组织工程化口腔黏膜的研究进展

随着组织工程学研究的发展,组织工程化口腔黏膜在修复皮肤和黏膜缺损以及建立疾病模型等试验性研究方面正不断深入。下面就组织工程化口腔黏膜的构建及其应用作一综述。     

口腔黏膜上皮细胞和成纤维细胞的复合培养

目的 为癌前病变临床病理研究建立一种简便、迅速和有效的口腔黏膜上皮细胞和成纤维细胞复合培养的方法,实现体外模拟组织工程化口腔黏膜的发生发展。方法 用DispaseⅡ分离上皮和皮下组织,用KGM培养口腔黏膜上皮细胞。用细胞培养法和组织块培养法获取验用的口腔黏膜上皮细胞和成纤维细胞,并采用复合培养法对两种细胞进行共同培养。结果 用DispaseⅡ可成分地分离上皮和皮下组织。KGM可明显促进口腔黏膜上皮细胞的分裂繁殖。复合培养的HE染色切片显示薄层的结缔组织之上有方形的基底细胞、颗粒细胞和角化层。结论 KGM可明显促进口腔黏膜上皮细胞的分裂和成熟。采用组织培养法获取原代成纤维细胞是适合口腔黏膜取材等特点的有效方法。气液相培养的口腔黏膜下结缔组织可促进上皮细胞的分层和分化。     

以胶原膜为支架构建组织工程化人口腔黏膜研究

目的：应用组织工程技术,以胶原膜为支架构建组织工程化人口腔黏膜。方法：体外培养、扩增人口腔黏膜角化细胞,通过细胞形态学及角蛋白免疫组化染色等对细胞进行定性研究,角化细胞接种于胶原膜上液面下培养1周后,升至液-气平面培养1周,光镜、电镜下观察大体组织形态及超微结构。结果：口腔黏膜上皮细胞可在生物支架材料胶原膜上粘附生长,并可形成上皮样组织,但无成熟的桥粒及基底膜样结构。胶原膜降解快,14d左右难以操作。结论：胶原膜与口腔黏膜角化细胞具有良好的生物相容性;由于降解速度和不易操作等特点,胶原膜作为支架材料构建组织工程化口腔黏膜有待深入研究。     

组织工程化口腔黏膜支架材料的研究进展

随着组织工程技术的发展,近年来国内外许多学者致力于口腔黏膜组织工程的研究,取得了一定的成就,支架材料是黏膜组织工程的一个重要因素,本文对组织工程化口腔黏膜的支架材料研究作一简要综述。     

组织工程化口腔黏膜研究进展

临床上由于各种原因引起的口腔黏膜缺损或功能不全 ,主要采用自体皮肤或黏膜移植进行修复。皮肤移植后虽能发生适应性黏膜化样外观 ,但有人认为并不能出现黏膜化生改变。而且移植物偶有毛发生长 ,与周围黏膜相比 ,在色泽、质地和功能上仍存在差异。自体黏膜移植虽最适合于口腔自然环境 ,但供区来源有限。与此同时 ,无论是自体皮肤还是黏膜移植都会造成新的供移植区创伤[1] 。组织工程学是应用工程学和生命科学的原理与方法 ,构建生物性替代物 ,以恢复、维持或增进受损器官或组织功能的一门科学[2 ] 。因此 ,组织工程化口腔黏膜的构建将是解…     

组织工程化口腔黏膜应用研究进展

目的组织工程是应用细胞生物学和工程学原理,将少量种子细胞经体外扩增后与可降解生物材料复合,用于替代或修复病变、缺损组织,重建生理功能。组织工程化口腔黏膜是目前研究的热点,可用于临床,也可用于体外生物相容性、黏膜刺激物、疾病及口腔生物学的实验研究。本文就组织工程化口腔黏膜的构建和主要应用作一综述。     

