唐古特大黄根茎不同组织的红外光谱分析及药效学的对比研究

目的 利用红外光谱分析唐古特大黄根茎不同组织中成分分布特征,同时对比研究唐古特大黄根茎不同组织的泻下及抗炎作用。方法 使用溴化钾压片法对样品进行红外光谱测定。（1）将小鼠随机分为空白组、模型组、唐古特大黄根茎组、传统药材组和外皮层组。空白组灌胃蒸馏水(20 mL·kg^-1),其余各组灌胃复方地芬诺酯(50 g·kg^-1)复制便秘模型。空白组与模型组灌胃空白对照液(20 mL·kg^-1),其余给药组分别灌胃加入碳素墨汁的唐古特大黄根茎药液、传统药材药液、外皮层药液(均为4 g·kg^-1)。给药后观察小鼠首次排黑便时间、5 h内排便次数及测定肠道含水量,次日,灌胃1 h后,用酶联免疫吸附法（ELSA）测定小鼠结肠Na⁺-K⁺-ATP酶活性。（2）用二甲苯致小鼠耳肿胀法、甲醛致小鼠足肿胀法建立炎症模型,将小鼠随机分为即模型组、唐古特大黄根茎组、传统药材组和外皮层组。模型组灌胃蒸馏水(20 mL·kg^-1),其余给药组分别灌胃唐古特大黄根茎药...     

白藜芦醇对心肌缺血再灌注过程中线粒体的保护

目的:探讨白藜芦醇对心肌缺血再灌注损伤过程中Ca²⁺-ATPase及HSP70表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠40只,采用随机数字量表法分为4组(假手术组、缺血再灌注组、缺血预适应组、白藜芦醇组),采用结扎冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注损伤模型,于结扎前15 min及再灌注前1 min经舌下静脉注射白藜芦醇10 mg·kg^-1。提取心肌线粒体,紫外可见光分光光度计测定线粒体中SDH、Na⁺-K⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase活性;荧光分光光度计测定线粒体中游离钙、mPTP开放度及跨膜电位;RT-PCR及Western blot检测心肌组织HSP70、Ca²⁺-ATPase mRNA及蛋白质的表达。结果:白藜芦醇与缺血再灌注组及缺血预适应组相比,线粒体中SDH、Na⁺-K⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase的活性明显提高(P<0.05或P<0.01);线粒体内钙离子浓度明显下降(P<0.05或P<0.01)、mPTP开放程度减小(P<0.01)、线粒体膜电位增高(P<0.01);Ca²⁺-ATPase、HSP70在 mRNA或蛋白水平上的表达均有所增加(P<0.05或P<0.01)。结论:白藜芦醇可能通过增加心肌组织中Ca²⁺-ATPase、HSP70 mRNA和蛋白的表达,提高线粒体Ca²⁺-ATPase的活性,产生对大鼠心肌缺血再灌注损伤时线粒体的保护作用。     

茵陈蒿汤及其不同组方提取物对雌激素诱导胆汁淤积大鼠的治疗作用及机制研究

目的：基于肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白1~4（multidrug resistant associated protein 1~4,Mrp1~4）、Na⁺依赖性牛磺胆酸共转运多肽（Na⁺-taurocholate co-transporting polypeptide,Ntcp）,探讨茵陈蒿汤及其不同组方提取物对胆汁淤积大鼠的治疗作用。方法： 30只Wistar雄性大鼠随机分为6组,即正常组、对照组、茵陈组、茵陈栀子组、茵陈大黄组、茵陈蒿汤组;采用皮下连续注射苯甲酸雌二醇（estradio benzoate,EB,5 mg·kg^-1·d^-1）5 d制备胆汁淤积大鼠模型。茵陈组、茵陈栀子组、茵陈大黄组、茵陈蒿汤组分别灌胃给予茵陈（0.43 g·kg^-1·d^-1）、茵陈栀子（1.08 g·kg^-1·d^-1）、茵陈大黄（1.09 g·kg^-1·d^-1）、茵陈蒿汤（1.69 g·kg^-1·d^-1）提取物14 d。干预结束后,测定各组大鼠胆汁流速,血清生化及肝脏病理,并采用Western blot检测肝组织中Mrp1~4和Ntcp的表达。结果：茵陈蒿汤及不同配伍组干预14 d后,胆汁流速均显著升高,血清生化与肝脏病理较对照组均有明显改善;与对照组相比,茵陈组、茵陈栀子组、茵陈大黄组及茵陈蒿汤组Mrp2、Mrp3、Ntcp的表达均升高;Mrp4的表达均降低;此外,茵陈栀子组Mrp1的表达降低。结论：茵陈蒿汤及其不同组方提取物对雌激素诱导的大鼠胆汁淤积均有治疗作用;其疗效可能与调控转运体Mrp1-4和Ntcp的表达相关,且不同组方提取物对Mrp1~4和Ntcp的调控作用不同。     

