2型糖尿病大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的变化与糖尿病心肌病变关系

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）大鼠心脏基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制物2（TIMP-2）的变化及其在糖尿病心肌病变（Diabetic Cardiomyopathy,DC）发病中的意义.方法 高脂食物喂养、小剂量链脲菌素诱导2型糖尿病大鼠模型.正糖高胰岛素嵌铗技术（EICT）检测两组大鼠胰岛素抵抗情况,葡萄糖输注速率（GIR）表示胰岛素抵抗;测定大鼠体重（BW）、心脏重量（HW）和计算HW /BW;RT-PCR测定两组大鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA水平,免疫组化法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白水平.结果 糖尿病大鼠GIR明显低于正常对照组（P〈0.01） .糖尿病大鼠心脏：HW和HW /BW明显高于正常对照组（P〈0.05）,Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多（P〈0.01）,MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达增加（P〈0.01）, MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白含量增加（MMP-2、TIMP-1：P 〈0.05;TIMP-2：P〈0.01）;MMP-2、MMP-9与TIMP-1蛋白水平比值及MMP-2与TIMP-2蛋白水平比值均显著降低.结论 T2DM大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2增加,MMPs/TIMPs比值降低,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多;心脏MMPs/TIMPs表达改变与心脏间质纤维化有关.     

阿托伐他汀钙对百草枯致肺纤维化大鼠MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的 探讨阿托伐他汀钙对百草枯致肺纤维化大鼠MMP-9及TIMP-1表达的影响。方法 45只SPF级雄性Wister大鼠,随机分为3组,正常对照组、百草枯组(模型组)、阿托伐他汀干预组(治疗组),每组15只。百草枯组和阿托伐他汀干预组均以百草枯50 mg/kg灌胃染毒建立大鼠肺纤维化模型。阿托伐他汀干预组给予阿伐他汀钙的生理盐水悬混液20 mg/kg灌胃给药,给药体积为200 uL。分别于中毒后第7、14、28天随机处理各组中5只大鼠进行实验观察。分离右肺组织(1 cm×1 cm×0.3 cm),96 h后行石蜡包埋切片。RT-PCR检测肺组织MMP-9、TIMP-1mRNA的表达,Western-blot检测肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果 MMP-9 mRNA表达结果阿托伐他汀钙治疗组高于对照组,但低于模型组。TIMP-1 mRNA表达结果正常对照组稍低,其余两组差别不大。肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达,百草枯中毒大鼠肺组织内MMP-9及TIMP-1的表达明显高于对照组及治疗组,治疗组两个细胞因子表达高于对照组,但显著低于模型组。结论 阿托伐他汀可以抑制百草枯中毒大鼠肺内MMP-9/TIMP-1的表达,拮抗百草枯所致的肺纤维化。     

染料木黄酮对大鼠异位子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:探讨染料木黄酮(GEN)对患子宫内膜异位症(EMs)大鼠的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达水平的影响。方法:将68只Wistar大鼠分为正常组(A组,n=8)和EMs组(n=60),EMs组通过手术方法建立大鼠EMs模型,3周后测量移植物体积。EMs组大鼠随机分为4亚组:模型组(B组)和GEN低剂量组(C组,0.5mg/kg)、GEN中剂量组(D组,5mg/kg)、GEN高剂量组(E组,50mg/kg),连续皮下注射药物84d后处死大鼠,测量移植物体积、观察其组织学结构,并采用免疫组化法观察异位内膜组织中MMP-9、TIMP-1的表达。结果:与治疗前比较,E组移植物体积明显缩小(P<0.01),而C组和D组无差异;与A组比较,B组MMP-9表达率明显升高(P<0.05),TIMP-1表达率明显降低(P<0.01);与B组比较,E组MMP-9表达率明显降低,TIMP-1表达率明显升高(P<0.05),C组和D组无差异。结论:GEN可抑制大鼠EMs模型中异位内膜的生长,其抑制作用可能与MMP-9表达下降和TIMP-1表达升高,平衡MMP-9和TIMP-1的表达比例有关。     

