋体(Treponema denticola,T.denticola)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)和牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)5种牙周致病菌的分布。结果 P.gingivalis、T.denticola、T.forsythia、F.nucleatum在完全闭塞组颈动脉粥样硬化斑块的检出率分别为71.4%、64.3%、42.9%和14.3%,高于在重度狭窄患者中的检出率,其中两组间...     

新疆霍城地区慢性牙周炎两种致病菌的分布研究

目的:研究新疆霍城地区慢性牙周炎患者中致病菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)和伴放线聚集杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,A.a)定量水平与人口统计学数据、临床牙周指数、牙周炎分度之间的关系.方法:选取2019年1～2月新疆伊犁哈...     

慢性牙周炎活动期龈下菌斑胰蛋白酶样酶活性与龈沟出血指数的关系

目的：初步探讨慢性牙周炎活动期龈下菌斑胰蛋白酶样酶活性与龈沟出血指数之间的关系，为临床牙周病活动期的诊断提供依据。方法：记录慢性牙周炎活动期牙周袋龈沟出血指数，并采集龈下菌斑标本进行胰蛋白酶样酶检测试验。结果：不同分值的龈沟出血指数所对应的胰蛋白酶样酶检测试验A600nm检测值的差异有统计学意义，经Spearman秩相关检验r=0．718，P＜0．05。结论：龈沟出血指数与牙周袋内胰蛋白酶样酶的水平呈正相关。胰蛋白酶样酶检测试验为临床牙周病活动期的诊断提供更直观的客观参考指标。     

牙周可疑致病菌在口腔内不同部位的分布特点

牙周炎是多种细菌混合感染性疾病,其病原菌在口腔内不同部位分布有所差异,了解口腔中牙周可疑致病菌的分布特点对于牙周炎的防治具有重要意义。本文就牙周可疑致病菌在口腔内不同部位的分布特点作一综述。     

中间普里沃菌在成人牙周炎患者龈下菌斑中的分布

目的 研究中间普里沃菌在牙周炎病人病变部位和健康部位龈下菌斑中的分布地选择６４例成年人牙周炎患者,分别取病变部位和健康部位龈下菌斑,经厌氧培养,挑取产黑色素菌落,经多聚酶链反应鉴定中间普里沃菌。结果 共对６１４株产黑色素Ｇ厌氧杆菌进行多聚酶链反应鉴定,有１１２株被鉴定为中间普里沃菌;在病变部位和健康部位,中间普里沃菌的检出率分别是２８．１％和１２．５％,有统计学差异（Ｐ〈０．０５）;在病变部位和健     

伴2型糖尿病的慢性牙周炎牙周可疑致病菌的检测

目的 检测伴2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)的慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈下菌斑中牙周可疑致病菌的种类和构成,从微生物学角度探讨牙周炎与DM的相互作用机制.方法 采集伴2型DM的CP患者154例(DM组)、不伴DM的单纯CP患者120例(CP组)及40名全身及牙周健康者(N组)的龈下集合菌斑,传统酚-氯仿法提取菌斑DNA,以牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg),伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa),具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn),中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi),福塞坦氏菌(Tannerella forsythia,Tf),齿垢密螺旋体(Treponema denticola,Td)为目标菌,应用以16SrRNA为基础的聚合酶链反应(PCR)技术对龈下菌群进行检测.结果 Pg、Aa、Fn、Pi、Tf、Td在DM组中均可检出;与CP组相比,在性别、年龄、牙周状况基本一致的情况下,轻度牙周炎者DM组Pi的检出率为35%(8/23),CP组为65%(13/20),两组间差异有统计学意义(P<0.05);重度牙周炎者DM组Pg、Aa、Tf的检出率分别为78%(72/92)、27%(25/92)、67%(62/92),CP组分别为58%(35/60)、17%(10/60)、43%(26/60),DM组均显著高于CP组,差异有统计学意义(P<0.05).同时,DM组Aa、Tf PCR产物的平均灰度值(average gradation,AVG)比值显著高于CP组,Pi的AVG比值明显低于CP组,P<0.05.结论 与单纯CP相比,伴2型DM的牙周炎患者龈下菌斑中Pg、Aa、Tf的数量增多,Pi的数量减少.     