基于因子分析与聚类分析评价补中益气汤对气虚发热大鼠免疫功能的影响

目的： 探讨因子分析与聚类分析在综合评价补中益气汤（Buzhong Yiqi Decoction, BYD）对气虚发热大鼠免疫功能影响中的应用。方法： 大鼠随机分成正常组、气虚发热组、阳性对照组（阿司匹林溶液0.1 g·kg^-1）、BYD高剂量组（25.34 g·kg^-1）、BYD中剂量组（12.67 g·kg^-1）、BYD低剂量组（6.34 g·kg^-1）,在限食法的基础上采用番泻叶（0.1 g·kg^-1）苦寒泻下加游泳劳倦过度及注射脂多糖（LPS, 80 μg·kg^-1）的方法建立气虚发热大鼠模型。造模42 d后连续给药6 d,末次给药后注射LPS,检测与免疫功能相关指标,包括CD4⁺、CD8⁺细胞百分比、补体C3水平、免疫球蛋白IgM、IgG水平及淋巴细胞转化率,并运用因子分析与聚类分析综合评价BYD对气虚发热大鼠免疫功能的影响。结果： BYD能显著改善气虚发热大鼠的免疫功能,其中低剂量效果最显著,中剂量与高剂量次之,阿司匹林效果较差。结论： 因子分析与聚类分析对气虚发热大鼠的免疫功能进行综合评价是可行的,可作为评价中药复方疗效科学、客观的新方法。     

长期服用生大黄、熟大黄对大鼠肝肾功能影响的比较

目的:观察生、熟大黄对SD大鼠肝、肾功能的作用,明确生、熟大黄的毒性作用差异。方法:生、熟大黄总提物10 g·kg^-1给予大鼠灌胃95 d,相当于临床用量的100倍,观察对大鼠行为活动、肝肾功能、电解质影响,并对大鼠脏器进行系统观察和组织病理学检查。结果:与正常对照组比较,生大黄组、熟大黄组的BUN、Cys-c、Crea、β2-MG显著性升高、Na⁺显著降低(P<0.01);与生大黄组相比,熟大黄组的BUN、Cys-c、Crea、β2-MG均显著性下降、Na⁺显著升高(P<0.01~0.05);生大黄组大鼠肾脏有色素沉积、肿胀变性,熟大黄组大鼠色素沉积。结论:长期服用生、熟大黄对大鼠的肾功能有一定的损伤,熟大黄可减轻生大黄的肾损伤作用。     

新鲜掌叶大黄茎的急性毒性及泻下作用研究

目的 研究新鲜掌叶大黄茎对小鼠的急性毒性及泻下作用,为大黄茎的安全性评价和毒理药效研究提供参考。方法 以SPF级昆明种小鼠为研究对象,采用最大给药量法评价其急性毒性;采用炭末排出时间、排便频率和小肠推进实验共同评价其泻下作用。结果 掌叶大黄茎水提物、鲜榨汁、冻干粉混悬液的最大给药剂量分别为342、136.8、297.6 g·kg^-1,分别为成人每日剂量的2660、1064、2315倍,且未见小鼠死亡、无明显中毒症状和脏器异常。与空白组比较,各组小鼠的炭末排出时间和小肠推进率均无统计学差异;掌叶大黄茎高剂量组5 h内的排便频率显著增加。结论 掌叶大黄茎的安全剂量大,无明显不良反应,短期内服用无损伤,具有一定的通便作用,无明显泻下作用。     