不同辐照方式对IL-4刺激的RAW264.7细胞MMP-2/9和VEGF表达的影响

目的 研究不同辐照方式对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）的影响,为肿瘤的预后影响因素研究提供依据。方法 实验分为两个部分,第一部分用0、2、5、10 Gy X射线照射细胞24 h后给予IL-4刺激12 h,第二部分用IL-4刺激3 h后用0、2、5、10 Gy X射线照射9h,Western blot方法检测RAW264.7细胞MMP-2、MMP-9和VEGF蛋白的表达情况。结果 照射+IL-4组,随着受照剂量的增加,RAW264.7细胞MMP-2、MMP-9和VEGF表达量增加（P<0.05）,存在剂量-反应关系,并且MMP-2和VEGF存在强相关性（P<0.001）,MMP-9和VEGF也存在强相关性（P<0.001）;IL-4+照射组,随着受照剂量的增加,RAW264.7细胞MMP-2、MMP-9和VEGF表达量增加（P<0.05）,存在剂量-反应关系,并且MMP-2和VEGF存在强相关性（P<0.001）,MMP-9和VEGF也存在强相关性（P<0.001）;与照射+IL-4组比较,IL-4+照射组RAW264.7细胞MMP-2、MMP-9和VEGF的增加更显著（P<0.05）。结论 电离辐射能导致RAW264.7细胞MMP-2、MMP-9和VEGF表达增高,不同辐照方式对RAW264.7细胞MMP-2/9和VEGF表达的影响不同,本研究为肿瘤的治疗提供作用靶点。     

胃旁路术对T2DM大鼠糖尿病肾损害及MMP-9/TIMP-1表达影响的实验研究

目的:研究胃旁路术(RYGB)对2型糖尿病大鼠肾损害的治疗效果,探索这个过程中的效果是否与基质金属蛋白酶9(MMP-9)/基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)相关。方法:38只SD大鼠建立2型糖尿病大鼠模型,所有SD大鼠分为3组;空白对照组(未干预)(CRT,n=12),假手术组(T2DM+假RYGB,n=15)和手术组(T2DM+RYGB,n=18)。对大鼠术前及术后相关临床和代谢参数进行周期性地监测。酶联免疫吸附试验ELISA试剂盒检测肾组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的表达。结果:术后12周手术组随机空腹血糖较假手术组随机空腹血糖明显降低(P 0. 05),而与空白对照组无明显差异;术后12周假手术组糖耐量(OGTT)、胰岛素水平(ITT)均明显升高,与空白对照组相比有统计学差异(P0. 05),手术组糖耐量、胰岛素水平明显低于假手术组(P 0. 05),但仍高于空白对照组(P 0. 05)。RYGB可阻止肾功能的恶化,从24小时尿量、总尿蛋白和BUN等指标体现出好转。此外,RYGB使基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶抑制剂1(MMP-9/TIMP-1)表达相对增加,重获表达平衡。结论:在T2DM肾功能重塑的过程中,胃旁路术不仅可显著改善血糖和糖耐量、胰岛素抵抗等指标,还可能通过基质降解的MMP-9途径,恢复MMP-9/TIMP-1之间的平衡性,调节细胞外基质降解复归,有效地阻止糖尿病肾功能恶化。     

