中国胃肠间质瘤患者服用伊马替尼稳态谷浓度的初步分析

目的：研究中国胃肠间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）患者服用伊马替尼稳态浓度的分布情况,为开展伊马替尼治疗药物浓度监测和个体化治疗提供依据。方法：收集服用甲磺酸伊马替尼达稳态（29 d）的GIST患者血浆,HPLC-MS/MS法检测血浆伊马替尼浓度。分析不同剂量伊马替尼血药浓度的差异以及个体间和个体内变异。结果：共收集88例GIST患者的154份血浆样本。服用伊马替尼600 mg·d^-1（n=4）、400 mg·d^-1（n=81）、300 mg·d^-1（n=1）、200 mg·d^-1（n=2）的患者血药浓度分别为（3 032.50±679.94）ng·mL^-1,（1 525.14±599.87）ng·mL^-1,1 155 ng·mL^-1,（655.57±21.92）ng·mL^-1。伊马替尼个体间变异39.57%,个体内变异为22.32%。单变量分析显示,伊马替尼血药浓度与性别、年龄、肿瘤切除部位以及是否转移无关。结论：中国GIST患者服用伊马替尼血药浓度个体差异较大,十分有必要进行血药浓度监测。     

氯吡格雷活性代谢物在人体内的血药浓度测定

目的：采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）建立人血浆中氯吡格雷活性代谢产物浓度测定的方法。方法：血浆经冷冻干燥处理,以Accucore C₁₈为色谱柱;乙腈（含0.01%甲酸）-水（含0.01%甲酸）为流动相,流速0.4 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量2 μL;通过正离子模式多反应监测扫描分析,离子通道分别为氯吡格雷活性代谢产物衍生物（CAMD）m/z 504.2→155.1,内标氯雷他定m/z 382.8→336.9。结果：血浆中氯吡格雷活性代谢产物衍生物在0.5~500 ng·mL^-1范围内线性关系良好;最低检测限为0.5 ng·mL^-1;提取回收率为83.81%~97.65%;日内和日间精密度的RSD均小于9.86%。结论：本方法准确可靠,简便快速且灵敏度高,适用于人血浆中氯吡格雷活性代谢物的测定,可进一步用于研究氯吡格雷活性代谢产物的药代动力学特征。     

高效液相色谱-质谱联用法快速测定人血浆中丙戊酸钠浓度

目的：建立有效测定人血浆中丙戊酸钠浓度的高效液相色谱-质谱连用（HPLC-MS/MS）的方法。方法：血浆样本经乙腈沉淀蛋白后,以替米沙坦为内标,采用Agilent ZORBAX300SB-C₁₈柱（2.1 mm×150 mm, 5 μm）色谱柱,乙腈-20 mmol·L^-1乙酸胺（55：45）为流动相,流速0.25 mL·min ^-1,以液相色谱分离,电喷雾离子化串联质谱进行检测,采用多反应监测（MRM）测定丙戊酸钠（m/z 143.0→m/z 143.0）和内标替米沙坦（m/z 513.5→ m/z 469.4）的浓度。结果：校准曲线线性浓度范围从0.2~100 μg·mL^-1,最低定量限为0.2 μg·mL^-1。3个不同浓度（低、中、高）丙戊酸钠提取回收率分别为90.46%,93.18%,95.31%。日内和日间精密度均小于10%和8%。结论：此法简单灵敏,重现性好。已成功应用于丙戊酸钠片在中国健康志愿者的药动学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中替加环素的浓度

目的：建立人血清中替加环素浓度的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定方法。方法：以[叔丁基-d9]替加环素为内标,将待测血清样品经氢氧化钠碱化后,加乙酸乙酯-二氯甲烷（4∶1,V/V）提取,上清液经真空干燥,得到的残渣经流动相复溶后进样。进样液经Agilent Eclipse plus C₈（4.6 mm×100 mm,5 μm）色谱柱分离,甲醇-水（30∶70,V/V,含0.005 mol·L^-1甲酸铵和0.25%甲酸）为流动相,流速0.5 mL·min^-1,进行洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为替加环素m/z586.4→513.3和[叔丁基-d9]替加环素m/z595.4→514.3。结果：血清中替加环素的浓度与峰面积比在10~2 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,定量下限为10 ng·mL^-1,提取回收率大于70.04%,日内日间精密度小于4.54%。结论：该法简单、灵敏、快速,分离效果良好,可用于人体血药浓度测定和PK/PD研究。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定食蟹猴血浆中地高辛、安非他酮及活性代谢物浓度和药动学评价

