藤茶双氢杨梅树皮素对人肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用

目的：探讨藤茶双氢杨梅树皮素（APS）的抗肿瘤作用。方法：以MTT法、生长曲线法、克隆形成法观察APS对人肝癌BEL-7404细胞的体外抑制作用。结果：MTT法中，APS对BEL-7404细胞的IC50为22．99μg／mL；细胞生长曲线法提示其对BEL-7404细胞生长有明显抑制作用；克隆形成法中，药物浓度在9．88μg／mL以上时抑制率为100％，药物浓度为6．58μg／mL时抑制率为69．65％。结论：APS对BEL-7404细胞的增殖有明显的抑制作用。     

白藜芦醇对肝癌Bel-7404细胞体外放射治疗的影响

目的：探讨白藜芦醇（ Res）联合体外放射治疗（放疗）对肝癌Bel-7404细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法25μmol·L-1 Res联合放疗处理肝癌Bel-7404细胞,并将细胞分为4组：对照组,2 Gy放疗组,4 Gy放疗组,6 Gy放疗组,噻唑蓝（ MTT）法检测肿瘤细胞的增殖及运动侵袭能力,荧光显微镜检测细胞凋亡,Western-blot法检测细胞基质金属蛋白酶2（MMP-2）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达情况。结果与对照组比较,2 Gy放疗组、4 Gy放疗组、6 Gy放疗组肝癌Bel-7404细胞增殖能力及侵袭能力均下降,凋亡细胞增多（ P〈0.05）。结论 Res能增强肝癌Bel-7404细胞对放疗的敏感性,放疗联合Res可使肝癌细胞增殖受抑,侵袭减弱,凋亡增加,其原因与降低MMP-2、VEGF蛋白表达有关。     

胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞增殖和膜流动性的影响

目的:研究胡桃醌诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞,采用荧光偏振技术离体动态地检测30 min内胡桃醌对BEL-7402细胞各向异性r、荧光偏振度P和微粘度η的影响,分析细胞膜流动性的改变。结果:各浓度的胡桃醌均可抑制人肝癌BEL-7402细胞的生长,诱导其凋亡,IC50为13.78μM。不同浓度胡桃醌均可引起BEL-7402细胞膜的r、P和η值显著性降低(P<0.05),尤其在前1 min内r、P、η值下降迅速,1min后各指标下降的趋势渐渐平缓。结论:胡桃醌能显著增加BEL-7402细胞的膜流动性,促进其本身进入细胞内部,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

蟾酥注射液诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的观察蟾酥注射液对人肝癌细胞凋亡的诱导作用。方法选择不同浓度蟾酥注射液分别与人肝癌BEL-7404细胞共同孵育24、48h,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期变化：琼脂糖凝胶电泳测定DNA Ladder；均与空白组做对照。结果流式细胞仪检测可见,各实验组细胞_1G、S期下降,G_2/M期升高,产生凋亡峰(sub-G_1期)；孵育48h,可见DNA Ladder出现。结论蟾酥注射液可以诱导人肝癌细胞BEL-7404凋亡。     

玉郎伞提取物的抗肝癌作用研究

目的:研究玉郎伞提取物的抗肝癌作用。方法:应用MTT法研究玉郎伞提取物对大鼠血清肝癌细胞7404(BEL-7404)的生长抑制作用;玉郎伞提取物作用于细胞不同时段后,通过免疫组化法检测其对BEL-7404细胞凋亡的影响。结果:在一定浓度(5%～20%)和时间(18～36h)范围内玉郎伞提取物抑制率与作用浓度和时间呈正相关。同浓度的玉郎伞提取物对BEL-7404的抑制率于培养36h时达高峰,其后未见改变。免疫组化法结果表明,BEL-7404凋亡指数与作用时间(16～22h内)呈正相关。结论:玉郎伞大鼠血清在体外能抑制BEL-7404细胞的生长,其部分作用机制为促进其凋亡。     

苦参碱对人肝癌细胞及正常肝细胞增殖和粘附功能影响的比较

目的观察苦参碱对人肝癌细胞BEL-7404及正常肝细胞QSG-7701增殖和粘附能力的影响。方法采用MTT法测定苦参碱对BEL-7404和QSG-7701的增殖;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;粘附实验检测细胞粘附率。结果苦参碱1.0～4.0g/L能有效抑制BEL-7404细胞的增殖。0.5～1.0g/L浓度的苦参碱能有效地诱导BEL-7404分化。当苦参碱的浓度低于0.5g/L时,其对QSG-7701细胞的增殖有一定的促进作用。0.25、0.5、0.75、1.0g/L苦参碱处理72h后,BEL-7404细胞黏附抑制率分别为18.6%、24.4%、30.3%、44.7%,与对照组比较差异均有显著性（P〈0.01）;而QSG-7701细胞黏附抑制率分别为1.7%、3.5%、6.1%、37.8%,只有1.0g/L浓度的苦参碱与对照组比较有差异显著性（P〈0.01）。结论苦参碱能有效抑制肝癌细胞BEL-7404的增殖,且抑制作用具有时间、剂量依赖性;低浓度能有效地诱导肝癌细胞分化;高浓度的苦参碱有较强的抑制人正常肝细胞增殖作用,低浓度具有一定的生长刺激作用;苦参碱抑制BEL-7404细胞粘附。     

姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α表达的影响

目的探讨姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中H IF-1α表达的影响以及蛋白酶体在其中的作用。方法以0、2.5、5、10、15、20μmol.L-1的姜黄素处理人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6 h,W ST-8法和台盼蓝染色法分析细胞增殖和活力,采用RT-PCR和W estern B lot方法检测肝癌细胞中H IF-1α的表达;以0、10μmol.L-1姜黄素、10μmol.L-1MG-132、10μmol.L-1姜黄素+10μmol.L-1MG-132处理人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6 h,采用W esternB lot方法检测肝癌细胞中H IF-1α的蛋白表达。结果①不同剂量的姜黄素对肝癌细胞活力和增殖率的影响与对照组相比差异无显著性;②随着姜黄素浓度的增加,H IF-1α蛋白表达逐渐降低;③不同剂量的姜黄素对H IF-1αmRNA表达的影响与对照组相比差异无显著性;④MG-132能够逆转姜黄素对H IF-1α蛋白的减少。结论姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中H IF-1α蛋白表达是通过转录后机制和蛋白酶体途径。     

月腺大戟与狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖的影响对比研究

目的:对比研究月腺大戟与狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖的影响。方法:灌胃月腺大戟(0.097、0.485、0.2425g.kg-1)、狼毒大戟(0.05、0.025、0.0125g.kg-1)混悬液,每天1次,连续3d,末次给药后自大鼠腹主动脉采血,以分离的血清加培养液体外培养人肝癌细胞BEL-7402;MTT比色法测定生长抑制率;通过集落形成试验测定克隆形成率。结果:狼毒大戟对BEL-7402细胞增殖和克隆形成率有明显的抑制或降低作用,且与给药剂量呈正相关;月腺大戟对BEL-7402细胞增殖和克隆形成率无明显影响。结论:狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖抑制作用明显强于月腺大戟。     

血清药理学方法观察复方斑蝥胶囊对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响

目的 :研究复方斑蝥胶囊含药动物血清对人肝癌细胞SMMC -7721增殖的影响。方法 :采用血清药理学方法 ,对兔灌胃给予不同剂量 (临床等效剂量、2倍临床等效剂量和3倍临床等效剂量 )的复方斑蝥胶囊混悬液 ,应用MTT比色法观察含药血清对人肝癌细胞SMMC -7721增殖的抑制作用 ,同时观察临床等效剂量组各采血时间点的抑制作用。结果 :3个剂量组的含药血清对SMMC -7721细胞增殖均有抑制作用 (P<0 01) ,其中以3倍临床等效剂量组含药血清的抑制率最高 ;临床等效剂量组各采血时间点的含药血清对SMMC -7721细胞增殖均有抑制作用 (P<0 05) ,其中3h时含药血清的抑制率最高。结论 :复方斑蝥胶囊含药动物血清对人肝癌细胞SMMC -7721增殖具有一定的抑制作用 ,并具有剂量依赖性。     

壮药红鱼眼黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性研究

目的:研究壮药红鱼眼黄酮类化合物的提取工艺及其抗氧化活性.方法:用乙醇回流提取法通过正交设计试验确定黄酮提取工艺的最佳条件,用氧化法测定其清除超氧自由基和DPPH·自由基的能力.结果:红鱼眼黄酮提取的最佳条件为:8倍量60%乙醇提取3次,每次1 h.所得黄酮在一定浓度范围内具有较强的清除自由基和抗氧化能力.结论:优选的提取工艺效率高,所制备的黄酮有较强的清除超氧自由基和DPPH·自由基活性,具有很好的抗自氧化效果,是一种较好的天然抗氧化剂.     

Geraniinic acid derivative from the leaves of Phyllanthus reticulatus

Chemical constituents as well as cytotoxic and insecticidal activity of the crude methanol extract from the leaves of Phyllanthus reticulatus Poir. (Euphorbiaceae) were investigated. (5R*,6R*)-4,6-Dimethoxycarbonyl-5-[2′,3′,4′-trihydroxy-6′-(methoxycarbonyl) phenyl]-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one (1) along with 3,4,3′-tri-O-methylellagic acid, and methyl gallate were isolated from the dichloromethane extract. Determination of their structures was based on spectroscopic analysis. Compound 1 possessed a very weak insecticidal activity against Spodoptera frugiperda (Sf9) with an IC₅₀ value of 27.27?μg/mL.     