下呼吸道细菌定植对稳定期COPD患者TLR2/NF-κB信号通路、免疫功能及气道重塑的影响

目的 探讨下呼吸道细菌定植对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者Toll样受体2(TLR2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、免疫功能及气道重塑的影响。方法 选取2018年6月-2020年6月南阳市中心医院收治的稳定期COPD患者102例,根据患者痰培养细菌定植结果分为细菌定植组和细菌未定植组,比较两组患者肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_1)、FEV_1%预计值(FEV_1%)、1秒率(FEV_1/FVC)]、血气指标[氧分压(PaO_2)、动脉二氧化碳分压(PaCO_2)、氧合指数(PaO_2/FiO_2)]、免疫功能[CD_3⁺、CD_4+、CD_4⁺、CD_8+、CD_8⁺、CD_4+、CD_4⁺/CD_8+/CD_8⁺]和血清炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)]、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)水平,采用聚合酶链式反应(PCR)检测外周血单个核细胞中TLR2和NF-κB mRNA水平。结果 细菌定植组FEV_1、FEV_1%、FEV_1/FVC、PaO_2、PaO_2/FiO_2、CD_3+]和血清炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)]、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)水平,采用聚合酶链式反应(PCR)检测外周血单个核细胞中TLR2和NF-κB mRNA水平。结果 细菌定植组FEV_1、FEV_1%、FEV_1/FVC、PaO_2、PaO_2/FiO_2、CD_3⁺、CD_4+、CD_4⁺和CD_4+和CD_4⁺/CD_8+/CD_8⁺均低于细菌未定植组(P<0.05),而PaCO_2、WBC、CRP、TNF-α、IL-6、IL-8、MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TLR2、NF-κB mRNA相对水平均高于细菌未定植组(P<0.05)。结论 稳定期COPD患者下呼吸道细菌定植会降低患者机体免疫功能,提高机体炎症反应和气道重塑,影响患者肺功能,可能与提高TLR2/NF-κB信号通路活性存在关系。     

子痫前期患者胎盘组织中MMP-9、IFI16及NGAL的变化及其临床意义

目的 探讨子痫前期(preeclampsia,PE)患者胎盘组织中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、人γ干扰素蛋白16(human gamma interferon protein 16,IFI16)及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)的变化及其临床意义。 方法 选取信阳市第一人民医院2019年1月—2021年1月收集的78例PE患者胎盘组织(PE组)、30例正常妊娠及分娩产妇的胎盘组织(对照组),采用Western-blot技术检测两组标本中的MMP-9、IFI16、NGAL蛋白表达情况,并分析不同病情PE患者中的MMP-9、IFI16、NGAL蛋白表达,采用Pearson相关分析法探讨MMP-9、IFI16、NGAL与PE患者SBP、DBP的相关性。 结果 PE组的SBP、DBP及24 h尿蛋白水平均高于对照组(P<0.05);PE组的胎盘组织中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白均高于对照组(P<0.05);重度PE组的胎盘组织中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白均高于轻度PE组(P<0.05);PE患者的胎盘组织中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白与患者的SBP、DBP均呈显著的正相关关系(P<0.05)。 结论 PE患者胎盘中MMP-9、IFI16、NGAL蛋白表达上调,并且与患者血压水平及病情程度有关。     

ω-3多不饱和脂肪酸对脂多糖所致新生大鼠脑损伤Toll-NF-κB信号通路调节作用

目的 探讨ω-3 PUFAs在脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠脑损伤中对TLR4、NF-κB信号通路的调节作用。方法 将96只SD新生大鼠按随机数字法分为对照组,ω-3组,ω-6组和LPS组。4组大鼠分别采用生理盐水或LPS腹腔注射后,立即注射生理盐水或不同的脂肪乳剂,使用时间分别为1天或5天,建立感染所致新生大鼠脑损伤模型;1天或5天后处死新生大鼠,检测TLR4 mRNA、NF-κB mRNA和对应蛋白水平的变化。结果 LPS注射后的第1天、第5天,新生大鼠TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及其对应的蛋白水平均明显高于对照组(P均＜0.05)。1 d 时ω-3组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及其对应的蛋白水平均低于ω-6组和LPS组(P均＜0.05)。5 d时ω-3组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及其对应的蛋白水平均低于ω-6组和LPS组(P均＜0.05)。不论第1 d和第5 d,ω-3 PUFAs均可明显降低TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及其对应的蛋白水平(P均＜0.05);而ω-6 PUFAs能提高TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及对应的蛋白水平(P均＜0.05)。结论 ω-3 PUFAs 能下调 TLR4、NF-κB活性,在LPS所致的脑损伤中具有抗炎作用。     