目的：建立同时测定食蟹猴体内地高辛、安非他酮及其活性代谢物血浆浓度的方法，并评价药动学特征。方法：以乙腈沉淀蛋白处理血浆样品。色谱柱Agilent Zorbax SB-C8（4.6×100 mm 3.5 μm）；流动相为甲醇-水（含5 mmol·L^-1甲酸铵，pH 3.6），梯度洗脱；质谱条件为电喷雾离子源，正离子模式，扫描方式为多反应离子监测，m/z 798.4→651.3（地高辛）；m/z 240.2→184.0（安非他酮）；m/z 256.3→238.0（羟基安非他酮）；m/z 242.2→168.1（赤式/苏式羟化安非他酮）；m/z 172.2→128.2（甲硝唑，内标）。食蟹猴3只，♂，体质量2~4 kg，0.1 mg·5 mL^-1·kg^-1地高辛和1.5 mg·5 mL^-1·kg^-1盐酸安非他酮静滴给药。给药前后0.08，0.25，0.5，1，1.5，2，4，6，8，12，24，48 h采血。测定地高辛、安非他酮及其活性代谢物浓度。结果：血浆标准曲线在0.25~100 ng·mL^-1（地高辛），0.2~1 000 ng·mL^-1（安非他酮/羟基安非他酮），0.2~50 ng·mL^-1（赤式/苏式羟化安非他酮），定量范围内线性良好（r≥0.995）。批内批间精密度均小于13.7%，绝对回收率为83.8%~104.2%，基质效应小于10.6%。地高辛、安非他酮、羟基安非他酮、赤式、苏式羟化安非他酮药动学参数C_max分别为（29.32±7.31）、（254.00±68.23）、（22.43±7.56）、（1.53±0.27）、（3.96±0.42） ng·mL^-1，T_max分别为（0.14±0.10）、（0.08±0）、（1.50±0.00）、（1.17±0.29）、（4.06±1.46） h，AUC_0-48h分别为（123.87±9.59）、（550.68±17.43）、（160.47±62.92）、（9.26±3.65）、（24.43±5.28） ng·h·mL^-1，半衰期分别为（21.26±3.77）、（5.54±1.76）、（3.96±1.21）、（5.58±2.40）、（4.06±1.46） h。结论：和已报道的方法比较，建立的分析方法灵敏、准确，样品处理简便、快速，适用于药动学研究以及地高辛-安非他酮药物相互作用的评价，也能为临床个体化用药实践提供方法学参考。     

超高效液相色谱串联质谱法快速测定尼扎替丁在人体血浆中的含量

目的: 建立超高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中尼扎替丁的含量。方法: 血浆以甲醇直接沉淀蛋白, 上清液用于目标物的检测;色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈;流动相为5 mmol·L^-1醋酸铵水溶液-甲醇 (65:35, V/V);流速:0.20 mL·min^-1;进样量:3 μL;柱温:35 ℃;样品室温度:6 ℃;采用电喷雾正离子模式电离, 尼扎替丁和内标雷尼替丁的监测离子分别为(m/z)332.2→155.0, (m/z)315.2→130.0。结果: 尼扎替丁的线性范围为10~3 000 ng·mL^-1, 平均回收率为93.2%~101.1%, 批内、批间RSD均小于15%。结论: 本研究建立的分析方法快速、准确、灵敏、简便, 适用于尼扎替丁人体药动学方面的研究。     