三肽化合物酪丝缬肽对人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制作用的实验研究

目的观察三肽化合物酪丝缬肽(tyroservaltide,YSV)对体外培养人肝癌BEL7402细胞增殖的抑制作用。方法建立人肝癌BEL7402及Chang氏肝细胞体外培养体系,用BrdU法、MTT法及LDH法,观察YSV对体外培养的BEL7402细胞、Chang氏肝细胞DNA分裂指数、MTT代谢率、LDH释放量的影响,用琼脂糖凝胶电泳观察药物对体外培养BEL7402细胞DNA片段化的影响。结果YSV对BEL7402细胞作用48h、72h时药物浓度为1mg·L-1和0.1mg·L-1组与阴性对照组比较:①能显著抑制肿瘤细胞DNA的合成(P<0.01),抑制率最高为药物浓度1mg·L-1作用72h时可达32.53%,②能表现出明显抑制细胞代谢的作用(P<0.05)其中YSV0.1mg·L-1作用72h时抑制率最高为19.12%,③能增加胞浆内LDH的释放(P<0.05),YSV(1mg·L-1)作用72h时抑制率最高,为36.13%,④能诱导BEL7402肝癌细胞DNA片断化成低分子量DNA,经1%琼脂糖电泳后显示为DNALadder。对正常肝细胞系Chang氏肝仅0.1mg·L-1在48h表现出抑制DNA合成能力的作用。结论YSV抑制人肝癌BEL7402细胞的增殖,对正常肝细胞系Chang氏肝没有影响。     

小剂量人参多糖对人肝癌BEL-7402细胞生长抑制与诱导分化作用初探

目的：探讨小剂量人参多糖（ginseng polysaccharides,GPS）对人肝癌BEL-7402细胞分化的诱导作用。方法：体外培养人肝癌BEL-7402细胞,GPS组加入10 mg·L^-1人参多糖孵育,同时设对照组,采用CCK8实验检测人肝癌BEL-7402细胞增殖情况;显微镜、透射电镜观察细胞形态及亚细胞结构的变化;放射免疫法检测甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）的分泌量;流式细胞术检测细胞周期。结果：人参多糖能抑制人肝癌BEL-7402细胞的增殖（P<0.05）;人参多糖处理人肝癌BEL-7402细胞后细胞形态及亚细胞结构趋于成熟分化;甲胎蛋白（AFP）分泌量明显下降,白蛋白（ALB）的分泌量明显升高,与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）;GPS组G1期细胞比例显著高于对照组（P<0.05）,细胞被阻滞G0/G1期。结论：小剂量人参多糖对人肝癌BEL-7402细胞生长有抑制作用,可能与诱导分化有关。     

姜黄素对肝癌HepG2和Bel-7404细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素对人肝癌HepG2和Bel-7404细胞增殖的影响。方法不同浓度的姜黄素(2.5,10.0,25.0,50.0,100.0μg/mL),0.2%二甲基亚砜的RPMI 1640培养基加细胞为空白对照,2μg/mL顺铂为阳性对照。MTT法检测肝癌HepG2和Bel-7404细胞的增殖。结果姜黄素对肝癌细胞HepG2和Bel-7404的增殖抑制有量效关系,并呈时间依赖性。在相同作用时间下,姜黄素组、顺铂组对肝癌细胞HepG2和Bel-7404增殖有明显的抑制作用,与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。与空白对照组比较,2.5,10.0μg/mL姜黄素对肝癌细胞HepG2和Bel-7404的增殖没有明显的抑制作用(P>0.05),而25.0,50.0,100.0μg/mL姜黄素以及顺铂组对肝癌细胞HepG2和Bel-7404的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05)。结论姜黄素可以明显的抑制肝癌细胞HepG2和Bel-7404的生长,且存在剂量-时间的关系。     

Water-soluble constituents from the bark of Elaeagnus pungens and their cytotoxic activities

Three new water-soluble compounds, pungens A–C, along with four known compounds including two phenol glycosides, one secoiso-flavanol and one phenol ether, have been isolated from the bark of Elaeagnus pungens. Among them, pungen C (7) (200 μg/ml) was tested in SGC-7901 and BEL-7404 tumor cell lines, and showed moderate cytotoxic activity. The structures of the new compounds were elucidated on the basis of spectroscopic data and chemical evidence.     

板蓝根高级不饱和脂肪酸对耐药肝癌细胞株BEL-7404/ADM逆转作用实验

目的：板蓝根高级不饱和脂肪酸对肝癌耐经细胞株BEL－7404／ADM耐药逆转作用主机制研究。方法：MTT法观察药物对细胞的生长抑制作用;免疫组化法检测细胞P－糖蛋白（P－gp)和多药耐药相关蛋白（MRP）的表达;采用高效液相色谱法（HPLC）测定细胞内ADM的浓度。结果：耐药肝癌细胞株BEL－7404／ADM对多种化疗药物产生多药耐药性,耐药细胞P－gp和MRP的阳性率显著高于亲本细胞（P＜0．01）;板蓝根高级不饱和脂肪酸在非细胞毒剂量时与ADM合用后能逆转BEL－7404／ADM对ADM的耐药性;ADM与板蓝根高级不饱和脂肪酸合用时,其细胞内ADM的含量较单独使用明显增高。结论：肝癌细胞株BEL－7404／ADM对多种化疗药物具有多药耐药性,其多药耐药性与P－gp和MRP过量表达有关;板蓝根高级不饱和脂肪酸在非细胞毒剂量时能逆转BEL－7404／ADM对ADM的耐药性,其逆转作用可能与降低P－gp药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关。