吸烟对慢性牙周炎龈沟液中基质金属蛋白酶-8及其抑制因子-1水平影响的研究

目的:基于一定临床基础上,探索在慢性牙周炎患者的龈沟液(GCF)中酶(即基质金属蛋白酶-8(matrix metallo proteinase-8,MMP-8))和抑制剂(即基质金属蛋白酶组织抑剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1))变化水平的相互影响。方法:抽取40例慢性牙周炎患者的龈沟液及20例正常牙周健康者的龈沟液,采用30号吸潮纸收集,并运用酶联免疫吸附实验的方法(ELISA),对照两组龈沟液中MMP-8和TIMP-1的含量的变化及时记录并检测。结果:检测之后的结果显示,在慢性牙周炎患者样本中,由于吸烟而引起的患者的龈沟液中MMP-8浓度为205.2~115.63 g/L,与非吸烟组牙周炎的人群中龈沟液中MMP-8浓度191.2~89.81g/L有着显著差异。在统计学中该差异意义为(P0.05);牙周健康样本显示,在吸烟组与非吸烟组龈沟液中的MMP-8浓度的差异并不大(P0.05);对吸烟组与非吸烟组进行比较,得出慢性牙周炎组的MMP-8浓度比牙周健康组的MMP-8浓度高,在统计学中该差异意义为(P0.05),而TIMP-1浓度在对比记录之后的对比实验组与对照组的差异并不明显(P0.05);慢性牙周炎患者的检测结果显示,MMP-8/TIMP-1比值在吸烟组为2.79±0.26,在非吸烟组为2.59±0.15,吸烟组明显要高,在统计学中该差异意义为(P0.05)。结论:吸烟有害人体健康,会加速牙周组织的破坏,引起龈沟液中龈沟液中MMP-8和TIMP-1的水平变化。     

早产孕妇血中核因子-κB P65与亚临床绒毛膜羊膜炎的关系

目的:探讨早产孕妇外周血中核因子-κBP65(NF-κB P65)、白细胞介素-8(IL-8)及重金属蛋白酶-9(MMP-9)与亚临床绒毛膜羊膜炎的关系,寻找预测亚临床绒毛膜羊膜炎的最佳指标。方法:采用免疫细胞化学(ICC)方法检测36例早产临产孕妇外周血白细胞中NF-κB P65表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测上述孕妇外周血清中IL-8及MMP-9浓度,胎盘胎膜病理检查有无组织学绒毛膜羊膜炎,并与未足月对照组、足月对照组进行对比。结果:①早产亚临床绒毛膜羊膜炎孕妇NF-κB P65、IL-8及MMP-9均显著高于非绒毛膜羊膜炎孕妇(P<0.05)。②早产临产组内无亚临床绒毛膜羊膜炎者外周血白细胞中NF-κBP65表达水平与未足月对照组、足月对照组比较无显著性差异(P>0.05)。③未足月对照组孕妇外周血白细胞中NF-κBP65表达水平与足月对照组比较无显著性差异(P>0.05)。④根据ROC曲线计算出母血NF-κB P65表达水平为3.50、IL-8浓度34.76ng/ml、MMP-9浓度360.81ng/ml可作为亚临床绒毛膜羊膜炎的诊断阈值。结论:①孕妇血白细胞中NF-κB P65表达水平与感染性早产有关。②孕妇外周血NF-κBP65表达水平可作为预测早产亚临床绒毛膜羊膜炎的指标。     

颅内动脉瘤术后肺部感染病原学及NF-κB和MMP-9水平变化

目的探讨颅内动脉瘤患者术后肺部感染病原菌特点及核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平变化。方法选择2017年3月-2019年9月承德医学院附属医院神经外科收治的颅内动脉瘤术后肺部感染患者67例作为感染组,同期医院收治的颅内动脉瘤术后未发生肺部感染的患者40例作为非感染组,采集感染患者痰液样本进行病原菌培养与鉴定,比较两组患者入院及治疗7 d时NF-κB、MMP-9、白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价上述指标对于颅内动脉瘤术后肺部感染患者7 d疗效的预测价值。结果 67例颅内动脉瘤术后肺部感染患者共培养出病原菌72株,其中革兰阴性菌44株,占61.11%,革兰阳性菌24株,占33.33%,真菌4株,占5.56%;感染组患者NF-κB、MMP-9、IL-6、CRP、PCT水平均高于非感染组(P<0.05),并随着感染程度的加重,上述指标水平逐渐升高(P<0.05);治疗7 d时,恶化组患者指标水平均明显高于好转组(P<0.05);ROC分析结果显示,入院时NF-κB、MMP-9、IL-6、CRP、PCT预测颅内动脉瘤术后肺部感染患者不良预后的曲线下面积为0.762?0.831。结论颅内动脉瘤术后肺部感染病原以革兰阴性菌为主,在用药时应予以侧重,血清NF-κB、MMP-9对于反映患者感染程度及预后具有一定价值,值得进行临床推广。     