槐杞黄清膏抑制UUO大鼠肾间质纤维化的初步研究

目的:探讨槐杞黄清膏对肾间质纤维化的疗效及其作用机制.方法:Wistar大鼠随机分为5组,每组5只, 分别为假手术组、UUO(unilateral ureteral obstruction)组,1.5 g·kg^-1槐杞黄治疗组,2.25 g·kg^-1槐杞黄治疗组和3.0 g·kg^-1槐杞黄治疗组.于术后第3天开始,每天分别给予治疗组大鼠1.5 g·kg^-1, 2.25 g·kg^-1,3.0 g·kg^-1槐杞黄清膏水溶剂灌胃;于术后第14 d处死大鼠后获取肾脏组织.梗阻侧肾脏组织行HE、Masson染色,观测肾间质病理改变;免疫组化方法检测肾间质肌成纤维细胞堆积程度;Western-Blot方法检测梗阻侧肾组织α-SMA蛋白表达水平.结果:与假手术组相比,UUO模型组大鼠建模后14 d肾间质严重损伤并伴明显纤维化病变,大量肌成纤维细胞在肾间质广泛堆积.2.25 g·kg^-1,3.0 g·kg^-1槐杞黄清膏治疗UUO大鼠后,间质纤维沉积及间质肌成纤维细胞浸润明显减少.Western Blot检测结果显示2.25 g·kg^-1、3.0 g·kg^-1剂量槐杞黄清膏治疗UUO大鼠14 d时,α-SMA蛋白表达下调.结论:在肾间质纤维化早期使用2.25 g·kg^-1、3.0 g·kg^-1槐杞黄可减轻UUO大鼠肾间质肌成纤维细胞堆积从而减轻肾间质纤维化.     

基于脑区特异性不同剂量冰片与川芎配伍抗脑缺血的研究

目的：观察不同剂量冰片配伍川芎对不同脑区缺血的保护作用。方法：复制大鼠全脑缺血-再灌注模型,观察不同剂量冰片（0.01, 0.02, 0.04, 0.08, 0.16, 0.32, 0.64, 1.28 g·kg^-1）联合川芎对大鼠皮层、海马、下丘脑和纹状体四个脑区梗死率,脑组织IL-1β、 IL-6、TNF-α含量和组织学评分的影响。结果：川芎单用能显著改善皮层区TNF-α含量。其配伍冰片后对四个脑区的梗死率,IL-1β、 IL-6、TNF-α含量和组织学评分均表现出更好的疗效。另外针对不同脑区,两药配伍疗效比较为皮层 > 海马、纹状体 > 下丘脑。针对冰片剂量,两药配伍疗效比较为0.08 g·kg^-1 > 0.16 g·kg^-1 > 0.32 g·kg^-1。结论：川芎和冰片配伍可以对缺血脑组织产生脑区特异性改善,而且这一改善作用与冰片剂量密切相关。     

苦参碱对阿霉素所致H9c2心肌细胞损伤的保护作用及与线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶关系的研究

目的：研究苦参碱对阿霉素所致H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：将H9c2心肌细胞培养,取2~3代细胞进行试验,共分为4组。对照组：接受生理盐水作为干预因素;阿霉素组：接受0.5 mg·L^-1阿霉素作为损伤模型;苦参碱+阿霉素组：接受0.5 mg·L^-1阿霉素和不同浓度苦参碱（50,150,200 mg·L^-1）作为干预因素;苦参碱组：接受不同浓度苦参碱（50,150,200 mg·L^-1）作为干预因素。以上各组相应干预24 h后,应用流式细胞仪检测H9c2心肌细胞凋亡水平,应用分光光度法检测线粒体Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性,利用JC-1法检测线粒体膜电位。结果：与阿霉素组相比,苦参碱+阿霉素组H9c2心肌细胞凋亡显著减少、线粒体Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性显著升高（P<0.05）、线粒体膜电位显著改善。结论：苦参碱对阿霉素所致H9c2心肌细胞有保护作用,减轻心肌细胞凋亡,改善线粒体膜电位、提高线粒体Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性。     

十二味穿甲片原料抗CCl4所致大鼠肝纤维化的实验研究

目的:探讨十二味穿甲片原料对四氯化碳(CCl₄)所致大鼠肝纤维化的保护作用。方法:将雄性SPF级SD 大鼠98只随机分为空白对照组,模型对照组,阳性对照组,中药十二味穿甲片原料4.2,2.8,1.4,0.7 g·kg^-1剂量组。除空白对照组腹腔注射同体积的注射用大豆油外,其余各组均腹腔注射40%的CCl₄大豆油溶液2 mL·kg^-1,每周2次并连续8周建立大鼠肝纤维化模型,造模同时给药进行抗肝纤维化干预,共59 d。通过测定体质量,检测肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB),比色法测定肝脏羟脯氨酸(Hyp)含量并进行肝内胶原定量分析,HE染色以观察肝组织病理变化,评价药物的抗纤维化作用。结果:与模型对照组比较,十二味穿甲片原料药粉4.2,2.8 g·kg^-1剂量组大鼠肝脏Hyp和胶原含量显著降低(P<0.05),2.8,0.7 g·kg^-1剂量组大鼠血清ALT、AST含量及1.4 g·kg^-1剂量组血清ALT均显著下降,差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01),而4.2 g·kg^-1剂量组血清ALT、AST和1.4 g·kg^-1剂量组AST含量亦呈下降趋势,但无显著性差异(P>0.05)。2.8 g·kg^-1剂量组大鼠血清ALB和TP呈明显升高趋势,但较模型对照组统计学意义不显著(P>0.05),病理结果显示2.8 g·kg^-1剂量组大鼠肝纤维化改善显著。结论:本实验条件下,十二味穿甲片原料具有抗CCl₄所致大鼠肝纤维化的作用,以2.8 g·kg^-1剂量抗肝纤维化作用最为明显。     

