川芎嗪和不同剂量冰片配伍对全脑缺血/再灌注大鼠脑区特异性保护作用研究

<正>脑卒中是危害人类健康的重大疾病~([1])。磷酸川芎嗪(tetramethylpyrazine phosphate,TMPP)的抗脑缺血作用证实与抗自由基、减少炎症反应有关~([2])。我们在前期研究发现,冰片对不同脑区具有不同的脑靶效应,即存在脑区特异性,这种特异性和冰片不同剂量密切相关~([3])。已有研究证实冰片和川芎联用在脑缺血的疗效上优于川芎单用~([4])。但目前还未见冰片-TMPP配伍在不同脑区抗脑缺血作用的报道,也未见冰片剂量对这一作用的干预研究。     

川芎与冰片伍用的现代研究进展

本文阐述了治疗缺血性脑血管病的主要药物川芎。主要介绍了川芎、川芎嗪与冰片配伍使用的一些情况,通过诸多实验研究发现,在与冰片配伍使用后,可明显提高其作用疗效。     

中药川芎与冰片配伍使用的研究

脑血管疾病(CVD)是危害人类健康及生命的三大疾病之一。从中医学角度来看,ICVD属于脑卒中的范畴,其形成主要在于"内亏",临床上多与肝肾阴虚、肝阳上亢、风痰上扰及老年人久病精血不足、肾元不固、机体失养、痰阻脉络等因素密切相关,瘀血闭阻脑脉是其基本病机。在辩证     

川芎、冰片配伍对脑缺血大鼠海马和下丘脑神经元的保护作用

目的研究川芎、冰片配伍对全脑缺血大鼠海马和下丘脑神经元的保护机制。方法将全脑缺血大鼠分为假手术组、模型组、川芎组(1.0 g·kg~(-1))、冰片组(0.16 g·kg~(-1))、川芎+冰片组。利用GC-MS方法检测海马/下丘脑的透析液中谷氨酸(glutamate,Glu)、甘氨酸(glycine,Gly)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)含量;激光共聚焦技术检测脑片中钙离子含量;TUNEL和电镜技术检测这两个脑区凋亡百分率和超微结构。结果川芎和冰片单用均可减少钙超载,缓解超微结构的改变,联合应用效果更佳。另外,川芎单用可减少两脑区的神经元凋亡指数、升高GABA。冰片仅降低两脑区的Glu,而它们的配伍还可进一步升高下丘脑Gly含量,也表现较好的协同关系。结论川芎和冰片配伍在缓解神经元兴奋毒、钙超载和超微结构异常方面具有较好的协同效应,但抗凋亡方面未见明显协同。     

川芎基于功效物质基础的抗脑缺血药理作用研究进展

目的总结川芎治疗缺血性脑血管病有效成分及其药理作用分子机制的研究现状,为对川芎的进一步深入研究提供理论和文献依据。方法对国内近15年来发表的相关文献进行分析、整理和归纳。结果川芎主要活性成分川芎嗪(Tetram ethylpyrazine,TMP)具有扩张血管、抑制血小板聚集、防止血栓形成、改善脑缺血等多种作用,酚类物质阿魏酸(Fumalicacid,FA)具有抗血小板凝集、血栓、清除氧自由基等作用,挥发油对缺血性脑损伤具有一定的保护作用。结论川芎嗪、阿魏酸均有较好的抗缺血性脑血管病作用,其药理作用的分子机制较明确,挥发油对缺血性脑损伤具有一定的保护作用,目前对川芎治疗该病的研究仅限于川芎嗪和阿魏酸单成分和挥发油,由于中药具有多成分、作用复杂的特点,应结合其功效加强川芎有效成分、有效成分群、有效部位、有效部位群之间的药效学研究及其作用机制研究,为阐明川芎抗缺血性脑血管病的作用机理提供理论依据,以便更好地指导临床合理用药和创新药物研发。     

冰片注射液的抗脑缺血作用

冰片具有通诸窍，散郁火，去翳明目，消肿止痛之功能，运用现代药理学研究方法研究发现，冰片与川芎等药物合用还具有抗脑缺血的作用。根据我们之前的研究，单独使用冰片同样具有一定的抗脑缺血作用。本次试验中，我们采用各个类型的大、小鼠脑缺氧缺血模型，进一步考查冰片的抗脑缺血作用。     

冰片配伍红花对大鼠大脑中动脉脑缺血的影响及其机制研究

目的:探讨冰片配伍红花对大脑中动脉脑缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠的作用及其可能的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、冰片组(0.03g·kg-1)、红花组(5g·kg-1)、冰片配伍红花组(冰片0.03g·kg-1+红花5g·kg-1)、尼莫地平组(0.01g·kg-1)。制备MCAO大鼠模型,术后连续灌胃给药7d对各组大鼠进行神经功能评分,激光多普勒仪检测大脑皮层脑血流量,TTC染色检测脑梗死范围,HE染色观察脑组织病理形态,免疫组化法检测脑组织MMP-2、MMP-9、ZO-1的表达,RT-PCR法检测MMP-9和Claudin-5的mRNA表达。结果:与模型组比较,冰片配伍红花组能降低大鼠神经功能评分,增加大脑皮层脑血流量,缩小脑梗塞范围,改善脑组织的病理形态,降低脑组织中MMP-2和MMP-9的表达同时提高ZO-1、Clauidin-5的表达。结论:冰片配伍红花对脑缺血大鼠具有脑保护作用,其脑保护的作用机制可能与下调MMP-2、MMP-9的表达和提高ZO-1、Claudin-5的表达有关。     

冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用

目的:研究冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片组、三七组、冰片配伍三七组和尼莫地平组6组，连续灌胃给药7 d后复制大脑中动脉脑缺血(MCAO)模型，术后24 h进行神经功能缺损测定，检测血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量，观察脑组织病理形态，检测脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达及血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA表达。结果:冰片配伍三七组能降低MCAO大鼠的神经功能评分(P<0.01),改善脑组织病理形态，升高血清中SOD活性并降低NO、MDA含量(P<0.05),降低脑组织中Bax蛋白表达和MMP-2的mRNA表达(P<0.01),升高Bcl-2蛋白表达，以及BDNF、VEGF的mRNA表达(P<0.01)。结论:冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用，其机制可能是提高了MCAO大鼠血清中SOD活性并降低了MDA、NO含量，降低脑组织中Ba...     

冰片注射液对小鼠实验性脑缺血的保护作用

目的研究冰片注射液对小鼠实验性脑缺血的保护作用及机制。方法分别采用小鼠结扎双侧颈总动脉及迷走神经模型、常压耐缺氧模型、大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,记录此后小鼠的存活时间,并对大脑中动脉阻塞小鼠进行行为学评分、测量其脑梗死面积,计算脑指数。结果冰片注射液可延长小鼠结扎双侧颈总动脉及迷走神经、常压耐缺氧后的存活时间,提高MCAO小鼠行为学评分,降低脑梗死面积及脑指数。结论冰片注射液对小鼠实验性脑缺血具有保护作用,其机制可能与改善缺血脑组织内能量代谢有关。     

川芎不同采收期的质量对比研究

目的：选取川芎的最佳采收时期,方法：通过气相色谱法测定川芎中蒿本内酯、川芎嗪和阿捃酸的含量。结果：5月前后采收的川芎药材上述三成份含量均较高。结论：小满前后采收的川芎质量较优。     

注射用大川芎中药材的质量研究

目的对注射用大川芎中所用原药材进行了质量研究。建立了川芎药材和天麻药材的TLC鉴别方法,并对样品进行了鉴别。方法建立了川芎药材中阿魏酸及天麻药材中天麻素的HPLC含量测定方法,并对方法学进行了考察。结果在所确立的色谱条件下,阿魏酸在0.0316-0.5056μg范围内,峰面积和进样量线性关系良好,精密度RSD=1.25%,平均回收率为97.80%（n=9,RSD=1.47%）;天麻素在0.502-10.04μg范围内,峰面积和进样量线性关系良好,精密度RSD=1.21%,平均回收率为98.00%（n=9,RSD=1.39%）。结论供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性样品无干扰。     

川芎地上部分的形态组织学研究

目的 为川芎地上部分的研究和开发提供依据.方法 采用显微常规鉴定方法 徒手切片、石蜡切片、表面制片.使用显微描绘目镜绘制组织图,并计算叶片栅表比、脉岛数及下表面气孔指数.结果 找出了川芎茎、叶柄、叶组织上的主要鉴别特征.结论 形态组织学研究为川芎地上部分的研究和开发奠定了基础.     

RP-HPLC测定川芎、奶芎和山川芎中阿魏酸的含量

目的 考察奶芎、山川芎能否作川芎药用。方法 用RP—HPLC测定不同产地和不同生长年限的奶芎、山川芎和川芎中阿魏酸的含量。结果 奶芎中阿魏酸的含量为0．0444％、川芎为0．0467％、山川芎为0．0863％,山川芎高于川芎、奶芎。根据川芎GAP课题中对三者的挥发油和总生物碱含量测定的数据表明,奶芎、川芎和山川芎的挥发油含量分别为0．22％、0．71％、0．63％,总生物碱含量分别为0．172％．0．259％．0．195％。结论 建议奶芎不作川芎药用,山川芎可作川芎药用,或作兽药使用。     

川芎-香附提取物对原发性痛经模型动物的作用

目的探讨3种不同提取方式提取川芎-香附药对所得到的提取物对动物原发性痛经模型的药理作用,为川芎-香附药对治疗痛经的新药开发提供依据。方法采用缩宫素致大鼠离体子宫剧烈收缩模型,观察各提取物对大鼠离体子宫活动的影响;采用小鼠原发性痛经模型以扭体次数和扭体潜伏期为指标,观察提取物的镇痛效果。结果 3种提取物能不同程度抑制大鼠离体子宫自发活动,对缩宫素引起的离体子宫剧烈收缩的抑制活性依次为超临界CO2萃取物>醇提水沉液>水提醇沉液。3种提取物均能不同程度减少缩宫素致痛经模型小鼠的扭体次数,延长扭体潜伏期。结论超临界CO2萃取川芎-香附药对(分子蒸馏纯化)所得到的提取物对大鼠离体子宫剧烈收缩模型及小鼠原发性痛经模型具有明显抑制及镇痛作用。     