CTRP9抑制幼年哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖和炎性反应的研究

目的 研究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对哮喘幼鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖和气道炎症的作用。方法 ELISA检测正常、哮喘儿童和小鼠血清中CTRP9含量;原代培养哮喘小鼠ASMCs,经pcDNA3.1-CTRP9转染后,MTT检测ASMCs增殖,ELISA测定TNF-α和IL-6含量,Western 印记检测TLR4和NF-κB p65蛋白表达以及NF-κB p65磷酸化水平;pcDNA3.1-CTRP9转染哮喘小鼠,HE染色观察肺组织炎性细胞的浸润程度;收集小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),光镜下检测嗜酸性粒细胞、巨噬细胞和中性粒细胞数目;检测小鼠肺部TNF-α、IL-6、TLR4和NF-κB的表达。结果 哮喘儿童和小鼠血清中CTRP9含量低于正常组;CTRP9能抑制ASMCs增殖、炎症因子分泌和TLR4/NF-κB通路活化;CTRP9也能抑制哮喘小鼠肺部炎性细胞浸润、各炎性反应细胞数目、炎症因子分泌和TLR4/NF-κB通路活化。结论 CTRP9能抑制幼年哮喘小鼠ASMCs增殖和炎性反应。     

蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠HGF表达影响

目的观察蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响。方法 60只健康清洁级Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、蓝莓低、中、高剂量组、鳖甲软肝片组,除对照组外,其余各组大鼠腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,各蓝莓组在造模同时分别给予不同浓度蓝莓原浆,鳖甲软肝片组用复方鳖甲软肝片灌胃,1次/d,共12周;采用实时荧光定量RT–PCR和免疫组织化学法检测大鼠肝组织HGF、MMP-9以及TIMP-2 mRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,肝纤维化模型组HGF、MMP-9、TIMP-2的mRNA水平及蛋白表达升高;与模型组比较,中、高剂量蓝莓组HGF mRNA及蛋白表达[(634.9±61.2)、(637.7±68.2)和(31.8±3.0)、(31.2±4.3)]与MMP-9 mRNA及蛋白表达[(359.1±29.5)、(361.4±27.1)和(39.4±4.0)、(38.5±3.7)]明显升高,TIMP-2 mRNA及蛋白表达[(426.0±16.7)、(431.3±33.0)和(41.6±6.2)、(37.3±4.3)]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化有一定预防作用,其机制可能与上调HGF、MMP-9,下调TIMP-2表达有关。     

氯氰菊酯对人乳腺癌细胞MCF-7 Akt/NF-κB/caspase 9信号通路作用研究

目的 研究氯氰菊酯对人乳腺癌细胞MCF-7 Akt/NF-κB/caspase-9信号通路的影响,探讨氯氰菊酯对MCF-7的作用机制。方法 用0和1.0×10-6 mol·L-1浓度氯氰菊酯染毒MCF-7细胞24 h,应用Western Blot法测定p-Akt、p-NF-κB p65和caspase 9蛋白表达水平。结果 与0 mol·L-1对照组相比,1.0×10-6 mol·L-1氯氰菊酯染毒组作用细胞后,p-Akt蛋白表达量(对照组:0.12±0.0081,染毒组:0.19±0.0167)上调,差异有统计学意义(t=-5.777,P=0.004)、p-NF-κB p65蛋白表达量(对照组:0.32±0.0342,染毒组:0.57±0.0964)上调,差异有统计学意义(t=-4.249,P=0.013)。caspase-9蛋白表达量(对照组:0.52±0.0069,染毒组:0.45±0.02068)下调,差异有统计学意义(t=5.285,P=0.006)。结论 氰菊酯通过对MCF-7细胞Akt/NF-κB/caspase-9信号通路产生影响发挥拟雌激素作用。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠心肌病保护作用