超高效液相色谱串联质谱法测定大鼠血浆中埃索美拉唑质量浓度及药动学研究

目的：建立超高效液相色谱串联质谱（UPLC-ESI-MS/MS）法测定大鼠血浆中埃索美拉唑的含量,并应用于药动学研究。方法：血浆样品经蛋白沉淀法处理后,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.8 μm）,以A（0.1%甲酸）-B（乙腈）（80：20）为流动相,柱温为35℃,采用电喷雾电离源（ESI）源,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。通道分别为m/z 346→198（埃索美拉唑）和m/z 254→156（内标,磺胺甲卟唑）,用非室模型计算药动学参数。结果：埃索美拉唑的线性范围为0.2~20 ng·mL^-1（r=0.999 7）,检出限为0.12 ng·mL^-1,日内日间精密度均小于10%。低、中、高3个浓度提取回收率均大于90%,达峰时间（t_max）为（1.5±0.5）h,达峰浓度（C_max）为（620.65±2.89）ng·mL^-1,药物浓度-时间曲线下面积（AUC_0-t）为（2 530.68±60.17）ng·h·mL^-1,半衰期（t_1/2）为（3.87±0.03）h。结论：该方法操作简便、快速、准确度高、重复性好,可用于大鼠血浆中埃索美拉唑的测定和药动学研究。     

超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中克拉霉素缓释片的浓度及其药动学

目的：建立高效、灵敏、快速的超高效液相色谱-电解质-质谱/质谱（UPLC-ESI-MS/MS）测定人血浆中克拉霉素浓度的方法,并应用于药动学研究。方法：血浆样品先经碳酸钠溶液碱化,经乙醚液-液萃取后,以0.05 mol·L^-1乙酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,色谱柱采用BEH C₁₈ （50 mm×2.1 mm,1.7 μm）色谱柱,克拉霉素和内标罗红霉素定量分析的离子对分别为m/z 748.6→157.9和m/z 837.0→679.2。结果：克拉霉素的线性范围为1~3 000 ng·mL^-1且线性关系良好,日内日间精密度均小于10.0%,准确度在-7.6%~6.0%之间,样品运行时间为2.0 min。结论：该法灵敏、快速,适用于克拉霉素高通量样本的分析, 已成功应用于克拉霉素人体药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中利培酮和9-羟基利培酮的浓度及临床应用

目的：建立简单快速的液相串联质谱法（LC-MS/MS）测定人血浆中利培酮及其代谢物9-羟基利培酮的浓度。方法：血浆样本采用甲醇沉淀蛋白法处理,以地西泮为内标,采用ES Industries Sonoma C₁₈（2）色谱柱（100 mm×2.1 mm,3 μm）分离化合物;流动相包括A-50%甲醇水溶液（含6 mmol·L^-1乙酸铵）、B-0.1%甲酸乙腈溶液;梯度洗脱,总流速0.60 mL·min^-1;进样量10 μL;柱温30℃。采用正离子MRM模式扫描,电喷雾电离,利培酮、9-羟基利培酮及地西泮内标离子通道分别为m/z411.3→m/z191.1、m/z427.2→m/z207.0和m/z285.1→m/z193.1。依据《中国药典》（2015年版）通则中9012"生物样品定量分析方法验证指导原则"对所建方法进行验证。结果：利培酮在0.16~101.40 μg·L^-1的浓度范围内线性关系良好（r>0.999）,9-羟基利培酮在0.40~256.80 μg·L^-1浓度范围内线性关系良好（r>0.999）;在定量下限,低、中、高浓度批内与批间精密度的标准偏差（RSD）均小于10.9%,准确度符合要求;含分析物血浆样品在不同储存条件下结果稳定。该法已成功应用于临床样本治疗药物监测。运用此方法监测分析一千多份临床样本得出总利培酮临床实际测定浓度范围为13.30~93.22 μg·L^-1。结论：本研究建立了测定血浆中利培酮及其代谢物9-羟基利培酮浓度的快速、简便、实用的LC-MS/MS方法。利培酮临床实际测定浓度范围相比于神经精神药理学与药物精神病学协会专家组推荐治疗浓度范围更宽,且多次监测的患者中女性血药浓度相对于男性更趋于稳定。     