川芎-天麻药对防治偏头痛的研究进展

偏头痛是临床常见的一种神经系统疾病,严重影响患者的工作与生活质量,因此,偏头痛的防治具有重要现实意义.研究表明川芎配伍天麻对偏头痛患者具有明显疗效,且现代药理研究发现其主要活性成分为阿魏酸、川芎嗪、洋川芎内酯类、天麻素、天麻苷元等,但其治疗偏头痛的物质基础及作用机制尚未阐明.本文通过综述国内外川芎-天麻药对相关文献报道...     

不同方法提取川芎挥发油的GC-MS分析

目的:对川芎饮片不同提取方法所得挥发油的化学成分进行比较分析。方法:采用气相色谱-质谱联用仪对提取物进行比较分析。结果:4种方法提取的挥发油有9个化合物相同。其中水蒸气蒸馏法提取的挥发油样品中组分种类最多,主要是烯萜类成分。结论:4种提取方法均能提取出川芎挥发油中的主要成分,主要成分为内酯类,相对含量最高的为反式-藁本内酯。     

基于UPLC指纹图谱和化学计量学相结合的川芎质量研究

目的 建立并比较川芎药材、破壁饮片、标准煎液、配方颗粒的UPLC指纹图谱,分析其相似度并对川芎不同饮片形式进行聚类分析（cluster analysis,CA）及主成分分析（principal component analysis,PCA）,为川芎不同的饮片形式提供质量控制依据。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）;以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;流速0.3 mL·min^-1;检测波长276 nm;柱温35℃;进样量2 μL。对12批川芎药材及其标准煎液、7批破壁饮片、以及6家厂家的川芎配方颗粒进行检测,采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012年版）中位数法计算其相似度,并运用SPSS 22.0统计软件进行化学模式识别分析。结果 川芎各饮片形式相似度均>0.9,川芎药材、破壁饮片、标准煎液、配方颗粒与对照图谱的相似度分别为0.534,0.449,0.979,0.968。CA及PCA分析揭示了川芎不同饮片形式之间的相似性及差异性。结论 以指纹图谱数据为基础,将CA与PCA相结合,可以看出川芎每种饮片形式质量较稳定,并且川芎破壁饮片与药材相似度较高,川芎标准煎液与川芎配方颗粒相似度较高。     

UPLC同时测定不同产地川芎中8种活性成分的含量

目的建立同时测定不同产地川芎中咖啡酸、香草醛、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、丁基苯酞、藁本内酯和丁烯基苯酞含量的UPLC方法。方法采用ACQUITY UPLC,HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲醇-0.03%磷酸水溶液,梯度洗脱,PDA检测器,针对不同组分,选择其最大吸收波长作为检测波长。结果咖啡酸、香草醛、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、丁基苯酞、藁本内酯和丁烯基苯酞分别在0.082 8～3.312μg.mL 1,0.047 85～1.914μg.mL 1,4.420～176.8μg.mL 1,2.035～81.4μg.mL 1,0.470 4～18.82μg.mL 1,1.044～41.75μg.mL 1,13.55～542.0μg.mL 1,1.785～71.40μg.mL 1内呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.0%,99.1%,98.9%,103.6%,96.3%,102.8%,98.1%,98.0%。结论该方法简便、快捷、重复性好,可用于川芎药材及其制剂的质量控制。     

益母草与川芎配伍水煎醇沉工艺实验研究

目的:优选肾宁颗粒制备中益母草与川芎的最佳水煎醇沉工艺。方法:采用正交试验法。以盐酸水苏碱含量和干膏收率为指标,对影响提取的各因素进行考察;以水苏碱含量和80%乙醇浸出物得率为指标,对影响醇沉的各因素进行考察。结果:最佳工艺为煎煮2次,每次2h,每次加水12倍量;水提液浓缩至1:1.5(g:ml),加乙醇使含醇量达50%,静置48h。结论:所建立提取纯化工艺稳定,为肾宁颗粒及其他制剂的生产提供了参考。     

肝宁颗粒中川芎的TLC鉴别与阿魏酸的HPLC测定

目的:建立肝宁颗粒中川芎的鉴别与阿魏酸(FA)的含量测定方法。方法:采用TLC法鉴别川芎;采用HPLC法测定FA的含量。色谱柱:Kromasil ODS-1 C18(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(30∶69.5∶0.5);检测波长:322nm;柱温:室温;流速:1.0mL·min-1。结果:供试品TLC中,在与川芎对照药材及FA对照品色谱相应的位置上,显相同颜色斑点;FA进样量在0.01012~0.15180μg范围内与色谱峰峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999,n=8);平均回收率为97.39%(RSD=1.97%)。结论:该鉴别与含量测定方法快速、准确、专属性强、重现性好,可用于肝宁颗粒的质量控制。