目的探讨α-硫辛酸对糖尿病心肌病大鼠心肌损伤保护作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为5组:对照组、糖尿病模型组、α-硫辛酸低、中、高剂量组。以60 mg/kg链脲佐菌素腹腔一次性注射建立大鼠糖尿病模型;α-硫辛酸低、中、高剂量组分别按15、30、60 mg/kg灌胃12周;检测血糖和血清果糖胺,心功能状态;免疫组织化学法和western blot法测定心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)蛋白表达。结果与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血糖值/血清果糖胺含量明显升高(P<0.05),心肌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值明显增加(P<0.05);与糖尿病模型组比较,α-硫辛酸中剂量组血糖[(14.25±3.23)mmol/L]和血清果糖胺[(3.05±0.20)mmol/L]含量明显降低(P<0.05),左室舒张末压[(5.60±0.98)mmHg]明显降低(P<0.05),左心室收缩压[(127.55±5.45)mmHg]明显升高(P<0.05);α-硫辛酸中剂量组MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白表达分别为62.26、76.78、72.87,明显减少(P<0.05)。结论α-硫辛酸对糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用,其机制可能与细胞因子及细胞外基质组成异常有关。     

儿茶素单体在治疗炎症性肠病作用中对NF-κB信号通路的影响

目的探索儿茶素单体表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在治疗炎症性肠病(IBD)模型大鼠作用中对NF-κB信号通路的影响。方法将36只健康SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、EGCG治疗组,每组12只,以三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制作大鼠IBD模型。灌肠用药2周后,分别用ELISA检测肠组织中PGE2、NO含量;免疫组化检测肠粘膜COX-2、iNOS的蛋白表达;Western Blotting检测大鼠肠粘膜NF-κB p65蛋白水平的变化。结果①模型组肠组织内PGE2、NO含量显著增高。EGCG治疗组大鼠肠组织内PGE2、NO含量与模型组相比显著减少(P=0.000);②模型组肠粘膜组织中COX-2表达明显增强,正常结肠组织未见或少见COX-2蛋白表达。而EGCG灌肠后大鼠肠组织中COX-2的表达显著下降。③模型组肠粘膜组织中iNOS表达明显增强,正常结肠组织未见或少见iNOS蛋白表达。而EGCG灌肠后大鼠肠组织中iNOS的表达显著下降。④正常大鼠肠组织NF-κB p65蛋白水平较低,模型组肠组织内NF-κB p65蛋白水平显著增加。EGCG可显著抑制肠组织内NF-κB p65蛋白水平表达。结论 EGCG可通过降低NF-κB p65蛋白的表达,下调COX-2、iNOS的表达,使其产物PGE2、NO生成减少,从而达到减轻炎症的目的。因此NF-κB可作为EGCG治疗大鼠实验性结肠炎的一个有效的分子"靶点"。     

N-乙酰-L-半胱氨酸对急性SiO2染尘肺组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的观察N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对急性SiO2染尘肺组织基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法清洁级Wistar大鼠随机分为3组,对照组经气管注入生理盐水,损伤组和干预组注入SiO2粉尘悬液,其中干预组在注入SiO2粉尘悬液前1 h用NAC预处理。3组大鼠分别在染尘后第1,3,7,14,28天取出肺组织,应用免疫组织化学和RT-PCR方法观察其MMP-2和MMP-9蛋白及其mRNA的动态变化。结果损伤组肺组织MMP-2和MMP-9表达均较对照组增高。MMP-2蛋白表达在各时间点分别是对照组的1.440,1.811,2.379,1.672和1.412倍,差异均有统计学意义(P<0.01);mRNA表达分别是对照组的2.061,2.261,2.931,2.000和1.615倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。MMP-9蛋白在各时间点分别是对照组的1.450,1.661,2.186,1.563和1.526倍,差异均有统计学意义(P<0.01);mRNA表达在第1,3,7,14天高于对照组,分别是对照组的1.676,2.027,2.584和2.178倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。干预组肺组织MMP-2蛋白及mRNA表达在各时间点均低于损伤组,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。MMP-9蛋白表达在各时间点低于损伤组,高于对照组;mRNA表达在第1,3,7,14天低于损伤组,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论应用NAC可以部分抑制急性矽尘染毒肺组织表达MMP-2和MMP-9。     