口腔黏膜组织工程的研究

近年来国内外许多学者致力于口腔黏膜组织工程的研究 ,取得了相应的成绩。该文即从口腔黏膜组织工程的支架材料以及临床应用情况进行简要综述     

口腔黏膜癌前病变及口腔鳞癌中的bFGF的表达及意义

目的 探讨口腔黏膜癌前病及口腔鳞癌的发生、发展过程中bFGF的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法对10例正常口腔黏膜、27例口腔扁平苔藓、24例口腔白斑及30例口腔鳞癌分别进行检测。结果 口腔鳞癌组织中bFGF高表达，明显高于正常口腔黏膜、口腔扁平苔藓和口腔白斑组织（P＜0．05）；口腔扁平苔藓和口腔白斑组织中bFGF表达高于正常口腔黏膜（P＜0．05）。结论 bFGF的过表达在口腔鳞癌的发生、发展过程中起着十分重要的作用，可以将其作为预测口腔黏膜恶变潜能的重要标志物。     

口腔黏膜上皮细胞体外培养研究

近年来国内外众多学者广泛开展了口腔黏膜上皮细胞体外培养的研究,致力于口腔黏膜上皮细胞体外培养体系的完善与简化。本文对近年来的口腔黏膜上皮细胞体外培养的研究作一综述。     

以胚鼠脱细胞真皮构建口腔黏膜固有层的实验研究

目的:探讨以胚鼠脱细胞真皮构建组织工程化口腔黏膜固有层的可行性。方法:取胚鼠皮肤制备脱细胞真皮支架,将体外培养的人口腔黏膜成纤维细胞复合入胚鼠脱细胞真皮支架中,分别于接种后的1、4、7 d行HE染色、荧光显微镜及电镜检测。结果:胚鼠脱细胞真皮支架行HE染色显示未见细胞残留,表皮-真皮结合面保存波浪状基底膜样结构,HE、荧光显微镜及电镜检测均显示成纤维细胞复合入胚鼠脱细胞真皮支架后可黏附、生长、增殖。结论:以胚鼠脱细胞真皮体外构建的口腔黏膜固有层具有较好的组织构架,为进一步研究成纤维细胞-上皮细胞相互作用机制和构建全层口腔黏膜提供良好的实验模型。     

口腔黏膜病

人口腔黏膜癌变不同阶段端粒酶逆转录酶及p53蛋白的表达；口腔黏膜扁平苔藓患者口腔黏膜组织中cyclin D1，ki-67及凋亡的表达研究；甘草散治疗口腔溃疡的动物实验研究；Ets-1在口腔扁平苔藓中的表达研究；改良组织块法体外原代培养口腔黏膜上皮细胞；……[编者按]     

全新视角透视口腔黏膜组织工程

口腔黏膜组织工程主要应用于修复因肿瘤切除、牙周病、外伤等导致的软组织缺损.以前的组织工程研究主要围绕上皮细胞培养方法的发展以及结缔组织支架材料的研发开展,本文将对口腔黏膜组织工程替代物的培养模式、支架结构、基质功能及临床应用进行综述,展示组织工程的新视角及口腔黏膜组织工程的新应用.     

全新视角透视口腔黏膜组织工程

口腔黏膜组织工程主要应用于修复因肿瘤切除、牙周病、外伤等导致的软组织缺损。以前的组织工程研究主要围绕上皮细胞培养方法的发展以及结缔组织支架材料的研发开展,本文将对121腔黏膜组织工程替代物的培养模式、支架结构、基质功能及临床应用进行综述,展示组织工程的新视角及口腔黏膜组织工程的新应用。     

口腔黏膜上皮细胞与猪小肠黏膜下层体外复合培养的实验研究

目的探讨体外快速培养犬口腔黏膜上皮细胞（OMECs）及其与猪小肠黏膜下层（SIS）体外复合培养的方法,为组织工程化黏膜研究提供实验依据。方法采用混合酶消化法,于6%胎牛血清的上皮细胞无血清培养基（DKSFM）中培养OMECs,观察OMECs的形态特征、绘制生长曲线并进行细胞表面标志物检测。将第2代犬OMECs接种在SIS上,行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、扫描电镜等观察OMECs在SIS上的生长状况。结果OMECs在DKSFM中生长良好,CK19细胞角蛋白免疫组化染色阳性。OMECs接种在SIS上呈单层生长,多角形,铺路石样排列,复合培养8 d呈多层生长。结论采用混合酶消化法,用含6%胎牛血清的DKSFM培养犬OMECs,方法简便,适合推广应用。SIS与OMECs有良好的相容性,可作为构建组织工程化黏膜的理想支架材料。     