右旋美托咪定后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：评价右旋美托咪定（DEX）后处理对大鼠心肌缺血再灌注时Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性的影响。方法：36个成年雄性Wistar大鼠心脏置于改良的Langendoff装置上,均为平衡灌注末HR>180次/min、左室收缩压>75mm Hg、室性早搏<2个/min的心脏模型,采用随机数字表法分为3组：对照组（A组）、缺血再灌注组（B组）、DEX处理组（C组）,每组12个。A组持续灌注KH液180 min,B组和C组在KH平衡灌注20 min时常温停灌40 min后恢复灌注,于再灌注即刻分别灌注KH液、含100 nmol·L^-1 DEX的KH液20 min,然后继续再灌注KH液100 min。监测心率（HR）、冠状动脉流出量（CF）,左心室发展压（LVDP）、左心室内压最大上升和下降速率（±dP/dt_max）,采用酶联免疫法测定心肌Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶,以梗死心肌质量占心室质量的百分比表示心肌梗死率。结果：再灌注后A组心功能优于B组、C组（P<0.05）,C组优于B组（P<0.05）。与A组比较,B组和C组心肌梗死率较大,心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶的活性降低（P<0.05）;与B组比较,C组心肌梗死率低,心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶的活性较高（P<0.05）。结论：DEX后处理可提高Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性,减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

玉郎伞水提物对心肌缺血再灌注损伤心肌组织ATP酶和凋亡蛋白的影响

目的:研究玉郎伞水提物(WYLS)对大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶和凋亡蛋白的影响。方法:采用Langendorff离体心脏灌流法,停灌30 min再灌30 min建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。观察WYLS对心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性的影响、心肌组织病理学变化、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果:与I/R组比较,WYLS高剂量组Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶的活性明显增加(P<0.05或P<0.01),心肌受损程度明显减轻(P<0.05)。同时,WYLS高剂量组心肌Bax蛋白表达明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达无明显影响(P>0.05),但Bcl-2/Bax的比率明显增加(P<0.05)。结论:WYLS能减轻大鼠心肌I/R损伤,作用机制可能与减轻钙超载、抑制某些凋亡相关蛋白表达有关。     

Inhibiting effect of cytotoxic bromine-containing compounds from sponges (Aplysinidae) on Na-K-ATPase activity

—The bromine-containing compounds from sponges of the Aplysinidae family inhibit, in vitro, the Na⁺-K⁺-ATPase activity of the rat brain microsomal fraction. The extent of inhibition is dependent on concentration and chemical structure of the compounds. The substances containing the dienone fragment, such as 3,5-dibromo-1-hydroxy-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-acetamide (IV), 3,5-dibromo-1-acetoxy-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-acetonitrile (V) and 3,5-dibromo-1-hydroxy-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ethylacetate (VI), are powerful inhibitors of Na⁺-K⁺-ATPase.     

Herbal medicine and false-positive results on lymphocyte transformation test

In vitro mitogenic activity of 16 herbs and 3 Kampo (herbal medicine) formulae have been reported in experimental studies. It is not known how many herbs and Kampo formulae in total have mitogenic activity. Lymphocyte transformation test (LTT) is generally utilized to diagnose drug-induced liver injury. In LTT, mitogenic activity is assessed by measuring 3H-thymidine incorporation. The objective of the present study was to determine which herbs and which Kampo formulae caused false-positivity on LTT. We examined 2496 summaries of all admission records from 1979 to 1999 in our department. We selected patients in whom liver injuries were diagnosed as definitely unrelated to Kampo medication. In these patients, LTT was performed for some herbs contained in the suspect Kampo medicines, resulting in positive LTT for 17 herbs: Evodiae Fructus (Goshuyu), Zizyphi Fructus (Taiso), Ginseng Radix (Ninjin), Zingiberis Rhizoma (Shokyo), Hoelen (Bukuryo), Aconiti Tuber (Bushi), Angelicae Radix (Toki), Cnidii Rhizoma (Senkyu), Rehmanniae Radix (Jio), Ephedrae Herba (Mao), Anemarrhenae Rhizoma (Chimo), Cinnamomi Cortex (Keihi), Bupleuri Radix (Saiko), Artemisiae Capillari Spica (Inchinko), Persicae Semen (Tonin), Moutan Cortex (Botanpi) and Paeoniae Radix (Shakuyaku). These results were considered false-positive, because the results were observed in the "definitely unrelated" patients. Mitogenic activity inherent to some herbs and Kampo formulae may sometimes cause false-positivity on LTT in clinical situations. These examples suggest that LTT for Kampo formulae may be unreliable as a diagnostic method for drug-induced liver injury.     