染矽尘大鼠MMP-9和MMP-2变化规律研究

目的 探讨染矽尘大鼠 肺组织、肺泡灌洗液(BALF)和血清中基质金 属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属 蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化。 方法 选取雄性Wistar大鼠84只随机分为实验组(100mg/ml)和生理盐水对照组,采用非气管暴露法建立大鼠矽肺模型,于染尘第3、7、14、21、28、60d处死大鼠,取肺组织并收集血清和BALF。免疫组化法检测肺组织中MMP-9和MMP-2的表达;酶联免 疫吸附法(ELISA)检测血清和BALF中MMP-9和MMP-2的浓度。 结果 免疫组化染色结果,与对照组比较,MMP-9和MMP-2在染尘初期含量升高,且随着时间的延长呈增强趋势,分别在第14d和21d达到峰值;在染尘后期阳性表达仍较高,但与前几个时间点相比表达已减弱。ELISA结果显示,BALF和血清中MMP-9、MMP-2含量变化与肺组织中变化趋势相同,与染尘时间有相关关系(P<0.05),均呈先上升后下降的趋势,但血清和BALF中两指标相关性差(P>0.05)。 结论 MMP-9、MMP-2参与了矽肺早期炎症及后期的纤维化过程,其表达随着时间的延长呈先上升后下降的趋势。     

乌司他丁对光气致大鼠急性肺损伤的保护及与基质金属蛋白酶-9的关系

目的 探讨乌司他丁对光气所致大鼠急性肺损伤的保护作用及与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系.方法 选取健康成年SD雄性大鼠64只,随机分为染毒组[光气染毒组(B1组)、生理盐水染毒组(B2组)、地塞米松治疗组(B3组)、乌司他丁治疗组(B4组)]和非染毒组[空气对照组(A1组)、生理盐水对照组(A2组)、地塞米松对照组(A3组)、乌司他丁对照组(A4组)],每组8只.各组大鼠均在注射相应的药物(地塞米松、生理盐水或乌司他丁)1 h后,非染毒组吸入新鲜空气5 min,染毒组吸人纯度为100%的 8.33 mg/L光气5 min.6 h后取各组大鼠的肺组织行HE染色,计算肺湿/干重量比值(W/D),检测肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量及白细胞计数,利用免疫组织化学法检测肺组织中MMP-9蛋白表达,酶联免疫吸附法检测血清中MMP-9活力以及明胶酶谱法检测BALF中MMP-9酶原含量.结果 与A1、A2、A3、A4组比较,B1和B2组大鼠肺W/D、BALF中蛋白含量和白细胞计数均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).与B1和B2组比较,B3和B4组大鼠肺W/D、BALF中蛋白含量及白细胞计数明显下降,差异有统计学意义(P<0.01).B1和B2组大鼠肺泡壁明显充血、增厚,肺泡壁和肺间质内可见较多白细胞浸润以及肺泡结构的破坏.B3和B4组大鼠肺泡结构较为清晰,肺泡壁稍增厚,伴少量炎性细胞浸润.非染毒组大鼠肺、支气管组织中MMP-9蛋白表达均呈弱阳性,B1组和B2组MMP-9蛋白表达呈强阳性,B3组和B4组肺组织中MMP-9蛋白表达明显减弱,恢复至正常肺组织的弱阳性表达水平.与A1、A2、A3、A4组比较,B1和B2组大鼠血清中MMP-9活力升高,差异有统计学意义(P<0.01),与B1和B2组比较,B3和B4组血清中MMP-9活力均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01).B1、B2组BALF中MMP-9酶原含量明显高于B3、B4组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 乌司他丁可以抑制MMP-9蛋白表达的上调,对于光气所致的ALI具有保护作用.