牙周病基础治疗前后龈下菌群的动态观察

目的：动态观察龈下细菌治疗前后在口腔内定植的变化，为牙周病病因学研究和治疗方案确定提供依据。方法：选取26例慢性牙周炎患者治疗前、治疗后1周、1个月和3个月时同一位点的龈下菌斑，测量牙周探诊深度，提DNA，洲浓度。扩增全细菌16SrRNA基因片段，变性梯度凝胶电泳分离，选择特异性的DNA条带，回收、测序。结果：测序结果表明治疗后消失的两个DNA条带与牙龈卟啉单胞菌有98％和99％的同源性；治疗后新出现的两个DNA条带与卟啉菌属的一种有99％的同源性。结论：牙龈卟啉单胞菌是慢性牙周炎的重要可疑致病菌。变性梯度凝胶电泳适用于分析大量微生物标本分布和类型。     

伴2型糖尿病的慢性牙周炎牙周可疑致病菌的检测

目的 检测伴2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)的慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈下菌斑中牙周可疑致病菌的种类和构成,从微生物学角度探讨牙周炎与DM的相互作用机制.方法 采集伴2型DM的CP患者154例(DM组)、不伴DM的单纯CP患者120例(CP组)及40名全身及牙周健康者(N组)的龈下集合菌斑,传统酚-氯仿法提取菌斑DNA,以牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg),伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa),具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn),中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi),福塞坦氏菌(Tannerella forsythia,Tf),齿垢密螺旋体(Treponema denticola,Td)为目标菌,应用以16SrRNA为基础的聚合酶链反应(PCR)技术对龈下菌群进行检测.结果 Pg、Aa、Fn、Pi、Tf、Td在DM组中均可检出;与CP组相比,在性别、年龄、牙周状况基本一致的情况下,轻度牙周炎者DM组Pi的检出率为35%(8/23),CP组为65%(13/20),两组间差异有统计学意义(P<0.05);重度牙周炎者DM组Pg、Aa、Tf的检出率分别为78%(72/92)、27%(25/92)、67%(62/92),CP组分别为58%(35/60)、17%(10/60)、43%(26/60),DM组均显著高于CP组,差异有统计学意义(P<0.05).同时,DM组Aa、Tf PCR产物的平均灰度值(average gradation,AVG)比值显著高于CP组,Pi的AVG比值明显低于CP组,P<0.05.结论 与单纯CP相比,伴2型DM的牙周炎患者龈下菌斑中Pg、Aa、Tf的数量增多,Pi的数量减少.     

伴2型糖尿病的慢性牙周炎牙周可疑致病菌的检测

目的 检测伴2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)的慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈下菌斑中牙周可疑致病菌的种类和构成,从微生物学角度探讨牙周炎与DM的相互作用机制.方法 采集伴2型DM的CP患者154例(DM组)、不伴DM的单纯CP患者120例(CP组)及40名全身及牙周健康者(N组)的龈下集合菌斑,传统酚-氯仿法提取菌斑DNA,以牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg),伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa),具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn),中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi),福塞坦氏菌(Tannerella forsythia,Tf),齿垢密螺旋体(Treponema denticola,Td)为目标菌,应用以16SrRNA为基础的聚合酶链反应(PCR)技术对龈下菌群进行检测.结果 Pg、Aa、Fn、Pi、Tf、Td在DM组中均可检出;与CP组相比,在性别、年龄、牙周状况基本一致的情况下,轻度牙周炎者DM组Pi的检出率为35%(8/23),CP组为65%(13/20),两组间差异有统计学意义(P<0.05);重度牙周炎者DM组Pg、Aa、Tf的检出率分别为78%(72/92)、27%(25/92)、67%(62/92),CP组分别为58%(35/60)、17%(10/60)、43%(26/60),DM组均显著高于CP组,差异有统计学意义(P<0.05).同时,DM组Aa、Tf PCR产物的平均灰度值(average gradation,AVG)比值显著高于CP组,Pi的AVG比值明显低于CP组,P<0.05.结论 与单纯CP相比,伴2型DM的牙周炎患者龈下菌斑中Pg、Aa、Tf的数量增多,Pi的数量减少.     