黄芪多糖对脓毒症急性肾损伤大鼠AMPK/SIRT1信号通路介导的肾上皮细胞能量代谢的影响

目的：研究黄芪多糖（APS）对脓毒症急性肾损伤（AKI）大鼠肾上皮细胞能量代谢的影响。方法： 60只大鼠随机抽取10只设为正常组,其余随机分为AKI组,APS低、高剂量组各10只,地塞米松组11只。建模后6,12,18 h时APS低、高剂量组APS 100,200 mg·kg^-1灌胃,地塞米松组地塞米松10 mg·kg^-1灌胃,正常组及AKI组等量生理盐水灌胃。建模后24 h测磷法检测肾上皮细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶（Na^＋-K^＋-ATP）活性;Western blot法检测肾组织沉默信息调节因子2相关酶类1（SIRT1）。结果：与AKI组比较,APS低、高剂量组,地塞米松组Na^＋-K^＋-ATP酶活性增强（t=3.894,P=0.005;t=6.564,P<0.01;t=6.565,P<0.01）;与APS低剂量组比较,APS高剂量组、地塞米松组Na^＋-K^＋-ATP酶活性增强（t=2.544,P=0.034;t=2.635,P=0.030）;与AKI组比较,APS低、高剂量组,地塞米松组SIRT1蛋白表达量升高（t=9.923,P<0.01;t=12.042,P<0.01;t=10.960,P<0.01）;与APS低剂量组比较,APS高剂量组、地塞米松组SIRT1蛋白表达量升高（t=4.985,P=0.001;t=5.000,P=0.001）。结论： APS可改善脓毒症AKI大鼠肾上皮细胞能量代谢,可能与激活AMPK/SIRT1信号通路有关。     

人参皂苷三醇型与二醇型在不同量比下对大鼠机体燥性的影响研究

目的 探究人参皂苷三醇型与人参皂苷二醇型含量比值变化对大鼠机体的燥性影响.方法 将30只SD大鼠随机分为空白组和4个实验组(R值=0.5、1、1.5、2),每组6只.采用Elisa法测定大鼠血中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)以及脑中胆碱酯酶(ChE)、...     

丹栀逍遥丸质量标准的研究

目的 建立丹栀逍遥丸的质量控制标准。方法 采用显微鉴别法对制剂中的茯苓、柴胡、牡丹皮、白术进行定性鉴别．用薄层色谱法对制剂中的当归、甘草进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法对制剂中的栀子苷进行含量测定。结果 显微检出茯苓、柴胡、牡丹皮、白术、TLC法检出当归、甘草、栀子苷含量测定的平均回收率为99.5％，RSD为1．57％(n=9)。结论 该方法专属性强、简便快速、重现性好，可作为该制荆的质量控制标准。     

Physical-chemical-activity relationship of organic solvents: Effects on Na-K-ATPase activity and membrane fluidity in mouse synaptosomes

Physical-chemical-activity relationship of aromatic hydrocarbons (n = 10) and alkyl acetates (n = 16) with respect to their in vitro effects on synaptosomal membranes was studied. Na⁺-K⁺-adenosine triphosphatase (Na⁺-K⁺-ATPase) activity and membrane fluidity, which was determined using the fluorescence probe 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene, were used as potential indicators of neuronal cell toxicity. The potency of inhibition for the enzyme (IC₅₀), the potency of increasing membrane fluidity (IC_12.5), and n-octanol/water partition coefficient (P) were all determined experimentally for 26 solvents. Correlation analyses were made on aromatic hydrocarbons and on alkyl acetates. There were linear relationships between log P and pIC₅₀ (log1/IC₅₀) values, and between log P and pIC_12.5 (logl/IC_12.5) values, indicating that the hydrophobicity of the solvents determines their toxic ability to affect membrane environment; the more hydrophobic the solvents are, the more toxic they are. A direct linear relationship between Na⁺-K⁺-ATPase activity pIC₅₀ and membrane fluidity pIC_12.5 values was also shown. This predictive correlation suggests a similar mechanism of membrane surface interaction govering both processes that are common to the test solvents. The present results confirm the importance of the lipid environment of neuronal membranes in maintaining the normal function of membrane-bound protein.