组织工程化人口腔黏膜移植对裸鼠创面修复作用研究

目的　评价组织工程化人口腔黏膜移植对裸鼠创面的修复作用。方法　该研究于2016年11—12月在中国医学科学院基础医学研究所实验动物中心完成。随机选取健康雄性裸鼠8只（3 ~ 4周龄,体重为14 ~ 15 g）,用0.8%戊巴比妥钠麻醉,在其颈部及背部各制备大小约1.0 cm×1.0 cm的缺损,颈部缺损用组织工程化人口腔黏膜移植修复,背部缺损用真皮基质（acellular dermis matrix,ADM）移植修复。饲养8 d后取下移植皮片,HE染色观察组织特点。结果　HE染色发现,组织工程化人口腔黏膜移植物形成类皮肤组织结构,但部分上皮细胞脱离生物支架及ADM开始降解;而ADM移植物表面未见上皮细胞爬行。结论　组织工程化人口腔黏膜移植能促进裸鼠创面修复。     

人口腔黏膜异常增生上皮细胞体外培养体系的研究

目的：建立稳定的人口腔黏膜异常增生细胞(Dysplastic Oral Keratinocyte，DOK)体外培养体系，为口腔癌前病变体外细胞模型的建立提供基础。方法：采用传统含血清培养法和改良无血清无3T3细胞的培养体系，观察比较不同培养条件和传代方法下DOK细胞的生长特性和分化现象。结果：酶消化，无血清无3T3细胞的培养条件和加血清细胞传代的培养体系能在体外连续培养DOK60-90d，传7-9代。结论：该培养体系可为癌前病变研究提供足够寿命的体外细胞。     

人口腔黏膜角化上皮细胞的体外培养及生物学特性研究

目的:探讨人口腔黏膜角化上皮细胞的体外培养扩增方法及其生物学特性。方法:取牙周手术中切取的正常角化牙龈组织,经0.25％Dispase分离上皮层后,0.05％的胰酶分离为单个细胞,接种在无血清培养基中,进行原代培养及传代培养,并进行形态学观察、角蛋白免疫组化染色及其生长曲线、传代特点、各代生长特点的观察。结果:口腔黏膜角化上皮细胞能够在Epilife无血清培养基中稳定增殖传代,可连续传4-6代,成活45-60d,细胞生长呈铺路石状,角蛋白免疫组化染色阳性。结论:应用Epilife无血清培养基,可在短期内获得大量具有增殖能力的口腔黏膜角化上皮细胞。     

用PGA支架体外构建人口腔黏膜固有层的实验研究

目的:探讨利用可吸收生物材料聚羟基乙酸(polyglycolicacids,PGA)和口腔黏膜成纤维细胞(oralfibroblast,OFC)在体外构建组织工程化口腔黏膜固有层的可能性。方法:取细胞经体外培养,扩增至第3代,与PGA混合培养,形成细胞—生物材料复合物,每2d换液一次。动态观察细胞形态和粘附生长状况,于体外培养1周左右,取组织作电镜观察、组织学和RT-PCR检测。结果:复合物体外培养6d,OFC粘附在生物支架上,沿PGA纤维纵轴方向向两极伸展,细胞分泌基质并形成拉网状结构。HE染色和Masson染色均提示胶原纤维形成,RT-PCR显示胶原成分主要为Ⅰ型胶原。结论:应用PGA支架可以在体外成功构建口腔黏膜固有层组织。     

口腔黏膜病

二期梅毒40例口腔表现及病理分析;TFAR19在口腔白斑和口腔鳞癌中表达的研究;人体口腔黏膜上皮细胞体外培养和鉴定;复发性口腔念珠菌病患者感染源初探;口腔黏膜下纤维化的易感性研究（综述）     

人口腔黏膜成纤维细胞的原代培养和在聚乳酸羟基乙酸膜上的种植实验

目的探索人口腔黏膜成纤维细胞体外培养,观察其在聚乳酸羟基乙酸(PLGA)膜上生长情况。方法体外分离培养人口腔黏膜成纤维细胞,苏木精-伊红染色,光镜、倒置相差显微镜、扫描电镜(SEM)观察其形态结构、免疫组化Vimentin,鉴定其间叶来源。结果光镜、倒置相差显微镜、SEM观察显示培养的细胞形态结构符合成纤维细胞特征,免疫组化结果显示Vimentin染色阳性。结论成功培养人口腔黏膜成纤维细胞,且其在PLGA膜上生长良好。