LC-MS/MS法同时分析血液中几种免疫抑制剂浓度

目的：建立LC-MS/MS法同时测定人血浆及全血中霉酚酸（MPA）、环孢素（CsA）、他克莫司（TAC）及西罗莫司（SRL）等几种常用免疫抑制剂的浓度。方法：分别采用蛋白沉淀法与液液萃取法处理血浆与全血：100 μL血浆加入含内标乙腈，涡旋振荡， 离心后取上清液进入LC-MS/MS分析。100 μL全血加入硫酸锌破裂血细胞，加入乙醚萃取，分离有机相，以氮气吹干后流动相复溶分析。色谱柱为 Agilent Eclipse XDB-C₁₈柱（3.5 μm，2.1 mm×100 mm），流动相为 2 mmol·L^-1 甲酸铵水溶液和甲醇，采用梯度洗脱的方式，流速0.3 mL·min^-1，多反应监测定量，ESI 正离子方式进行检测，用于定量分析的检测离子对分别为m/z→274.4/159.2（MPA），m/z→1 219.4/1 202.4（CsA），m/z →821.7/768.5（TAC），m/z →931.6/864.5（SRL），内标m/z→809.6/756.5（子囊霉素），m/z→356.3/312.0（吲哚美辛）。回顾性收集常规监测肾移植患者的全血标本，比较LC-MS/MS 法与 EMIT法的检测结果。结果：CsA、TAC、SRL、MPA的线性范围分别为：4~1 000 ng·mL^-1 （r=0.999 7）、0.2~50 ng·mL^-1 （r=0.999 5）、0.2~50 ng·mL^-1 （r=0.999 8）、0.204~51 μg·mL^-1 （r=0.997 6），血浆和全血日内和日间相对标准差（RSD）均小于15%，提取回收率以及基质效应血浆中为72.38%~98.52%、65.61%~99.19%，全血中为85.34%~99.76%、75.94%~97.67%。不同法检测全血中与血浆中CsA及TAC浓度相关性良好，而血浆中CsA与TAC显著低于全血中水平，MPA血浆浓度大约为全血浓度的2倍。结论：本研究建立的方法具有方便快速的特点，可以同时测定几种免疫抑制剂浓度，对同时监测多种免疫抑制剂具有一定价值。     

液相色谱-质谱联用法同时测定大鼠血浆中柔红霉素和汉防己甲素的浓度

目的:建立一种灵敏快速的LC-MS/MS方法,能够同时测定大鼠血浆中的柔红霉素(DNR)和汉防己甲素(Tet)含量。方法:色谱柱使用的是BDS HYPERSIL-C₈柱(2.1 mm×100 mm,3 μm);采用乙腈-5 mmoL·L^-1醋酸铵(46:54 V/V)作为流动相, 其中含千分之四的甲酸;流速设为0.2 ml·min^-1。采用醋酸乙酯对血浆样品进行液液萃取,选择阿霉素(DOX)为内标,进行HPLC-MS/MS分析,正离子扫描, MRM模式检测。DNR、Tet和IS的定量检测离子对分别为m/z 528.4→321.3,m/z 623.1→381.8,m/z 544.4→397.6。结果:大鼠血浆中检测DNR及Tet的线性范围分别为2~500 ng·ml^-1,0.5~400 ng·ml^-1,DNR与Tet高、中、低浓度提取回收率均>86%,日内精密度RSD<7.3%,日间精密度RSD<4.9%,准确度RE在-0.4%~4.5%范围内。结论:本方法可灵敏、快速地测定大鼠血浆中DNR及Tet 浓度。     

高效液相串联质谱法测定小鼠肺组织中美罗培南的含量

目的：采用液相色谱-质谱串联技术（HPLC-MS/MS）,建立测定小鼠肺组织中美罗培南含量的方法,为研究美罗培南在肺内分布的药动学奠定基础。方法：采用Diamonsil C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱进行分离,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,内标选择厄他培南。电喷雾离子化源（ESI）,正负离子切换,美罗培南为正离子检测模式,内标厄他培南为负离子检测模式。多反应监测（MRM）方式进行定量分析,用于定量分析的离子对分别为美罗培南m/z 384.1→141.2,内标厄他培南m/z 474.4→265.2。结果：小鼠肺组织匀浆中美罗培南在15.625~2 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.999 7）,平均提取回收率为98.05%~102.54%,日内、日间精密度均小于15%。结论：采用本法测定小鼠肺组织中美罗培南的浓度,灵敏度高,专属性强,可用于肺组织样品中美罗培南快速有效的分析以及美罗培南在肺组织分布的药动学研究。