慢性牙周炎主要牙周致病菌和口臭的相关性分析

目的：分析慢性牙周炎主要牙周致病菌与口臭程度的相关性。方法：选取慢性牙周炎伴口臭患者43例作为研究对象,检测其主要牙周致病菌VSCs含量和OS值,并对OS值和VSCs水平与临床指标以及VSCs水平与Pg、Pi、Tf、Td进行相关分析。结果：治疗前研究组的PD、BI、CAL、OS值和VSCs水平高于对照组,治疗后研究组PD、BI、CAL、OS值和VSCs水平与治疗前相比明显降低,差异均有统计学意义（P＜0．05）。治疗后研究组OS值和VSCs水平与PD、BI、CAL呈正相关,且VSCs水平与舌背、龈下菌斑中Pg、Pi、Tf、Td也呈正相关。结论：慢性牙周炎主要牙周致病菌与口臭程度存在着高度相关性,有效降低牙周致病菌水平,可以改善口臭值。     

不同牙周状态下龈下菌斑中人类巨细胞病毒的检测

目的 :研究人类巨细胞病毒 (HCMV)与慢性牙周炎及其活动性的相关性。方法 :采集 62例慢性牙周炎患者 (男性 2 7例 ,女性 3 5例 )的牙周炎活动部位 ,牙周炎静止部位 ,以及轻度龈炎部位的龈下菌斑 ,使用SeekVi ralDNAkit试剂盒提取DNA ,采用巢式PCR法检测HCMV ,比较同一患者不同牙周状态的检出率并加以分析。结果 :慢性牙周炎患者牙周炎活动部位、牙周炎静止部位、轻度龈炎部位的HCMV检出率为分别为 3 8.7%、14 .5 %、12 .9% ;HCMV在牙周炎活动部位的检出率高于牙周炎静止期部位 (P <0 .0 5 ) ,以及轻度龈炎部位 (P <0 .0 5 ) ;牙周炎静止部位与轻度龈炎部位的HCMV检出率的差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :提示HCMV感染与慢性牙周炎及其活动性的有一定的相关性。     

种植修复患者唾液与龈下菌斑微生物群落结构关联及其影响因素研究

目的 利用高通量测序技术研究种植修复患者唾液与龈下菌斑微生物群落结构的关联及其影响因素,为种植体周微生物研究的样本选择提供参考。方法 选取于2014年6月至2015年9月在第四军医大学口腔医院口腔修复科完成种植修复的10例患者（12颗种植体）,于2021年11月至2022年1月随访复诊时采集其唾液和种植体周龈下菌斑样本,行16S rRNA V3～V4区双端测序,通过Alpha多样性分析和LEfSe多级物种差异判别分析其微生物群落丰富度、多样性及物种丰度的差异性。结果 在Alpha多样性分析中,Sobs指数和Chao指数显示,唾液中微生物群落丰富度大于龈下菌斑,差异均有统计学意义（均P <0.05）;而Shannon指数和Simpson指数显示,唾液与龈下菌斑微生物群落多样性差异无统计学意义（P> 0.05）。进一步分析发现,种植体周围黏膜炎患者和吸烟患者的唾液与龈下菌斑微生物群落丰富度差异无统计学意义（均P> 0.05）;男性、不饮酒、种植体周最大探诊深度≥5 mm的患者唾液与龈下菌斑微生物群落多样性差异有统计学意义（均P <0.05）;其他因素如不同年龄、软垢...     

光动力疗法对慢性牙周炎龈下牙周致病菌的影响

目的：应用PeriowaveTM光动力杀菌系统对慢性牙周炎患者进行治疗,通过龈下菌斑中牙周致病菌比例的变化,评价光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）治疗慢性牙周炎的临床效果。方法：选取60名慢性牙周炎患者,分别给予SRP＋1次PDT（A组）、SRP＋2次PDT（B组）或单纯SRP（C组）治疗。利用real-time PCR技术检测A、B、C三组在治疗前、治疗后6周、治疗后12周龈下菌斑中牙周致病菌P.g、A.a、T.f所占比例的变化。结果：治疗后6周,A、B两组牙周致病菌P.g在总菌中的比例都有非常显著降低（p〈0.01）,C组有显著降低（p〈0.05）;治疗后12周,A、B组仍有非常显著的降低（p〈0.01）,与C组相比有非常显著差异（p〈0.01）,但A、B两组之间没有差异（p〉0.05）;而仅在治疗后12周,B组的A.a相对于总菌的比例与基线相比有显著降低（p〈0.05）,且这一变化显著大于A、C两组（p〈0.05）;在治疗后6周,A、B组T.f相对于总菌含量的下降与基线相比,明显大于C组（p〈0.05）,治疗后12周,A、B两组T.f相对于总菌的含量仍有非常显著的下降（p〈0.01）,但A组和B组之间都没有差异。结论：PDT对P.g、A.a和T.f3种牙周致病菌都有杀灭作用,但P.g、T.f对PDT更为敏感,PDT可以作为治疗慢性牙周炎的辅助方法。